最終滅菌注射劑的質(zhì)量控制

1、精選課件 最終滅菌注射劑質(zhì)量控制最終滅菌注射劑質(zhì)量控制 精選課件污染微生物的來源污染微生物的來源內(nèi)源性的影響因素內(nèi)源性的影響因素l空氣凈化系統(tǒng)空氣凈化系統(tǒng)l水水l工藝過程工藝過程l物料物料 外源性的影響因素外源性的影響因素l人員人員 精選課件芽孢是關(guān)鍵控制點(diǎn)芽孢是關(guān)鍵控制點(diǎn)G+G-微生物無處不在微生物無處不在氣源性微生物革蘭氏陽(yáng)性菌較多它氣源性微生物革蘭氏陽(yáng)性菌較多它們可形成芽孢，難以殺滅們可形成芽孢，難以殺滅因此，藥品生產(chǎn)需要因此，藥品生產(chǎn)需要HVAC水源性則革蘭氏陰性菌居多水源性則革蘭氏陰性菌居多不會(huì)生成孢子不會(huì)生成孢子但會(huì)形成細(xì)菌內(nèi)毒素但會(huì)形成細(xì)菌內(nèi)毒素精選課件一、什么是芽孢？當(dāng)某些細(xì)菌

2、遇到不良生存環(huán)境條件時(shí)，為保護(hù)自身，在細(xì)胞內(nèi)形成一外壁厚而堅(jiān)硬的體眠體，該體眠體即稱芽孢（Spore）或孢子。由于其對(duì)不良環(huán)境的耐受性遠(yuǎn)高于生長(zhǎng)態(tài)細(xì)胞，常被用于挑戰(zhàn)滅菌工藝，以確認(rèn)被滅菌物品無菌的可靠性。精選課件芽孢的特性主要產(chǎn)生于Gram+ 細(xì)菌的兩個(gè)屬l芽孢桿菌屬 Bacillusl梭菌屬 Clostridium能抵御各種惡劣環(huán)境，可存活上百萬年，因?yàn)樗黮有厚的皮層結(jié)構(gòu)l僅含核酸及少量萌發(fā)必需物l含水量極低休眠體，內(nèi)生孢子，不可再生（每個(gè)細(xì)胞只產(chǎn)生一個(gè)芽孢）；真菌孢子屬于分生孢子，不具上述特性。精選課件細(xì)菌芽胞（孢）的形成及其特性成熟芽孢孢子壁母細(xì)胞孢子壁的形成生長(zhǎng)態(tài)細(xì)胞精選課件熱對(duì)活細(xì)胞

3、的作用q有一種可引發(fā)克雅氏綜合癥 (Creutzfekldt- Jakob）的普里昴 ( prion）病原體，在132下加 一小時(shí)才可完全殺滅（克雅氏綜合癥：俗稱人體瘋牛?。﹒需氧菌中的芽孢桿菌屬(Bacillus)和厭氧菌中的梭狀芽孢桿菌屬(Clostridium)，耐熱性較強(qiáng)q它們能產(chǎn)生內(nèi)源性孢子/芽孢，或胞間休眠體，對(duì)熱、干燥及化學(xué)消毒劑的耐受性大大增強(qiáng)q這類芽孢的干熱滅菌溫度一般在100 170，濕熱滅菌的溫度則在80 129之間。精選課件從從“欣弗欣弗”事件談滅菌工藝事件談滅菌工藝欣弗事件的發(fā)生欣弗事件的發(fā)生l20062006年年7 7月月l安徽華源l克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液l不良

