細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)

1、實(shí)驗(yàn)一、幾種光學(xué)顯微鏡實(shí)驗(yàn)一、幾種光學(xué)顯微鏡的使用的使用一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模阂?、?shí)驗(yàn)?zāi)康模毫私鈳追N光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)、使用了解幾種光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)、使用方法、工作原理等。方法、工作原理等。掌握使用普通光學(xué)顯微鏡提高分辨掌握使用普通光學(xué)顯微鏡提高分辨率的方法。率的方法。二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理1 1、基本原理、基本原理一般光學(xué)顯微鏡主要是由目鏡、物鏡、一般光學(xué)顯微鏡主要是由目鏡、物鏡、聚光器以及反光鏡等構(gòu)成。聚光器以及反光鏡等構(gòu)成。各種光學(xué)顯微鏡的放大原理基本相同，各種光學(xué)顯微鏡的放大原理基本相同，各種特殊用途的顯微鏡只是在主要器各種特殊用途的顯微鏡只是在主要器件上進(jìn)行了稍微改動(dòng)而已。件上進(jìn)行了稍微改動(dòng)

2、而已。2 2、幾種光學(xué)顯微鏡、幾種光學(xué)顯微鏡1 1、普通復(fù)式光學(xué)顯微鏡：其重要的性能參數(shù)是分辨率。、普通復(fù)式光學(xué)顯微鏡：其重要的性能參數(shù)是分辨率。2 2、暗視野顯微鏡：具有特殊的聚光器。光源中心束不直、暗視野顯微鏡：具有特殊的聚光器。光源中心束不直入物鏡，所以視野灰暗。而被檢測(cè)細(xì)胞由于光的衍射及入物鏡，所以視野灰暗。而被檢測(cè)細(xì)胞由于光的衍射及反射而較亮反射而較亮3 3、相差顯微鏡：利用光的干涉原理。在物鏡與聚光器上、相差顯微鏡：利用光的干涉原理。在物鏡與聚光器上做了改動(dòng)。把肉眼看不見的相位差改為可見的振幅差，做了改動(dòng)。把肉眼看不見的相位差改為可見的振幅差，使人能夠看清楚。使人能夠看清楚。4 4

3、、熒光顯微鏡：是在光鏡水平上對(duì)細(xì)胞內(nèi)特異的蛋白質(zhì)、熒光顯微鏡：是在光鏡水平上對(duì)細(xì)胞內(nèi)特異的蛋白質(zhì)、核酸、糖類、脂質(zhì)以及某些離子等組分進(jìn)行定性定位研核酸、糖類、脂質(zhì)以及某些離子等組分進(jìn)行定性定位研究的有利工具。究的有利工具。普通復(fù)氏顯微鏡普通復(fù)氏顯微鏡暗視野顯微鏡暗視野顯微鏡相差顯微鏡相差顯微鏡熒光顯微鏡熒光顯微鏡3 3、如何提高顯微鏡、如何提高顯微鏡分辨率分辨率1 1、數(shù)片孔徑：孔徑愈大，顯微鏡能力俞強(qiáng)。、數(shù)片孔徑：孔徑愈大，顯微鏡能力俞強(qiáng)。2 2、分辨率：分辨率以分辨?zhèn)z點(diǎn)之間的最小距離表示。、分辨率：分辨率以分辨?zhèn)z點(diǎn)之間的最小距離表示。目鏡與顯微鏡的分辨率無關(guān)，物鏡的分辨率即為顯目鏡與顯微鏡

4、的分辨率無關(guān)，物鏡的分辨率即為顯微鏡的分辨率，照明光線波長(zhǎng)越短，物鏡的數(shù)值孔微鏡的分辨率，照明光線波長(zhǎng)越短，物鏡的數(shù)值孔徑越大顯微鏡的分辨率的越大。徑越大顯微鏡的分辨率的越大。3 3、放大率：總放大率超過物鏡數(shù)值孔徑的、放大率：總放大率超過物鏡數(shù)值孔徑的10001000倍時(shí)，倍時(shí)，細(xì)微結(jié)構(gòu)分辨不清，為空的放大，細(xì)微結(jié)構(gòu)分辨不清，為空的放大，低于低于500500倍時(shí)由于放大率過低，肉眼難以分辨。倍時(shí)由于放大率過低，肉眼難以分辨。4 4、焦點(diǎn)深度：焦深加大，總放大率提高。、焦點(diǎn)深度：焦深加大，總放大率提高。三、實(shí)驗(yàn)器材三、實(shí)驗(yàn)器材觀察材料（草履蟲，洋蔥內(nèi)表皮，紫鴨趾觀察材料（草履蟲，洋蔥內(nèi)表皮，紫

5、鴨趾草等花粉，菠菜葉），普通光學(xué)顯微鏡，草等花粉，菠菜葉），普通光學(xué)顯微鏡，暗視野顯微鏡，相差顯微鏡，熒光顯微鏡，暗視野顯微鏡，相差顯微鏡，熒光顯微鏡，載玻片，蓋玻片，吸管，鑷子，剪刀等。載玻片，蓋玻片，吸管，鑷子，剪刀等。四、實(shí)驗(yàn)方法四、實(shí)驗(yàn)方法1 1觀察草履蟲的外形、運(yùn)動(dòng)、纖毛、食物泡等。觀察草履蟲的外形、運(yùn)動(dòng)、纖毛、食物泡等。取少許棉花纖維或擦鏡紙纖維，放于載玻片上，在取少許棉花纖維或擦鏡紙纖維，放于載玻片上，在其上滴一滴草履蟲懸液，然后加蓋玻片觀察。其上滴一滴草履蟲懸液，然后加蓋玻片觀察。2 2洋蔥表皮細(xì)胞和菠菜葉的細(xì)胞核、葉綠體的觀洋蔥表皮細(xì)胞和菠菜葉的細(xì)胞核、葉綠體的觀察在載玻片上滴一滴水，撕洋蔥鱗莖內(nèi)表皮或菠菜察在載玻片上滴一滴水，撕洋蔥鱗莖內(nèi)表皮或菠菜下表皮一小塊放于其中，使其展開，然后加蓋玻片下表皮一小塊放于其中，使其展開，然后加蓋玻片觀察。觀察。3 3紫鴨趾草花粉外形、表