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文檔簡介
1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上選修一 生物技術(shù)實踐專題一 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題1 果酒和果醋的制作1果酒制作的原理(1)人類利用微生物發(fā)酵制作果酒,該過程用到的微生物是 ,它的代謝類型是 ,與異化作用有關(guān)的方程式有 。生活狀態(tài):進行發(fā)酵,產(chǎn)生大量 。(2)果酒制作條件傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所使用的酵母菌的來源是 。酵母菌生長的最適溫度是 ; PH呈 ;(3)紅色葡萄酒呈現(xiàn)顏色的原因是:酒精發(fā)酵過程中,隨著 的提高,紅色葡萄皮的 進入發(fā)酵液,使葡萄酒呈 色。(4)在 、 的發(fā)酵液中,酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數(shù)其它微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。2果醋的制作原理(1)果醋發(fā)酵菌種是 ,新陳代謝類型
2、。 (2)當氧氣和糖源充足時醋酸菌將糖分解成 ,當糖源不足時醋酸菌將 變?yōu)?再變成醋酸,其反應(yīng)式 。3操作過程應(yīng)注意的問題(1)為防止發(fā)酵液被污染,發(fā)酵瓶要用 消毒。(2)葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時,要留出大約 的空間。(3)制作葡萄酒時將溫度嚴格控制在 ,時間控制在 d左右,可通過 對發(fā)酵的情況進行及時的監(jiān)測。(4)制葡萄醋的過程中,將溫度嚴格控制在 ,時間控制在 d,并注意適時在 充氣。4酒精的檢驗(1)檢驗試劑: 。(2)反應(yīng)條件及現(xiàn)象:在 條件下,反應(yīng)呈現(xiàn) 。5.制作果酒、果醋的實驗流程挑選葡萄 果酒 果醋P4旁欄思考題1你認為應(yīng)該先洗葡萄還是先除去枝梗,為什么?應(yīng)該先沖洗葡萄,然后再除去枝梗
3、,以避免除去枝梗時引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機會。2你認為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染?需要從發(fā)酵制作的過程進行全面的考慮,因為操作的每一步都可能混入雜菌。例如:榨汁機、發(fā)酵裝置要清洗干凈;每次排氣時只需擰松瓶蓋、不要完全揭開瓶蓋等。3制作葡萄酒時,為什么要將溫度控制在18250C?制作葡萄醋時,為什么要將溫度控制在30350C?溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。200C左右最適合酵母菌繁殖,因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌,最適生長溫度為30350C,因此要將溫度控制在30350C。4制葡萄醋時,為什么要適時通過充氣口充氣? 醋酸菌是好氧菌,再將酒精變成醋酸時需要
4、養(yǎng)的參與,因此要適時向發(fā)酵液中充氣。P4:A同學:每次排氣時只需擰松瓶蓋,不要完全揭開瓶蓋;制醋時,再將瓶蓋打開,蓋上一層紗布,進行葡萄醋的發(fā)酵。來防止發(fā)酵液被污染,因為操作的每一步都可能混入雜菌B同學:分析果酒和果醋的發(fā)酵裝置中充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用。為什么排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接?充氣口:是在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進行充氣用的;排氣口:是在酒精發(fā)酵時用來排出二氧化碳的;出料口:是用來取樣的。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的是防止空氣中微生物的污染。使用該裝置制酒時,應(yīng)該關(guān)閉充氣口;制醋時,應(yīng)將充氣口連接氣泵,輸入氧氣。課題2 腐乳的制作1.制作原