4、事件報(bào)告81例，涉及10個(gè)省份精選課件欣弗到底怎么了？欣弗到底怎么了？精選課件克林霉素磷酸酯注射劑產(chǎn)品的調(diào)查克林霉素磷酸酯注射劑產(chǎn)品的調(diào)查克林霉素磷酸酯氯化鈉注射克林霉素磷酸酯氯化鈉注射（100ml:0.6g100ml:0.6g）l采用半無菌工藝生產(chǎn)采用半無菌工藝生產(chǎn)l滅菌條件滅菌條件100100、7 7分鐘分鐘l貯存條件貯存條件陰涼陰涼l有效期有效期1 1年年l有些企業(yè)的處方中含有有些企業(yè)的處方中含有苯甲醇苯甲醇l穩(wěn)定性考察穩(wěn)定性考察有一批留樣的有關(guān)物質(zhì)為有一批留樣的有關(guān)物質(zhì)為7.9l有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)總雜不得過總雜不得過8.0 單雜不得過單雜不得過5.0精選課件克林霉素磷酸酯注射劑產(chǎn)品的調(diào)查

5、克林霉素磷酸酯注射劑產(chǎn)品的調(diào)查克林霉素磷酸酯注射液克林霉素磷酸酯注射液（2ml:0.3g2ml:0.3g）l滅菌條件滅菌條件100100、3 31010分鐘分鐘l貯存條件貯存條件遮光、密閉保存遮光、密閉保存l有效期有效期2 2年年l處方中含有苯甲醇處方中含有苯甲醇l有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)總雜不得過總雜不得過6.06.0（20042004年底改年底改為為8.08.0）單雜不得過單雜不得過4.04.0精選課件從上述調(diào)查從上述調(diào)查看國(guó)內(nèi)滅菌注射劑生產(chǎn)的缺陷看國(guó)內(nèi)滅菌注射劑生產(chǎn)的缺陷對(duì)滅菌的認(rèn)識(shí)不正確對(duì)滅菌的認(rèn)識(shí)不正確產(chǎn)品研發(fā)未考慮滅菌產(chǎn)品研發(fā)未考慮滅菌工藝的可行性工藝的可行性忽視工藝的可行性，忽視工藝的可

6、行性，盲目跟風(fēng)報(bào)批盲目跟風(fēng)報(bào)批注射劑用原料藥的雜注射劑用原料藥的雜質(zhì)控制不嚴(yán)質(zhì)控制不嚴(yán)忽視產(chǎn)品的安全性忽視產(chǎn)品的安全性精選課件中國(guó)醫(yī)藥報(bào)中國(guó)醫(yī)藥報(bào) 2007年年1月月4日日 A6版版精選課件無菌藥品常用滅菌工藝的比較無菌藥品常用滅菌工藝的比較類別類別Fo值值微生物存活概率微生物存活概率要點(diǎn)說明要點(diǎn)說明過度過度殺滅法殺滅法Fo1210-6熱穩(wěn)定性產(chǎn)品熱穩(wěn)定性產(chǎn)品以殺滅微生物作為實(shí)現(xiàn)無菌的手段以殺滅微生物作為實(shí)現(xiàn)無菌的手段殘存殘存概率法概率法8Fo710-3不能加熱的產(chǎn)品不能加熱的產(chǎn)品不能除去病毒、支原體等微生物不能除去病毒、支原體等微生物L(fēng)RV=log reduction value 過濾對(duì)數(shù)下

7、降值一過濾對(duì)數(shù)下降值一般上游為般上游為107下游為下游為1，則，則LRV=7由于操作較多，最終產(chǎn)品達(dá)到的無菌保證水由于操作較多，最終產(chǎn)品達(dá)到的無菌保證水平遠(yuǎn)低于除菌過濾的水平平遠(yuǎn)低于除菌過濾的水平精選課件影響濕熱滅菌效果的因素影響濕熱滅菌效果的因素待滅菌產(chǎn)品中含有微生物的種類和數(shù)量待滅菌產(chǎn)品中含有微生物的種類和數(shù)量待滅菌產(chǎn)品的包裝形式待滅菌產(chǎn)品的包裝形式待滅菌產(chǎn)品的裝載方式和裝載數(shù)量待滅菌產(chǎn)品的裝載方式和裝載數(shù)量濕熱滅菌工藝條件濕熱滅菌工藝條件濕熱滅菌設(shè)備濕熱滅菌設(shè)備精選課件無菌保證水平無菌保證水平SAL無菌保證水平無菌保證水平（Sterility Assurance Sterility As

