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文檔簡介
1、現(xiàn)代生物科技專題現(xiàn)代生物科技專題細(xì)細(xì)胞胞工工程程細(xì)胞生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)分子生物學(xué)細(xì)胞整體程度或細(xì)細(xì)胞整體程度或細(xì)胞器程度胞器程度按照人們的志愿來改按照人們的志愿來改動細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)動細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品或獲得細(xì)胞產(chǎn)品運(yùn)用的原理和方法運(yùn)用的原理和方法概念概念分類分類研討的目的研討的目的研討的程度研討的程度植物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程動物細(xì)胞工程動物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程的實(shí)際根底植物細(xì)胞工程的實(shí)際根底是什么?通常采用的技術(shù)手段是什么?通常采用的技術(shù)手段有哪些?有哪些?一植物細(xì)胞工程的根本技術(shù)一植物細(xì)胞工程的根本技術(shù)所采用技術(shù)的實(shí)際根底 植物細(xì)胞工程通常采用的技 術(shù) 手 段 植物
2、組織培育植物組織培育 植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性一、植物組織培育的根本原理一、植物組織培育的根本原理植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性緣由:緣由:表現(xiàn)的條件:表現(xiàn)的條件:在植物體中未表現(xiàn)的緣由:在植物體中未表現(xiàn)的緣由:每個細(xì)胞都含有本物種的全部遺傳信息,每個細(xì)胞都含有本物種的全部遺傳信息,都具有發(fā)育成一個完好個體的潛能。都具有發(fā)育成一個完好個體的潛能。離體離體無菌、無毒的環(huán)境無菌、無毒的環(huán)境適宜的培育基適宜的培育基(營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素) 適宜的環(huán)境條件適宜的環(huán)境條件(溫度等溫度等)在個體發(fā)育過程中,基因在特定的時空條件下選擇性表達(dá)的在個體發(fā)育過
3、程中,基因在特定的時空條件下選擇性表達(dá)的結(jié)果。結(jié)果。1、有關(guān)全能性的表述中,不正確的選項(xiàng)是、有關(guān)全能性的表述中,不正確的選項(xiàng)是 受精卵在自然條件下能使后代細(xì)胞構(gòu)成完受精卵在自然條件下能使后代細(xì)胞構(gòu)成完 整個體,因此全能性最高整個體,因此全能性最高 生物體內(nèi)細(xì)胞由于分化全能性不能表達(dá)生物體內(nèi)細(xì)胞由于分化全能性不能表達(dá) 卵細(xì)胞和受精卵一樣,細(xì)胞未分化,全能卵細(xì)胞和受精卵一樣,細(xì)胞未分化,全能 性很高性很高 植物細(xì)胞離體培育在一定條件下能表現(xiàn)出植物細(xì)胞離體培育在一定條件下能表現(xiàn)出 全能性全能性C2、在一個生物體內(nèi),細(xì)胞沒有表現(xiàn)出、在一個生物體內(nèi),細(xì)胞沒有表現(xiàn)出全能性,緣由是全能性,緣由是 細(xì)胞失去了