5、理(1)經(jīng)過微生物的發(fā)酵,豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成小分子的 和 ,脂肪被分解成 和 ,因而更利于消化吸收。(2)腐乳的發(fā)酵有多種微生物參與,如 、 、 、 等,其中起主要作用的是 。它是一種絲狀 ,常見 、 、 、 上。(3)現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴格的 條件下,將優(yōu)良 菌種直接接種在豆腐上,這樣可以避免其他菌種的 ,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。2. 腐乳制作的實驗流程:讓豆腐長出 密封腌制。3.實驗注意事項(1)在豆腐上長出毛霉時,溫度控制在 ,自然條件下毛霉的菌種來自空氣中的 。(2)將長滿毛霉的豆腐塊分層加鹽,加鹽量要隨著擺放層數(shù)的加高而 ,近瓶口的表層要 。加鹽的目的是使豆腐塊失水,利于 ,同時也能 的
6、生長。鹽的濃度過低, ;鹽的濃度過高, 。(3)鹵湯中酒精的含量應(yīng)控制在 左右,它能 微生物的生長,同時也與豆腐乳獨特的 形成有關(guān)。酒精含量過高, ;酒精含量過低, 。香辛料可以調(diào)制腐乳的風味,同時也有 作用。(4)瓶口密封時,最好將瓶口 ,防止瓶口污染。P6旁欄思考題1.你能利用所學的生物學知識,解釋豆腐長白毛是怎么一回事? 豆腐上生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴格地說是直立菌絲,在豆腐中還有匍匐菌絲。2.王致和為什么要撒許多鹽,將長毛的豆腐腌起來?鹽能防止雜菌污染,避免豆腐腐敗。3你能總結(jié)出王致和做腐乳的方法嗎? 讓豆腐長出毛霉加鹽腌制密封腌制。P7旁欄思考題1.我們平常吃的豆腐,哪種適合用
7、來做腐乳?含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量過高的豆腐制腐乳,不易成形。2.吃腐乳時,你會發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢?它對人體有害嗎?它的作用是什么? “皮”是前期發(fā)酵時在豆腐表面上生長的菌絲(匍匐菌絲),它能形成腐乳的“體”,使腐乳成形。“皮”對人體無害。P8練習1. 腌制腐乳時,為什么要隨豆腐層的加高而增加鹽的含量?為什么在接近瓶口的表面要將鹽厚鋪一些?越接近瓶口,雜菌污染的可能性越大,因此要隨著豆腐層的加高增加鹽的用量,在接近瓶口的表面,鹽要鋪厚一些,以有效防止雜菌污染。課題3 制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量1乳酸菌代謝類型為 ,在 情況狂下,將葡萄糖
8、分解為乳酸。在自然界中分布廣泛,在 、 、 、 內(nèi)都有分布。常見的乳酸菌有 和 兩種,其中 常用于生產(chǎn)酸奶。2亞硝酸鹽為 ,易溶于 ,在食品生產(chǎn)中用作 。一般不會危害人體健康,但當人體攝入硝酸鹽總量達 g時,會引起中毒;當攝入總量達到 g時,會引起死亡。在特定的條件下,如 、 和 的作用下,會轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì)亞硝胺,亞硝胺對動物有致畸和致突變作用。3泡菜制作大致流程:原料處理 裝壇 成品(1)配制鹽水:清水和鹽的比例為 ,鹽水 后備用。(2)裝壇:蔬菜裝至 時加入香辛料,裝至 時加鹽水,鹽水要 ,蓋好壇蓋。壇蓋邊沿水槽中 ,保證壇內(nèi) 環(huán)境。(3)腌制過程種要注意控制腌制的 、 和 。溫度過高、食
9、鹽用量不足10%、 過短,容易造成 , 。4測亞硝酸鹽含量的原理是 。將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的 進行比較,可以大致 出泡菜中亞硝酸鹽的含量。測定步驟:配定溶液 制備樣品處理液 P9旁欄思考題:為什么含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶?酸奶的制作依靠的是乳酸菌的發(fā)酵作用??股啬軌驓⑺阑蛞种迫樗峋纳L,因此含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶。P10旁欄思考題:1為什么日常生活中要多吃新鮮蔬菜,不宜多吃腌制蔬菜?有些蔬菜,入小白菜和蘿卜等,含有豐富的硝酸鹽。當這些蔬菜放置過久發(fā)生變質(zhì)(發(fā)黃、腐爛)或者煮熟后存放太久時,蔬菜中的硝酸鹽會被微生物還原成亞硝酸鹽,危害人體健康。2為什么泡菜壇內(nèi)有時會長一
