國產(chǎn)卵磷脂輔料對脂肪乳制劑的質(zhì)量研究 王汝濤（西安） 脂肪乳注射液是

1、國產(chǎn)卵磷脂輔料對脂肪乳制劑的質(zhì)量研究王汝濤西安脂肪乳注射液是一種胃腸外能量補(bǔ)給劑, 是臨床患者必需脂肪酸和能量的補(bǔ)充來源1,2。脂肪乳制劑藥劑學(xué)屬非均勻分散的液體制劑3, 主要由精制大豆油，精制蛋黃卵磷脂與注射用水經(jīng)乳化制成,其中精制蛋黃卵磷脂作為脂肪乳制劑的乳化劑對乳劑的質(zhì)量起到?jīng)Q定性的作用，目前國內(nèi)脂肪乳廠家使用的精制蛋黃卵磷脂大多為進(jìn)口產(chǎn)品。由于進(jìn)口產(chǎn)品的價(jià)格較高，因此直接導(dǎo)致了產(chǎn)品的生產(chǎn)本錢和銷售價(jià)格的提高。在一定程度上限制了其推廣使用。本實(shí)驗(yàn)采用最新國內(nèi)精制的蛋黃卵磷脂作為乳化劑，制備了的脂肪乳制劑，同時(shí)與進(jìn)口磷脂制備的制劑進(jìn)行了比照性研究，期待為國產(chǎn)卵磷脂在藥物制劑生產(chǎn)中的廣泛使用

2、提供依據(jù)。1. 材料與方法1.1儀器 Emulsi Flex-C5高壓乳勻機(jī)(加拿大Avestin公司),Waters HPLC系統(tǒng)，PSS NICOMP 380粒徑測定系統(tǒng)(Santa Barbara ,Calif,USA.)，100 DIOL 250 * 色譜拄Merck LiChrospher,紫外可見分光光度計(jì)Backman;Labconco Stoppering Tray Dryer 冷凍枯燥機(jī)。國產(chǎn)精制蛋黃卵磷脂西安力邦制藥產(chǎn)品、進(jìn)口精制蛋黃卵磷脂德國Lipoid公司產(chǎn)品， 油酸對照品Sigma，含量99%、溶血磷脂對照品Sigma，含量99%、生化用棕櫚酸Sigma，含量99%、

3、鱟試劑和鱟試劑檢查用水湛江安度斯生物產(chǎn)，大豆油、甘油和維生素E等其它試劑為色譜純、分析純或化學(xué)純。1.3實(shí)驗(yàn)方法 制備以國產(chǎn)及進(jìn)口精制蛋黃卵磷脂為乳化劑的脂肪乳制劑樣品 國產(chǎn)及進(jìn)口蛋黃卵磷脂，加熱攪拌約10-20min混勻。 另取注射用水700ml，參加甘油22.0g。在氮?dú)獗Ｗo(hù)和攪拌條件下，將精制蛋黃卵磷脂油溶液參加甘油水溶液中，調(diào)節(jié)總量至1000ml。經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)78次，均質(zhì)壓力為100MPa，至粒徑范圍在180nm300nm，調(diào)節(jié)pH 6.08.5，過濾，分裝，通入氮?dú)?，密封?15滅菌30min，燈檢合格后，包裝。國產(chǎn)精制蛋黃卵磷脂為乳化劑制備的脂肪乳制劑的質(zhì)量評價(jià)pH值及乳粒大小

4、分布的測定參照中國藥典方法4。乳粒大小分布的測定用PSS NICOMP 380粒徑測定系統(tǒng)µl脂肪乳樣品置測樣杯加空白介質(zhì)至10ml，搖勻后計(jì)數(shù)其中>1和> 5µµm的乳?？倲?shù)中，大于1 µm的乳粒數(shù)不得超過3%并不得有大于5µm的乳粒5。 另依據(jù)2005版中國藥典方法，使用HPLC測定脂肪乳注射劑樣品中游離脂肪酸、甘油三酯含量。同時(shí)用正向液相色譜法，采用二醇柱梯度洗脫和光散射檢測器測定溶血磷脂含量。使用硫代硫酸鈉液滴定法進(jìn)行過氧化值測定，用紫外分光光度法測定氧基苯胺含量4。 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查 試驗(yàn)前先對購得的鱟試劑進(jìn)行靈敏度復(fù)核。參

