注射用水細(xì)菌內(nèi)毒素分析方法確認(rèn)方案

1、編號：YZ-VP-2020-00 注射用水細(xì)菌內(nèi)毒素分析方法確認(rèn)方案 第 7 頁 共 7 頁 注射用水細(xì)菌內(nèi)毒素分析方法確認(rèn)方案文件編號：YZ-VP-2020-00 方案起草 日期 方案審核 日期 方案批準(zhǔn) 日期 藥業(yè)有限公司目 錄1. 概述32. 確認(rèn)目的33. 適用范圍34. 確認(rèn)小組成員及職責(zé)35. 風(fēng)險(xiǎn)評估36. 確認(rèn)方案編制依據(jù)47. 確認(rèn)內(nèi)容47.1 確認(rèn)人員培訓(xùn)47.2 確認(rèn)前準(zhǔn)備工作47.3 確認(rèn)所需儀器47.4 確認(rèn)所需試劑47.5 確認(rèn)所需供試品57.6 試驗(yàn)過程58. 偏差處理69. 確認(rèn)結(jié)果評定與結(jié)論610. 再驗(yàn)證周期711. 確認(rèn)進(jìn)度安排712. 附件713. 變更

2、歷史71. 概述：依據(jù)細(xì)菌內(nèi)毒素分析方法確認(rèn)的試驗(yàn)原理，采用本公司注射用水進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素分析方法確認(rèn)，得到其無干擾濃度。本方案中細(xì)菌內(nèi)毒素的量用內(nèi)毒素單位（EU）表示。2. 確認(rèn)目的：為了確保注射用水細(xì)菌內(nèi)毒素分析方法的可靠性，需在實(shí)際檢驗(yàn)條件下，確認(rèn)其對細(xì)菌內(nèi)毒素檢查試驗(yàn)有無干擾作用，以確認(rèn)所采用的方法適合于注射用水的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查。3. 適用范圍：適用于注射用水細(xì)菌內(nèi)毒素分析方法的確認(rèn)。4. 確認(rèn)小組成員及職責(zé)：姓名工作部門或職務(wù)職責(zé)質(zhì)量管理負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)方案及報(bào)告的批準(zhǔn)質(zhì)量保證負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)跟蹤方案的實(shí)施質(zhì)量控制負(fù)責(zé)人小組組長；負(fù)責(zé)方案的組織協(xié)調(diào)工作；負(fù)責(zé)各階段確認(rèn)結(jié)果匯總及評價(jià)；負(fù)責(zé)小組成員的

3、培訓(xùn)及培訓(xùn)效果的評價(jià)質(zhì)量控制負(fù)責(zé)方案及報(bào)告的起草，并按照批準(zhǔn)后的方案進(jìn)行方法確認(rèn)，并完成所有數(shù)據(jù)分析及試驗(yàn)記錄質(zhì)量控制負(fù)責(zé)供試品的取樣5. 風(fēng)險(xiǎn)評估：確認(rèn)小組成員對注射用水細(xì)菌內(nèi)毒素分析方法確認(rèn)方案進(jìn)行了風(fēng)險(xiǎn)評估分析，并制定了相應(yīng)的控制措施以最大限度地降低風(fēng)險(xiǎn)。具體情況見下表：風(fēng)險(xiǎn)識別風(fēng)險(xiǎn)分析評估SPDRPN風(fēng)險(xiǎn)級別控制措施分析方法驗(yàn)證活動的立項(xiàng)管理方法驗(yàn)證沒有按照公司驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)管理規(guī)程的要求進(jìn)行立項(xiàng)44464高級對分析方法驗(yàn)證活動進(jìn)行立項(xiàng)，并開展驗(yàn)證分析方法驗(yàn)證方案管理分析方法驗(yàn)證活動無方案，或方案沒有審核、審批過程34448高級由驗(yàn)證小組驗(yàn)證方案，并對驗(yàn)證方案進(jìn)行審核和批準(zhǔn)人員人員培訓(xùn)不到位