10、層白膜?你認為這層白膜是怎么形成的?形成白膜是由于產(chǎn)膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厭氧微生物,泡菜發(fā)酵液營養(yǎng)豐富,其表面氧氣含量也很豐富,適合酵母菌繁殖。專題知識歸納果酒和果醋的制作果酒和果醋的制作原理果酒和果醋的設(shè)計制作裝置果酒和果醋的制作過程傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用腐乳的制作 腐乳的制作原理腐乳制作過程的控制條件制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量 泡菜制作原理 泡菜發(fā)酵條件亞硝酸鹽含量的測定專題二 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1 微生物的實驗室培養(yǎng)1根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)可將培養(yǎng)基可以分為 和 。2培養(yǎng)基一般都含有 、 、 、 四類營養(yǎng)物質(zhì),另外還需要滿足微生物生長對 、 以及 的要求。3獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 。
11、4消毒是指 滅菌是指 5日常生活中常用的消毒方法是 ,此外,人們也常使用化學藥劑進行消毒,如用 、 等。常用的滅菌方法有 、 、 ,此外,實驗室里還用 或 進行消毒。6制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟是 , , , , 。7微生物接種的方法中最常用的是 和 。平板劃線是指 。稀釋涂布平板法指 。8菌種的保藏:(1)臨時保藏:將菌種接種到試管的 ,在合適的溫度下培養(yǎng), 長成后,放入 冰箱中保藏,以后每36個月,轉(zhuǎn)移一次新的培養(yǎng)基。缺點是:保存時間 ,菌種容易被 或產(chǎn)生變異。(2)長期保存方法: 法,放在 冷凍箱中保存。P15旁欄思考題:無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外
12、,還有什么目的?無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。P16旁欄思考題:請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要,請選擇合適的方法。(1) 培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿(2) 玻棒、試管、燒瓶和吸管(3) 實驗操作者的雙手(1)、(2)需要滅菌;(3)需要消毒。P17倒平板操作的討論1.培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50 左右時,才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度?可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時,就可以進行倒平板了。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰?通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后,為什么要將平板倒置?平板冷凝
13、后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。4.在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么?空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。P18平板劃線操作的討論1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時,仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使
14、下一次劃線時,接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。2.在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進行劃線?以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。3.在作第二次以及其后的劃線操作時,為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?劃線后,線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。P19涂布平板操作的討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的
