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1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上(共16套)新人教版高中生物選修1(全套)導(dǎo)學(xué)案匯總專題1課題1 果酒和果醋和制作【補(bǔ)充知識(shí)】發(fā)酵1、概念:利用微生物或其他生物的細(xì)胞在有氧或無(wú)氧條件下繁殖或積累其代謝產(chǎn)物的過(guò)程。2、類型:(1)根據(jù)是否需要氧氣分為: 和 。(2)根據(jù)產(chǎn)生的產(chǎn)物可分為: 、 、 等。一、基礎(chǔ)知識(shí)(一)果酒制作的原理1菌種是 ,屬于 生物,新陳代謝類型 ,有氧時(shí),進(jìn)行 ,大量繁殖,反應(yīng)式為 ;無(wú)氧時(shí),能進(jìn)行 ,反應(yīng)式為 。2酵母菌繁殖的最適溫度 左右,且為有氧條件;酒精發(fā)酵一般控制在 ,缺氧酸性條件。(原因: )3自然發(fā)酵過(guò)程中,起作用的主要是附著于 上的野生型酵母菌。也可以在果汁中加
2、入人工培養(yǎng)的酵母菌。4.葡萄酒呈深紅色的原因: (二)果醋制作的原理1菌種是 ,屬于 生物,新陳代謝類型為 。只有在氧氣充足時(shí),才能進(jìn)行旺盛的生命活動(dòng)。變酸的酒表面觀察到的菌膜就是 在液面大量繁殖形成的。2當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí),醋酸菌將葡萄汁中的 分解成 ,當(dāng)缺少糖源時(shí),醋酸菌將 變?yōu)?,再將乙醛變?yōu)?,反應(yīng)簡(jiǎn)式為 。3醋酸菌的最適合生長(zhǎng)溫度為 。4菌種來(lái)源:到 或 購(gòu)買(mǎi),或從 中分離醋酸菌。二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1、流程圖 葡萄 發(fā)酵 發(fā)酵 2、制作實(shí)例實(shí)驗(yàn)材料葡萄、榨汁機(jī)、紗布、醋酸菌(或醋曲)、發(fā)酵瓶(如右圖)、氣泵、體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精等。實(shí)驗(yàn)步驟1對(duì)發(fā)酵瓶、紗布、榨汁機(jī)等實(shí)驗(yàn)用具進(jìn)行清洗并消
3、毒。先用溫水反復(fù)沖洗幾次,再用體積分?jǐn)?shù)為 的酒精擦拭消毒,晾干待用。2取葡萄500g,去除枝梗和腐爛的子粒。3用清水沖洗葡萄12遍除去污物。(注意 。)4用榨汁機(jī)榨取葡萄汁后,將其裝入發(fā)酵瓶中。(如果沒(méi)有合適的發(fā)酵裝置,可用500mL的_替代。但注入的果汁量不要超過(guò)塑料瓶總體積的_。)5將發(fā)酵瓶置于適宜的溫度(_)下發(fā)酵。6由于發(fā)酵旺盛期CO2的產(chǎn)量非常多,因此需要及時(shí)_,以防止發(fā)酵瓶爆裂。(如果是簡(jiǎn)易發(fā)酵裝置,每天_瓶蓋24次。進(jìn)行排氣。)710天后,取樣檢驗(yàn)。例如,可以檢驗(yàn)酒味、酒精的含量、進(jìn)行酵母菌的鏡檢等工作。8當(dāng)果酒制成以后,可在發(fā)酵液中加入醋酸菌(或醋曲),然后移至_條件下發(fā)酵,適
4、時(shí)用氣泵向發(fā)酵液中_。(如果沒(méi)有充氣裝置,可以將瓶蓋打開(kāi),在瓶口上蓋上_。)三、操作提示(一)材料的選擇與處理選擇_的葡萄,榨汁前先將葡萄進(jìn)行_,然后再除去_。(二)防止發(fā)酵液被污染1、榨汁機(jī)要清洗_,并_。2、發(fā)酵瓶要清洗_,用體積分?jǐn)?shù)_的酒精消毒。3、裝入葡萄汁后,_充氣口。(三)控制好發(fā)酵條件1、葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí),要留出大約_的空間。2、制作葡萄酒過(guò)程中,將溫度嚴(yán)格控制在_,時(shí)間控制在_d左右,可通過(guò)出料口對(duì)發(fā)酵的情況進(jìn)行及時(shí)的監(jiān)測(cè)。3、制作葡萄醋的過(guò)程中,將溫度嚴(yán)格控制在_,時(shí)間控制在_d左右,并注意適時(shí)通過(guò)充氣口_。四、課題延伸果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生,可以用_來(lái)檢驗(yàn)。在_條件下,
5、重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)_。檢測(cè)時(shí),先在試管中加入發(fā)酵液2mL,再滴入物質(zhì)的量的濃度為3mol/L的_3滴,振蕩混勻,最后滴加常溫下_3滴?!窘滩拇鸢浮浚ㄒ唬┡詸谒伎碱}1.你認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗?為什么?答:應(yīng)該先_,然后再_,以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。2.你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染?提示:需要從發(fā)酵制作的過(guò)程進(jìn)行_的考慮。例如,榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要_干凈;每次排氣時(shí)只需_瓶蓋、不要完全揭開(kāi)瓶蓋等。3.制葡萄酒時(shí),為什么要將溫度控制在1825 ?制葡萄醋時(shí),為什么要將溫度控制在3035 ?答:溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件。_最適合酵母菌繁殖。因此
