T∕CAQI 181-2021 具有消毒功能的車載空氣凈化器技術(shù)要求和試驗方法

1、ICS 97.030CCS Y 62團體CAQI標(biāo)準(zhǔn)T/CAQI 1812021具有消毒功能的車載空氣凈化器技術(shù)要求和試驗方法Technical requirements and test methods of car air cleanerwith disinfection function2021-02-24 發(fā)布2021-05-23 實施中國質(zhì)量檢驗協(xié)會發(fā)布T/CAQI 1812021本文件按照GB/T 1.12020（標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定 起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由北京中標(biāo)信科技術(shù)服務(wù)有

2、限公司提出。本文件由中國質(zhì)量檢驗協(xié)會歸口。本文件起草單位：浙江天青環(huán)?？萍加邢薰?、珠海格力電器股份有限公司、萊克電氣股份有限公 司、浙江金海高科股份有限公司、北京米微環(huán)?？萍加邢薰尽⒈本┤宥h(huán)?？萍加邢薰?、完美（中 國）有限公司、中國家用電器研究院、中國質(zhì)量檢驗協(xié)會。本文件主要起草人：陳朝陽、周云正、吳畏、陳來星、劉朝軍、劉艷萍、李勁松、黃以燦、鄧哲、王文秀。IT/CAQI 1812021具有消毒功能的車載空氣凈化器技術(shù)要求和試驗方法1范圍本文件規(guī)定了具有消毒功能的車載空氣凈化器（以下簡稱：車載消毒器）的術(shù)語和定義、技術(shù)要求、 試驗方法、檢驗規(guī)則、標(biāo)志、使用說明、包裝、運輸和貯存。本文

3、件適用于乘用車內(nèi)使用的帶有消毒功能的車載空氣凈化器。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文 件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于 本文件。GB/T 191包裝儲運圖示標(biāo)志GB/T 2828.12012計數(shù)抽樣檢驗程序 第1部分：按接收質(zhì)量限（AQL）檢索的逐批檢驗抽樣 計劃GB/T 2829GB 4706.45GB/T 6388GB/T 6682GB/T 9969GB/T 13306周期檢驗計數(shù)抽樣程序及表（適用于對過程穩(wěn)定性的檢驗） 家用和類似用途電器的安全空氣凈化器的特殊要

4、求運輸包裝收發(fā)貨標(biāo)志分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法工業(yè)產(chǎn)品使用說明書總則標(biāo)牌GB/T 188012015 空氣凈化器GB 19489實驗室生物安全通用要求GB 21551.32010家用和類似用途電器的抗菌、除菌、凈化功能空氣凈化器的特殊要求WS/T 6482019 空氣消毒機通用衛(wèi)生要求消毒產(chǎn)品標(biāo)簽說明書管理規(guī)范.中華人民共和國衛(wèi)生部（2005年版）.衛(wèi)監(jiān)督發(fā)2005426號3術(shù)語和定義WS/T 648界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1具有消毒功能的車載空氣凈化器 car air cleaner with disinfection function利用化學(xué)、物理方法殺滅或去除車內(nèi)空氣

5、中化學(xué)污染物，同時能達到消毒要求的車載空氣凈化器。3.2消毒因子 disinfection factor具有殺滅細菌、病毒、霉菌等功能的化學(xué)或物理因子。4技術(shù)要求4.1外觀與結(jié)構(gòu)4.1.1外表面應(yīng)平整光潔、色澤均勻。應(yīng)無明顯的凹痕、劃傷、裂縫、變形、粗糙不平和其他損傷。表面 涂層應(yīng)均勻、無起泡、龜裂和脫落現(xiàn)象，金屬零部件不應(yīng)有銹蝕及其他機械損傷。4.1.2如配有智能感應(yīng)裝置，應(yīng)能實時自動監(jiān)測，標(biāo)稱參數(shù)顯示清晰易懂。4.1.3主要部件應(yīng)采用無害、無異味、不造成二次污染材料制作，應(yīng)堅固、耐用。4.1.4標(biāo)牌、商標(biāo)等應(yīng)固定在車載消毒器的明顯位置。各種標(biāo)牌的固定位置應(yīng)正確、牢固、平直、整齊， 并應(yīng)清晰

6、、耐久。表示產(chǎn)品功能的文字、符號、圖形標(biāo)志應(yīng)標(biāo)記清晰、準(zhǔn)確。4.1.5車載消毒器的凈化、過濾等材料應(yīng)能夠更換或再生，其裝置能夠清洗或消毒。4.1.6內(nèi)部關(guān)鍵件應(yīng)采用耐老化、耐腐蝕的材料。4.1.7電源：車載蓄電池供電或車載太陽能系統(tǒng)供電；使用空間范圍：3 m36 m3。4.2性能要求4.2.1般性能應(yīng)符合GB/T 18801相關(guān)規(guī)定。4.2.2消毒效果消毒效果應(yīng)符合以下要求：a）對白色葡萄球菌的殺滅率應(yīng)99.9%。b）對空氣中自然菌的消亡率應(yīng) 90.0%。c）甲型流感病毒A/PR8/34CH1N1）殺滅率應(yīng)99.99%。d）腸道病毒EV71C宿主細胞Veto細胞）殺滅率應(yīng)99.99%。4.2.