15、無菌操作要求,想一想,第2步應(yīng)如何進行無菌操作?應(yīng)從操作的各個細節(jié)保證“無菌”。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍;等等。課題2 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)1尿素只有被 分解成 之后,才能被植物吸收利用。選擇分解尿素細菌的培養(yǎng)基特點: 惟一氮源,按物理性質(zhì)歸類為 培養(yǎng)基。2PCR( )是一種在體外將 。此項技術(shù)的自動化,要求使用耐高溫的DNA聚合酶。3實驗室中微生物的篩選應(yīng)用的原理是:人為提供有利于 生長的條件(包括 等),同時抑制或阻止其他微生物生長。4選擇培養(yǎng)基是指 。5常用來統(tǒng)計樣品中活菌數(shù)目的方法是 。即當樣品的稀釋度足夠高時,培
16、養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的 。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準確,一般選擇菌落數(shù)在 的平板進行計數(shù),計數(shù)公式是 。利用稀釋涂布平板法成功統(tǒng)計菌落數(shù)目的關(guān)鍵是 。另外, 也是測定微生物數(shù)量的常用方法。6一般來說,統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目 。這是因為 。因此,統(tǒng)計結(jié)果一般用 而不是活菌數(shù)來表示。7設(shè)置對照實驗的主要目的是 ,提高實驗結(jié)果的可信度。對照實驗是 。滿足該條件的稱為 ,未滿足該條件的稱為 。8實驗設(shè)計包括的內(nèi)容有: 、 、 和 ,具體的實驗步驟以及時間安排等的綜合考慮和安排。9不同種類的微生物,往往需要不同的培養(yǎng) 和培養(yǎng)
17、。在實驗過程中,一般每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果,這樣可以 。10土壤有“ ”之稱,同其他生物環(huán)境相比,土壤中微生物 、 。11土壤中的微生物約 是細菌,細菌適宜在酸堿度接近 潮濕土壤中生長。土壤中微生物的數(shù)量不同,分離不同微生物采用的 的稀釋度不同。12一般來說,在一定的培養(yǎng)條件下,同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。這些特征包括菌落的 、 、 和 等方面。13在進行多組實驗過程中,應(yīng)注意做好標記,其目的是 。14對所需的微生物進行初步篩選,只是分離純化菌種的第一步,要對分離的菌種進行一步的鑒定,還需要借助 的方法。15在細菌分解尿素的化學反應(yīng)中,細菌合成的 將
18、尿素分解成了 。氨會使培養(yǎng)基的堿性 ,PH 。因此,我們可以通過檢測培養(yǎng)基 變化來判斷該化學反應(yīng)是否發(fā)生。在以 為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入 指示劑。培養(yǎng)某種細菌后,如果PH升高,指示劑將變 ,說明該細菌能夠 。課題3 分解纖維素的微生物的分離1纖維素是 類物質(zhì), 是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物,此外,木材、作物秸稈等也富含纖維素。2纖維素酶是一種 酶,一般認為它至少包括三種組分,即 、 和 ,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成 。正是在這三種酶的協(xié)同作用下,纖維素最終被水解成葡萄糖,為微生物的生長提供營養(yǎng),同樣,也可以為人類所利用。3篩選纖維素分解菌可以用 法,這種方法
19、能夠通過 直接對微生物進行篩選。 可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成 ,但并不和水解后的 和 發(fā)生這種反應(yīng)。纖維素分解菌能產(chǎn)生 分解纖維素,從而使菌落周圍形成 。4分離分解纖維素的微生物的實驗流程圖如下: 梯度稀釋 。5為確定得到的菌是否是纖維素分解菌,還學進行 的實驗。纖維素酶的發(fā)酵方法有 發(fā)酵和 發(fā)酵。測定方法一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的 進行定量測定。專題知識歸納結(jié)果分析與評價培養(yǎng)基培養(yǎng)基的類型培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)無菌技術(shù)避免雜菌污染的方法實驗室常用的消毒方法實驗室常用的滅菌方法制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基計算稱量溶化滅菌倒平板純化大腸桿菌平板劃線法稱釋涂布法課題延伸微生物的培養(yǎng)與
