動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器

1、關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第一頁，共25頁 體外培養(yǎng)的動物細(xì)胞根據(jù)它們在培養(yǎng)器皿是否能貼附于支持物上體外培養(yǎng)的動物細(xì)胞根據(jù)它們在培養(yǎng)器皿是否能貼附于支持物上生長特征，可分為貼附型生長和懸浮型生長兩大類。生長特征，可分為貼附型生長和懸浮型生長兩大類。貼附型細(xì)胞貼附型細(xì)胞在培養(yǎng)時能貼附在支技物表面生長。大多數(shù)動物細(xì)胞在培養(yǎng)時能貼附在支技物表面生長。大多數(shù)動物細(xì)胞屬于貼壁型細(xì)胞，如屬于貼壁型細(xì)胞，如Hela、Vero、BHK、CHO細(xì)胞系。細(xì)胞系。懸浮型細(xì)胞懸浮型細(xì)胞在培養(yǎng)中懸浮生長。來源于血液、淋巴組織的細(xì)胞，在培養(yǎng)中懸浮生長。來源于血液、淋巴組織的細(xì)胞，許多腫瘤細(xì)胞和某些轉(zhuǎn)化細(xì)胞。許多腫

2、瘤細(xì)胞和某些轉(zhuǎn)化細(xì)胞。動物細(xì)胞培養(yǎng)方法動物細(xì)胞培養(yǎng)方法現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二頁，共25頁動物細(xì)胞培養(yǎng)方法動物細(xì)胞培養(yǎng)方法 貼壁培養(yǎng)(單層細(xì)胞培養(yǎng)) 分散的細(xì)胞懸浮在培養(yǎng)瓶中很快分散的細(xì)胞懸浮在培養(yǎng)瓶中很快(幾十分鐘至幾小時幾十分鐘至幾小時)就貼就貼附在瓶壁上，附在瓶壁上， 稱為細(xì)胞貼壁，稱為細(xì)胞貼壁， 貼壁后的細(xì)胞形態(tài)形成多態(tài)性，貼壁后的細(xì)胞形態(tài)形成多態(tài)性， 呈單層生長，呈單層生長， 所以此法又叫單層細(xì)胞培養(yǎng)。所以此法又叫單層細(xì)胞培養(yǎng)。懸浮培養(yǎng) 細(xì)胞在培養(yǎng)器中自由懸浮生長的過程，不貼壁，主要用于細(xì)胞在培養(yǎng)器中自由懸浮生長的過程，不貼壁，主要用于懸浮型細(xì)胞培養(yǎng)，如懸浮型細(xì)胞培養(yǎng)，如淋巴淋巴細(xì)和腫瘤細(xì)胞

3、的培養(yǎng)。細(xì)和腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第三頁，共25頁 固定化培養(yǎng) 一種包埋培養(yǎng)。對兩類細(xì)胞都適用，細(xì)胞生長密度高，抗一種包埋培養(yǎng)。對兩類細(xì)胞都適用，細(xì)胞生長密度高，抗剪切力和抗污染能力強(qiáng)。懸浮型細(xì)胞常用海藻酸鈣包埋，貼壁剪切力和抗污染能力強(qiáng)。懸浮型細(xì)胞常用海藻酸鈣包埋，貼壁型細(xì)胞常用膠原包埋。型細(xì)胞常用膠原包埋。動物細(xì)胞培養(yǎng)方法動物細(xì)胞培養(yǎng)方法現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第四頁，共25頁 動物細(xì)胞培養(yǎng)可生產(chǎn)的生物制品1.病毒疫苗：病毒疫苗：口蹄疫(FMD)、狂犬疫苗等2.非抗體免疫調(diào)節(jié)劑：非抗體免疫調(diào)節(jié)劑：干擾素(IFN)、白介素(IL)等3.多肽生長因子：多肽生長因子：神經(jīng)生長因子(NGF)、成纖維細(xì)胞