7、3除菌效果分級車載消毒器殺菌率95%，在同樣的殺菌率情況下，按作用吋間對車載消毒器進行分級，見表1:表1除菌效果分級作用時間/min級別201級302級603級5試驗方法5.1試驗儀器和設(shè)備5.1.1測量儀器和設(shè)備的準(zhǔn)確度應(yīng)符合表2的規(guī)定。11表2測量儀器和設(shè)備的準(zhǔn)確度測量參數(shù)測量儀器和設(shè)備單位準(zhǔn)確度壓力微壓計、電傳感器Pa1.0大氣壓力計kPa0.2風(fēng)量噴嘴組%2.0漏風(fēng)率漏風(fēng)量測量裝置%1.0電氣特性功率表級0.5電壓表電流表頻率表噪聲聲級計dB(A)0.5pm2.5濃度粉塵儀mg/m30.001 mg/m3臭氧臭氧測試儀mg/m32%紫外線泄漏量紫外輻照計piW/m20.1 jzW/m2

8、5.1.2試驗時的測量儀器和設(shè)備應(yīng)在計量檢定有效期內(nèi)。5.2外觀與結(jié)構(gòu)視檢。5.3性能要求5.3.1_般性能按GB/T 18801方法測試。5.3.2消毒效果消毒效果試壓應(yīng)符合以下要求：a）空氣消毒模擬現(xiàn)場試驗（按照附錄A規(guī)定），用車載消毒器進行空氣消毒模擬現(xiàn)場試驗，在20 °C25 °C，相對濕度50%70%條件下，開機作用至說明書規(guī)定的時間，對白色葡萄球菌 的殺滅率應(yīng)99.9%。b）現(xiàn)場自然條件下（按照附錄B規(guī)定），用車載消毒器進行空氣消毒現(xiàn)場試驗，開機作用至說明 書規(guī)定的時間，對空氣中自然菌的消亡率應(yīng)90.0%。c）甲型流感和腸道病毒殺滅效果按附錄C測試。5.3.3除

9、菌效果分級按5.3.2的方法測試。6檢驗規(guī)則6.1檢驗分類檢驗分為出廠檢驗和型式檢驗兩種。6.2 出廠檢驗6.2.1每臺凈化機在出廠前須經(jīng)制造商的檢驗部門進行出廠檢驗、確認(rèn)合格后方能出廠。檢驗合格出 廠的產(chǎn)品應(yīng)附有合格證。6.2.2出廠檢驗按GB/T 2828.12012正常檢查一次抽樣方案實施，具體檢驗項目按表3執(zhí)行。 表3出廠檢驗項目序號檢驗項目要求檢驗方法1外觀與結(jié)構(gòu)4.15.22標(biāo)志7.1視檢6.2.3判定規(guī)則：如有一項不合格，則判該產(chǎn)品為不合格品。6.3型式試驗 6.3.1在下列情況之一時，應(yīng)進行型式檢驗：a）新產(chǎn)品試制鑒定時；b）正式投產(chǎn)后，設(shè)計、工藝材料、元器件有較大改變，可能影

10、響產(chǎn)品質(zhì)量時；c）停產(chǎn)1年以上，恢復(fù)生產(chǎn)時；d）正常生產(chǎn)每年進行一次；e）出廠檢驗結(jié)果與上次型式檢驗結(jié)果有較大差異時；f）國家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督部門提出要求時。6.3.2型式檢驗為抽檢，從出廠檢驗合格的產(chǎn)品中，按GB/T 2829規(guī)定抽取相應(yīng)數(shù)量的產(chǎn)品進行型式 檢驗，判別水平、樣本大小、不合格質(zhì)量水平見表4。6.3.3型式檢驗項目：第5章全項和7.1標(biāo)志。6.3.4型式檢驗判定：必須全部符合規(guī)定判為合格。如有一個項目不合格，可重新抽取加倍數(shù)量的產(chǎn) 品就該不合格項目進行復(fù)驗，復(fù)驗合格，該批產(chǎn)品判為合格；如仍有不合格，則該批產(chǎn)品判為不合格。具 體檢驗項目按表5執(zhí)行。表4抽樣規(guī)則判別水平抽樣方案二次抽樣樣

11、本大小不合格質(zhì)量水平A類RQL=65B類RQL=80C類RQL=100判別水平n第1次3AcReAcReAcRe020313第2次722 =3123445表5型式檢驗項目序號fe驗項目本標(biāo)準(zhǔn)所屬的章、條不合格類別技術(shù)要求試驗方法1外觀與結(jié)構(gòu)4.15.2C2一般性能4.2.15.3.1A3消毒效果4.2.25.3.2A4除菌效果分級4.2.35.3.2A5標(biāo)志7.1視檢C7標(biāo)志、使用說明、包裝、運輸和貯存7.1 標(biāo)志7.1.1產(chǎn)品標(biāo)志車載消毒器的銘牌應(yīng)符合GB/T 13306的規(guī)定，車載消毒器應(yīng)在其明顯部位加貼銘牌，銘牌上至少 包括下列內(nèi)容：a）制造單位名稱；b）產(chǎn)品型號和名稱；c）產(chǎn)品主要技術(shù)

