血涂片評價(jià)和分類計(jì)數(shù)的質(zhì)量控制流程

1、精選文檔血涂片評價(jià)和分類計(jì)數(shù)的質(zhì)量控制流程 血涂片評價(jià)血涂片的顯微鏡檢查是血液細(xì)胞學(xué)檢查的基本方法，臨床上應(yīng)用極為廣泛，制備薄適宜，分布均勻，染色良好的血涂片是血液學(xué)檢查的重要基本技術(shù)之一。一、 血涂片制作取末梢血1滴，置載玻片一端，取另一邊緣光滑的推片，放在血滴前面慢慢后移，接觸血滴后稍停。血液即沿推片散開，將推片與載片保持30 45°角，向前平穩(wěn)均勻推動(dòng)推片，載片上便留下一層薄血膜。血涂片制成后，立即在空氣中揮動(dòng)，使其迅速干燥，以免血細(xì)胞變形。血膜干燥后，用鉛筆在血膜的一側(cè)寫上病人姓名或編號。一張良好的血片，厚薄要適宜，頭體尾要明顯，細(xì)胞分布要均勻，膜的邊緣要

2、整齊，并留有一定的空隙。涂片時(shí)血滴愈大，角度愈大，推片速度愈快則血膜愈厚，反之血膜愈薄。太薄的血膜片50%的白細(xì)胞集中于邊緣或尾部，血涂片過厚，細(xì)胞重疊縮小均不利于白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。如果血膜分布不勻，主要是推片不整齊，用力不均勻，載片不清潔所致。 二、血涂片的質(zhì)量控制 1、血膜片的質(zhì)量要求是厚薄均勻適度，低倍鏡下觀察全片，細(xì)胞不重疊，頭尾及兩側(cè)有一定的空隙，血膜頭部有明確的病人標(biāo)志。 2、一些體積較大的特殊細(xì)胞常在血膜的尾部出現(xiàn)，因此蠟筆劃線時(shí)應(yīng)注意保存血膜尾部細(xì)胞，血膜必須充分干燥，否則在染色過程中容易脫落。 3、配制染料須用優(yōu)質(zhì)甲醇，稀釋染液用緩沖液，

3、因?yàn)榫彌_液的pH 對細(xì)胞染色的影響很重要。在偏酸性環(huán)境中正電荷增多，在偏堿性環(huán)境中負(fù)電荷增多，又因?yàn)榧?xì)胞著色對氫離子濃度十分敏感。如果染色偏堿，原是紫紅色的中性顆粒則染成深藍(lán)色，造成識別困難。沖洗須用中性水，雖亦可用自來水（但不能保持穩(wěn)定）。 4、對所用染液應(yīng)進(jìn)行預(yù)染試驗(yàn)，新配制的染液放置一段時(shí)間后其中的美藍(lán)逐漸氧化成天青B ，天青B 對細(xì)胞核的著色效果比美藍(lán)好，因此，瑞氏染液放置時(shí)間越長染色效果越好，臨床上稱之為成熟。判斷染液成熟程度的簡易方法是用正常優(yōu)質(zhì)血片做預(yù)染試驗(yàn)，先用低倍鏡觀察載有染液的血片，認(rèn)為著色滿意后，再按照染色后沖洗順序最后用油鏡鏡檢，

4、這樣不僅可了解染液的成熟程度，而且還可以選擇合適的染色時(shí)間，供臨床標(biāo)本染色時(shí)參考。 5、染液與緩沖液的比例要適當(dāng)，以12為宜。一般說來緩沖液稀釋度愈大，染色時(shí)間愈長，細(xì)胞著色愈勻稱、鮮艷。緩沖液和染液量要充足，否則染液很快蒸發(fā)，染料沉淀于細(xì)胞上，使細(xì)胞深染而無法檢查。細(xì)胞較多較厚的涂片（如紅細(xì)胞增多癥）染液應(yīng)多些。細(xì)胞較少的涂片染液應(yīng)少些。 6、染色時(shí)間與染液濃度、室溫高低、細(xì)胞多少有關(guān)，染液愈淡，室溫越低，細(xì)胞愈多，所需時(shí)間越長，應(yīng)適當(dāng)增加染液濃度，因此必須根據(jù)情況靈活掌握。 7、染色良好的血膜片，外觀呈淺紅色，紅細(xì)胞呈粉紅色，白細(xì)胞核呈暗紫紅色，染色質(zhì)結(jié)構(gòu)能辨

