臨床自動(dòng)生化分析儀的性能與應(yīng)用

1、第十九章第十九章 臨床自動(dòng)生化分臨床自動(dòng)生化分析儀的性能與應(yīng)用析儀的性能與應(yīng)用 李興武附院檢驗(yàn)科第十九章 生化分析儀2第一節(jié) 臨床生化自動(dòng)分析儀的類型一、概述 儀器的發(fā)展史、第一臺(tái)1957年由美國Technicon公司生產(chǎn)(Auto Analyzer)，單通道連續(xù)流動(dòng)式，只是模仿手工。60年代后隨電子計(jì)算機(jī)技術(shù)迅速發(fā)展。從設(shè)計(jì)構(gòu)造及速度、功能方面有很大的發(fā)展。 第十九章 生化分析儀3試劑自動(dòng)檢測：借助條碼技術(shù)識(shí)別種類及效期等。樣本自動(dòng)識(shí)別：量多少，有無溶血、脂血、黃疸、血球、凝塊等。自動(dòng)加樣：試劑、樣本、稀釋液等。自動(dòng)檢測：樣本杯、試劑架、反應(yīng)杯。數(shù)據(jù)處理：打印報(bào)告：自動(dòng)報(bào)警： 第十九章 生化

2、分析儀4分類 按反應(yīng)裝置結(jié)構(gòu)：連續(xù)流動(dòng)式、分立式和離心式。 按同時(shí)檢測項(xiàng)目與否：單通道、多通道。 按儀器的自動(dòng)化程度：全自動(dòng)、半自動(dòng)。 按儀器復(fù)雜程度：小型、中型和大型。 第十九章 生化分析儀5（一）管道式分析儀（P442） 原理：吸樣吸試劑混勻（第二試劑）混勻孵育比色計(jì)算打印結(jié)果。特點(diǎn)：所有反應(yīng)在同一管道中進(jìn)行，一個(gè)接一個(gè)進(jìn)行，可通過透析器將干擾物除去、速度慢；也有將多個(gè)通道并列起來。第十九章 生化分析儀6（二）、分立式分析儀（二）、分立式分析儀 （P443）（1）原理：同一時(shí)期的測定在不同反應(yīng)杯中進(jìn)行，試劑及樣本由不同的加樣器自動(dòng)加樣，在一定溫度下反應(yīng)一定時(shí)間后反應(yīng)液依次自動(dòng)吸入比色杯比色

3、或反應(yīng)杯依次通過光路進(jìn)行檢測；可有多個(gè)加樣臂，所以其體積大且速度快。第十九章 生化分析儀7（2） 儀器各部分簡介： 標(biāo)本架：條形:適合于現(xiàn)在自動(dòng)加樣圓形:有整圓形,節(jié)段組成的第十九章 生化分析儀8水及熱空氣等廢水等樣品盤試劑盤試劑針樣品針清洗針反應(yīng)池反應(yīng)杯分離式全自動(dòng)生化分析儀府視圖試劑盤第十九章 生化分析儀9第十九章 生化分析儀10比色杯 質(zhì)地：玻璃、塑料或石英；人工更換:一次性反應(yīng)比色杯儀器自動(dòng)更換：一次性反應(yīng)比色杯自動(dòng)清洗:反應(yīng)杯可反復(fù)使用第十九章 生化分析儀11加樣與采樣器：一般采用機(jī)械傳動(dòng)帶動(dòng)注射器活塞，閥門有電磁控閥門，玻璃活塞等。控溫裝置：一般溫度有25、30、37，也有連續(xù)式溫

4、度如2050等可任選；第十九章 生化分析儀12恒溫水（油）浴箱：溫度比較穩(wěn)定，但水需要經(jīng)常更換和處理，以防影響比色杯表面光度；電熱恒溫器：采用空氣恒溫時(shí)送熱風(fēng)，溫度波動(dòng)較大，受外界影響大；半導(dǎo)體恒溫：硅半導(dǎo)體介導(dǎo)恒溫，介于兩者之間。反應(yīng)時(shí)間控制： 隨意設(shè)定第十九章 生化分析儀13檢測器：試劑 樣品及杯子 吸光度等 清洗系統(tǒng)：干燥系統(tǒng)：與清洗系統(tǒng)共用分析系統(tǒng)：結(jié)果、原始數(shù)據(jù)、是否超出反應(yīng)線性、酶反應(yīng)時(shí)線性是否合理等打印機(jī)： 第十九章 生化分析儀14(三)離心式生化分析儀 （P444）原理：圓盤內(nèi)的樣品和試劑受到離心力的作用而相互混合發(fā)生反應(yīng)，在高速旋轉(zhuǎn)過程中進(jìn)行比色測定。 第十九章 生化分析儀1