12、參數(shù)（包括：噪聲、殺毒率等）、適用車型或機型；d）尺寸、重量；e）產(chǎn)品執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)號；f）制造日期或產(chǎn)品批號；g）生產(chǎn)許可證編號；h）衛(wèi)生許可批件號；1） 注意事項。7.1.2 包裝標(biāo)志產(chǎn)品外包裝箱上應(yīng)標(biāo)注以下內(nèi)容：a）產(chǎn)品名稱、型號；b）制造廠名稱、地址；c）重量：凈重、毛重；d）體積（長X寬X高）；e）執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)號；f）出廠年月/產(chǎn)品批號/產(chǎn)品編號；g）符合GB/T 6388規(guī)定的收發(fā)貨標(biāo)志；h）符合GB/T 191規(guī)定的包裝儲運圖示標(biāo)志等。7.2使用說明產(chǎn)品出廠應(yīng)附有使用說明書，使用說明書應(yīng)符合GB/T 9969和消毒產(chǎn)品標(biāo)簽說明書管理規(guī)范的 規(guī)定，并標(biāo)注以下內(nèi)容：a）產(chǎn)品名稱、規(guī)格；b）產(chǎn)品

13、參數(shù)；O 安裝、調(diào)試、操作；d）維修、保養(yǎng)及故障處理說明;e）運輸、驗收及貯存注意事項;f）產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)號；g）產(chǎn)品合格證；h）結(jié)構(gòu)圖；i）執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)；j）隨機文件清單。7.3包裝、運輸和貯存7.3.1 包裝7.3.1.1車載消毒器應(yīng)用牢固的包裝箱包裝，外包裝標(biāo)志應(yīng)符合GB/T 191的規(guī)定，并有防潮、防震保 護措施。7.3.1.2包裝應(yīng)保證車載消毒器在正常運輸和保管條件下，不因受震、裝卸、受潮和侵人灰塵而使過濾 網(wǎng)等部件損傷，車載消毒器及附件在包裝箱內(nèi)應(yīng)固定可靠，必要時加適當(dāng)襯墊。7.3.1.3車載消毒器及其附件以固定數(shù)量裝人包裝箱中，包裝應(yīng)有可靠的防碰撞措施。 7.3.1.4包裝箱內(nèi)應(yīng)附有以下文

14、件：a）產(chǎn)品使用說明書；b）保修卡；c）產(chǎn)品合格證；d）零配件清單；e）裝箱清單。7.3.2運輸7.3.2.1車載消毒器應(yīng)采用箱式或遮篷運輸，在運輸和裝卸過程中，應(yīng)輕拿輕放，防止碰撞、劃傷、重壓 和損壞產(chǎn)品及附件，防止暴曬和雨雪淋襲，嚴(yán)格隔絕有毒物品污染。7.3.2.2運輸收發(fā)標(biāo)志應(yīng)符合GB/T 6388的規(guī)定。7.3.3 貯存7.3.3.1車載消毒器包裝、裝箱后，應(yīng)存放在干燥、通風(fēng)，無腐蝕性氣體的庫房內(nèi)，室內(nèi)無酸、堿、鹽及腐 蝕性、爆炸性氣體，不受灰塵雨雪的侵燭。7.3.3.2包裝好的車載消毒器應(yīng)放置在周圍空氣溫度在一25 °C+55 °C，通風(fēng)、干燥、不受雨雪浸淋的 條

15、件下貯存。貯存期不超過2年。附錄 A（規(guī)范性）空氣消毒模擬現(xiàn)場試驗A. 1目的以人工噴霧微生物氣溶膠的方法污染模擬現(xiàn)場受試空氣，測定車載消毒器用于空氣消毒的最低安 全使用劑量。A. 2試驗設(shè)備和器材A. 2.1試驗菌株：白色葡萄球菌8 032株。A. 2.2培養(yǎng)基：營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、含中和劑的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（所含中和劑為按附 錄C鑒定合格者，用于化學(xué)消毒因子的空氣消毒機消毒后采樣）。A. 2.3消毒試驗用氣霧室：氣霧室宜以不銹鋼、鋁合金和玻璃等光潔、耐腐蝕和易清洗的材料建造相鄰 的一對（容積均為20 m3），一個用于消毒試驗，另一個用于試驗對照。一對氣霧室所處環(huán)境（包括溫度、 相

16、對濕度、光照、密閉性和通風(fēng)條件等）應(yīng)一致。應(yīng)安裝溫度和相對濕度調(diào)節(jié)裝置以及通風(fēng)機過濾除菌 或其他消毒裝置和相應(yīng)管道，開設(shè)供噴霧染菌、給藥、采樣等的袖套操作和樣本傳遞等窗口。A. 2.4噴霧染菌裝置，包括空氣壓縮機、壓力表、氣體流量計和氣溶膠噴霧器等。噴出細菌氣溶膠微粒 的直徑90%以上應(yīng)在1 gm10 jtzm之間。A. 2.5空氣微生物采樣裝置：六級篩孔空氣撞擊式采樣器、抽氣設(shè)備、氣體流量計、計時器等。A. 2.6環(huán)境監(jiān)測器材：溫度計、濕度計等。A. 3試驗菌懸液的制備取白色葡萄球菌第37代經(jīng)36 °C±1 °C培養(yǎng)18 h24 h的新鮮斜面培養(yǎng)物，用TPS（胰

