骨代謝異常生物化學(xué)診療

1、骨代謝異常生物化學(xué)診療2教學(xué)目標(biāo)與要求教學(xué)目標(biāo)與要求1. 掌握掌握鈣、磷、鎂代謝異常與代謝性骨病的關(guān)系鈣、磷、鎂代謝異常與代謝性骨病的關(guān)系骨礦物質(zhì)的激素調(diào)節(jié)與代謝性骨病的關(guān)系骨礦物質(zhì)的激素調(diào)節(jié)與代謝性骨病的關(guān)系血清鈣、磷和鎂的檢測(cè)方法血清鈣、磷和鎂的檢測(cè)方法 骨鈣素、骨性堿性磷酸酶、骨鈣素、骨性堿性磷酸酶、型膠原前肽和型膠原前肽和型膠原交型膠原交聯(lián)降解產(chǎn)物在代謝性骨病診斷中的意義聯(lián)降解產(chǎn)物在代謝性骨病診斷中的意義 32. 熟悉熟悉骨組織的基本組成、成骨作用與鈣化、溶骨作用與脫鈣骨組織的基本組成、成骨作用與鈣化、溶骨作用與脫鈣甲狀旁腺素、降鈣素和甲狀旁腺素、降鈣素和1,25-(OH)2D3的主要

2、生理作用的主要生理作用 PTH、CT、維生素、維生素D的常用測(cè)定方法的常用測(cè)定方法 3. 了解了解PTH、CT及及1,25-(OH)2D3的合成與分泌及其調(diào)節(jié)的合成與分泌及其調(diào)節(jié)骨形成和吸收標(biāo)志物的測(cè)定方法骨形成和吸收標(biāo)志物的測(cè)定方法教學(xué)目標(biāo)與要求教學(xué)目標(biāo)與要求4骨組織組成骨組織組成 5 骨組織與體內(nèi)鈣、磷代謝密切相關(guān)。由于多種原因引起骨組骨組織與體內(nèi)鈣、磷代謝密切相關(guān)。由于多種原因引起骨組織中鈣、磷等礦物質(zhì)、成骨細(xì)胞和織中鈣、磷等礦物質(zhì)、成骨細(xì)胞和/或破骨細(xì)胞功能異常，造成或破骨細(xì)胞功能異常，造成骨基質(zhì)、骨細(xì)胞代謝紊亂，使骨組織處于異常的疾病狀態(tài)，總骨基質(zhì)、骨細(xì)胞代謝紊亂，使骨組織處于異常的

3、疾病狀態(tài)，總稱為骨代謝疾?。ó惓＃ㄘE病、骨軟化病、骨質(zhì)疏松稱為骨代謝疾?。ó惓＃ㄘE病、骨軟化病、骨質(zhì)疏松癥等。癥等。骨代謝異常（疾?。┕谴x異常（疾?。?目目錄錄 鈣磷鎂代謝異常與代謝性骨病鈣磷鎂代謝異常與代謝性骨病1激素調(diào)節(jié)與代謝性骨病激素調(diào)節(jié)與代謝性骨病2血清鈣磷鎂的測(cè)定血清鈣磷鎂的測(cè)定3骨代謝異常的生物化學(xué)測(cè)定骨代謝異常的生物化學(xué)測(cè)定4小結(jié)與展望小結(jié)與展望5返回總目錄返回總目錄7第一節(jié)第一節(jié)鈣磷鎂代謝異常與代謝性骨病鈣磷鎂代謝異常與代謝性骨病 81. 血鈣血鈣 鈣被稱為鈣被稱為 “生命金屬生命金屬”，占人體體重的，占人體體重的1.5%2.0%，其中，其中99%存在于骨骼和

4、牙齒中。存在于骨骼和牙齒中。 血漿中的鈣約占機(jī)體總鈣的血漿中的鈣約占機(jī)體總鈣的0.1%，稱為血鈣。，稱為血鈣。一、鈣代謝異常一、鈣代謝異常（一）血鈣與骨代謝（一）血鈣與骨代謝9血鈣血鈣離子鈣（游離鈣）（約離子鈣（游離鈣）（約50）結(jié)合鈣（約結(jié)合鈣（約50）與清蛋白結(jié)合與清蛋白結(jié)合（大部分）（大部分）與檸檬酸等結(jié)合與檸檬酸等結(jié)合（小部分）（小部分）可擴(kuò)散鈣可擴(kuò)散鈣不可擴(kuò)散鈣不可擴(kuò)散鈣血鈣存在形式血鈣存在形式10人體鈣分布人體鈣分布112. 成骨作用（成骨作用（osteogenesis） 骨的生長、修復(fù)或重建過程骨的生長、修復(fù)或重建過程 鈣化（鈣化（calcification） 成骨過程中，成骨細(xì)