4、全能性細(xì)胞失去了全能性細(xì)胞中的基因部分喪失細(xì)胞中的基因部分喪失 細(xì)胞中的基因選擇性表達(dá)細(xì)胞中的基因選擇性表達(dá)細(xì)胞中的基因變異不同細(xì)胞中的基因變異不同C、植物組織培育的概念、植物組織培育的概念 一植物組織培育技術(shù)一植物組織培育技術(shù)、植物組織培育的過程、植物組織培育的過程3 3、自我評價、自我評價 在無菌和人工控制的條件下,將離體的在無菌和人工控制的條件下,將離體的植物器官、組織、細(xì)胞,培育在人工配制的植物器官、組織、細(xì)胞,培育在人工配制的培育基上,給予適宜的培育條件,誘導(dǎo)其產(chǎn)培育基上,給予適宜的培育條件,誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽,最終構(gòu)成完好的植株。生愈傷組織、叢芽,最終構(gòu)成完好的植株。叢芽胚叢
5、芽胚狀體狀體外植體外植體植物體植物體脫分化脫分化再分化再分化過程過程分化分化未分化未分化分化分化幼芽或幼根?幼芽或幼根?條件?條件?優(yōu)點(diǎn)?優(yōu)點(diǎn)?特點(diǎn)?特點(diǎn)?繁衍速度快繁衍速度快不受季節(jié)限制不受季節(jié)限制幼苗無毒幼苗無毒堅持優(yōu)良性狀堅持優(yōu)良性狀適宜溫度、無光適宜溫度、無光照、照、 pH和無菌環(huán)和無菌環(huán)境。境。無機(jī)、有機(jī)成分無機(jī)、有機(jī)成分和植物激素生長和植物激素生長素,細(xì)胞分裂素和素,細(xì)胞分裂素和赤霉素赤霉素?zé)o定外形狀無定外形狀薄壁細(xì)胞薄壁細(xì)胞高度液泡化高度液泡化陳列疏松、無規(guī)那陳列疏松、無規(guī)那么么分化程度低分化程度低去分化較易去分化較易離體的植物離體的植物器官、組織器官、組織或細(xì)胞或細(xì)胞愈傷組織愈
6、傷組織1、關(guān)于愈傷組織構(gòu)成過程的正確表達(dá)是、關(guān)于愈傷組織構(gòu)成過程的正確表達(dá)是 A、愈傷組織的構(gòu)成是離體植物細(xì)胞分化的結(jié)果、愈傷組織的構(gòu)成是離體植物細(xì)胞分化的結(jié)果 B、愈傷組織的構(gòu)成是離體植物細(xì)胞分裂的結(jié)果、愈傷組織的構(gòu)成是離體植物細(xì)胞分裂的結(jié)果 C 、愈傷組織的構(gòu)成是離體動物細(xì)胞分化的結(jié)果、愈傷組織的構(gòu)成是離體動物細(xì)胞分化的結(jié)果 D 、愈傷組織的構(gòu)成是離體植物細(xì)胞脫分化的結(jié)果、愈傷組織的構(gòu)成是離體植物細(xì)胞脫分化的結(jié)果D2 、植物組織培育構(gòu)成的愈傷組織進(jìn)展培育,、植物組織培育構(gòu)成的愈傷組織進(jìn)展培育, 又又可以分化構(gòu)成根、芽等器官,這一過程稱為可以分化構(gòu)成根、芽等器官,這一過程稱為( ) A、脫分
7、化、脫分化 B、去分化、去分化 C、再分化、再分化 D、脫分化或去分化、脫分化或去分化C1.微型繁衍 微型繁衍技術(shù):快速繁衍優(yōu)良種類的植物組織培育技術(shù)。 二植物細(xì)胞工程的實(shí)踐運(yùn)用二植物細(xì)胞工程的實(shí)踐運(yùn)用特點(diǎn):堅持優(yōu)良種類的遺傳特性; 高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁衍。 (1)資料:無病毒的莖尖。 (2)脫毒苗:切取莖尖進(jìn)展組織培育獲得。2.作物脫毒3.神奇的人工種子 (1)技術(shù):植物組織培育。(2)構(gòu)造:人工薄膜胚狀體或不定芽或頂芽或腋芽。(3)特點(diǎn):堅持親本優(yōu)良性狀;不受氣候,季節(jié)和地域限制。1.單倍體育種 (1)方法:花藥離體培育。 (2)優(yōu)點(diǎn): 后代穩(wěn)定遺傳,都是純合體; 明顯縮短育種年限。