17、蛋白胨生 理鹽水溶液）洗下菌苔，無菌脫脂棉過濾后，用營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基稀釋成所需濃度。A.4操作程序A. 4.1待測車載消毒器的安裝試驗開始前，按待測車載消毒器的安裝說明，將待測車載消毒器安裝在試驗氣霧室遠端，連接好電 源并確認(rèn)能夠正常工作，同時在對照氣霧室內(nèi)安裝去除了空氣消毒能力的與待檢同型號設(shè)備作為對照， 然后將門關(guān)閉。此后，一切操作和儀器設(shè)備的操作均在室外通過帶有密封袖套的窗口或搖控器進行。 直至試驗結(jié)束，才可將門打開。A.4.2試驗環(huán)境條件設(shè)定開啟計算機控制系統(tǒng)（或開啟溫、濕度調(diào)節(jié)裝置），同時調(diào)節(jié)兩個氣霧室的溫度、相對濕度至試驗要 求的溫度（20 °C-25 °C）和相

18、對濕度（50%70%）。A.4.3氣溶膠噴霧染菌分別在對照組和試驗組氣霧室中，將微生物氣溶膠發(fā)生器固定在采樣車上并使之位于氣霧室內(nèi)中 央位置距地面1.0 m處，按照不同的氣溶膠發(fā)生裝置設(shè)定壓力、氣體流量和噴菌時間噴霧染菌。邊噴霧 染菌，邊用風(fēng)扇（攪拌器）攪拌。噴霧染菌完畢，繼續(xù)攪拌5 min，靜止5 min。A.4.4消毒前采樣靜止5 min后，同時對對照組和試驗組氣霧室分別進行消毒前采樣，作為對照組試驗開始前和試驗 組消毒處理前的陽性對照（即污染菌量）。氣霧室內(nèi)空氣中各陽性對照菌數(shù)應(yīng)達5X104 CFU/m3 5X105 CFU/m3 （消毒試驗最后一個時間對照組陽性對照菌數(shù)不得小于5X10

19、4 CFU/m3）。A.4.5 消毒處理按待測車載消毒器的使用說明，開機運行。A.4.6消毒后采樣車載消毒器作用至預(yù)定的第一個時間（說明書規(guī)定時間的0.5倍），即刻對試驗組和對照組氣霧室 同時進行采樣;繼續(xù)作用至第二個預(yù)定消毒時間（說明書規(guī)定的時間），再次按前述方法進行采樣。A.4.7采樣要求試驗用六級篩孔空氣撞擊式采樣器采樣，采樣時，將六級篩孔空氣撞擊式采樣器放在氣霧室中央1.0 m高處，采樣流量為28.3 L/min,采樣時間依據(jù)預(yù)測試驗確定（一般對照組和試驗組消毒處理前采 樣5 s10 s，試驗組消毒后視其消毒效果，如消毒合格采樣5 min10 min）。A.4.8培養(yǎng)與結(jié)果觀察采樣后，

20、無菌操作取出平板，置36 °C±1 °C培養(yǎng)箱培養(yǎng)48 h進行活菌培養(yǎng)計數(shù)。在完成試驗組與 陽性對照組采樣后，將未用的同批培養(yǎng)基與上述兩組樣本同時進行培養(yǎng)，作為陰性對照。若陰性對照組 有菌生長，說明所用培養(yǎng)基有污染，試驗無效，更換無菌器材重新進行。A.4.9對氣霧室消毒處理全程試驗完畢，對氣霧室表面和空氣中殘留的細菌做最終消毒后，打開通風(fēng)機，過濾除菌排風(fēng)，排除 氣霧室內(nèi)滯留的污染空氣。A.5數(shù)據(jù)處理A.5.1空氣中含菌量計算空氣中含菌量按式（A.1）計算。SX = 2O7X1000(A.1式中：X空氣含菌量，單位為菌落形成單位每立方米（CFU/m3）； S六級采樣

21、平板上總菌數(shù)，單位為菌落形成單位（CFU）； 采樣時間，單位為分（min）。A.5.2殺滅率的計算車載消毒器對細菌消毒效果以殺滅率（或清除率）計，數(shù)值以（）表示，按公式（A.3）計算。v0-vtNt = X100v 0（1 一 Nt） V;V “卜 Nt）謂(A.2(A.3式中：K（消毒處理對空氣中細菌的殺滅率（或消除率）.%;V;與V't試驗組消毒處理前和消毒過程中不同時間的空氣含菌量，單位為菌落形成單位每立 方米（CFU/m3）；Nt空氣中細菌的自然衰亡率；Vu與V：對照組試驗開始前和試驗過程中不同時間的空氣含菌量，單位為菌落形成單位每立 方米（CFU/m3 ）。A.6重復(fù)試驗同一