5、5特點(diǎn)：又稱為成批測定或同步測定，即分析過程中，樣品與試劑的混合、反應(yīng)和檢測等每一步幾乎同時(shí)完成。試劑和樣本量:（樣品150ul,試劑50350ul），視離心杯的底部面積大??；速度一般，現(xiàn)很少生產(chǎn)此類產(chǎn)品；第十九章 生化分析儀16反應(yīng)轉(zhuǎn)盤：可用手工換，也可通過自動(dòng)換盤。無法自動(dòng)清洗。轉(zhuǎn)速一般在5001000r/min；儀器：美國Baker公司的Encore 、型、IL的Monarch系列、Roche公司的Cobas Fara-型等 第十九章 生化分析儀17（四）干片式分析儀 （P444） 原理：在干化學(xué)紙片上加上血清后，背面產(chǎn)生顏色，用反射光度計(jì)檢測即可定量；特點(diǎn)：是80年代問世的產(chǎn)品，是將含

6、底物的試劑浸入紙片后，經(jīng)干燥制得，干片由試劑和電極構(gòu)成，一次使用，成本高。但方便快捷。缺點(diǎn)：結(jié)果波動(dòng)性大。 第十九章 生化分析儀18二、半自動(dòng)生化分析儀二、半自動(dòng)生化分析儀 （1） 操作分兩部分：手工部分：加樣、保溫、吸入樣本儀器部分：比色、讀數(shù)、計(jì)算、打印結(jié)果。 第十九章 生化分析儀19（2）特點(diǎn)：體積小，結(jié)構(gòu)簡單，靈活，價(jià)廉，適合標(biāo)本量不大的小型醫(yī)院。比色快，速率法慢，不受試劑、方法的限制，常規(guī)、急診使用方便。 第十九章 生化分析儀20（3） 注意事項(xiàng)：使用同一比色池，重復(fù)性好，但結(jié)果受加樣和取樣的影響。作酶動(dòng)學(xué)時(shí)，應(yīng)注意計(jì)時(shí)準(zhǔn)確性，還應(yīng)注意溫度的波動(dòng)。 第十九章 生化分析儀21三、全自動(dòng)

7、生化分析儀 概念：從加樣本至出結(jié)果的全過程由儀器來完成，受主觀因素影響少。功能全，靈活性大，易于操作，有吸光度法、熒光法、光散射法、濁度法、ISE法等。 第十九章 生化分析儀22常規(guī)生化、特殊蛋白、藥物監(jiān)測等。隨機(jī)安排程序，呆單項(xiàng)測定，也可成批測定，可對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。模塊式生化分析儀：采用多個(gè)相同的或不同的生化分析儀通過傳送帶等形式相互連接起來。 第十九章 生化分析儀23第二節(jié) 臨床生化自動(dòng)分析儀的性能評價(jià)及與合理選用（P446）正確評價(jià)十分重要一、自動(dòng)化程度儀器自動(dòng)化程度越高，功能越強(qiáng)大，適合樣本多、人員少、大型醫(yī)院；樣本少的、檢驗(yàn)數(shù)量少的小醫(yī)院等選用半自動(dòng)或小型全自動(dòng)生化分析儀。 第十

8、九章 生化分析儀24二、分析效率 指分析的速度，根據(jù)儀器每小時(shí)測定樣本數(shù)量及每個(gè)樣本可測項(xiàng)目的多少；離心式應(yīng)進(jìn)行成批測定，如一個(gè)一個(gè)測定，則其效率較低；但同時(shí)應(yīng)考慮儀器的使用效率，一個(gè)大型生化分析儀如樣本較少，則儀器的使用效率不高。 第十九章 生化分析儀25三、應(yīng)用范圍： 項(xiàng)目：可測生化項(xiàng)目、還有藥物監(jiān)測、各種特殊蛋白、微量元素等。方法：分光光度法、濁度比色法、離子選擇性電極法、熒光法等。波長：雙波長法(三波長法)，消除背景噪音，排除溶血、脂血、膽紅素等干擾。試劑：單試劑、雙試劑、三試劑等排除試劑或樣本空白等。 第十九章 生化分析儀26四、分析準(zhǔn)確度 準(zhǔn)確度愈高愈好，取決于加液、溫控、波長、記