20、應(yīng)用微生物的實驗室培養(yǎng)土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)篩選菌株P(guān)CR技術(shù)實驗室中篩選微生物的原理選擇培養(yǎng)基統(tǒng)計菌落數(shù)目稀釋涂布平板法顯微鏡直接計數(shù)法設(shè)置對照設(shè)置對照的目的對照實驗的概念實驗設(shè)計土壤取樣樣品的稀釋微生物的培養(yǎng)與觀察無菌操作做好標記規(guī)劃時間操作提示結(jié)果分析與評價課題延伸分解纖維素的微生物的分離纖維素與纖維素酶纖維素酶的組成成分纖維素酶分解纖維素的實驗纖維素分解菌的篩選剛果紅染料篩選纖維素分解菌的依據(jù)實驗設(shè)計土壤取樣選擇培養(yǎng)剛果紅染色法操作提示復(fù)習微生物技術(shù)選擇培養(yǎng)的操作方法結(jié)果分析與評價課題延伸 專題4 酶的研究與應(yīng)用 課題1果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用一、基礎(chǔ)知識1果膠酶的作用(1)
21、果膠的成分及作用:果膠是植物_以及_的主要組成成分之一,它是由_聚合而成的一種高分子化合物,不溶于水。(2)果膠酶的作用:果膠酶能夠把果膠分解成可溶性的_。(3)果膠酶的組成:果膠酶并不特指某一種酶,而是_的一類酶的總稱,包括_、_和_等。提醒由于原核生物的細胞壁的主要成分是肽聚糖,真菌細胞壁的主要成分是幾丁質(zhì),因此這兩類生物的細胞壁均不能用纖維素酶和果膠酶除去。(4)果膠酶的來源:_、_、_和_均能產(chǎn)生果膠酶。由_發(fā)酵生產(chǎn)的果膠酶是食品加工業(yè)中使用量最大的酶制劑之一,被廣泛地應(yīng)用于果汁加工業(yè)。2酶的活性與影響酶活性的因素(1)酶的活性:是指酶_的能力。酶活性的高低可以用在一定條件下,酶所催化
22、的某一化學反應(yīng)的_來表示。(2)酶的反應(yīng)速度:用_內(nèi)、_中反應(yīng)物的_或產(chǎn)物的_來表示。影響酶活性的因素主要有_、_和_等。3酶的用量酶用量過多,會導(dǎo)致酶的_;酶用量過少,會_酶促反應(yīng)的速度。因此要得到適宜的酶用量,需通過設(shè)計實驗進行探究。二、實驗設(shè)計1探究溫度對酶活性的影響(1)實驗原理果膠酶活性受溫度影響。在一定范圍內(nèi),隨著溫度的升高,酶的活性逐漸_;超過一定溫度之后,隨著溫度的升高,酶的活性逐漸降低;當達到一定溫度后,酶的活性_。酶的活性隨溫度的升高而變化的趨勢可用下圖表示:通過測定_內(nèi)濾出的_大小來判斷果膠酶的活性的原理是:果膠酶將果膠分解為可溶性的半乳糖醛酸,半乳糖醛酸可通過濾紙,因此
23、_和_反映了果膠酶催化分解果膠的能力。在不同的溫度和pH條件下,果膠酶的活性越高,蘋果汁的體積就_,同時果汁也越_。(2)實驗操作流程各取一支分9組,分別放入30、35、40、45、50、55、60、65和70的恒溫水箱中恒溫加熱恒溫保持10 min比較果汁的澄清度,或過濾果汁,用量筒測量果汁的量,并記錄結(jié)果(3)記錄結(jié)果實驗溫度303540455055606570果汁量(mL)(4)實驗分析本實驗的實驗對象是_,溫度為_,屬于探究性的定量實驗。這類實驗的自變量通常是通過設(shè)置梯度來確定最適值。第一輪實驗設(shè)置的梯度差通常較大,縮小范圍后,在第二輪實驗中可設(shè)置較小的梯度差。酶遇高溫變性后,很難再恢
24、復(fù)活性,不宜再回收利用。在混合蘋果泥和果膠酶之前,要將蘋果泥和果膠酶分裝在不同的試管中恒溫處理,其目的是_相同,避免蘋果泥與果膠酶混合時影響混合物的溫度,從而影響果膠酶的活性。提醒(1)探究不同溫度(或pH)對果膠酶活性的影響,溫度(或pH)為自變量,且應(yīng)嚴格控制其他無關(guān)變量均相同,通過設(shè)置合理的溫度(或pH)梯度來確定最適值。(2)在蘋果泥和果膠酶混合之前,一定要保證底物和酶先達到相同的條件(溫度或pH),避免混合后條件發(fā)生變化,以確保實驗結(jié)果的準確性。2探究pH對酶活性的影響(1)實驗原理大部分酶的活性受pH的影響,在一定pH下,酶促反應(yīng)具有最大速度,高于或低于此pH,反應(yīng)速度都下降,通常
