植物組織內(nèi)可溶性蛋白質(zhì)含量測(cè)定_第1頁
植物組織內(nèi)可溶性蛋白質(zhì)含量測(cè)定_第2頁
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蛋白質(zhì)含量測(cè)定蛋白質(zhì)含量測(cè)定南京曉莊學(xué)院生命科學(xué)系一 實(shí)驗(yàn)原理v利用考馬斯亮藍(lán)能使蛋白質(zhì)染色的利用考馬斯亮藍(lán)能使蛋白質(zhì)染色的特性，能快速簡(jiǎn)單地測(cè)定蛋白質(zhì)的特性，能快速簡(jiǎn)單地測(cè)定蛋白質(zhì)的含量，本方法的靈敏度較高，且不含量，本方法的靈敏度較高，且不受游離氨基酸和小肽的影響。受游離氨基酸和小肽的影響。二 實(shí)驗(yàn)器材和試劑實(shí)驗(yàn)儀器：實(shí)驗(yàn)儀器：v分光光度計(jì)v分析天平v樣品v容量瓶v移液管實(shí)驗(yàn)材料：蘆薈v實(shí)驗(yàn)試劑實(shí)驗(yàn)試劑v標(biāo)準(zhǔn)牛血清蛋白溶液v染料試劑三三 實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟v1 取蘆薈葉片0.1剪碎，從磷酸緩沖液研磨，倒入10ml 離心管中，定容到10 ml，12000 pm離心，20min 得上清液作為待測(cè)樣品。2 取0.5 ml提取液叫上5 ml考馬斯亮蘭試劑，搖勻在30攝氏度水浴 20min ，于595nm處測(cè)得OD值。3 制定標(biāo)準(zhǔn)曲線，配制20 40 60 80 100 mg/ml牛血清蛋白液，同2法測(cè)595nm 處的OD 值，以蒸餾水加考馬斯亮蘭試劑為作照。四四 計(jì)算計(jì)算v蘆薈：0.067v0.067=0.0042 x-0.0141v x=19.31mg/ml蛋白質(zhì)含量=19.31*10/0.1*1000000 =0.193五五 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)由于取的組織不同，所以 OD值相差較大。 研磨須充分，否則溶解后析光時(shí)所得數(shù)據(jù)并不是1克

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