22、條件試驗重復(fù)3次。A.7結(jié)果判定3次試驗結(jié)果的殺滅率（或清除率）均99.9%，可判為消毒合格。A.8注意事項A. 8.1試驗中，因控制統(tǒng)一的條件較難，故每次試驗均需同時設(shè)置試驗組與對照組，兩組條件盡量保持 一致。A.8.2注意記錄試驗過程中的溫度和相對濕度，以便分析對比。A.8.3所采樣本應(yīng)盡快進行微生物檢驗，以免影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。A.8.4每次試驗完畢，氣霧室應(yīng)充分通風(fēng)。必要時消毒沖洗，間隔4 h后才可做第二次試驗。A.8.5試驗時，氣霧室必須保持密閉，設(shè)有空氣過濾裝置，以防染菌空氣污染環(huán)境。A.8.6試驗時，氣霧室應(yīng)防止日光直射，以免造成殺菌作用不穩(wěn)定。A.8.7氣霧室排風(fēng)過濾裝置中的濾材

23、應(yīng)定期更換，換下的濾材應(yīng)經(jīng)滅菌后再做其他處理。附錄B（規(guī)范性）空氣消毒現(xiàn)場試驗B. 1目的在適用現(xiàn)場，無人情況下，以自然菌為指示微生物，對消毒場所（如病房、寢室、辦公室等可密閉的場 所）空氣進行消毒或微生物清除處理，驗證車載消毒器實用消毒效果。B. 2試驗設(shè)備和器材B.2.1 培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、含中和劑的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（所含中和劑為按附錄C鑒定合格者，用于化學(xué)消毒 因子的車載消毒器消毒后采樣）。B.2.2空氣微生物采樣裝置六級篩孔空氣撞擊式采樣器、抽氣設(shè)備、氣體流量計、計時器等。B.2.3環(huán)境監(jiān)測器材溫度計、濕度計等。B.3操作程序B.3.1試驗場所選擇根據(jù)車載消毒器的使用要求，選擇有代表

24、性的試驗場所（如病房、寢室、辦公室、救護車輛等可密閉 的場所），并且試驗場所菌量宜1 000 CFU/m3 .在室內(nèi)無人情況下進行試驗。B. 3.2待測車載消毒器的安裝試驗開始前，按待測車載消毒器的安裝說明，將待測車載消毒器安裝在所選試驗場所的遠端，連接 好電源并確認(rèn)能夠正常工作。B. 3.3消毒前采樣所選密閉試驗場所空氣靜止5 mm后，用六級篩孔空氣撞擊式采樣器進行空氣中自然菌采樣，作為 消毒前樣本（陽性對照），采樣時，試驗場所10 m2則設(shè)一個采樣點，試驗場所10 m2,每增加10 m2 增設(shè)一個采樣點，最多設(shè)5個采樣點。一個采樣點采樣，將六級篩孔空氣撞擊式采樣器置試驗場所中央 1.0 m

25、高處，多個采樣點將六級篩孔空氣撞擊式采樣器置于對角線上或梅花式均勻分布，且遠離消毒機 的出風(fēng)口，離墻壁距離應(yīng)0.5 m.1.0 m高度處采樣。采樣流量為28.3 L/min.采樣時間依據(jù)空氣含菌 量確定，一般不超過10 min。B.3.4 消毒處理按待測車載消毒器的使用說明，開機運行。B. 3.5消毒后采樣車載消毒器作用至預(yù)定的時間（說明書規(guī)定的時間），在消毒前采樣點用六級篩孔空氣撞擊式采樣T/CAQI 1812021 器同法進行空氣中自然菌采樣，作為消毒后的試驗樣本。B.3.6培養(yǎng)與結(jié)果觀察采樣后，無菌操作取出平板，置36 °C + 1 °C培養(yǎng)箱培養(yǎng)48 h進行活菌培養(yǎng)

26、計數(shù)。同時將未用的同 批培養(yǎng)基與上述兩組樣本同時進行培養(yǎng)，作為陰性對照。若陰性對照組有菌生長，說明所用培養(yǎng)基有污 染，試驗無效，更換后重新進行。B.3.7 重復(fù)試驗試驗重復(fù)3次。B.4數(shù)據(jù)處理B. 4.1空氣中含菌量計算同A.5.1。B.4.2消亡率的計算。車載消毒器對空氣中自然菌消毒效果以消亡率計，數(shù)值以()表示，按式(B.1)計算。A 一BX = . X1OO( B.1 )式中：X消亡率A消毒前樣本平均菌數(shù)，單位為菌落形成單位每立方米(CFU/m3)；B消毒后樣本平均菌數(shù)，單位為菌落形成單位每立方米(CFU/m3)。B.5結(jié)果判定每次試驗對自然菌的消亡率均90.0%者為合格。B.6注意事項

27、B. 6.1試驗中，因控制統(tǒng)一的條件較難，故消毒前后及不同次數(shù)間的環(huán)境條件應(yīng)盡量保持一致。B. 6.2注意記錄試驗過程中的溫度和相對濕度，以便分析對比。B. 6.3現(xiàn)場房間應(yīng)防止日光直射，以免造成殺菌作用不穩(wěn)定。B. 6.4所采樣本應(yīng)在4 h內(nèi)進行微生物檢驗，以免影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。B. 6.5試驗時，應(yīng)關(guān)閉實驗場所門窗。13T/CAQI 1812021附錄C（規(guī)范性）殺病毒效果要求和試驗方法C. 1范圍本附錄規(guī)定了宣稱對甲型流感病毒、腸道病毒EV71、冠狀病毒具有殺滅功能的車載消毒器的要求 和方法。本附錄適用于宣稱對甲型流感病毒、腸道病毒EV71、冠狀病毒具有殺滅功能的車載消毒器。 宣稱殺滅其