25、稱此pH為酶反應(yīng)的_。pH對酶活性的影響可用下圖表示:(2)實驗流程及注意問題用攪拌器攪拌制取蘋果泥,蘋果泥來源要_(最好是同一個蘋果)。注意制取蘋果泥時,可先將蘋果切成小塊放入攪拌器中,加入適量的水后再進行攪拌;如果用橙子做實驗,不必去皮。將分別裝有_和_的試管在恒溫水浴中保溫。注意a蘋果泥的用量和果膠酶的用量比例要適當。b恒溫水浴的溫度可用上一實驗測出的最適溫度。將蘋果泥和果膠酶分別加入9組實驗用的試管中(pH梯度可設(shè)置為5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0),并快速混合調(diào)節(jié)pH。注意a在探究不同pH對果膠酶活性的影響時,可以用體積分數(shù)為0.1%的NaOH
26、溶液或鹽酸調(diào)節(jié)pH。b在用果膠酶處理蘋果泥時,為了使果膠酶能夠充分地催化反應(yīng),應(yīng)用玻璃棒不時地攪拌反應(yīng)混合物。放進恒溫水浴中反應(yīng)一段時間。將試管中混合物過濾,并用量筒量取果汁體積,比較果汁多少。記錄實驗結(jié)果,確定最適pH。pH5.05.56.06.57.07.58.08.59.0果汁量(mL)3.探究果膠酶的用量(1)實驗原理實驗中如果隨著酶的用量增加,過濾到的果汁的體積也增加,說明酶的_;當酶的用量增加到某個值后,再增加酶的用量,過濾到的果汁的體積_,說明酶的用量已經(jīng)足夠,那么,這個值就是酶的_。(2)實驗流程準確稱取純的果膠酶1 mg、2 mg、3 mg、4 mg、5 mg、6 mg、7
27、mg、8 mg、9 mg,配制成_體積的酶的水溶液,取等量放入9支試管中,依次編號為19號。制取蘋果泥并稱45 g蘋果泥,分裝入9支試管中,每支試管中分裝5 g,依次編號為19號。將上述分別裝有果膠酶和蘋果泥的試管放入37的恒溫水浴中平衡內(nèi)外溫度。一段時間后將不同濃度的果膠酶分別迅速與各試管的蘋果泥混合,然后再放入恒溫水浴中。記錄反應(yīng)時間,約20 min。過濾后測量果汁體積。試管123456789果汁量(mL)(3)結(jié)果分析及評價溫度和pH在很大程度上對酶的空間結(jié)構(gòu)會產(chǎn)生巨大的影響。因有其他無關(guān)變量影響,實際用量比理論值稍多。一般為50 mg/L左右,因為用此濃度處理果汁24 h后出汁率增加1
28、0%后不再增加。當然,不同果汁的使用量有較大差別。實驗中所用的果膠酶盡量使用其純酶制劑或不含抑制物的粗酶制劑,以免影響對酶用量的估算。課題2探討加酶洗衣粉的洗滌效果一、基礎(chǔ)知識1加酶洗衣粉(1)概念:是指含有_的洗衣粉。(2)種類:目前常用的酶制劑有_、_、_和_四類。(3)作用:加酶洗衣粉中的蛋白酶可將_最終水解為_;脂肪酶可將_最終水解為_;淀粉酶可將_最終水解為_,以達到去污的目的。_能將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的_或_,使污跡容易從衣物上脫落。2影響加酶洗衣粉洗滌效果的因素使用加酶洗衣粉時,影響酶活性的因素有_、_和_等,為此科學家通過_生產(chǎn)出了能夠_、_、_和_的酶
29、,并制成酶制劑,使其與洗衣粉的其他成分_。提醒使用加酶洗衣粉時必須注意以下幾點:(1)堿性蛋白酶能使蛋白質(zhì)水解,因此,蛋白質(zhì)類纖維(羊毛、蠶絲等)織物就不能用加酶洗衣粉來洗滌,以免使纖維受到破壞;(2)使用加酶洗衣粉時,必須注意洗滌用水的溫度。堿性蛋白酶在3550時活性最強,在低溫下或70以上就會失效;(3)加酶洗衣粉也不宜長期存放,存放時間過長會導(dǎo)致酶活性損失;(4)加酶洗衣粉不宜與三聚磷酸鹽共存,否則酶的活性將會喪失;(5)添加了堿性蛋白酶的洗衣粉可以分解人體皮膚表面蛋白質(zhì),而使人患過敏性皮炎、濕疹等,因此,應(yīng)避免與這類洗衣粉長時間地接觸。二、實驗設(shè)計1探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬
30、的洗滌效果(1)實驗分析探究加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗滌效果的區(qū)別時,_為自變量,要控制其他條件一致,同時普通洗衣粉處理污漬與加酶洗衣粉處理污漬形成_實驗;在控制變量時需要將科學實驗與生活經(jīng)驗區(qū)別開。(2)實驗準備帶有污染物的實驗用布的制?。悍Q取一定量的污染物制成溶液,取等量污染物滴加在大小、質(zhì)地相同的新布上。稱取等量的洗衣粉:用天平準確稱取等量普通洗衣粉和加酶洗衣粉。(3)實驗過程取大燒杯兩只,用量筒量取等量水倒入其中。將制好的污染布塊和洗衣粉(一組為污染布塊與普通洗衣粉,一組為污染布塊與加酶洗衣粉)分別放入兩只燒杯中。用玻璃棒同時充分攪拌相同的時間,攪拌可重復(fù)進行。經(jīng)過相同的時間后觀察洗滌
