LC-MS原理及簡(jiǎn)介

1、 LC-MS原理及簡(jiǎn)介原理及簡(jiǎn)介 研發(fā)部研發(fā)部 呂呂 蕾蕾ContentLC-MS原理簡(jiǎn)介TSQ Quantum LC-MS的主要組成部分LC-MS使用的條件因素日常維護(hù)及保養(yǎng)LC-MS原理簡(jiǎn)介原理簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介什么是LC-MS?-LC: HPLC 高效液相色譜高效液相色譜-MS: Mass Spectrometer 質(zhì)譜質(zhì)譜LC-MS ：an instrument that produces ions and separates them in the gas phase according to their massto

2、-charge ratio (m/z)LC-MS原理簡(jiǎn)介原理簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介怎樣理解質(zhì)譜?LC-MS的應(yīng)用領(lǐng)域的應(yīng)用領(lǐng)域質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介藥學(xué)領(lǐng)域藥學(xué)領(lǐng)域代謝組學(xué)代謝組學(xué)食品安全食品安全蛋白質(zhì)組蛋白質(zhì)組學(xué)學(xué)原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作質(zhì)譜儀的組成質(zhì)譜儀的組成原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作 真空系統(tǒng)真空系統(tǒng) Vacuum System 進(jìn)樣進(jìn)樣系統(tǒng)系統(tǒng)Sample I

3、nlet離子源離子源Ionization Source質(zhì)量分析器質(zhì)量分析器Mass AnalyserMass Analyser檢測(cè)器檢測(cè)器DetectorDetector數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)Data SystemData SystemComponents of mass spectrometer原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作TSQ Quantum組成部件原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作離子源（大氣壓電離技術(shù)）離子源（大氣壓電離技術(shù)）原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇條件條件日常維

4、日常維護(hù)工作護(hù)工作離子源（大氣壓電離技術(shù)）離子源（大氣壓電離技術(shù)）原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作離子源作用：u將導(dǎo)入質(zhì)譜儀系統(tǒng)的樣品去溶劑化將導(dǎo)入質(zhì)譜儀系統(tǒng)的樣品去溶劑化u將離子源處的大氣壓與質(zhì)譜儀系統(tǒng)一級(jí)真空阻將離子源處的大氣壓與質(zhì)譜儀系統(tǒng)一級(jí)真空阻 隔開隔開u 被分析物離子化或?qū)⑷軇┲械碾x子轉(zhuǎn)化成氣相被分析物離子化或?qū)⑷軇┲械碾x子轉(zhuǎn)化成氣相u去除中性物質(zhì)和帶反極性電荷離子，否則會(huì)對(duì)去除中性物質(zhì)和帶反極性電荷離子，否則會(huì)對(duì)分析產(chǎn)生干擾分析產(chǎn)生干擾離子源（大氣壓電離技術(shù)）離子源（大氣壓電離技術(shù)）原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇條

5、件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作離子源類型：電噴霧電離（電噴霧電離（ESI）液相處理過程（多數(shù)情液相處理過程（多數(shù)情況）況）大氣壓化學(xué)電離（大氣壓化學(xué)電離（APCI）氣相處理過程氣相處理過程大氣壓光電電離（大氣壓光電電離（APPI）氣相處理過程氣相處理過程ESI與與APCI的比較的比較原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作離子在液態(tài)中形成離子在液態(tài)中形成熱不穩(wěn)定化合物熱不穩(wěn)定化合物極性或半極性化合物極性或半極性化合物蛋白質(zhì)、多肽等大分子蛋白質(zhì)、多肽等大分子ESIAPCI離子從氣態(tài)中形成離子從氣態(tài)中形成熱穩(wěn)定化合物熱穩(wěn)定化合物弱極性或半極性化合物弱極性或半

6、極性化合物小分子化合物小分子化合物ESI與與APCI的比較的比較原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作質(zhì)量分析器的種類質(zhì)量分析器的種類原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作離子阱分析器離子阱分析器扇形磁分析器扇形磁分析器飛行時(shí)間分析器飛行時(shí)間分析器四極桿分析器四極桿分析器傅里葉變換分析器傅里葉變換分析器多級(jí)串聯(lián)質(zhì)譜儀多級(jí)串聯(lián)質(zhì)譜儀三重四極桿三重四極桿原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作正離子化和負(fù)離子化正離子化和負(fù)離子化原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇

7、條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作兩個(gè)化合物選擇合適的掃描方式兩個(gè)化合物選擇合適的掃描方式液質(zhì)推薦使用的流速液質(zhì)推薦使用的流速原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作ESI: 電噴霧電離電噴霧電離 1 L/min 1.0 mL/minute 最佳流速： 200 L/min通常，流速越高要求毛細(xì)管溫度越高，氣體流速也越高APCI: 大氣壓化學(xué)電離大氣壓化學(xué)電離200 L/min 2.0 mL/minute.最佳流速: 500 L/min通常，流速越高，要求鞘氣和輔助氣越多，但是不要求較高的毛細(xì)管溫度常用液質(zhì)流動(dòng)相常用液質(zhì)流動(dòng)相原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組

8、成的組成選擇選擇條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作流動(dòng)相添加劑流動(dòng)相添加劑原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作酸性物質(zhì)酸性物質(zhì)不推薦使用用無酸（會(huì)導(dǎo)導(dǎo)源源腐）推薦使用用酸和和酸堿性物質(zhì)堿性物質(zhì)不推薦使用用金堿性化合物（會(huì)導(dǎo)導(dǎo)源源腐） 推薦使用銨及氨水。表面活性劑表面活性劑 洗滌劑和其他表面活性劑會(huì)抑制離子化三氟和酸三氟和酸(TFA) 可以提高色譜分辨率，但用論是正離子化還是負(fù)離子化模式，都會(huì)抑制離子化 三和胺三和胺/三用胺三用胺(TEA/TMA) 在負(fù)離子化模式下，可以加強(qiáng)去質(zhì)子化作用。Buffers 緩沖液緩沖液原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組

9、成選擇選擇條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作當(dāng)使用非揮發(fā)緩沖液，應(yīng)該使用吹掃擋錐如果可能，盡量避免使用非揮發(fā)液相色譜添加物質(zhì)，例如： 堿用金磷酸鹽堿用金磷酸鹽 硼酸鹽硼酸鹽 檸檬酸鹽檸檬酸鹽如果使用緩沖鹽，應(yīng)該經(jīng)常清洗離子傳輸管和Q00。每日維護(hù)每日維護(hù)-使用前檢查使用前檢查原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作1. 檢查氬氣和氮?dú)鈮毫z查氬氣和氮?dú)鈮毫?. 檢查壓力，確認(rèn)真空系統(tǒng)處于可操作狀態(tài)檢查壓力，確認(rèn)真空系統(tǒng)處于可操作狀態(tài)3. 移走離子傳輸毛細(xì)管入口上的保護(hù)墊或放電移走離子傳輸毛細(xì)管入口上的保護(hù)墊或放電針，重新檢查前級(jí)泵壓力，確認(rèn)真空系統(tǒng)在可針，重新檢查前級(jí)泵壓力，確認(rèn)真空系統(tǒng)在可操作條件。操作條件。每日維護(hù)每日維護(hù)-使用后維護(hù)使用后維護(hù)原理原理簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀的組成的組成選擇選擇條件條件日常維日常維護(hù)工作護(hù)工作1.沖洗樣品管路和大氣壓電離探針（電噴霧和大氣壓化學(xué)電離沖洗樣品管路和大氣壓電離探針（電噴霧和大氣壓化學(xué)電