28、他病毒的車載消毒器可參考本附錄的方法。C.2術(shù)語和定義C. 2.1病毒 virus沒有細胞結(jié)構(gòu)、只能在宿主細胞內(nèi)進行復(fù)制的微生物或遺傳單元，由蛋白質(zhì)外殼和內(nèi)部的遺傳物質(zhì) （DNA或RNA）組成。病毒不能獨立生存，必須生活在其他生物的細胞內(nèi)，一旦離開活細胞殼就不表現(xiàn) 任何生命活動跡象。C. 2.2驗艙 test chamber用于測定產(chǎn)品對空氣中目標(biāo)污染物去除能力的限定空間裝置，規(guī)定了形狀、尺寸和換氣次數(shù)等基本 條件。其規(guī)格參見GB/T 188012015附錄A的3 m3試驗艙。C. 2.3自 然衰亡 natural decay在規(guī)定空間內(nèi)，由于沉降、附聚、失活等非人為因素，導(dǎo)致空氣中目標(biāo)污染物

29、濃度的降低。C. 2.4病毒殺滅率 virus removal rate在規(guī)定空間內(nèi)，由于產(chǎn)品的運行，導(dǎo)致病毒氣溶膠濃度降低的百分率。C.3測試條件使用本文件的人員應(yīng)有正規(guī)實驗室工作的實踐經(jīng)驗，實驗室應(yīng)滿足GB 19489要求。本文件并未 指出所有可能的安全問題，使用者有責(zé)任采取適當(dāng)?shù)陌踩徒】荡胧?，并保證符合國家有關(guān)法規(guī)規(guī)定的 條件。C.3.1 試驗環(huán)境如無特殊說明，試驗應(yīng)符合下列一般條件：a）試驗環(huán)境溫度為25 °C±2 °C，環(huán)境濕度為相對濕度（50±10）%，無外界氣流，無強烈陽光和其 他輻射作用的室內(nèi)進行；b）電壓和頻率波動范圍不得超過額定值的

30、±1%;c）試驗用水為GB/T 6682中規(guī)定的三級及以上用水。C.3.2試驗儀器設(shè)備試驗用儀器儀表的性能、精度、量程應(yīng)滿足被測量的要求。a）電工儀表其精度應(yīng)不低于0.5級，出廠試驗應(yīng)不低于1.0級；b）測量溫度用的儀表不確定度應(yīng)在士0.5 °C以內(nèi)；O 測量時間用的儀表不確定度應(yīng)在±0.5%以內(nèi)；d）水量計以升（L）計，精確至0.01 L；e）壓力計以帕（Pa）計，精確至0.02 MPa；f）試驗艙：符合附錄A相關(guān)要求；g）倒置顯微鏡；h）離心機：控速范圍500 r/min10 000 r/min.準(zhǔn)確度1%;i）二級氣溶膠發(fā)生器：用于噴霧發(fā)生病毒氣溶膠，噴出的

31、氣溶膠微粒的直徑90%以上應(yīng)在0.1 廠m10;j）二氧化碳培養(yǎng)箱：控溫范圍為室溫置50 °C，準(zhǔn)確度1 °C，可維持5%的二氧化碳濃度；k）高壓蒸汽滅菌鍋：溫范圍為105 °C 128 °C，準(zhǔn)確度1 °C ;控壓范圍為50 kPa300 kPa，壓力 精度5 kPa；D 干熱滅菌箱：溫范圍為50 °C200 °C，準(zhǔn)確度2 °C；m）生物安全柜：應(yīng)為符合YY 0569規(guī)定的II級及以上生物安全柜；n）冰箱：控溫范圍為 2 °C 8 °C .-（20±2 ）°C，一（80&

32、#177;2）°C ；o）可調(diào)移液器：量程為 10100 jiL. 1001 000 pL，l mL5 mL。P）水浴鍋：控溫范圍為25 °C55 °C，準(zhǔn)確度1 °C。q）細胞培養(yǎng)板：經(jīng)7-射線滅菌的6孔及96孔細胞培養(yǎng)板。r）細胞瓶：經(jīng)7-射線滅菌后具有一定培養(yǎng)面積和帶濾膜瓶蓋的細胞培養(yǎng)瓶，瓶蓋可擰緊。用于貼壁細胞培養(yǎng)。瓶蓋的濾膜用0.2濾膜來交換空氣。s）生化培養(yǎng)箱：控溫范圍為20 °C50 °C，準(zhǔn)確度1 °Ct ）培養(yǎng)皿、試管、錐形瓶等其他微生物學(xué)試驗耗材：微生物培養(yǎng)和實驗的各個規(guī)格。u）液體撞擊式采樣器。C. 4