8、surance LevelLevel）l表示物品被滅菌后的無菌狀態(tài)表示物品被滅菌后的無菌狀態(tài)l按國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，濕熱滅菌法的無菌保證值不得低按國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，濕熱滅菌法的無菌保證值不得低于于10-6，即滅菌后微生物存活的概率不得大于，即滅菌后微生物存活的概率不得大于百萬分之一。百萬分之一。精選課件滅菌工藝驗(yàn)證的必要性滅菌工藝驗(yàn)證的必要性滅菌產(chǎn)品的無菌保證不能依賴于最終產(chǎn)品滅菌產(chǎn)品的無菌保證不能依賴于最終產(chǎn)品的無菌檢驗(yàn)，而是取決于生產(chǎn)過程中采用的無菌檢驗(yàn)，而是取決于生產(chǎn)過程中采用合格的滅菌工藝、嚴(yán)格的合格的滅菌工藝、嚴(yán)格的GMPGMP管理和良好管理和良好的無菌保證體系的無菌保證體系滅菌工藝的驗(yàn)證是無菌保證的

9、必要條件滅菌工藝的驗(yàn)證是無菌保證的必要條件滅菌工藝經(jīng)過驗(yàn)證后，方可正式用于生產(chǎn)滅菌工藝經(jīng)過驗(yàn)證后，方可正式用于生產(chǎn)精選課件國(guó)內(nèi)企業(yè)滅菌工藝驗(yàn)證常見缺陷國(guó)內(nèi)企業(yè)滅菌工藝驗(yàn)證常見缺陷無包裝規(guī)格無包裝規(guī)格無裝載方式無裝載方式未對(duì)每一種產(chǎn)品每一種包裝規(guī)格的每一種裝載方未對(duì)每一種產(chǎn)品每一種包裝規(guī)格的每一種裝載方式進(jìn)行驗(yàn)證式進(jìn)行驗(yàn)證采用留點(diǎn)溫度計(jì)監(jiān)測(cè)溫度采用留點(diǎn)溫度計(jì)監(jiān)測(cè)溫度無溫度探頭校準(zhǔn)記錄無溫度探頭校準(zhǔn)記錄驗(yàn)證的滅菌工藝與實(shí)際工藝不一致驗(yàn)證的滅菌工藝與實(shí)際工藝不一致未驗(yàn)證最差滅菌條件未驗(yàn)證最差滅菌條件設(shè)定的驗(yàn)證合格標(biāo)準(zhǔn)達(dá)不到無菌保證水平（設(shè)定的驗(yàn)證合格標(biāo)準(zhǔn)達(dá)不到無菌保證水平（SAL）10-6生物指示劑

10、使用不規(guī)范生物指示劑使用不規(guī)范精選課件滅菌工藝檢查要點(diǎn)滅菌工藝檢查要點(diǎn)生產(chǎn)環(huán)境和待滅菌產(chǎn)品中含有微生物的種類和數(shù)生產(chǎn)環(huán)境和待滅菌產(chǎn)品中含有微生物的種類和數(shù)量研究和監(jiān)控量研究和監(jiān)控待滅菌產(chǎn)品的包裝形式、裝載方式和裝載數(shù)量待滅菌產(chǎn)品的包裝形式、裝載方式和裝載數(shù)量滅菌工藝條件滅菌工藝條件滅菌設(shè)備滅菌設(shè)備l關(guān)鍵控制參數(shù)的控制和記錄儀表的校準(zhǔn)關(guān)鍵控制參數(shù)的控制和記錄儀表的校準(zhǔn)l設(shè)備維護(hù)和維修設(shè)備維護(hù)和維修滅菌的記錄滅菌的記錄滅菌工藝的驗(yàn)證滅菌工藝的驗(yàn)證l選用的生物指示劑選用的生物指示劑l熱分布試驗(yàn)，找出最冷點(diǎn)位置熱分布試驗(yàn)，找出最冷點(diǎn)位置無菌檢驗(yàn)樣品的取樣無菌檢驗(yàn)樣品的取樣精選課件無菌檢查無菌檢查精選課