5、照中國藥典細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法4，用一定靈敏度的鱟試劑與樣品中的細(xì)菌內(nèi)毒素發(fā)生反響形成凝膠，以判斷檢品中的細(xì)菌內(nèi)毒素是否超限。然后各取樣品原液用鱟試劑檢查用水稀釋，進(jìn)行干擾試驗(yàn)，證實(shí)對鱟試劑無抑制和增強(qiáng)作用后再檢查脂肪乳樣品的內(nèi)毒素，每毫升含內(nèi)毒素不得超0.5EU。國產(chǎn)精制蛋黃卵磷脂制備的脂肪乳制劑的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)兩種脂肪乳樣品在10, 20 , 40條件下經(jīng)0，3,6,12,18個(gè)月貯藏，分別參照中國藥典方法測定pH值和游離脂肪酸濃度4，同時(shí)記錄樣品的外觀變化。2.1 國產(chǎn)精制蛋黃卵磷脂制備的脂肪乳制劑的質(zhì)量評價(jià)結(jié)果國產(chǎn)及進(jìn)口精制蛋黃卵磷脂制備的脂肪乳制劑外觀均為白色乳狀液。實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步比照兩制劑樣品

6、的pH 值、乳粒大小和分布、甘油三酯及游離脂肪酸含量等質(zhì)量參數(shù)，發(fā)現(xiàn)其均符合藥典規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)且無顯著的質(zhì)量差異，見表1。表1 對國產(chǎn)精制蛋黃卵磷脂制備的脂肪乳制劑的質(zhì)量評價(jià)結(jié)果n=3, sTable 1 Result of pharmaceutical evaluation of fat emulsion injections preparation by domestic lecithin 分組 pH值 乳粒% 游離脂肪酸 甘油三酯 >1µm >5µm mmol·L-1 (mg·ml-1)國產(chǎn)組*±±0.09 

7、7;±* p>0.05 vs進(jìn)口組.2.2 國產(chǎn)精制蛋黃卵磷脂制備的脂肪乳制劑中溶血磷脂、過氧化值、甲氧基苯胺及內(nèi)毒素含量的測定結(jié)果實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步比照國產(chǎn)及進(jìn)口精制卵磷脂制備的脂肪乳制劑中溶血磷脂、甲氧基苯胺的含量及過氧化值水平，發(fā)現(xiàn)國產(chǎn)蛋黃卵磷脂制備的脂肪乳制劑與采用進(jìn)口卵磷脂制備的脂肪乳制劑未見差異且均符合藥典規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，見表2。表2 對國產(chǎn)蛋黃卵磷脂制備的脂肪乳制劑中溶血磷脂、過氧化值及甲氧基苯胺含量的測定結(jié)果n=3, sTable 2 The concentration of lysophosphatide, peroxide and anisidine in fat

8、emulsion injections preparation by domestic lecithin 分組 溶血磷脂 過氧化值 甲氧基苯胺 mg·ml-1 mmol·L-1 mg·ml-1 國產(chǎn)乳化劑組 ±±±0.15 * * * * p>0.05 vs進(jìn)口組.2.3 國產(chǎn)蛋黃卵磷脂制備的脂肪乳制劑中內(nèi)毒素水平的測定結(jié)果按中國藥典細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法，用鱟試劑法檢測檢品中的細(xì)菌內(nèi)毒素是否超限。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示利用國產(chǎn)及進(jìn)口卵磷脂制備的脂肪乳制劑樣品中，每毫升含內(nèi)毒素均小于0.3EU,兩種制劑都完全符合中國藥典規(guī)定的質(zhì)量要求。 國產(chǎn)蛋