33、甲型流感病毒C.4.1 殺滅率甲型流感病毒A/PR8/34（H1N1）殺滅率不小于99.99%。C. 4.2病毒的制備C.4.2.1制備要求本附錄規(guī)定了甲型流感病毒A/PR8/34 （H1N1）、宿主細胞（MDCK細胞）傳代培養(yǎng)及測試用病毒 懸液的制備流程。其他病毒及宿主細胞制備流程，參照按本附錄規(guī)定的方法進行。不同病毒或細胞的 培養(yǎng)溫度、時間等參數(shù)可以根據(jù)需要進行調(diào)整。甲型流感病毒A/PR8/34（H1N1）的操作應(yīng)在BSL-2級及以上級別試驗室操作，其他病毒應(yīng)在不 小于其對應(yīng)的試驗室級別上操作。C.4.2.2制備步驟a）從液氮中取出凍存的試驗用宿主細胞，在37 °C溫水中迅速融化

34、，用毛細吸管移至含有細胞維 持液的細胞管內(nèi)。吹吸數(shù)次，使混勻，立即離心（3 000 r/min. 3 min）.去上清液。再加人適當(dāng) 的細胞維持液，吹吸數(shù)次，使混勻，同上離心后，轉(zhuǎn)種于加有10 mL完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中。 逐日觀察細胞生長情況，在細胞長滿單層時，用于消毒試驗。b）取出低溫凍存的試驗病毒毒種，37 1水浴融化，用細胞維持液作10倍稀釋然后接種于已經(jīng)長 滿單層細胞的細胞瓶內(nèi)，置37 °C溫箱中，使與細胞吸附、生長。逐日觀察病變，待3/4細胞出 現(xiàn)病變時，收獲病毒，置一80 °C保存。c）將含有病毒及宿主細胞的培養(yǎng)液，在冰浴條件下，用超聲波（或反復(fù)凍融）破碎宿主細

35、胞，釋放 病毒。然后，盡快離心（6 000 r/min. 15 min）去除沉淀（主要為細胞破碎片），上清液即為所需 的病毒懸液。按每管1.0 mL分裝于無菌離心管（1.5 mL）中。通過蝕斑或TCID50方法檢測病 毒滴度是否超過107 PFU或107 TCID50/mL,若滴定度低于107 PFU或107 TCID50/mL,則從 頭開始重新制備。使用前，將冷凍的病毒放人37 °C水浴，使其迅速解凍。解凍后即為檢測用 的病毒懸液，若非立即使用，可暫存于4 °C冰箱。C. 4.3測試步驟a）準(zhǔn)備好試驗用試劑和用品，需要無菌的，應(yīng)提前滅菌備用。b）將待檢驗的產(chǎn)品按GB/T

36、18801-2015附錄A的A.4的要求放置于試驗艙內(nèi)，并將使用的器 材一次放人試驗艙內(nèi)，將門關(guān)閉。c）同時調(diào)節(jié)實驗組和對照組試驗艙的測試環(huán)境，使之保持一致。包括：打開操作間的送風(fēng)裝置， 送人經(jīng)過高效過濾器的循環(huán)風(fēng)以維持操作間的壓差，以防止試驗艙中的微生物氣溶膠外泄；開 啟高效空氣過濾器，凈化試驗艙內(nèi)空氣，使其潔凈度達到萬級以上；啟動溫濕度控制裝置，使室 內(nèi)溫度和相對濕度達到規(guī)定狀態(tài)。d）關(guān)閉高效空氣過濾器和濕度控制裝置，將病毒懸液用PBS或維持培養(yǎng)基稀釋成所需濃度。按 照噴射裝置設(shè)定的壓力、氣體流量及噴射時間向試驗空間中噴病毒懸液，邊噴病毒懸液，邊用 風(fēng)扇攪拌。噴染完畢，繼續(xù)攪拌5 min，

37、然后靜置5 min。e）以細胞維持培養(yǎng)基或其他合適的液體為采樣液，同時對試驗組和對照組試驗艙進行實驗前病 毒濃度采樣，按采樣器流速采樣，采樣時間1 min5 min。要求試驗艙內(nèi)空氣中各陽性對照病 毒數(shù)應(yīng)在 5.0X105 PFU/m3 （或 TCID50/m3）5.0X107 PFU/m3 ,否則試驗無效。f）待試驗艙內(nèi)的初始病毒數(shù)（r = 0 min）測定后，開啟被測樣機，設(shè)定至規(guī)定狀態(tài)，作用至預(yù)定時 間后，關(guān)閉機器。作用時間應(yīng)不大于lh。g）樣機作用至1 h，停止運行，即刻對試驗組和對照組試驗艙同時進行采樣。采樣高度為0.8 m1.2 m，采樣時間1 min5 mino注：采樣時間可以視