8、2.突變體的利用 (1)產(chǎn)生:植物組織培育; (2)利用:挑選對人們有利突變體,進(jìn)而培育新種類。1.種類:蛋白質(zhì),脂肪,糖類,藥物,香料,生物堿等。2.技術(shù):植物的組織培育。植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交 1他以為兩個來自不同植物的體細(xì)胞完成交他以為兩個來自不同植物的體細(xì)胞完成交融,遇到的第一個妨礙是什么?融,遇到的第一個妨礙是什么? 2怎樣樣去處理這個妨礙呢?怎樣樣去處理這個妨礙呢? 3兩個原生質(zhì)體能發(fā)生交融,這與細(xì)胞膜的兩個原生質(zhì)體能發(fā)生交融,這與細(xì)胞膜的什么特性有關(guān)?什么特性有關(guān)?雜雜種種植植株株交融的交融的原生質(zhì)原生質(zhì)體體ABAB再再生生出出細(xì)細(xì)胞胞壁壁脫脫分分化化愈愈傷傷組組織織再再分
9、分化化植物體細(xì)胞雜交的過程植物體細(xì)胞雜交的過程植物細(xì)胞的交融植物細(xì)胞的交融植物組織培育植物組織培育植物細(xì)胞植物細(xì)胞A A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B B原生質(zhì)體原生質(zhì)體A A雜種雜種細(xì)胞細(xì)胞ABAB去去 壁壁去去 壁壁人人工工誘誘導(dǎo)導(dǎo)方法?方法?促進(jìn)交融促進(jìn)交融的方法?的方法?交融交融完成完成的的標(biāo)志標(biāo)志植物細(xì)胞植物細(xì)胞B B實(shí)例實(shí)例 番茄番茄- -馬鈴薯馬鈴薯 在抑制遠(yuǎn)源雜交不親和的妨礙、培育作物在抑制遠(yuǎn)源雜交不親和的妨礙、培育作物新種類方面所獲得的艱苦突破。新種類方面所獲得的艱苦突破。 意義:意義:未處理的問題:未能讓雜種植物按照人們的未處理的問題:未能讓雜種植物按照人們的需求表現(xiàn)出親代的優(yōu)良性狀。
10、需求表現(xiàn)出親代的優(yōu)良性狀。原理:植物細(xì)胞的全能性和細(xì)胞膜的流動性原理:植物細(xì)胞的全能性和細(xì)胞膜的流動性2.利用多倍體育種能獲得這種白菜利用多倍體育種能獲得這種白菜-甘藍(lán)嗎?怎樣獲得?甘藍(lán)嗎?怎樣獲得?2N=142N=141.植物體細(xì)胞雜交得到的白菜甘藍(lán)是幾倍體、幾個染色體組、多少染色體,能否植物體細(xì)胞雜交得到的白菜甘藍(lán)是幾倍體、幾個染色體組、多少染色體,能否可育?可育?是四倍體、四個染色體組、是四倍體、四個染色體組、28條染色體、可育條染色體、可育能,先讓兩者進(jìn)展有性雜交,對雜交所得種子在萌生成幼能,先讓兩者進(jìn)展有性雜交,對雜交所得種子在萌生成幼苗時,用秋水仙素處置,使其染色體加倍,恢復(fù)育性。
11、苗時,用秋水仙素處置,使其染色體加倍,恢復(fù)育性。思索:思索:1 1以下屬于組織培育的是以下屬于組織培育的是 ( )( )A A花粉培育成單倍體植株花粉培育成單倍體植株 B B芽發(fā)育成枝條芽發(fā)育成枝條C C根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū)根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū) D D未受精的卵細(xì)胞發(fā)育成個體未受精的卵細(xì)胞發(fā)育成個體 A A2.2.植物體細(xì)胞雜交的過程本質(zhì)是植物體細(xì)胞雜交的過程本質(zhì)是 A A、細(xì)胞質(zhì)交融的過程、細(xì)胞質(zhì)交融的過程 B B、細(xì)胞核交融的過程、細(xì)胞核交融的過程C C、細(xì)胞膜交融的過程、細(xì)胞膜交融的過程 D D、細(xì)胞原生質(zhì)體交融的過程、細(xì)胞原生質(zhì)體交融的過程D D3.3.在植物細(xì)胞工程中,當(dāng)原生質(zhì)體