31、效果。2探究使用加酶洗衣粉時的最適溫度(1)實驗分析在探究加酶洗衣粉的最適溫度時,_是自變量,其他條件一致,不同的實驗組之間形成_;變量的范圍應(yīng)考慮_。(2)實驗步驟將等量相同的污染物滴加在相同大小、質(zhì)地的白棉布上(8塊)。取8只大燒杯,分別注入500 mL自來水,編號為1、2、3、4、5、6、7、8,溫度均控制在37。將8只大燒杯中的水溫分別調(diào)節(jié)為20、25、30、35、40、45、50、55;然后分別向各燒杯中加入等量的加酶洗衣粉。取制好的污染布塊分別放入8只燒杯中,用玻璃棒同時充分攪拌。相同的時間后觀察洗滌效果。(3)結(jié)果分析洗衣粉的洗滌效果可以根據(jù)污染物消失的時間或相同時間內(nèi)白棉布上的
32、污漬的消失情況進行判斷。在探究加酶洗衣粉使用時的最適溫度時,若測出在40時洗滌效果比其他條件下好,可設(shè)置溫度梯度差更小的實驗變量,如35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45,進行重復(fù)實驗,直至測出具體的最適溫度。3探究不同種類的加酶洗衣粉的洗滌效果(1)實驗分析:在探究不同種類的加酶洗衣粉的洗滌效果時,自變量是_,污漬應(yīng)該是_的,其他條件均一致。(2)實驗步驟在相同大小、質(zhì)地的白棉布(3塊)上滴加等量的牛奶。取大燒杯3只,分別注入500 mL自來水,編號A、B、C,溫度均控制在37。在A中加入一定量的加入蛋白酶的洗衣粉,在B中加入等量的加入復(fù)合酶的洗衣粉,在C中加入等量
33、的加入脂肪酶的洗衣粉。取制好的污染布塊分別放入3只燒杯中,用玻璃棒同時充分攪拌。相同的時間(5 min)后觀察洗滌效果。提醒(1)該實驗設(shè)計可有兩條思路:探究同一種加酶洗衣粉對于不同污漬的洗滌效果。探究多種加酶洗衣粉對同一污漬的洗滌效果。(2)洗滌效果可在洗滌后比較污物的殘留程度(如:已消失、顏色變淺、面積縮小等),還可以比較達到同樣效果所用的時間長短。(3)該實驗的自變量是洗衣粉的種類,要保證其他無關(guān)變量相同。課題3酵母細胞的固定化一、固定化酶的應(yīng)用和固定化細胞技術(shù)1高果糖漿的生產(chǎn)(1)高果糖漿的生產(chǎn)原理原料:_(由淀粉轉(zhuǎn)化來的)。原理:葡萄糖 果糖。(2)使用固定化酶技術(shù)生產(chǎn)高果糖漿的過程
34、將葡萄糖異構(gòu)酶固定在顆粒狀的載體上放入底部有許多小孔的反應(yīng)柱中(酶顆粒_通過篩板上的小孔,反應(yīng)液能_)葡萄糖溶液從反應(yīng)柱的上端注入流經(jīng)反應(yīng)柱與_接觸,轉(zhuǎn)化成_果糖從反應(yīng)柱下端流出。(3)使用固定化酶生產(chǎn)高果糖漿的優(yōu)點與一般酶制劑相比,固定化酶既能與_接觸,又能與_分離,同時還可以被_利用。2固定化細胞技術(shù)(1)概念:利用_或_方法將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)。(2)常用方法:_、_結(jié)合法和物理吸附法。_:是指將酶或細胞包裹在多孔的載體中,如將酶包裹在聚丙烯酰胺凝膠等高分子凝膠中,或包裹在醋酸纖維素等半透性高分子膜中(適用于較大的細胞)。_結(jié)合法:是指將酶分子相互結(jié)合,或?qū)⑵浣Y(jié)合到纖維素、瓊
35、脂糖、離子交換樹脂等載體上的固定方式(適用于酶的固定)。_吸附法:是指將酶吸附到固體吸附劑表面的方法。固體吸附劑多為活性炭、多孔玻璃等(適用于酶的固定)。3直接使用酶、固定化酶、固定化細胞的比較直接使用酶固定化酶固定化細胞酶的種數(shù)一種或幾種一種一系列酶常用載體高嶺土、皂土、硅膠、凝膠明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素、聚丙烯酰胺制作方法化學結(jié)合法固定化、物理吸附法固定化包埋法固定化是否需要營養(yǎng)物質(zhì)否否是反應(yīng)底物各種物質(zhì)(大分子、小分子)各種物質(zhì)(大分子、小分子)小分子物質(zhì)催化反應(yīng)單一或多種單一一系列缺點對環(huán)境條件非常敏感,易失活難回收,成本高,影響產(chǎn)品質(zhì)量不利于催化一系列的酶促反應(yīng)反應(yīng)物不易與
36、固定后的細胞接觸,尤其是大分子物質(zhì),反應(yīng)效率下降優(yōu)點催化效率高、低耗能、低污染既能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離可以反復(fù)利用成本低、操作容易,能產(chǎn)生一系列酶提醒(1)固定化細胞使用的都是活細胞,因而為了保證其生長、增殖的需要,應(yīng)該為其提供一定的營養(yǎng)物質(zhì)。(2)固定化細胞由于保證了細胞的完整性,因而酶的環(huán)境改變小,所以對酶的活性影響最小。二、制備固定化酵母細胞技術(shù)1制備固定化酵母細胞(1)酵母細胞的_活化就是讓由于缺水而處于休眠狀態(tài)下的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)。酵母菌活化需要1 h左右,酵母細胞活化后體積變大。(2)配制物質(zhì)的量濃度為0.05 mol/L的_溶液。(3)配制_溶液:將0.7 g