38、艙內(nèi)污染物濃度確定。h）采樣完畢后，選擇合適的方法計算每毫升樣液中病毒的含量。最后計算每立方米空氣中病毒 的數(shù)量。i）采樣液和培養(yǎng)用的培養(yǎng)基應(yīng)同時進行培養(yǎng)，作為陰性對照。陰性對照組不得出現(xiàn)病毒空斑、病 變和雜菌，否則說明試驗中有污染，試驗無效，更換無菌器材重新進行。j）試驗完畢后，對試驗艙空氣進行消毒。打開紫外燈，消毒30 min60 min，然后用臭氧或其他 消毒方法對空氣凈化器消毒30 min。k）空白對照組和試驗組應(yīng)同時進行測試，試驗重復(fù)進行3次（每次試驗間隔至少1 d），每次均分 別計算其殺滅率，每次試驗殺滅率不小于99.99%者為合格。C. 4.4病毒的計數(shù)實驗室可以根據(jù)自身的實驗條

39、件和實驗技術(shù)，選擇下面任意一種方法進行病毒的計數(shù)。C.4.4.1 噬斑法a）按以下步驟進行試驗：在6孔細胞培養(yǎng)板的每個孔內(nèi)培養(yǎng)單層細胞，并用顯微鏡觀察細胞的生長狀態(tài)。當(dāng)觀察到長滿的單層細胞時，棄掉生長培養(yǎng)基。加適量細胞維持培養(yǎng)基洗掉殘留的 生長培養(yǎng)基，重復(fù)洗2次。病毒液原液及每個梯度的稀釋液均接種2孔用于測試，接種量0.1 mL。如果原液接種到第一個2孔，則接下來的2孔接種1/10稀釋液，以此類推。最后一 個2孔，接種雙倍維持培養(yǎng)基，做陰性對照。把6孔板放人CO2培養(yǎng)箱（34 °C±1 °C, 5% CO2）孵育1 h，以便讓病毒吸附到細胞上。每隔15 min搖一

40、下細胞板，讓病毒懸液充分和細 胞接觸。取2 mL3 mL維持培養(yǎng)基加到6孔板上，清洗表面，然后棄掉多余的培養(yǎng)基。加人3 mL瓊脂培養(yǎng)基做蝕斑實驗，蓋上蓋子并放室溫10 min左右讓瓊脂培養(yǎng)基凝固。待瓊脂培 養(yǎng)基凝固后，倒置細胞板，放人CO2培養(yǎng)箱中（34 °C±1 °C,5% CO2）培養(yǎng)2 d3 d。然后，從 培養(yǎng)箱中把細胞板拿出來，放正，添加3 mL的福爾馬林溶液以固定細胞，令其在室溫下固定 至少lh。棄掉瓊脂培養(yǎng)基，添加3 mL亞甲基藍溶液，室溫下保持15 min對細胞染色。染色 完畢，棄掉亞甲基藍溶液，用水沖洗一下。確認(rèn)細胞染色。計算斑的數(shù)量（白色斑點），

41、取兩個 孔的平均值。b）培養(yǎng)時間及溫度可以隨測試病毒的種類進行改變。c）實驗結(jié)束后，按以下步驟計算PFU值：從接種了不同稀釋度病毒液的培養(yǎng)孔計數(shù)得到蝕斑的 數(shù)量（空斑的數(shù)量宜在60個以內(nèi)，超過60個時，空斑的邊界將不清晰）。空斑的數(shù)量以每個稀 釋度上兩個數(shù)據(jù)的平均值計。對合適的稀釋度上的蝕斑進行計數(shù)，其空斑數(shù)量如下標(biāo)準(zhǔn)進行： 如果不同稀釋度中的一個出現(xiàn)了 660,則取660進行計算；如果原液的空斑數(shù)6,則取原液孔上的空斑作為測試的PFU；如果原液的空斑數(shù)1，包括0,則以1計算測試的PFU。C. 4.4.2 TCID50 法在96孔細胞培養(yǎng)板的每個孔內(nèi)培養(yǎng)單層細胞，并用顯微鏡觀察細胞的生長狀態(tài)。

42、當(dāng)觀察到長滿單 層細胞時，棄掉生長培養(yǎng)基。加0.1 mL細胞維持培養(yǎng)基洗細胞表面，重復(fù)洗2次。病毒原液及每個梯 度的稀釋液均接種8孔用于測試，接種量0.1 mL，并以雙倍維持培養(yǎng)基做陰性對照。把96孔板放CO2 培養(yǎng)箱（34 °C ±1 °C, 5% CO2）孵育1 h，以便讓病毒吸附到細胞上。之后棄掉96孔板的上清液，取0.1 mL細胞維持培養(yǎng)基，洗板，棄掉多余的細胞維持培養(yǎng)基。加人0.1 mL細胞維持培養(yǎng)基后將96孔 板放CO2培養(yǎng)箱（34 °C±1 °C,5% CO2）培養(yǎng)7 d。通過倒置顯微鏡觀察細胞病變。確認(rèn)細胞病變之后 用Behren和Karber方法計算TCID5。，得到每毫升采樣液中的病毒數(shù)量（TCID50/mL）。培養(yǎng)時間及溫度可以隨測試病毒的種類進行改變。C. 4.5 殺滅率計算C.4.5.1每立方空間中病毒數(shù)量按公式（C.1）進行計算：NXV 000（ C.1 ）FXt式中：C 每立方空間中病毒的數(shù)量，單位為PFU/m3或TCID50/m3 ;N每毫升采樣液原液中病毒的數(shù)量，單位為PFU/mL或TCID50/mL；V采樣液體