6、需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌,最適生長(zhǎng)溫度為_(kāi),因此要將溫度控制在3035 。4.制葡萄醋時(shí),為什么要適時(shí)通過(guò)充氣口充氣?答:醋酸菌是_菌,在將酒精變?yōu)榇姿釙r(shí)需要_的參與,因此要適時(shí)向發(fā)酵液中充氣。(二)資料發(fā)酵裝置的設(shè)計(jì)討論題請(qǐng)分析此裝置中的充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用。為什么排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接?答:充氣口是在醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵進(jìn)行 用的;排氣口是在酒精發(fā)酵時(shí)用來(lái)排出 的;出料口是用來(lái)取樣的。排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的是 ,其作用類似巴斯德的鵝頸瓶。使用該裝置制酒時(shí),應(yīng)該 充氣口;制醋時(shí),應(yīng)將充氣口連接氣泵,輸入 。
7、專題1課題2 腐乳的制作一、基礎(chǔ)知識(shí)腐乳制作的原理1腐乳的發(fā)酵有多種微生物的 ,其中起主要作用的是 ,它是一種 生物,新陳代謝類型是 。2毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的 分解成小分子的 和 ;脂肪酶可以將 水解成 和 。3現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的 條件下,將優(yōu)良 菌種直接接種在豆腐上,這樣可以避免 的污染,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1、實(shí)驗(yàn)流程讓豆腐 加 腌制加 裝瓶 腌制。2、制作實(shí)例實(shí)驗(yàn)材料:含水量70%的豆腐,粽葉,盤(pán)子,鹽,黃酒,米酒,糖,香辛料等,廣口玻璃瓶,高壓鍋等。實(shí)驗(yàn)步驟1將豆腐切成3cm×3cm×1cm若干塊。2將豆腐塊平放在鋪有干粽葉的盤(pán)內(nèi)(粽
8、葉可以提供菌種,并能起到保溫的作用),每塊豆腐等距離排放,周?chē)粢欢ǖ?。豆腐上面再鋪上干凈的粽葉。氣候干燥時(shí),將平盤(pán)用保鮮膜包裹,但不要封嚴(yán),以免濕度太高,不利于毛霉的生長(zhǎng)。3將平盤(pán)放在溫度為 的地方,毛霉逐漸生長(zhǎng),大約5d后,豆腐表面叢生直立菌絲。4當(dāng)毛霉生長(zhǎng)旺盛,并呈 時(shí),去除保鮮膜及鋪在上面的粽葉,使豆腐塊的熱量和水分能夠迅速散失,同時(shí)散去霉味,這一過(guò)程一般持續(xù)36h以上。5豆腐涼透后,將豆腐間的連在一起的菌絲拉斷,并整齊排在容器內(nèi),準(zhǔn)備腌制。6長(zhǎng)滿毛霉的豆腐塊(以下稱毛坯)分層擺放,分層加鹽,并隨層高而 ,在接近瓶口表面鹽要鋪厚一些,以防止雜菌污染,約腌制8d。(豆腐與鹽質(zhì)量分?jǐn)?shù)比為
9、51)7將黃酒、米酒和糖、香辛料等混合制成鹵湯。鹵湯酒精含量控制在 左右為宜。8將廣口玻璃瓶刷洗干凈,用高壓鍋在1000C蒸汽滅菌30min,將腐乳成坯擺入瓶中,加入鹵湯和輔料后,將瓶口用 加熱滅菌,用膠條 。在常溫下,一般六個(gè)月即可以成熟。三、操作提示(一)控制好材料的用量1、用鹽腌制時(shí),注意控制鹽的用量。鹽的濃度過(guò)低, ,可能導(dǎo)致豆腐腐??;鹽的濃度過(guò)高,會(huì) 。2、乳湯中酒的含量應(yīng)控制在 左右。酒精含量過(guò)低, ,可能導(dǎo)致豆腐腐敗;酒精含量過(guò)高,腐乳成熟的時(shí)間將會(huì) 。(二)防止雜菌污染1、用來(lái)腌制腐乳的玻璃瓶,刷干凈后要用 消毒。2、裝瓶時(shí)要 ;加入鹵湯后要用膠條將瓶口 ;封瓶時(shí),最好將瓶口通
10、過(guò)酒精燈的火焰,防止瓶口被 ?!窘滩拇鸢浮浚ㄒ唬┡詸谒伎碱}1.你能利用所學(xué)的生物學(xué)知識(shí),解釋豆腐長(zhǎng)白毛是怎么一回事?答:豆腐上生長(zhǎng)的白毛是毛霉的 。嚴(yán)格地說(shuō)是直立菌絲,在豆腐中還有匍匐菌絲。2.王致和為什么要撒許多鹽,將長(zhǎng)毛的豆腐腌起來(lái)?答:鹽能 ,避免豆腐腐敗。3.我們平常吃的豆腐,哪種適合用來(lái)做腐乳?答:含水量為 的豆腐適于作腐乳。用含水量過(guò)高的豆腐制腐乳,不易成形。4.吃腐乳時(shí),你會(huì)發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢?它對(duì)人體有害嗎?它的作用是什么?答:“皮”是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐表面上生長(zhǎng)的 (匍匐菌絲),它能形成腐乳的“體”,使腐乳成形?!捌ぁ睂?duì)人體無(wú)害。(二)練習(xí)
11、1.答: ,因此要隨著豆腐層的加高增加鹽的用量,在接近瓶口的表面,鹽要鋪厚一些,以有效防止雜菌污染。專題1課題3 制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量一乳酸菌1.代謝類型為異養(yǎng)厭氧型,在 情況下,將葡萄糖分解成乳酸2.常見(jiàn)種類: 和 3.分布:分布廣泛, 、土壤、植物 、人或動(dòng)物的 內(nèi)等均有分布。4.應(yīng)用:常用于生產(chǎn) 二亞硝酸鹽1.物理性質(zhì) 粉末、易溶于 。2.應(yīng)用在食品生產(chǎn)中常用作食品 3.分布自然界中分布廣泛。據(jù)統(tǒng)計(jì),亞硝酸鹽在蔬菜中的平均含量約為 ,咸菜中平均含量在 以上,而豆粉中的平均含量可達(dá) 4.對(duì)人體的影響膳食中的亞硝酸鹽一般不危害人體健康,當(dāng)人體攝入總量達(dá) 時(shí),會(huì)引起中毒;當(dāng)攝入總量達(dá) 時(shí)