11、件無菌檢查的局限性無菌檢查的局限性無菌的定義無菌的定義l理論上：無菌沒有任何活的微生物理論上：無菌沒有任何活的微生物l實(shí)際上：我們無法證明產(chǎn)品中沒有活微生物存在實(shí)際上：我們無法證明產(chǎn)品中沒有活微生物存在無法對(duì)整批產(chǎn)品進(jìn)行無法對(duì)整批產(chǎn)品進(jìn)行100%100%檢驗(yàn)檢驗(yàn)l無菌檢驗(yàn)的結(jié)果只是一個(gè)基于無菌檢驗(yàn)的結(jié)果只是一個(gè)基于“可能性可能性”的判斷的判斷無菌檢驗(yàn)用培養(yǎng)基有其局限性無菌檢驗(yàn)用培養(yǎng)基有其局限性l只進(jìn)行細(xì)菌和真菌的檢驗(yàn)只進(jìn)行細(xì)菌和真菌的檢驗(yàn)l對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定是基于對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定是基于“是否在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)是否在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)”l培養(yǎng)條件（如溫度和時(shí)間）是有限的培養(yǎng)條件（如溫度和時(shí)間）是有限的我們的

12、工作環(huán)境及操作是在相對(duì)無菌的狀態(tài)我們的工作環(huán)境及操作是在相對(duì)無菌的狀態(tài)精選課件美國(guó)非腸道藥物學(xué)會(huì)注射劑無菌測(cè)試結(jié)果美國(guó)非腸道藥物學(xué)會(huì)注射劑無菌測(cè)試結(jié)果試驗(yàn)?zāi)康模翰缓细竦目赡苄栽囼?yàn)?zāi)康模翰缓细竦目赡苄?%)試驗(yàn)批量：試驗(yàn)批量：60,000支支試驗(yàn)方法：按美國(guó)藥典無菌測(cè)試方法試驗(yàn)方法：按美國(guó)藥典無菌測(cè)試方法真實(shí)的不合格率真實(shí)的不合格率測(cè)試測(cè)試20支樣品支樣品不合格的可能性不合格的可能性測(cè)試測(cè)試40支樣品支樣品不合格的可能性不合格的可能性118.2%33.1%564.2%87.2%1596.1%99.8%3099.9%100.0%精選課件上述無菌測(cè)試結(jié)果的啟示上述無菌測(cè)試結(jié)果的啟示含有少量微生物污染

13、產(chǎn)含有少量微生物污染產(chǎn)品的批次也有可能品的批次也有可能“通通過過”無菌檢驗(yàn)無菌檢驗(yàn)一批產(chǎn)品的染菌率越低，一批產(chǎn)品的染菌率越低，根據(jù)無菌檢驗(yàn)的結(jié)果來根據(jù)無菌檢驗(yàn)的結(jié)果來判定整批產(chǎn)品的無菌，判定整批產(chǎn)品的無菌，其風(fēng)險(xiǎn)就越大其風(fēng)險(xiǎn)就越大精選課件如何用無菌檢驗(yàn)來證明整批產(chǎn)品無菌如何用無菌檢驗(yàn)來證明整批產(chǎn)品無菌要求有一個(gè)取樣計(jì)要求有一個(gè)取樣計(jì)劃來涵蓋整個(gè)批號(hào)劃來涵蓋整個(gè)批號(hào)有足夠的取樣量和有足夠的取樣量和檢驗(yàn)量檢驗(yàn)量選擇適用的培養(yǎng)基選擇適用的培養(yǎng)基采用經(jīng)驗(yàn)證的無菌采用經(jīng)驗(yàn)證的無菌檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)方法良好的環(huán)境監(jiān)控良好的環(huán)境監(jiān)控精選課件檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)制定依據(jù)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)制定依據(jù)2003驗(yàn)證指南驗(yàn)證指南 QC-751E注