4、生長因子(FGF)4.酶：酶：組織血纖維溶酶原激活劑(t-PA)5.激素：激素：紅細(xì)胞生成素(EPO)、促黃體生成素(LH)6.病毒殺蟲劑病毒殺蟲劑7.腫瘤特異性抗原：癌胚抗原腫瘤特異性抗原：癌胚抗原(CEA)8.單克隆抗體單克隆抗體9.皮膚重植皮膚重植10.細(xì)胞細(xì)胞動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第五頁，共25頁動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用 動物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品工藝實例 1.組織纖溶酶激活劑生產(chǎn)工藝流程組織纖溶酶激活劑生產(chǎn)工藝流程細(xì)胞單層細(xì)胞懸液細(xì)胞培養(yǎng)物培養(yǎng) 培養(yǎng)液提取液 層析液濃縮液層析液tPA成品分散分離提取層析純化濃縮層析精制凍干2.抗抗H

5、BsAS的單克隆抗體生產(chǎn)工藝流程的單克隆抗體生產(chǎn)工藝流程培養(yǎng)液雜種細(xì)胞混合物大鼠骨髓瘤免疫大鼠脾淋巴細(xì)胞融合融合混合物篩選克隆化雜交瘤克隆系種質(zhì)培養(yǎng)細(xì)胞種質(zhì)擴(kuò)大培養(yǎng)分離粗制McAb精制層析液超慮濃縮液凍干McAb精品現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第六頁，共25頁 動物細(xì)胞培養(yǎng)的特點1. 細(xì)胞生長緩慢，易受微生物污染，培養(yǎng)時需要抗生素；細(xì)胞生長緩慢，易受微生物污染，培養(yǎng)時需要抗生素；2. 動物細(xì)胞較微生物大得多，無細(xì)胞壁，機(jī)械強(qiáng)度低，適應(yīng)動物細(xì)胞較微生物大得多，無細(xì)胞壁，機(jī)械強(qiáng)度低，適應(yīng)環(huán)境能力差；環(huán)境能力差；3. 培養(yǎng)過程需氧量少，且不耐受強(qiáng)力通風(fēng)與攪拌；培養(yǎng)過程需氧量少，且不耐受強(qiáng)力通風(fēng)與攪拌；4. 在機(jī)體中

6、，細(xì)胞相互粘連以集群形式存在；在機(jī)體中，細(xì)胞相互粘連以集群形式存在；5. 培養(yǎng)過程產(chǎn)物分布于細(xì)胞內(nèi)外，成本高，產(chǎn)品價格昂貴；培養(yǎng)過程產(chǎn)物分布于細(xì)胞內(nèi)外，成本高，產(chǎn)品價格昂貴；6. 大規(guī)模培養(yǎng)時，不可套用微生物反應(yīng)的經(jīng)驗；大規(guī)模培養(yǎng)時，不可套用微生物反應(yīng)的經(jīng)驗；7. 原代培養(yǎng)細(xì)胞一般繁殖原代培養(yǎng)細(xì)胞一般繁殖50代即退化死亡。代即退化死亡。動物細(xì)胞培養(yǎng)的特點動物細(xì)胞培養(yǎng)的特點現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第七頁，共25頁 無論是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞，深層培養(yǎng)的操作方式可分無論是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞，深層培養(yǎng)的操作方式可分細(xì)胞培養(yǎng)的操作方式細(xì)胞培養(yǎng)的操作方式分批式、流加式、半連續(xù)式、連續(xù)式和灌注式。分批式、流加式、半