12、,會(huì)引起死亡5.我國(guó)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)亞硝酸鹽殘留量在肉制品中不得超過(guò) ,醬腌菜中不超過(guò) ,嬰兒奶粉中不得超過(guò) 。6.代謝絕大多數(shù)亞硝酸鹽隨 排出,但在特定條件下,即適宜的 和一定的 作用,會(huì)轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì)- 三泡菜腌制過(guò)程1.泡菜壇的選擇(1)應(yīng)選用火候好、無(wú)砂眼、 、壇沿深、 好的泡菜壇(2)檢查時(shí)可將壇口 壓入水中,看壇內(nèi)有無(wú) 現(xiàn)象2.腌制(1)過(guò)程:將清水和鹽以 的質(zhì)量比例配制鹽水。將鹽水 后備用。將蔬菜裝至 時(shí)加入香辛料,裝至 時(shí),加入鹽水,要使鹽水 蓋好壇蓋。將壇蓋邊沿的水槽中注滿水,以保證壇內(nèi)的 環(huán)境(2)條件:控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽的用量。溫度 、食鹽用量不足 ,腌制時(shí)間 ,容易造成
13、細(xì)胞大量繁殖, 含量增加四亞硝酸鹽的測(cè)定1.原理(1)在 條件下,亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生 反應(yīng)后,與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成 色染料。(2)將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的 進(jìn)行比較,可以大致 出泡菜中亞硝酸鹽的含量2.測(cè)定步驟配制溶液 制備樣品處理液 思考:亞硝酸鹽可轉(zhuǎn)化成致癌物質(zhì),為什么在食品生產(chǎn)中還可作為添加劑? 專題2課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)一基礎(chǔ)知識(shí)1.培養(yǎng)基(1)培養(yǎng)基的種類包括 培養(yǎng)基和 培養(yǎng)基等。(2)培養(yǎng)基的化學(xué)成分一般都含有 、 、 、 四類營(yíng)養(yǎng)成分,(3)在提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上,培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì) 、 以及 等的要求。例如:培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要
14、在培養(yǎng)基中添加 ;培養(yǎng)霉菌時(shí)需要將培養(yǎng)基的PH調(diào)至 ;培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需要將培養(yǎng)基的PH調(diào)至 ;培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)需要提供無(wú)氧的條件【思考】為什么各種營(yíng)養(yǎng)基的具體配方不同,但一般都有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源和氮源?2.無(wú)菌技術(shù)(1)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 。避免雜菌污染的方法主要包括以下四個(gè)內(nèi)容: (2)消毒是指 滅菌是指 【思考】消毒與滅菌的相同點(diǎn)與區(qū)別分別是什么?(3)實(shí)驗(yàn)室常用的消毒方法是 ,此外,人們也常使用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒,如用 、 等。常用的滅菌方法有 、 、 ,此外,實(shí)驗(yàn)室里還用 或 進(jìn)行消毒。二實(shí)驗(yàn)操作1.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟: 倒平板【思考】
15、培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50左右,才能用來(lái)倒平板。你用什么方法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度?為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰?平板冷凝后,為什么要將平板倒置?在倒平板的過(guò)程中,如果不小心瘵培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎?為什么?2.純化大腸桿菌(1)微生物接種的方法中最常用的是 和 。平板劃線法是指 。稀釋涂布平板法是指 ?!舅伎肌繛槭裁丛诓僮鞯牡谝徊揭约懊看蝿澗€之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線?在作第二次以及其后的劃線操作是赤什么總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線?(3)平板劃線法和稀釋涂布平板