12、交融成一個細(xì)胞后,需在植物細(xì)胞工程中,當(dāng)原生質(zhì)體交融成一個細(xì)胞后,需要誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞壁,參與這一過程的細(xì)胞器要誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞壁,參與這一過程的細(xì)胞器 A A、葉綠體、高爾基體、葉綠體、高爾基體 B B、線粒體、高爾基體、線粒體、高爾基體C C、葉綠體、線粒體、葉綠體、線粒體 D D、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)B B4.4.用雜合種子盡快獲得純合子植株的方法是用雜合種子盡快獲得純合子植株的方法是 A A、種植、種植F1F1選出不分別者選出不分別者純合子純合子 B B、種植、種植秋水仙素處置秋水仙素處置純合子純合子C C、種植、種植生長素處置生長素處置純合子純合子D D、種植、種植花藥離體培育花藥
13、離體培育單倍體幼苗單倍體幼苗秋水仙素處置秋水仙素處置純合子純合子D D5.5.下面關(guān)于植物細(xì)胞工程的表達(dá),正確的選項(xiàng)是下面關(guān)于植物細(xì)胞工程的表達(dá),正確的選項(xiàng)是( (多項(xiàng)多項(xiàng)選擇選擇) ( ) ( )A A葉肉細(xì)胞脫分化后可構(gòu)成具有分裂才干的薄壁細(xì)胞葉肉細(xì)胞脫分化后可構(gòu)成具有分裂才干的薄壁細(xì)胞B B葉肉細(xì)胞經(jīng)再分化過程可構(gòu)成愈傷組織葉肉細(xì)胞經(jīng)再分化過程可構(gòu)成愈傷組織C C交融植物葉肉細(xì)胞時,應(yīng)先去掉細(xì)胞膜交融植物葉肉細(xì)胞時,應(yīng)先去掉細(xì)胞膜D D葉肉細(xì)胞離體培育時,可以表現(xiàn)出全能性葉肉細(xì)胞離體培育時,可以表現(xiàn)出全能性AD AD 6.6.以下圖為植物體細(xì)胞雜交過程表示圖,據(jù)圖回答:以下圖為植物體細(xì)胞
14、雜交過程表示圖,據(jù)圖回答: 步驟是去掉步驟是去掉 ,使植物細(xì)胞成為,使植物細(xì)胞成為 ,最,最常用的方法是常用的方法是 。步驟普通常用的化學(xué)試劑是步驟普通常用的化學(xué)試劑是 ,目的是目的是 。在利用雜種細(xì)胞培育成為雜種植株的過程中,運(yùn)用的在利用雜種細(xì)胞培育成為雜種植株的過程中,運(yùn)用的技術(shù)手段是技術(shù)手段是 ,其中步驟相當(dāng)于,其中步驟相當(dāng)于 ,步驟相當(dāng)于步驟相當(dāng)于 。細(xì)胞壁細(xì)胞壁 原生質(zhì)體原生質(zhì)體 酶解法酶解法 聚乙二醇聚乙二醇 誘導(dǎo)原生質(zhì)體交融誘導(dǎo)原生質(zhì)體交融 組織培育組織培育 脫分化脫分化 再分化再分化 植物體細(xì)胞雜交的目的是獲得新的雜種植株,使兩株植物體細(xì)胞雜交的目的是獲得新的雜種植株,使兩株植
15、物的性狀可以在新的植物體上有所表現(xiàn),其根本緣由植物的性狀可以在新的植物體上有所表現(xiàn),其根本緣由是是 。從實(shí)際上講,雜種植株的育性為從實(shí)際上講,雜種植株的育性為 。假設(shè)運(yùn)用傳。假設(shè)運(yùn)用傳統(tǒng)有性雜交方法能否實(shí)現(xiàn)?統(tǒng)有性雜交方法能否實(shí)現(xiàn)? 因此,這因此,這項(xiàng)研討對于培育作物新種類方面的艱苦意義在于項(xiàng)研討對于培育作物新種類方面的艱苦意義在于 。利用植物體細(xì)胞雜交的方法培育作物新種類的過程中,利用植物體細(xì)胞雜交的方法培育作物新種類的過程中,遺傳物質(zhì)的傳送能否遵照孟德爾的遺傳規(guī)律?為什么?遺傳物質(zhì)的傳送能否遵照孟德爾的遺傳規(guī)律?為什么?雜種細(xì)胞具有兩個親本的遺傳物質(zhì)雜種細(xì)胞具有兩個親本的遺傳物質(zhì) 可育可育