9、黃卵磷脂制備的脂肪乳制劑的穩(wěn)定性研究結(jié)果兩種脂肪乳樣品在10, 20 , 40條件下經(jīng)0，3,6,12,18個(gè)月貯藏，分別測定pH值和游離脂肪酸濃度，結(jié)果見表3。從中可以看出，隨貯藏溫度和貯藏時(shí)間的變化，對pH及游離脂肪酸兩個(gè)項(xiàng)均有影響。結(jié)果中發(fā)現(xiàn)采用國產(chǎn)及進(jìn)口蛋黃卵磷脂為乳化劑制備脂肪乳制劑在放置12個(gè)月后其pH值和游離脂肪酸濃度變化略低于制備初期的樣品。但相同貯存時(shí)間及溫度條件下的兩種樣品的pH及游離脂肪酸濃度的變化趨勢相同，說明兩種制劑的質(zhì)量穩(wěn)定性沒有差異。表3利用國產(chǎn)精制蛋黃卵磷脂制備的脂肪乳制劑的穩(wěn)定性評價(jià)結(jié)果n=3Table 3 Result of stability evalua

10、tion of fat emulsion injections preparation by domestic lecithin 分組 溫度 10 20 40 時(shí)間月 0 3 6 12 18 3 6 12 18 3 6 12 18 pH 8.2 8.2 8.1 7.9 7.9 8.2 8.1 7.8 7.7 7.7 7.4 7.0 6.6 國產(chǎn)組 游離脂肪酸(mmol·L-1) pH進(jìn)口組(mmol·L-1)3. 討論脂肪乳用作腸外營養(yǎng)已有40多年的歷史，其確切的臨床營養(yǎng)效果已為國內(nèi)外臨床應(yīng)用所證實(shí) 1,2。脂肪乳具有許多獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)，首先其平安性好，不含熱原，無抗原, 不溶

11、血, 經(jīng)靜脈輸注可用于手術(shù)前后，消化道疾患吸收障礙及各種不能進(jìn)食的病人, 以補(bǔ)充脂肪營養(yǎng), 提供能量。其次由于其原料易得，生產(chǎn)工藝簡單，對生產(chǎn)設(shè)備要求不高，制劑本身能夠耐受高壓蒸汽滅菌，并且可以使用現(xiàn)有的生產(chǎn)線進(jìn)行工業(yè)化大生產(chǎn)，所以生產(chǎn)本錢較低。另外其作為新型的遞藥系統(tǒng)近年來也越來越多的應(yīng)用于新劑型的開發(fā)中，因此脂肪乳制劑的應(yīng)用前景十分廣闊。作為脂肪乳制劑的乳化劑，目前制劑生產(chǎn)中最常用的是精制蛋黃卵磷脂。由于它本身即為體內(nèi)生物膜的組成成分因此對于人體無毒性，更重要的是由于其乳化效果好，所以在脂肪乳制劑中廣泛使用6。但是目前國內(nèi)制藥企業(yè)普遍采用進(jìn)口產(chǎn)品，由于進(jìn)口產(chǎn)品價(jià)格較高，提高了制劑的生產(chǎn)本錢

12、，所以不利于脂肪乳制劑的推廣和普及。如今國內(nèi)廠家生產(chǎn)和精致蛋黃卵磷脂的工藝已成熟。但由于成品生產(chǎn)時(shí)間較短，生產(chǎn)規(guī)模小，且制劑質(zhì)量還需要進(jìn)一步的驗(yàn)證。因此還未在國內(nèi)制劑廠家中推廣使用，所以其制劑的理化性質(zhì)、平安性和穩(wěn)定性都急需要進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究來確認(rèn)。本研究同時(shí)采用國產(chǎn)及進(jìn)口精致蛋黃卵磷脂制備了脂肪乳制劑。并且通過系列實(shí)驗(yàn)研究證明了兩種制劑在產(chǎn)品質(zhì)量、平安性及制劑穩(wěn)定性等方面沒有差異，完全到達(dá)藥典規(guī)定的質(zhì)量要求。鑒于目前卵磷脂在藥物制劑工業(yè)中應(yīng)用十分廣泛，因此對國產(chǎn)卵磷脂制劑的質(zhì)量評價(jià)具有更加深遠(yuǎn)的意義。參考文獻(xiàn)1 朱維銘.脂肪乳的進(jìn)展.江蘇臨床醫(yī)學(xué)雜志，2002，62：100-1032 陳亭苑.靜脈脂肪乳劑的應(yīng)用