16、法的優(yōu)缺點(diǎn): (4)平板劃線法和稀釋涂布平板法的適用范圍: 1. 菌種的保存為了保持菌種的純凈,需對(duì)菌種進(jìn)行保藏。對(duì)于頻繁使用的菌種,我們可以采用 法;對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種,可以采用 法。將菌種放在低溫環(huán)境中保藏的目的是 ,但時(shí)間長(zhǎng)了菌種還是要老化的,因此對(duì)臨時(shí)保存的菌種 個(gè)月后需重新接種【疑難點(diǎn)撥】1生物的營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)是指生物攝取、利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的過(guò)程。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是指維持機(jī)體生命活動(dòng),保證發(fā)育、生殖所需的外源物質(zhì)。在人及動(dòng)物,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括水、無(wú)機(jī)鹽、糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素六類;在植物,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括礦質(zhì)元素、水、二氧化碳等三類;在微生物,則有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)五類。2培養(yǎng)基的制
17、作是否合格如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫12天后無(wú)菌落生長(zhǎng),說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的,否則需要重新制備。3無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外,還有什么目的?無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。4平板冷凝后,為什么要將平板倒置?平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。5為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接
18、種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端,從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。專題2課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)1尿素只有被 分解成 之后,才能被植物吸收利用。2以土壤中能分解尿素的細(xì)菌為研究對(duì)象,要達(dá)到的兩個(gè)主要目的是: ; 。3PCR( )是一種在體外將 。此項(xiàng)技術(shù)的自動(dòng)化,要求使用耐高溫的DNA聚合酶。思考:怎樣找耐高溫的酶呢?4實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理是:人為提供有利于 生長(zhǎng)的條件(包括 等
19、),同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。5選擇培養(yǎng)基是指 。6常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目的方法是 。即當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落,來(lái)源于樣品稀釋液中的 。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)在 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。另外, 也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。7比較教材中兩位同學(xué)的操作方法,哪位同學(xué)的結(jié)果接近真實(shí)值?你認(rèn)為這兩位同學(xué)的實(shí)驗(yàn)需要改進(jìn)呢?如需要,如何改進(jìn)?8一般來(lái)說(shuō),統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目 。這是因?yàn)?。因此,統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用 而不是活菌數(shù)來(lái)表示。9設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是 ,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。10對(duì)照實(shí)驗(yàn)是 。1
20、1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括的內(nèi)容有: 、 、 和 ,具體的實(shí)驗(yàn)步驟以及時(shí)間安排等的綜合考慮和安排。12不同種類的微生物,往往需要不同的培養(yǎng) 和培養(yǎng) 。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,一般每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果,這樣可以 。13無(wú)菌操作應(yīng)注意什么問(wèn)題? 14在進(jìn)行多組實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,應(yīng)注意做好標(biāo)記,其目的是 。思考:應(yīng)標(biāo)記哪些內(nèi)容?怎樣操作更有利于實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行?15對(duì)所需的微生物進(jìn)行初步篩選,只是分離純化菌種的第一步,要對(duì)分離的菌種進(jìn)行一步的鑒定,還需要借助 的方法。思考:有哪些方法可以對(duì)菌種進(jìn)行鑒定?【疑難點(diǎn)撥】1選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基的含義是:在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生