4、操作不符合要求32212中級加強(qiáng)培訓(xùn)考核，確保操作符合要求人流、物流交叉交叉污染45120中級人流、物流通道分開確認(rèn)所需儀器儀器沒有校準(zhǔn)或驗(yàn)證42324中級確認(rèn)所需儀器必須經(jīng)過校驗(yàn)或驗(yàn)證環(huán)境及空氣潔凈度級別不符合要求影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果55125中級安裝空氣凈化系統(tǒng)及檢測裝置6. 確認(rèn)方案編制依據(jù)：中國藥典2015年版四部。7. 確認(rèn)內(nèi)容：7.1 確認(rèn)人員培訓(xùn)：參加確認(rèn)人員經(jīng)過確認(rèn)方案、相關(guān)操作規(guī)程及偏差處理管理規(guī)程的培訓(xùn)，培訓(xùn)合格后方可參與確認(rèn)。見人員培訓(xùn)記錄。7.2 確認(rèn)前準(zhǔn)備工作7.2.1 進(jìn)行確認(rèn)前，所有與確認(rèn)有關(guān)的儀器應(yīng)進(jìn)行過校驗(yàn)，儀表、計(jì)量器具等應(yīng)校正合格。見確認(rèn)所需儀器、儀表、量具清單及

5、校正情況。7.2.2 進(jìn)行確認(rèn)前，檢查設(shè)備及儀器操作、維護(hù)等文件，確認(rèn)所需的相關(guān)文件齊全，并經(jīng)過批準(zhǔn)。見確認(rèn)所需文件。7.3 確認(rèn)所需儀器：序號儀器名稱型號編號有效期至1電熱鼓風(fēng)干燥箱2潔凈工作臺3旋渦混合器4內(nèi)毒素凝膠法測定儀7.4 驗(yàn)證所需試劑：序號名稱生產(chǎn)廠家批號規(guī)格配制批號1細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品2鱟試劑3細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水-575酒精7.5 驗(yàn)證所需供試品：序號名稱來源數(shù)量1注射用水2注射用水3注射用水7.6 試驗(yàn)過程：應(yīng)進(jìn)行3次獨(dú)立的平行試驗(yàn)。7.6.1 試驗(yàn)準(zhǔn)備：玻璃器皿用自來水徹底洗凈，再用純化水反復(fù)沖洗三遍以上，控干后用錫箔紙包好后放入金屬容器內(nèi)，放置入電熱鼓風(fēng)干燥箱。將電熱鼓

6、風(fēng)干燥箱調(diào)至250，待電熱鼓風(fēng)干燥箱溫度升至設(shè)定的溫度后開始計(jì)時(shí)，干烤至少半小時(shí)。達(dá)到規(guī)定時(shí)間后，關(guān)斷電源，待電熱鼓風(fēng)干燥箱溫度自然降至室溫。玻璃器皿用錫箔紙包裝，在不打開包裝的情況下，可在兩周內(nèi)使用。否則須再次干烤除去可能存在的外源性內(nèi)毒素。7.6.2 鱟試劑靈敏度復(fù)核：詳見鱟試劑靈敏度復(fù)核操作規(guī)程。7.6.3 干擾實(shí)驗(yàn)：目的是檢驗(yàn)在某一濃度下的供試品對于鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)有無干擾作用。使用的供試品溶液應(yīng)為未檢驗(yàn)出內(nèi)毒素切不超過所使用的鱟試劑的最大有效稀釋倍數(shù)的溶液。7.6.3.1 制備內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)對照溶液取細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品一支，輕彈瓶壁，使粉末落入瓶底，然后用砂輪在瓶頸上部輕輕劃痕，用7