7、連續(xù)式、連續(xù)式和灌注式。 分批式操作分批式操作 操作簡單、是最常用的操作方式。分批式培養(yǎng)過程中，細(xì)胞操作簡單、是最常用的操作方式。分批式培養(yǎng)過程中，細(xì)胞的生長可分為延遲期、對數(shù)生長期、減速期、平穩(wěn)期和衰退期的生長可分為延遲期、對數(shù)生長期、減速期、平穩(wěn)期和衰退期分批式培養(yǎng)細(xì)胞生長曲線分批式培養(yǎng)細(xì)胞生長曲線現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第八頁，共25頁 流加式操作流加式操作 半連續(xù)式操作半連續(xù)式操作細(xì)胞培養(yǎng)的操作方式細(xì)胞培養(yǎng)的操作方式 能夠調(diào)節(jié)培養(yǎng)環(huán)境中營養(yǎng)物質(zhì)的能夠調(diào)節(jié)培養(yǎng)環(huán)境中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度。濃度。 連續(xù)操作連續(xù)操作 能提高細(xì)胞密度，應(yīng)用于培能提高細(xì)胞密度，應(yīng)用于培養(yǎng)懸浮型細(xì)胞。養(yǎng)懸浮型細(xì)胞。 灌注培養(yǎng)灌注培養(yǎng)

8、 大大提高細(xì)胞密度，有助于大大提高細(xì)胞密度，有助于產(chǎn)物的表達(dá)和純化。產(chǎn)物的表達(dá)和純化?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第九頁，共25頁動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十頁，共25頁動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十一頁，共25頁通氣攪拌式細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器通氣攪拌式細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十二頁，共25頁通氣攪拌式細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器通氣攪拌式細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十三頁，共25頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十四頁，共25頁動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器 氣升式細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器氣升式細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器氣升式培養(yǎng)系統(tǒng)的優(yōu)點：氣升式培養(yǎng)系統(tǒng)的優(yōu)點： 沒有移動部件；沒有移動部件； 完全密封；完全密

9、封； 便于無菌操作；便于無菌操作； 設(shè)計簡單；設(shè)計簡單； 便于放大生產(chǎn)；便于放大生產(chǎn)； 氧的轉(zhuǎn)換率高。氧的轉(zhuǎn)換率高?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十五頁，共25頁動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器 細(xì)胞培養(yǎng)流程細(xì)胞培養(yǎng)流程現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十六頁，共25頁動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器 中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十七頁，共25頁動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器 中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器優(yōu)點：優(yōu)點： 培養(yǎng)體積小，細(xì)胞高密度生長；培養(yǎng)體積小，細(xì)胞高密度生長； 有濃縮產(chǎn)品的功能；有濃縮產(chǎn)品的功能； 產(chǎn)物純度高；產(chǎn)物純度高； 自動化程度高，細(xì)胞生長周期長。自

10、動化程度高，細(xì)胞生長周期長。缺點：缺點： 中空纖維價格昂貴，生產(chǎn)成本高。中空纖維價格昂貴，生產(chǎn)成本高?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十八頁，共25頁動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器 微囊細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器微囊細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器特點：特點： 細(xì)胞密度大； 產(chǎn)物濃度高； 分離純化操作經(jīng)濟(jì)簡單； 抗體活性、純度好現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十九頁，共25頁動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器 微載體微載體細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十頁，共25頁動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器 微載體細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器微載體細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器懸浮培養(yǎng)瓶懸浮培養(yǎng)裝置現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十一頁，共25頁動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器 微載體細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器微載體細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十二頁，共25頁動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器動物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器 微載體細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器微載體細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十三頁，共25頁微載體系統(tǒng)培養(yǎng)動物細(xì)胞的優(yōu)點：微載體系統(tǒng)培養(yǎng)動物細(xì)胞的優(yōu)點： 比表面積大，單位體積培養(yǎng)培養(yǎng)基細(xì)胞產(chǎn)率高比表面積大，單位體積培養(yǎng)培養(yǎng)基細(xì)胞產(chǎn)率高; 微載體懸浮于培養(yǎng)基中，細(xì)胞生長環(huán)境均一，簡化了這些微載體懸浮于培養(yǎng)基中，細(xì)胞生長環(huán)境均一，簡化了這些環(huán)境因素的檢測和控制環(huán)境因素的檢測和控制; 培養(yǎng)基的