16、 不能不能 抑制遠(yuǎn)緣雜交不親和的妨礙抑制遠(yuǎn)緣雜交不親和的妨礙 不遵照,植物體細(xì)胞雜交屬于無性生殖。不遵照,植物體細(xì)胞雜交屬于無性生殖。7.7.基因型為基因型為AaBbAaBb的水稻的水稻2424條染色體的花藥經(jīng)過無菌條染色體的花藥經(jīng)過無菌操操作,接入試管后,在一定條件下培育構(gòu)成試管苗。作,接入試管后,在一定條件下培育構(gòu)成試管苗。愈傷組織是花粉細(xì)胞不斷分裂后構(gòu)成的不規(guī)那么的細(xì)胞愈傷組織是花粉細(xì)胞不斷分裂后構(gòu)成的不規(guī)那么的細(xì)胞團(tuán)團(tuán)愈傷組織構(gòu)成中,必需從培育基中獲得愈傷組織構(gòu)成中,必需從培育基中獲得 和小和小分分子有機(jī)物等營養(yǎng)物質(zhì)。子有機(jī)物等營養(yǎng)物質(zhì)。要促進(jìn)花粉細(xì)胞分裂生長,培育基中應(yīng)有要促進(jìn)花粉細(xì)
17、胞分裂生長,培育基中應(yīng)有 和和 兩類激素。兩類激素。組織培育技術(shù)不能直接用于組織培育技術(shù)不能直接用于 A A、快速繁衍、快速繁衍 B B、培育無病毒植株、培育無病毒植株C C、植物產(chǎn)品的工廠化消費(fèi)、植物產(chǎn)品的工廠化消費(fèi) D D、培育抗病菌植株、培育抗病菌植株用組織培育技術(shù)繁衍植物體時,不能夠發(fā)生的是用組織培育技術(shù)繁衍植物體時,不能夠發(fā)生的是 A A、基因重組、基因重組 B B、基因突變、基因突變 C C、染色體變異、染色體變異 D D、染色體分別、染色體分別水、無機(jī)鹽水、無機(jī)鹽 細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素 生長素生長素 D A A 試管苗的細(xì)胞核中含有試管苗的細(xì)胞核中含有 個個DNADNA分子。分子
18、。培育成的試管苗能夠出現(xiàn)的基因型有培育成的試管苗能夠出現(xiàn)的基因型有 。假設(shè)要獲得育種需求的植株,并能繁衍新種類,后面的假設(shè)要獲得育種需求的植株,并能繁衍新種類,后面的育種步驟是育種步驟是 。12 12 AB Ab aB ab AB Ab aB ab 用一定濃度的秋水仙素處置組織用一定濃度的秋水仙素處置組織培育獲得的幼苗培育獲得的幼苗 8.8.下面所列過程是植物組織培育的簡單過程。請據(jù)此回下面所列過程是植物組織培育的簡單過程。請據(jù)此回答:答:脫分化脫分化再分化再分化表示表示 ,它能被培育成,它能被培育成的根本緣由的根本緣由是是 。表示表示 ,它的細(xì)胞特點(diǎn),它的細(xì)胞特點(diǎn)是是 ,它,它的顏色特點(diǎn)是的
19、顏色特點(diǎn)是 。假想象制造人工種子,應(yīng)選擇寫編假想象制造人工種子,應(yīng)選擇寫編號號 。外植體外植體植物細(xì)胞全能性植物細(xì)胞全能性 愈傷組織愈傷組織 細(xì)胞陳列疏松,高度液泡化無定外形狀細(xì)胞陳列疏松,高度液泡化無定外形狀 色淺色淺 假設(shè)是花藥,那么是假設(shè)是花藥,那么是 ,這項(xiàng)技術(shù)可用,這項(xiàng)技術(shù)可用在在 上。上。 單倍體植株單倍體植株 單倍體育種單倍體育種 9.9.以下圖為植物細(xì)胞交融及組織培育過程表示圖。以下說法以下圖為植物細(xì)胞交融及組織培育過程表示圖。以下說法不正確的選項(xiàng)是不正確的選項(xiàng)是 A A植物體細(xì)胞雜交的最大優(yōu)點(diǎn)是可以抑制遠(yuǎn)緣雜交不親植物體細(xì)胞雜交的最大優(yōu)點(diǎn)是可以抑制遠(yuǎn)緣雜交不親和的妨礙和的妨礙