21、物的生長(zhǎng),促進(jìn)需要的微生物的生長(zhǎng)。目的是從眾多微生物中分離所需要的微生物。在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)可以做到這一點(diǎn),如加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌。這里的加入是在培養(yǎng)的培養(yǎng)成分的基礎(chǔ)上加入的。培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分的改變也可達(dá)到分離微生物的目的。如培養(yǎng)基中缺乏氮源時(shí),可以分離固氮微生物,因?yàn)榉枪痰⑸锊荒茉诖伺囵B(yǎng)基上生存。當(dāng)培養(yǎng)基的某種營(yíng)養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時(shí),也具有分離效果。如石油是唯一碳源時(shí),可以抑制不能利用石油的微生物的生長(zhǎng),使能夠利用石油的微生物生存,達(dá)到分離能消除石油污染的微生物的目的。改變微生物的培養(yǎng)條件, 也可以達(dá)到分離微生物的目的,如將培
22、養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。2如何從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的菌落數(shù)?統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù),最好能統(tǒng)計(jì)3個(gè)平板,計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值,然后按課本旁欄的公式進(jìn)行計(jì)算。3為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度?測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量,選用的稀釋范圍相同嗎?這是因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量(單位:株/Kg)是不同的,例如在干旱土壤中的上層樣本中:好氧及兼性厭氧型細(xì)菌數(shù)約為2185萬(wàn),放線菌數(shù)約為477萬(wàn),霉菌數(shù)約為23.1萬(wàn)。因此,為獲得不同類型的微生物,就需要按不同的稀釋度進(jìn)行分離,同時(shí)還應(yīng)當(dāng)有針對(duì)性地提供選擇培養(yǎng)的條件。專題2
23、課題3 分解纖維素的微生物的分離一、課題背景分析纖維素是一種由 首尾相連而成的高分子化合物,植物每年產(chǎn)生的纖維素能被土壤中的某些微生物分解利用,是因?yàn)樗鼈兡墚a(chǎn)生 。對(duì)這些微生物的研究與利用,使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn) ,用 處理服裝面料等。二.基礎(chǔ)知識(shí):(一)纖維素和纖維素酶閱讀課本27頁(yè)基礎(chǔ)知識(shí)部分第一、二段,回答下列問(wèn)題:1、纖維素在生物圈的分布狀況?纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。植物的根、莖、葉等器官都含有大量的纖維素。其中 是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物。2、纖維素酶的組成及作用?纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即 、 和 ,前兩種酶使纖維素分解成 ,
24、第三種酶將 分解成葡萄糖。(二)纖維素分解菌的篩選閱讀課本課本28頁(yè)相關(guān)部分,回答下列問(wèn)題:1、纖維素分解菌的篩選方法- ,這種方法能夠通過(guò)顏色反應(yīng)直接對(duì)微生物進(jìn)行篩選2、纖維素分解菌的篩選方法的原理剛果紅是一種染料,它可以與纖維素形成 ,但并不和 、 發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后剛果紅纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解為中心的 。這樣我們可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌三、實(shí)驗(yàn)操作分離分解纖維素的微生物實(shí)驗(yàn)流程:土壤取樣 梯度稀釋 。旁欄思考題本實(shí)驗(yàn)的流程與課題2中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些異同?提示:本實(shí)驗(yàn)流程與課題2的流程的區(qū)別如下。課題2是將土樣制成的菌懸液直
25、接涂布在以尿素為惟一氮源的選擇性培養(yǎng)基上,直接分離得到菌落。本課題通過(guò)選擇培養(yǎng),使纖維素分解菌得到增殖后,再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。其他步驟基本一致。(一) 土壤取樣采集土樣時(shí),應(yīng)選擇富含纖維素的環(huán)境。若找不到合適環(huán)境,可將濾紙埋在土壤中一個(gè)月左右,也會(huì)有能分解纖維素的微生物生長(zhǎng)。旁欄思考題取樣的環(huán)境是怎樣的,作出這種選擇的理由是什么?選擇 的環(huán)境,如樹(shù)林中多年落葉形成的腐殖土,多年積累的枯枝敗葉等等。根據(jù)生物與環(huán)境的互相依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中 的含量相對(duì)提高,因此從這種土壤中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。旁欄思考題將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深?提示:
26、將濾紙埋在土壤中能使 ,實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約 cm左右腐殖土壤中。(二)選擇培養(yǎng)1.選擇培養(yǎng)的目的:增加 ,以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物。2.制備選擇培養(yǎng)基:參照課本29頁(yè)旁欄中的比例配置,回答下列問(wèn)題:旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基?為什么?是液體培養(yǎng)基,原因是配方中無(wú)凝固劑。這個(gè)培養(yǎng)基對(duì)微生物是否具有選擇作用?如果具有,是如何進(jìn)行選擇的?有選擇作用,本配方中的碳源是纖維素,所以能分解纖維素的微生物可以大量繁殖。你能否設(shè)計(jì)一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn),說(shuō)明選擇培養(yǎng)基的作用用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基與之對(duì)照。3、選擇培養(yǎng)將土樣加入裝有30ml選擇培養(yǎng)基的錐
27、形瓶中,將錐形瓶固定在搖床上,在一定溫度下震蕩培養(yǎng)12天,直至培養(yǎng)液變渾濁。也可重復(fù)選擇培養(yǎng)旁欄思考題為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物?提示:在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮”的作用(三)梯度稀釋按照課題1的稀釋操作方法,將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋101107倍。將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上。(四)將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上1.制備培養(yǎng)基:參照課本旁欄中的比例配制。2.倒平板操作。3.涂布平板:將稀釋度為104106的菌懸液各取0.1ml涂布到平板培養(yǎng)基上,
28、30倒置培養(yǎng),菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)明顯的透明圈。4.挑選產(chǎn)生透明圈的菌落(參照課本剛果紅染色法,挑選產(chǎn)生透明圈的菌落,一般即為分解纖維素的菌落。)(五)剛果紅染色法方法一:先 ,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)。方法二:在 時(shí)就加入剛果紅。旁欄思考題這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足?提示:方法一 缺點(diǎn)是操作煩瑣,加入剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜;優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。 方法二 優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便,不存在菌落混雜問(wèn)題。缺點(diǎn)一是由于培養(yǎng)基中還含有淀粉類物質(zhì),可以使能產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng);缺點(diǎn)二有些微生物具有降解色素的能力,它們?cè)陂L(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)降解剛果紅,形成明顯的透明圈
29、,與纖維素分解菌不易區(qū)分。四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)(一)培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落?設(shè)置對(duì)照,若對(duì)照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過(guò)程中無(wú)菌落生長(zhǎng)則說(shuō)明培養(yǎng)基制作合格。如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落,則說(shuō)明可能獲得了分解纖維素的微生物。(二)分離的結(jié)果是否一致如果不同,分析產(chǎn)生不同結(jié)果的原因。五、課題延伸本課題對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選,但是這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行 的實(shí)驗(yàn),纖維素酶的測(cè)定方法一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的 進(jìn)行定量的測(cè)定。專題3課題1 菊花的組織培養(yǎng)一 植物組織培養(yǎng)的相關(guān)概念和基本過(guò)程1. 植物組織培養(yǎng)的相關(guān)概念(1)細(xì)