7、5酒精棉球擦似乎后啟開，啟開過程中應(yīng)防止玻璃屑落入瓶內(nèi)。按照標(biāo)準(zhǔn)品說明書，加入規(guī)定量的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水溶解其內(nèi)容物，用封口膜將瓶口封嚴(yán)，置漩渦混合器上混合15分鐘。然后進(jìn)行稀釋，制備成4個(gè)濃度的細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液，即2、0.5、0.25（為所復(fù)核的鱟試劑對的標(biāo)示靈敏度），每稀釋一步均應(yīng)在漩渦混合器上混合30秒鐘。7.6.3.2 制備含內(nèi)毒素的供試品溶液：根據(jù)公式MVD=cL/，確定注射用水的最大有效稀釋倍數(shù)MVD=1，將注射用水稀釋一倍后將細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品稀釋成4個(gè)濃度即為2、0.5、0.25，即得含內(nèi)毒素的供試品溶液。7.6.3.3 鱟試劑的準(zhǔn)備：取規(guī)格為0.1ml/支的鱟試劑，用細(xì)菌

8、內(nèi)毒素檢查用水溶解，在旋渦混合器上混勻15分鐘，然后制成2、0.5、0.25四個(gè)濃度的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液，每稀釋一步均應(yīng)在旋渦混合器上混勻30秒。7.6.3.4 合格標(biāo)準(zhǔn)：兩c在0.5-2.0范圍內(nèi)，且Et均在0.5Es-2.0Es范圍內(nèi)，說明該供試品濃度稀釋至0.02mg/ml確已排除干擾作用，在低于或等于此濃度的情況下即可使用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法。見干擾試驗(yàn)檢驗(yàn)記錄。7.6.4 供試品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查：7.6.4.1 在細(xì)菌內(nèi)毒素檢查中，按下表制備試驗(yàn)溶液，每批供試品必須做2支供試品管和2支供試品陽性對照，同時(shí)每次試驗(yàn)必須做2支陽性對照和2支陰性對照。編號內(nèi)毒素濃度/被加入內(nèi)毒素的溶液平行管數(shù)A無/

9、供試品溶液2B2/供試品溶液2C2/檢查用水2D無/檢查用水27.6.4.2 合格標(biāo)準(zhǔn)：保溫60min2min后觀察結(jié)果。若陰性對照溶液D的平行管均為陰性，陽性對照溶液B的平行管均為陽性，陽性對照溶液C的平行管均為陽性，試驗(yàn)有效。若溶液A的兩個(gè)平行管均為陰性，判定供試品符合規(guī)定。若溶液A的兩個(gè)平行管均為陽性，判定供試品不符合規(guī)定。若溶液A的兩個(gè)平行管中的一管為陽性，另一管為陰性，需進(jìn)行復(fù)試。復(fù)試時(shí)，溶液A需做4支平行管，若所有平行管均為陰性，判定供試品瓿符合規(guī)定，否則判定供試品不符合規(guī)定。若供試品的稀釋倍數(shù)小于MVD而溶液A出現(xiàn)不符合規(guī)定時(shí)，需將供試品稀釋MVD重新實(shí)驗(yàn)，再對結(jié)果進(jìn)行判斷。見細(xì)菌內(nèi)毒素檢驗(yàn)記錄。8. 偏差處理：在確認(rèn)過程中應(yīng)嚴(yán)格按照方案執(zhí)行，發(fā)現(xiàn)任何異常情況，應(yīng)分析查明偏差原因后制定糾正預(yù)防措施，重新進(jìn)行確認(rèn)。見偏差記錄。9. 確認(rèn)結(jié)果評定與結(jié)論：確認(rèn)小組根據(jù)確認(rèn)結(jié)果起草確認(rèn)報(bào)告，并報(bào)確認(rèn)與驗(yàn)證領(lǐng)導(dǎo)小組審批。確認(rèn)與驗(yàn)證領(lǐng)導(dǎo)小組對確認(rèn)結(jié)果進(jìn)行綜合評審，并作出結(jié)論，確認(rèn)合格后發(fā)放合格證書。10. 再驗(yàn)證周期：若產(chǎn)品的分