20、B B雜種細(xì)胞經(jīng)過雜種細(xì)胞經(jīng)過和和過程可以培育成雜種植株,闡明過程可以培育成雜種植株,闡明雜種細(xì)胞具有全能性雜種細(xì)胞具有全能性C C雖然愈傷組織可以進(jìn)展光協(xié)作用,但其培育基中仍需雖然愈傷組織可以進(jìn)展光協(xié)作用,但其培育基中仍需要糖類、氨基酸等有機(jī)營養(yǎng)要糖類、氨基酸等有機(jī)營養(yǎng)D D假設(shè)假設(shè)A A的基因型為的基因型為RrRr,B B的基因型為的基因型為YyYy,那么最終構(gòu)成的雜,那么最終構(gòu)成的雜種植株的基因型為種植株的基因型為RrYyRrYyC C 二二 、動物細(xì)胞工程、動物細(xì)胞工程(第二課時第二課時)讀下面一段文字資料,思索以下問題:讀下面一段文字資料,思索以下問題:長期以來,為了獲得抗體,采用的
21、是把某種抗原反復(fù)注射長期以來,為了獲得抗體,采用的是把某種抗原反復(fù)注射到動物體內(nèi),然后從動物血清中分別出所需抗體的方法。到動物體內(nèi),然后從動物血清中分別出所需抗體的方法。用這種方法獲得的抗體,不僅產(chǎn)量低,而且抗體的特異性用這種方法獲得的抗體,不僅產(chǎn)量低,而且抗體的特異性差,純度低,反響不夠靈敏。人們發(fā)現(xiàn),在動物發(fā)生免疫差,純度低,反響不夠靈敏。人們發(fā)現(xiàn),在動物發(fā)生免疫反響的過程中,體內(nèi)的反響的過程中,體內(nèi)的B B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的特異性抗體,但是每個特異性抗體,但是每個B B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大
22、量的單一抗體,必需用單個特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體,必需用單個B B細(xì)胞進(jìn)展無性繁衍,即克隆。細(xì)胞進(jìn)展無性繁衍,即克隆。 1、請從以上文字資料中找出單克隆抗體的概念、請從以上文字資料中找出單克隆抗體的概念2、怎樣才干獲得單克隆抗體?、怎樣才干獲得單克隆抗體?提示提示1 1:僅用細(xì)胞培育技術(shù)可行嗎?:僅用細(xì)胞培育技術(shù)可行嗎?提示提示2 2:我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無限增殖的?:我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無限增殖的?提示提示3 3:有什么方法能使:有什么方法能使B B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的才干和細(xì)胞產(chǎn)生抗體的才干和腫瘤細(xì)胞無限增殖才干同時具備呢?腫瘤細(xì)胞無限增殖才干同時具備呢?用單個用單個B B
23、細(xì)胞進(jìn)展克隆,得到的細(xì)胞群可以分泌一種化學(xué)性細(xì)胞進(jìn)展克隆,得到的細(xì)胞群可以分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體,這種抗體就叫做單克隆抗體。質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體,這種抗體就叫做單克隆抗體。五、動物細(xì)胞培育 從動物機(jī)體中取出相關(guān)的 ,將它分散成 ,然后,放在適宜的培育基中,讓這些細(xì)胞 。 1概念:動物胚胎或動物胚胎或幼齡動物的組織、器官幼齡動物的組織、器官如:腎、肺等如:腎、肺等細(xì)胞生命力旺盛,分裂才干強(qiáng)細(xì)胞生命力旺盛,分裂才干強(qiáng)原理:細(xì)胞增殖使細(xì)胞和培育液充分接觸使細(xì)胞和培育液充分接觸組織組織單個細(xì)胞單個細(xì)胞生長和增殖生長和增殖2、過程:取什么樣的組織?如何將組織分散成單個細(xì)胞?如何制備細(xì)胞懸