9、時(shí)等的加工精確度及狀態(tài)，加樣量準(zhǔn)確性、微量、系統(tǒng)穩(wěn)定性、機(jī)械結(jié)構(gòu)精密度、加樣中針的攜帶污染等。 第十九章 生化分析儀27五、試劑使用靈活性 通常儀器所用試劑的范圍也是相當(dāng)重要，試劑的開放程度越高，使用的靈活性就大，有些儀器與試劑采用捆綁方式，成本高，不利于開展新工作。 第十九章 生化分析儀28第三節(jié) 臨床生化自動(dòng)分析儀的方法 要合理使用儀器，就必須首先了解儀器的各項(xiàng)功能 一、分析方法： 第十九章 生化分析儀29（一）平衡法（終點(diǎn)法） （1）一步法：試劑酶的底物（S）就是所測的物質(zhì)（P448）（2）酶偶聯(lián)反應(yīng)；S1S2 EaP1P2 EiP3P4 Ea為輔酶，Ei為指示酶第十九章 生化分析儀30

10、（二）動(dòng)態(tài)法分為可變信號(hào)與固定信號(hào) 第十九章 生化分析儀31一點(diǎn)與二點(diǎn)不需特殊的儀器；但結(jié)果準(zhǔn)確性差及可靠性差多點(diǎn)法、回歸法及積分法為使用生化分析儀的首選儀器。（三） 固定時(shí)間法（二點(diǎn)法）不需對反應(yīng)過程進(jìn)行觀察，或只需觀察前后兩點(diǎn)即可。 第十九章 生化分析儀32（四） 空白對照方法樣本空白試劑；試劑；樣本完全試劑(終止反應(yīng)后)第十九章 生化分析儀33二、主要實(shí)驗(yàn)參數(shù)的選擇（設(shè)置）（一）波長：吸收曲線的低谷為空白波長，吸光度大而平的波長為分析波長；采用光柵或單色光濾光器，光路采用后分光技術(shù)，波長更準(zhǔn)確。（二）溫度：現(xiàn)一般采用37。 第十九章 生化分析儀34（三）、樣品量及試劑量：一般按手工法按比

11、例縮減；但可以根據(jù)不同儀器的情況自行設(shè)計(jì)，但同時(shí)改變線性及靈敏度。 試劑樣本用量的多少是衡量生化分析儀品質(zhì)的一個(gè)重要指標(biāo)。第十九章 生化分析儀35（四）分析時(shí)間確定： （1）、終點(diǎn)法：一般選開始時(shí)間（即試劑與樣本混勻舜間，這樣反應(yīng)還未開始但又能去除試劑與樣本的空白），結(jié)束時(shí)間一般以反應(yīng)達(dá)終點(diǎn)時(shí)的時(shí)間，計(jì)算A=A末A始 第十九章 生化分析儀36（2） 動(dòng)態(tài)法時(shí)間：選定讀數(shù)的起始點(diǎn)，即遲滯期后開始，結(jié)束時(shí)間一定要在線性反應(yīng)期內(nèi)，計(jì)算按：A/min(A末A始)/（TA末TA始）。 第十九章 生化分析儀37（五）線性判斷標(biāo)準(zhǔn)(線性限度L)：作為反應(yīng)達(dá)終點(diǎn)時(shí)吸光度反應(yīng)的界限，這只是對于終點(diǎn)法實(shí)驗(yàn)來說，若為酶促反應(yīng)的話，很難觀察到終點(diǎn)的時(shí)間.空白試劑吸光度：配好試劑是否已變質(zhì)?？瞻追磻?yīng)吸光度：看試劑在反應(yīng)溫度下的穩(wěn)定性。 第十九章 生化分析儀38(六)異常吸收率限度:見下面的示意圖。 第十九章 生化分析儀39三、儀器室條件及儀器操作 （一）、儀器室條件（1）、電源、電壓、UPS、溫度（1530）、濕度、防塵等。（2）、操作常規(guī)：操作規(guī)程及維修保養(yǎng)、專人保管使用等 第十九章 生化分析儀401、方法學(xué)：單試劑、雙試劑、與試劑盒。2、加樣系統(tǒng)：加樣的準(zhǔn)確性、微量、系統(tǒng)穩(wěn)定性、機(jī)械結(jié)構(gòu)精密、加