14、射劑藥液過濾前含菌量測(cè)定注射劑藥液過濾前含菌量測(cè)定M-00 061A 注射劑滅菌前藥液污染水注射劑滅菌前藥液污染水平及耐熱性檢查平及耐熱性檢查精選課件大容量注射劑舉例大容量注射劑舉例滅菌前藥液的含微生物的計(jì)算過程：滅菌前藥液的含微生物的計(jì)算過程：根據(jù)根據(jù)2003版藥品上產(chǎn)驗(yàn)證指南版藥品上產(chǎn)驗(yàn)證指南 lgP=lgN-F0/D121P:滅菌后產(chǎn)品內(nèi)微生物存活概率滅菌后產(chǎn)品內(nèi)微生物存活概率 N:滅菌前藥液的含耐熱孢子的量滅菌前藥液的含耐熱孢子的量 D121:微生物耐熱參數(shù)，系指一定溫度下將微生物殺微生物耐熱參數(shù)，系指一定溫度下將微生物殺滅滅90%或使之下降一個(gè)對(duì)數(shù)單位所需的時(shí)間（分）或使之下降一個(gè)對(duì)

15、數(shù)單位所需的時(shí)間（分）lgN = lgP+F0/D121= lgP+FT/DT(N值與值與FT成成正比，與正比，與DT成反比成反比)該產(chǎn)品（葡萄糖）采用該產(chǎn)品（葡萄糖）采用115滅菌滅菌32min,產(chǎn)品滅菌的產(chǎn)品滅菌的F08,為更嚴(yán)格的控制滅菌前產(chǎn)品的生物負(fù)載，為更嚴(yán)格的控制滅菌前產(chǎn)品的生物負(fù)載，F(xiàn)0取取8計(jì)算。計(jì)算。精選課件大容量注射劑舉例大容量注射劑舉例DT與生產(chǎn)環(huán)境，以及過濾截留得到的微生與生產(chǎn)環(huán)境，以及過濾截留得到的微生物有關(guān)，需要確認(rèn)污染微生物的耐熱性，物有關(guān)，需要確認(rèn)污染微生物的耐熱性，在未檢測(cè)到耐熱微生物時(shí)，在未檢測(cè)到耐熱微生物時(shí)，DT通常按通常按1計(jì)算。為更嚴(yán)格的控制滅菌前產(chǎn)品

16、的生物計(jì)算。為更嚴(yán)格的控制滅菌前產(chǎn)品的生物負(fù)載，負(fù)載， 取取DT 為為1計(jì)算。計(jì)算。lgN =lg10-6 +8/1 N=100CFU/袋（產(chǎn)品規(guī)格為袋（產(chǎn)品規(guī)格為250ml）N=40CFU/100ml精選課件檢測(cè)重點(diǎn)檢測(cè)重點(diǎn)污染水平污染水平微生物耐熱性微生物耐熱性精選課件取樣取樣 滅菌前藥液直接取樣，每個(gè)樣品取樣大滅菌前藥液直接取樣，每個(gè)樣品取樣大容量注射劑（兩個(gè)最小包裝，最少各容量注射劑（兩個(gè)最小包裝，最少各 100mL）。小容量注射劑兩份，最少）。小容量注射劑兩份，最少各各100mL。滅菌后取樣大容量注射劑各約滅菌后取樣大容量注射劑各約50mL。精選課件檢測(cè)方法檢測(cè)方法污染水平檢查污染水平檢查l先用滅菌的含先用滅菌的含5吐溫吐溫80的的pH7.0氯氯化鈉蛋白胨潤(rùn)濕化鈉蛋白胨潤(rùn)濕0.45m濾膜，然后過濾膜，然后過濾濾100mL滅菌前藥液，有抑菌性的藥滅菌前藥液，有抑菌性的藥液需用已驗(yàn)證量的緩沖液沖洗濾膜，以液需用已驗(yàn)證量的緩沖液沖洗濾膜，以消除藥液的抑菌性），再以無菌方式將消除藥液的抑菌性），再以無菌方式將濾膜菌面朝上貼于準(zhǔn)備好的胰酪胨大豆濾膜菌面朝上貼于準(zhǔn)備好的胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基（瓊脂培養(yǎng)基（TSA）上，同時(shí)做）上，同時(shí)做1個(gè)陰個(gè)陰性對(duì)照。胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基在性對(duì)照。胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)