5、，粒細(xì)胞的顆粒呈固有種特異顏色。 四、注意：在日常工作中遇到特殊標(biāo)本，在制片時(shí)就要特殊對待。如：貧血病人、WBC特高疑為白血病人、腹水或胸水。 個(gè)人：由檢驗(yàn)師（士）完成涂片、染色、計(jì)數(shù)、分類。兩差比較：由主管技師計(jì)數(shù)、分類。雙份技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)差評價(jià)法：由檢驗(yàn)師（士）及副主管技師計(jì)數(shù)、分類后比較。質(zhì)評：A級（優(yōu)）：90100分。B級（良）：8089分。C級（中）：7079分。D級（及格）：6069分。E級（不及格）: <60分。 檢驗(yàn)士主管技師副主任技師 質(zhì)控目的：1避免或消除技術(shù)誤差。 2縮小固有誤差。質(zhì)控評價(jià)：1常規(guī)考核標(biāo)準(zhǔn)。2變異

6、百分?jǐn)?shù)評價(jià)。3經(jīng)驗(yàn)控制。分類計(jì)數(shù)的質(zhì)量控制流程 制定血細(xì)胞分析儀血涂片復(fù)檢的標(biāo)準(zhǔn)并加以評價(jià)，建立適合我院的分類計(jì)數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)。 方法：通過對200份臨床標(biāo)本血涂片進(jìn)行顯微鏡檢查，評價(jià)儀器提示結(jié)果與手工分類計(jì)數(shù)的一致性和標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行的可行性。復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)本均需要嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行顯微鏡鏡檢，以免造成漏診、誤診現(xiàn)象，提高血液學(xué)分析質(zhì)量。 白細(xì)胞分類計(jì)數(shù) 一、低倍鏡觀察：選擇細(xì)胞分布均勻、染色好的部位，轉(zhuǎn)油鏡下計(jì)數(shù)100200個(gè)細(xì)胞，求出各種白細(xì)胞所占百分比。包括：中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜酸細(xì)胞、嗜堿細(xì)胞。 二、細(xì)胞分布：頭體部以淋巴細(xì)胞較多，尾

7、部和兩側(cè)以中性粒、單核細(xì)胞較多，片尾部異常大的細(xì)胞較多。一般選擇體尾交界處，細(xì)胞分布均勻的地方按一定方式，有規(guī)律的移動(dòng)視野。 三、發(fā)現(xiàn)幼稚或異常白細(xì)胞，應(yīng)分類報(bào)告，包括在分類百分率中。如遇到不能確認(rèn)的細(xì)胞，應(yīng)另列入分類不明一項(xiàng)，如實(shí)報(bào)告，并保留血片。如發(fā)現(xiàn)有核紅細(xì)胞，應(yīng)報(bào)告分類100個(gè)白細(xì)胞所見有核紅細(xì)胞數(shù)。檢驗(yàn)人員必須能對所有常見白細(xì)胞進(jìn)行分類，并了解大多數(shù)白細(xì)胞的形態(tài)異常，包括先天性和獲得性。參與細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查的檢驗(yàn)人員必須進(jìn)行專業(yè)培訓(xùn)，并具備實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn)。檢驗(yàn)人員的工作態(tài)度、動(dòng)機(jī)和專心程度是關(guān)鍵因素。因?yàn)榘准?xì)胞分類計(jì)數(shù)是一項(xiàng)主觀性很強(qiáng)的工作，影響分類計(jì)數(shù)的因素很多，有檢驗(yàn)人員的態(tài)度、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境條件和工作量等。 四、血涂片考核考核樣本選擇10份樣本。樣本必須包含7種類型白細(xì)胞（中性分葉核粒細(xì)胞、性桿狀核粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、異型淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞）。按照要求，每份樣本制備5張血涂片，按照第節(jié)所述方法染色，統(tǒng)一標(biāo)簽，但檢驗(yàn)人員不知道樣本來源。