37、海藻酸鈉放入50 mL小燒杯中,加入10 mL水,用酒精燈小火加熱(或者間斷加熱),邊加熱邊攪拌,反復(fù)幾次,直至完全溶化,用蒸餾水定容至10 mL。如果海藻酸鈉濃度過高,將很難形成凝膠珠;如果濃度過低,則形成的凝膠珠所包埋的酵母細胞的數(shù)目少,影響實驗效果。(4)海藻酸鈉溶液與_混合:將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫,加入已經(jīng)活化的酵母細胞,進行充分攪拌,使其混合均勻,再轉(zhuǎn)移至注射器中。冷卻的目的是防止高溫殺死酵母菌。(5)_酵母細胞:以恒定的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中,觀察液滴在CaCl2溶液中形成凝膠珠的情形。剛形成的凝膠珠應(yīng)在CaCl2溶液中浸泡一段時間(約3
38、0 min),以便形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。2用固定化酵母細胞發(fā)酵(1)將固定好的_(凝膠珠)用蒸餾水沖洗23次。(2)將150 mL質(zhì)量分數(shù)為10%的_轉(zhuǎn)移到200 mL 的錐形瓶中,再加入固定好的酵母細胞,置于25下發(fā)酵24 h,可以看到產(chǎn)生了大量氣泡,同時會聞到酒香。提醒加熱使海藻酸鈉溶化是操作中最重要的一環(huán),涉及實驗的成敗。海藻酸鈉在水中溶解的速度慢,需要通過加熱,促進其溶解。溶解海藻酸鈉,最好采用_或者_的方法。例如,加熱幾分鐘后,從石棉網(wǎng)上取下燒杯冷卻片刻,并不斷攪拌,再將燒杯放回石棉網(wǎng)上繼續(xù)加熱,如此重復(fù)幾次,直至海藻酸鈉完全_。如果加熱太快,海藻酸鈉會發(fā)生焦糊。專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)
39、(三)血紅蛋白的粗提取和分離1.實驗原理蛋白質(zhì)的分離和提取的原理:根據(jù)蛋白質(zhì)各種特性的差異,如分子的、所帶電荷的、和等等,可以用來分離不同蛋白質(zhì)。(1)凝膠色譜法(也稱)概念:根據(jù)被分離蛋白質(zhì)的,利用具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠的分子篩作用,來分離蛋白質(zhì)的有效方法。原理:凝膠實際上是一些由構(gòu)成的多孔球體,當不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時,的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道,路程,移動速度,而的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部的通道,只能在移動,路程,移動速度,相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)因此得以分離。(2)緩沖溶液概念:在一定的范圍內(nèi),能對抗外來少量強酸、強堿或稍加稀釋不引起溶液發(fā)生明顯變化的作用叫做緩沖作用,具有緩沖作用的溶液叫做緩沖溶液。作用:能夠抵制對溶液的的影響,維持基本不變。緩沖溶液的配制:通常由種緩沖劑溶解于水中配制而成。調(diào)節(jié)緩沖劑的就可以制得使用的緩沖液。(3)電泳概念:指在作用下發(fā)生遷移的過程。原理:許多重要的生物大分子,如、等都具有,在下,這些基團會帶上。在電場的作用下,這些帶電分子會向著與其所帶電荷的電極移動。作用:電泳利用了待分離樣品中各種分子以及分子本身的、的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的,從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離。方法分類:電泳;電泳蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于以及等因素。測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量通常用2.實驗操作蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步:、和。(1)樣品(哺乳
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