24、液?什么叫原代培育?什么叫傳代細(xì)胞培育?如何進(jìn)展傳代培育?什么是細(xì)胞貼壁景象?什么是細(xì)胞接觸抑制取幼齡組織或器官如:腎臟 肌肉用胰蛋白酶處置參與細(xì)胞培育液u細(xì)胞貼壁:培育過程中,細(xì)胞貼附在瓶壁上的景象。u要求:培育瓶或培育皿的內(nèi)外表光滑、無毒細(xì)胞接觸抑制細(xì)胞接觸抑制 細(xì)胞在貼壁生長細(xì)胞在貼壁生長過程中,隨著細(xì)過程中,隨著細(xì)胞分裂,數(shù)量不胞分裂,數(shù)量不斷添加,最后構(gòu)斷添加,最后構(gòu)成一個單層,此成一個單層,此時細(xì)胞間相互接時細(xì)胞間相互接觸,細(xì)胞分裂和觸,細(xì)胞分裂和生長停頓,數(shù)量生長停頓,數(shù)量不再添加。不再添加。原代培育:從機(jī)原代培育:從機(jī)體取出后立刻培體取出后立刻培育的細(xì)胞。育的細(xì)胞。 10代以內(nèi)
25、代以內(nèi)用胰蛋白酶分散成單個細(xì)胞傳代培育:傳代培育:分瓶后的培分瓶后的培育,從育,從10代代培育到培育到4050代細(xì)胞代細(xì)胞2、過程、過程取取 的組織、器官的組織、器官細(xì)胞懸浮液細(xì)胞懸浮液 酶酶 貼滿瓶壁的細(xì)胞貼滿瓶壁的細(xì)胞單個細(xì)胞單個細(xì)胞參與參與 液液動物胚胎或幼齡動動物胚胎或幼齡動物物胰蛋白胰蛋白 培育培育接觸抑制接觸抑制原代原代 培育培育1-10代細(xì)胞代細(xì)胞4050代細(xì)胞代細(xì)胞(細(xì)胞株細(xì)胞株)傳代培育傳代培育無限傳代細(xì)胞系無限傳代細(xì)胞系用 處置胰蛋白酶遺傳物質(zhì)不變遺傳物質(zhì)改動,能無限增殖癌變3 3、條件:、條件:1、無菌、無毒的環(huán)境、無菌、無毒的環(huán)境 2、營養(yǎng)、營養(yǎng)3、溫度和、溫度和PH
26、4、氣體環(huán)境:、氣體環(huán)境:添加一定量的抗生素,定期改換培育液添加一定量的抗生素,定期改換培育液補(bǔ)充合成培育基補(bǔ)充合成培育基中缺乏的物質(zhì)中缺乏的物質(zhì)36.5 +0.5度 ;PH為7.2-7.4。 O2作用:進(jìn)展作用:進(jìn)展 呼吸,提供能量呼吸,提供能量 CO2作用:維持培育液的作用:維持培育液的PH值值95%空氣和空氣和5% CO2 葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、微量元素、動物血清、血漿等。葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、微量元素、動物血清、血漿等。有氧有氧1 1消費(fèi)蛋白質(zhì)生物制品:病毒疫苗、干消費(fèi)蛋白質(zhì)生物制品:病毒疫苗、干 擾素、單克隆抗體等。擾素、單克隆抗體等。2 2獲得大量本身的皮膚細(xì)胞,用于植皮。獲得
27、大量本身的皮膚細(xì)胞,用于植皮。3 3用于檢測有毒物質(zhì)用于檢測有毒物質(zhì)4 4用于生理、病理、藥理等方面的研討,用于生理、病理、藥理等方面的研討,為治療和預(yù)防疾病提供實(shí)際根據(jù)為治療和預(yù)防疾病提供實(shí)際根據(jù)4、運(yùn)用 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康? :制備單克隆抗體制備單克隆抗體. . 實(shí)驗(yàn)原理:實(shí)驗(yàn)原理:B B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗體,骨髓瘤淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗體,骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖,雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生抗細(xì)胞能無限增殖,雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生抗體又能無限增殖。體又能無限增殖。 實(shí)驗(yàn)資料:小白鼠實(shí)驗(yàn)資料:小白鼠 實(shí)驗(yàn)器材:培育皿、針筒等等。實(shí)驗(yàn)器材:培育皿、針筒等等。 實(shí)驗(yàn)過程:如下頁實(shí)驗(yàn)過程:如下頁 單克隆抗體制備過程單克隆