30、胞分化:植物的個(gè)體發(fā)育過(guò)程中,細(xì)胞在_、_和_上都會(huì)出現(xiàn)穩(wěn)定性的差異,形成這些差異的過(guò)程就叫做細(xì)胞分化。細(xì)胞分化是基因_的結(jié)果。(2)細(xì)胞的全能性:_的植物細(xì)胞仍然具有發(fā)育成為_(kāi)的潛能。細(xì)胞全能性是組織培養(yǎng)的基本原理。(3)愈傷組織:由離體的植物器官、組織或細(xì)胞在一定的培養(yǎng)條件下經(jīng)過(guò)_過(guò)程形成的組織,就叫愈傷組織,愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無(wú)規(guī)則,是一種_的呈無(wú)定形狀態(tài)的_。(4)脫分化:由_的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生_的過(guò)程,稱為脫分化,又叫去分化。(5)再分化:脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng),又可以重新分化成_,這個(gè)過(guò)程叫做再分化。(6)外植體:用于離體培養(yǎng)的植物器官或組織片段。2. 植物組織培
31、養(yǎng)的基本過(guò)程離體的植物組織、器官或細(xì)胞組織培養(yǎng)脫分化愈傷組織組織培養(yǎng)再分化根、芽等器官人為使用植物激素控制 移植試管苗完整的植物體二 影響植物組織培養(yǎng)的因素1.內(nèi)部因素:不同的植物組織,培養(yǎng)的難易程度差別很大。同種植物材料,_ ,_ 等也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。菊花的組織培養(yǎng),一般選擇 _的莖上部新萌生的側(cè)枝。2.外部因素:(1)營(yíng)養(yǎng)條件 常用的是_ 培養(yǎng)基,其主要成分包括: _,如_;_ ,如_ ;_ 等。(2)植物激素 植物激素中_ 和_ 是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性因素。_、_ 以及_ 等,都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。(3)環(huán)境因素 _ 、_ 、 _等條件也能影響植物組織培養(yǎng)。菊花組織培養(yǎng),一般
32、PH控制在 _ ;溫度控制在 _ ;每天用日光燈照射_小時(shí)。【思考】(1)MS培養(yǎng)基中,各種營(yíng)養(yǎng)成分各有什么作用?與微生物培養(yǎng)基的配方相比,有什么不同?(2)生長(zhǎng)素使用的先后順序、用量比例不同分別會(huì)造成哪些影響?三、實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程1.制備MS固體培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)室一般使用4保存的配制好的培養(yǎng)基母液來(lái)制備(1)配制各種母液。配制母液時(shí),大量元素濃縮_ ,微量元素濃縮_ 。常溫保存。激素類、維生素類以及用量比較小的有機(jī)物可以按照1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制母液。用母液配制培養(yǎng)基時(shí),需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù),計(jì)算用量。(2)配制培養(yǎng)基。配制1LMS培養(yǎng)基時(shí),將稱量好的瓊脂加入800mL蒸餾水,加熱熔化,
33、然后加入蔗糖30g,依次加入母液,定容至1000mL。_,然后分裝到錐形瓶中,每瓶分裝_。(3)滅菌。高壓蒸汽滅菌2、外植體消毒選取菊花莖段時(shí),要取 _。無(wú)菌技術(shù)包括培養(yǎng)基消毒滅菌和植物材料(外植體)的消毒滅菌。對(duì)培養(yǎng)材料進(jìn)行表面滅菌時(shí),一方面要考慮_;另一方面還要考慮植物材料的_。不同藥劑、不同植物材料,甚至不同器官要區(qū)別對(duì)待。一般情況下,細(xì)菌污染可能是由接種人員造成的,真菌污染可能是_滅菌不當(dāng)。過(guò)程:流水沖洗軟刷刷洗流水沖洗過(guò)程流水沖洗軟刷刷洗流水沖洗_無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面體積分?jǐn)?shù)為_(kāi)的酒精中搖動(dòng)23次,持續(xù)_無(wú)菌水清洗無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1的_溶液中12min無(wú)菌水
34、中至少清洗3次3、接種接種前,用體積分?jǐn)?shù)70%的酒精將工作臺(tái)擦拭,然后點(diǎn)燃酒精燈。所有的接種操作必須在酒精燈旁進(jìn)行,并且每次使用器械后,都要用火焰灼燒滅菌4、培養(yǎng)接種后的錐形瓶最好放在_中培養(yǎng)。培養(yǎng)期間定期消毒,溫度控制在18-22,并且每天用日光燈光照12h5、移栽6、栽培附:一般來(lái)說(shuō),容易進(jìn)行_的植物,也容易進(jìn)行組織培養(yǎng)?!舅伎肌浚簩?shí)驗(yàn)操作過(guò)程中為什么要進(jìn)行一系列的消毒、滅菌,實(shí)驗(yàn)中是如何做到無(wú)菌操作的?【知識(shí)補(bǔ)充】1. 無(wú)菌技術(shù)是植物組織培養(yǎng)能否獲得成功的關(guān)鍵植物組織培養(yǎng)不同于扦插、分根、葉插等常規(guī)無(wú)性繁殖。由于植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差,所以對(duì)培養(yǎng)條件的要求較高,對(duì)無(wú)菌