5、胞合成和分泌膠原和蛋白多糖等細(xì)胞成骨過程中，成骨細(xì)胞合成和分泌膠原和蛋白多糖等細(xì)胞間質(zhì)成分，形成間質(zhì)成分，形成“類骨質(zhì)類骨質(zhì)”，繼后將鈣、磷吸收到纖維的孔隙中，繼后將鈣、磷吸收到纖維的孔隙中進(jìn)行沉淀結(jié)晶的過程進(jìn)行沉淀結(jié)晶的過程 12影響成骨作用（鈣化）的主要因素影響成骨作用（鈣化）的主要因素 血液及骨組織微環(huán)境中的血液及骨組織微環(huán)境中的CaP濃度乘積濃度乘積正常血中存在的焦磷酸鹽等抑制骨鈣化正常血中存在的焦磷酸鹽等抑制骨鈣化 基質(zhì)中的骨連接素促進(jìn)羥磷石結(jié)晶的形成并規(guī)律排列基質(zhì)中的骨連接素促進(jìn)羥磷石結(jié)晶的形成并規(guī)律排列膠原纖維的成熟和類骨質(zhì)的正常是骨鹽沉積的基礎(chǔ)膠原纖維的成熟和類骨質(zhì)的正常是骨鹽

6、沉積的基礎(chǔ)骨形態(tài)發(fā)生蛋白（骨形態(tài)發(fā)生蛋白（ BMPs）與骨的生成相關(guān)）與骨的生成相關(guān) 133. 溶骨作用（溶骨作用（osteolysis ） 骨的溶解和消失骨的溶解和消失 ，包括基質(zhì)的水解和骨鹽的溶解，主要，包括基質(zhì)的水解和骨鹽的溶解，主要由破骨細(xì)胞引起由破骨細(xì)胞引起 。 又稱：骨吸收（又稱：骨吸收（bone resorption） 脫鈣（脫鈣（decalcification）14（二）常見鈣代謝異常（二）常見鈣代謝異常1高鈣血癥高鈣血癥 （hypercalcemia）概概 念：血鈣濃度超過念：血鈣濃度超過2.75 mmol/L常見表現(xiàn)：惡心、嘔吐、便秘、嗜睡、神志不清等常見表現(xiàn)：惡心、嘔吐、

7、便秘、嗜睡、神志不清等 病程長時(shí)可發(fā)生組織內(nèi)鈣沉積病程長時(shí)可發(fā)生組織內(nèi)鈣沉積15常見病因：常見病因： 原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn) 甲狀旁腺素異位分泌甲狀旁腺素異位分泌 惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移 維生素維生素D中毒中毒 其它疾病其它疾病超過超過9090162低鈣血癥低鈣血癥 （hypocalcemia ）概概 念：血鈣濃度低于念：血鈣濃度低于2.25 mmol/L 常見表現(xiàn)：手足抽搐、肌痙攣、喉鳴、驚厥等常見表現(xiàn)：手足抽搐、肌痙攣、喉鳴、驚厥等 骨質(zhì)鈣化障礙包括佝僂病骨質(zhì)鈣化障礙包括佝僂病 、骨質(zhì)軟化等、骨質(zhì)軟化等 17常見病因：常見病因： 甲狀旁腺功能低下甲狀旁腺功能低下

8、 維生素缺維生素缺D缺乏缺乏 慢性腎功能衰竭慢性腎功能衰竭 新生兒低鈣血癥新生兒低鈣血癥 長期低鈣飲食或吸收不良等情況長期低鈣飲食或吸收不良等情況18二、磷代謝異常二、磷代謝異常（一）常見磷代謝異常（一）常見磷代謝異常 1 1高磷血癥高磷血癥 （hyperphosphatemia ）概概 念：血磷濃度念：血磷濃度成人大于成人大于1.61 mmol/L 兒童大于兒童大于1.90 mmol/L 常見表現(xiàn)：常見表現(xiàn)：低鈣血癥、骨質(zhì)鈣化障礙低鈣血癥、骨質(zhì)鈣化障礙 19高磷血癥常見病因：高磷血癥常見病因： 甲狀旁腺功能減退甲狀旁腺功能減退 維生素維生素D增多癥增多癥 慢性腎功能不全或衰竭慢性腎功能不全或

