實驗一特殊顯微鏡的工作原理和使用

1、放大倍數(shù)和數(shù)值孔徑放大倍數(shù)和數(shù)值孔徑10/0.25 ， 40/0.65 ，100/1.3標(biāo)準(zhǔn)機(jī)械筒長和蓋玻片厚度標(biāo)準(zhǔn)機(jī)械筒長和蓋玻片厚度160/0.17160/0或或160/160/-/0或或/-油浸物鏡：油浸物鏡：oil、oel、Hi等等水浸物鏡：水浸物鏡：W或或Water甘油浸物鏡：甘油浸物鏡：Glyz和和Glye復(fù)消色差物鏡：復(fù)消色差物鏡：APO半復(fù)消色差物鏡：半復(fù)消色差物鏡：FL平場物鏡：平場物鏡：PL丁達(dá)爾現(xiàn)象丁達(dá)爾現(xiàn)象明場普通顯微鏡成像光路圖明場普通顯微鏡成像光路圖暗場照明光路圖暗場照明光路圖普通顯微鏡普通顯微鏡暗視場顯微鏡暗視場顯微鏡相差顯微鏡相差顯微鏡人口腔上皮細(xì)胞在不同顯微鏡

2、下的圖像人口腔上皮細(xì)胞在不同顯微鏡下的圖像-明相差明相差+暗相差暗相差相差環(huán)相差環(huán)特點(diǎn)特點(diǎn):鑒定活體細(xì)胞最實用、最經(jīng)濟(jì)的方法鑒定活體細(xì)胞最實用、最經(jīng)濟(jì)的方法缺點(diǎn)缺點(diǎn):需要光強(qiáng)高需要光強(qiáng)高切片不能太厚切片不能太厚(510um)蓋片、載片需符合標(biāo)準(zhǔn)蓋片、載片需符合標(biāo)準(zhǔn)最好配用單色濾光鏡最好配用單色濾光鏡熒光效果不如明場物鏡熒光效果不如明場物鏡激發(fā)方式激發(fā)方式 激發(fā)波長激發(fā)波長 應(yīng)用范圍應(yīng)用范圍U U激發(fā)激發(fā)334334病理切片，細(xì)菌、病理切片，細(xì)菌、FITCFITC染料、染料、V V激發(fā)激發(fā)365.405.365.405.435435自發(fā)熒光、一般熒光抗自發(fā)熒光、一般熒光抗體、四環(huán)素染色物體、四環(huán)

3、素染色物B B激發(fā)激發(fā)405.435.405.435.490490FITCFITC染料、吖啶橙染色、染料、吖啶橙染色、染色體、紅細(xì)胞、癌細(xì)染色體、紅細(xì)胞、癌細(xì)胞、蛔蟲胞、蛔蟲G G激發(fā)激發(fā)546546浮爾根染色、浮爾根染色、DNADNA熒光素?zé)晒馑丶ぐl(fā)波長激發(fā)波長 發(fā)射波長發(fā)射波長DAPI372372456456AMCA350350450450Hoechst 33258365365465465FITC490490520520Acridine Orange490490590590Acridine Yellow470470550550CY3552552565565TRITC541541572572Propidium Iodide530530615615優(yōu)點(diǎn)：n檢出能力高n對細(xì)胞的刺激小n能進(jìn)行多重染色用途：n物體構(gòu)造的觀察n熒光的有無、色調(diào)比較進(jìn)行物質(zhì)判別n發(fā)熒光量的測定對物質(zhì)定性、定量分析熒光顯微鏡的優(yōu)點(diǎn)和用途熒光顯微鏡的優(yōu)點(diǎn)和用途 WUWU WIBWIBDUALDUAL BANDBANDWIBAWIBAWIGWIGWIBWIB雙重染色標(biāo)本的單色和雙色觀察雙重染色標(biāo)本的單色和雙色觀察原位雜交技術(shù)原位雜交技術(shù) 用于培養(yǎng)細(xì)胞用于培養(yǎng)細(xì)胞的觀察或者