35、操作的要求非常嚴(yán)格。無(wú)菌技術(shù)包括培養(yǎng)基消毒滅菌和植物材料(外植體)的消毒滅菌。對(duì)培養(yǎng)材料進(jìn)行表面滅菌時(shí),一方面要考慮藥劑的消毒效果;另一方面還要考慮植物材料的耐受能力。不同藥劑、不同植物材料,甚至不同器官要區(qū)別對(duì)待。2.妥善處理被污染的培養(yǎng)物即使對(duì)于有經(jīng)驗(yàn)的操作人員,操作后出現(xiàn)培養(yǎng)物被污染的情況也常有。一般情況下,細(xì)菌污染可能是由接種人員造成的,如未戴口罩,接種時(shí)說(shuō)話,或手及器械消毒不嚴(yán)等。真菌污染可能是植物材料滅菌不當(dāng)。3.你能說(shuō)出各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎?同專題2中微生物培養(yǎng)基的配方相比,MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同?微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無(wú)機(jī)鹽;蔗糖提供碳源,同時(shí)能夠
36、維持細(xì)胞的滲透壓;甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營(yíng)養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同,MS培養(yǎng)基則需提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng),無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素兩大類。3. 植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用范圍是很廣的,除了快速繁殖、培育無(wú)病毒植物外,還可以通過(guò)大規(guī)模的植物細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)生產(chǎn)藥物、食品添加劑、香料、色素和殺蟲(chóng)劑等。例如,從大量培養(yǎng)的紫草愈傷組織中提取的紫草素,是制造治療燙傷和割傷的藥物以及染料和化妝品的原料。用植物組織培養(yǎng)的方法,誘導(dǎo)離體的植物組織形成具有生根發(fā)芽能力的胚狀結(jié)構(gòu),包裹上人造
37、種皮,制成人工種子,可以解決有些作物品種繁殖能力差,結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問(wèn)題。此外,轉(zhuǎn)基因植物的培育,也要用到植物組織培養(yǎng)的方法。專題3課題2 月季的花藥培養(yǎng)一被子植物花粉發(fā)育過(guò)程1被子植物的花粉是在 中由 經(jīng)過(guò) 分裂形成的。所以,花粉是 的生殖細(xì)胞。2結(jié)合教材內(nèi)容填下列示意圖:小孢子母細(xì)胞(2n)( )時(shí)期(n)單核( )期(n)雙核期( )細(xì)胞核(n)( )細(xì)胞核(n)( )細(xì)胞(n)( )細(xì)胞(n)( )個(gè)精子(n)( )分裂( )分裂單核( )期(n)( )分裂思考1由此可見(jiàn),被子植物的花粉的發(fā)育要經(jīng)歷 時(shí)期, 期和 期等階段。思考2在正常情況下,一個(gè)小孢子母細(xì)胞可以產(chǎn)生 個(gè)精子;在一
38、枚花藥中可以產(chǎn)生 個(gè)花粉。二產(chǎn)生花粉植株的兩條途徑1產(chǎn)生花粉植株(即單倍體植株)的兩種途徑:一是花粉通過(guò) 階段發(fā)育為植株,二是通過(guò) 階段發(fā)育為植株。這兩種途徑的區(qū)別主要取決于培養(yǎng)基中 的種類及其 的配比。2填寫(xiě)培育花粉植株的途徑圖解:( )花藥中的花粉( )( )( 胚狀體 )( 愈傷組織 )( )叢芽生根移栽3胚狀體的結(jié)構(gòu)及其發(fā)育過(guò)程與種子相似,所以把胚狀體到從芽的過(guò)程稱為 ,而把從愈傷組織到從芽的過(guò)程稱為 。4.植物體細(xì)胞發(fā)育而來(lái)的胚狀體又叫 ,花粉發(fā)育而來(lái)的胚狀體叫 ,可發(fā)育為 植物,要使其成為純合的正常植株,可用 處理發(fā)育中的幼苗。三影響花藥培養(yǎng)的因素1影響花粉植株成功與否和成功率的主
39、要因素: 和 等。2材料的選擇:從花藥來(lái)看,應(yīng)當(dāng)選擇(初花期、盛花期、晚花期)的花藥;從花粉來(lái)看,應(yīng)當(dāng)選擇(四分體期、單核期、雙核期、萌發(fā)期)的花粉,因?yàn)閱魏似谝郧暗幕ㄋ?,選擇單核期以后的花藥接種, 。;從花蕾來(lái)看,應(yīng)當(dāng)選擇(完全未開(kāi)放、略微開(kāi)放、完全盛開(kāi))的花蕾。思考3除此之外,你認(rèn)為影響花粉誘導(dǎo)成功率的因素還有哪些?植物的種類、親本生長(zhǎng)條件、材料的低溫處理、接種密度、培養(yǎng)基組成、培養(yǎng)的環(huán)境條件等。思考4為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料消毒帶來(lái)困難? 花瓣松動(dòng)后,微生物就可能已經(jīng)侵入到花藥,給材料消毒帶來(lái)困難。四實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1.材料的選擇選擇花藥時(shí)一般通過(guò) 確定花粉發(fā)育時(shí)期,此時(shí)需要對(duì)花粉細(xì)胞核進(jìn)行染色,最常用的染色劑是 和 ,它們分別可以將細(xì)胞核染成 色和 色。2.材料的消毒花蕾(無(wú)菌水)清洗(無(wú)菌吸水紙)吸干水分(無(wú)菌水)沖洗3.接種和培養(yǎng)(1)剝?nèi)』ㄋ帲合竞蟮幕ɡ伲?條件下除去花萼、花瓣。在剝離花藥時(shí),要盡量不損傷花藥,否則 還要徹底除去
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