9、衰竭 多發(fā)性骨髓瘤及某些骨病多發(fā)性骨髓瘤及某些骨病 新生兒生理狀況下血鈣較成人低，而血磷明顯新生兒生理狀況下血鈣較成人低，而血磷明顯高于成人高于成人202低磷血癥低磷血癥 （hypophosphatemia）概概 念：血磷濃度小于念：血磷濃度小于0.8 mmol/L常見表現(xiàn)：鴨態(tài)步、骨痛、佝僂病、病理性骨折、常見表現(xiàn)：鴨態(tài)步、骨痛、佝僂病、病理性骨折、 精神錯(cuò)亂、抽搐和昏迷等精神錯(cuò)亂、抽搐和昏迷等 21低磷血癥常見病因：低磷血癥常見病因： 甲狀旁腺功能亢進(jìn)甲狀旁腺功能亢進(jìn) 佝僂病或骨軟化癥佝僂病或骨軟化癥 糖利用增加糖利用增加 乳糜瀉乳糜瀉 肝硬化和腎臟疾病肝硬化和腎臟疾病 使用雌激素、避孕藥

10、和苯巴比妥等藥物使用雌激素、避孕藥和苯巴比妥等藥物22（二）低磷血癥與代謝性骨?。ǘ┑土籽Y與代謝性骨病 1. 低磷性佝僂病和骨軟化癥低磷性佝僂病和骨軟化癥血磷顯著降低，并有明顯的肌無力血磷顯著降低，并有明顯的肌無力病人下肢無力，步態(tài)蹣跚或呈鴨態(tài)步病人下肢無力，步態(tài)蹣跚或呈鴨態(tài)步2. X連鎖家族性低磷血癥連鎖家族性低磷血癥又稱遺傳性低血磷性維生素又稱遺傳性低血磷性維生素D抵抗性佝僂病抵抗性佝僂病病因：腎小管對(duì)磷的重吸收障礙；腸道對(duì)磷的吸收減少病因：腎小管對(duì)磷的重吸收障礙；腸道對(duì)磷的吸收減少后果：血磷降低而引起佝僂病的骨改變后果：血磷降低而引起佝僂病的骨改變23三、鎂代謝異常三、鎂代謝異常（一

11、）常見鎂代謝異常（一）常見鎂代謝異常 1 1低鎂血癥低鎂血癥 （hypomagnesemia）概概 念：念：血清鎂低于血清鎂低于0.75 mmol/L常見表現(xiàn)：常見表現(xiàn)：神經(jīng)神經(jīng)-肌肉障礙和精神與行動(dòng)的異常肌肉障礙和精神與行動(dòng)的異常 24 消化道吸收障礙消化道吸收障礙 尿路丟失增多尿路丟失增多 內(nèi)分泌疾病內(nèi)分泌疾病 其它疾病其它疾病低鎂血癥常見病因低鎂血癥常見病因252 2高鎂血癥高鎂血癥 （hypermagnesemia）概概 念：念：血清鎂高于血清鎂高于1.25 mmol/L常見病因：常見病因：腎臟疾病腎臟疾病 內(nèi)分泌疾病內(nèi)分泌疾病 其它疾病其它疾病26（二）鎂代謝異常與代謝性骨?。ǘ╂V

12、代謝異常與代謝性骨病 大鼠實(shí)驗(yàn)表明，大鼠實(shí)驗(yàn)表明，低鎂幼鼠的鈣化骨減少、發(fā)生多低鎂幼鼠的鈣化骨減少、發(fā)生多種骨骼畸形種骨骼畸形 高鎂可影響成骨作用，發(fā)生骨營養(yǎng)不良高鎂可影響成骨作用，發(fā)生骨營養(yǎng)不良返回章目錄返回章目錄27第二節(jié)第二節(jié)激素調(diào)節(jié)與代謝性骨病激素調(diào)節(jié)與代謝性骨病 28一、甲狀旁腺素一、甲狀旁腺素 （parathormone，PTH） （一）甲狀旁腺素合成及分泌（一）甲狀旁腺素合成及分泌甲甲狀狀旁旁腺腺主主細(xì)細(xì)胞胞 前甲狀旁腺前甲狀旁腺素原素原 115aa115aa甲狀旁甲狀旁腺素原腺素原 90aa90aaPTH PTH 84aa84aa29（二）（二）PTH的的生理作用：升高血鈣、降