28、抗體制備過程 注射抗原B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞交融、挑選細(xì)胞交融、挑選雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培育細(xì)胞培育挑選,繼續(xù)培育挑選,繼續(xù)培育足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群特定抗體的細(xì)胞群體外培育體外培育注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔單克隆抗體單克隆抗體1 1為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B B淋巴細(xì)胞交融淋巴細(xì)胞交融? ?小鼠骨髓瘤細(xì)胞可以在體外培育條件下大量增殖,小鼠骨髓瘤細(xì)胞可以在體外培育條件下大量增殖,B B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體,淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體,細(xì)胞的同源性越近,交融構(gòu)成的雜種細(xì)胞越易成活。細(xì)胞的同源性越近,交融構(gòu)成的雜種細(xì)胞越
29、易成活。2 2骨髓瘤細(xì)胞是癌細(xì)胞嗎骨髓瘤細(xì)胞是癌細(xì)胞嗎? ? 有無限增殖才干的細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞,有無限增殖才干的細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞, 具有轉(zhuǎn)移才干的腫瘤細(xì)胞,稱為癌細(xì)胞,具有轉(zhuǎn)移才干的腫瘤細(xì)胞,稱為癌細(xì)胞, 所以說,瘤細(xì)胞不能等于癌細(xì)胞。所以說,瘤細(xì)胞不能等于癌細(xì)胞。3 3整個制備過程為何要經(jīng)過兩次挑選整個制備過程為何要經(jīng)過兩次挑選? ?第一次挑選得到雜交瘤細(xì)胞多種,第一次挑選得到雜交瘤細(xì)胞多種,第二次需先在多孔培育板上,在每孔只需一個雜交瘤第二次需先在多孔培育板上,在每孔只需一個雜交瘤細(xì)胞的情況下開場培育,然后再挑選出能產(chǎn)生特異性細(xì)胞的情況下開場培育,然后再挑選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。抗體的細(xì)胞群。 由于該細(xì)胞群是單個雜交瘤細(xì)胞克隆得來的,所由于該細(xì)胞群是單個雜交瘤細(xì)胞克隆得來的,所以產(chǎn)生的抗體必然是化學(xué)性質(zhì)單一的,特異性強(qiáng)的單以產(chǎn)生的抗體必然是化學(xué)性質(zhì)單一的,特異性強(qiáng)的單克隆抗體。這里的單克隆確有單個細(xì)胞克隆的含義,克隆抗體。這里的單克隆確有單個細(xì)胞克隆的含義,只不過克隆的不是只不過克隆的不是B B淋巴細(xì)胞,而是雜交瘤細(xì)胞。淋巴細(xì)胞,而是雜交瘤細(xì)胞。 胚胎移植技術(shù)胚胎移植技術(shù)試管動物嬰兒培育過程試管動物嬰兒培育過程卵細(xì)胞卵細(xì)胞精子精子體外受精體外受精受精卵受精卵胚胎胚胎新個體新個體母體子宮內(nèi)母體子宮內(nèi)孕育、產(chǎn)出孕育、產(chǎn)出核移植技術(shù)核移植技
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