13、低血磷生理作用：升高血鈣、降低血磷 1. 對(duì)骨的作用對(duì)骨的作用 動(dòng)員骨鈣入血，使血鈣升高動(dòng)員骨鈣入血，使血鈣升高 增加骨吸收和骨生成，骨吸收大于骨生成增加骨吸收和骨生成，骨吸收大于骨生成 2. 對(duì)腎的作用對(duì)腎的作用鈣重吸收鈣重吸收磷重吸收磷重吸收保鈣排磷保鈣排磷303. 對(duì)小腸的作用對(duì)小腸的作用PTH激活腎臟激活腎臟1-1-羥羥化酶化酶 活性活性D D3 3增加增加 腸道吸收鈣腸道吸收鈣增加增加31（三）甲狀旁腺功能異常與代謝性骨?。ㄈ┘谞钆韵俟δ墚惓Ｅc代謝性骨病輕型的原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)患者輕型的原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)患者中重型原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)患者中重型原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)患者典

14、型骨病變：纖維性囊性骨炎（棕色瘤）典型骨病變：纖維性囊性骨炎（棕色瘤） 32二、降鈣素二、降鈣素（calcitonin，CT） （一）降鈣素的合成與分泌（一）降鈣素的合成與分泌甲狀腺濾泡旁細(xì)胞合成和分泌甲狀腺濾泡旁細(xì)胞合成和分泌單鏈多肽，由單鏈多肽，由32個(gè)氨基酸殘基組成個(gè)氨基酸殘基組成血鈣是影響血鈣是影響CT分泌的主要因素分泌的主要因素33抑制破骨、促進(jìn)成骨抑制破骨、促進(jìn)成骨抑制腎小管對(duì)鈣、磷的重吸收抑制腎小管對(duì)鈣、磷的重吸收抑制腎維生素抑制腎維生素D-1-羥化酶活性羥化酶活性因雌激素減少而減少因雌激素減少而減少（二）降鈣素的生理作用（二）降鈣素的生理作用降低血鈣、降低血磷降低血鈣、降低血磷

15、其主要作用機(jī)制為：其主要作用機(jī)制為：34三、三、活性維生素活性維生素D （一）活性維生素（一）活性維生素D的的生成生成 35（二）活性維生素（二）活性維生素D的生理作用：升高血鈣、升高血磷的生理作用：升高血鈣、升高血磷 基本途徑基本途徑活性維活性維生素生素D D靶細(xì)胞上維靶細(xì)胞上維生素生素D D受體受體激素受體激素受體復(fù)合物復(fù)合物二聚體二聚體維生素維生素D D反反應(yīng)元件應(yīng)元件相關(guān)基因的相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯轉(zhuǎn)錄和翻譯鈣磷代鈣磷代謝調(diào)控謝調(diào)控視黃醛視黃醛X X受體受體 361. 對(duì)小腸的作用：促進(jìn)小腸對(duì)鈣磷的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)對(duì)小腸的作用：促進(jìn)小腸對(duì)鈣磷的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)小腸粘膜上皮細(xì)胞小腸粘膜上皮細(xì)胞維生素維

16、生素D D受體受體活性維活性維生素生素D D相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯和翻譯鈣結(jié)合蛋白鈣結(jié)合蛋白表達(dá)上調(diào)表達(dá)上調(diào)Ca2+-Mg2+ ATP酶增加酶增加小腸鈣轉(zhuǎn)小腸鈣轉(zhuǎn)運(yùn)增加運(yùn)增加372. 對(duì)骨的作用：溶骨和成骨的雙重作用對(duì)骨的作用：溶骨和成骨的雙重作用 活性維活性維生素生素D D增加破骨細(xì)胞數(shù)增加破骨細(xì)胞數(shù)量和活性量和活性協(xié)同協(xié)同PTHPTH增加破增加破骨細(xì)胞數(shù)量骨細(xì)胞數(shù)量增加血鈣增加血鈣增加膠原增加膠原促進(jìn)溶骨促進(jìn)溶骨（低血鈣時(shí)）（低血鈣時(shí)）促進(jìn)成骨促進(jìn)成骨（高血鈣時(shí)）（高血鈣時(shí)）3. 對(duì)腎臟的作用：促進(jìn)腎小管對(duì)鈣、磷的重吸收對(duì)腎臟的作用：促進(jìn)腎小管對(duì)鈣、磷的重吸收 38（三）維生素

17、（三）維生素D缺乏與代謝性骨病缺乏與代謝性骨病1 1佝僂病和骨軟化癥佝僂病和骨軟化癥 活性維生素活性維生素D D缺乏缺乏兒童兒童成人成人骨質(zhì)軟化癥骨質(zhì)軟化癥佝僂病佝僂病392 2肝性佝僂病肝性佝僂病 肝功能肝功能障礙障礙25-25-羥化酶羥化酶下降下降25-羥化酶 活性維生活性維生素素D D缺乏缺乏膽道阻塞鈣皂膽道阻塞鈣皂形成形成 維生素維生素D D吸吸收障礙收障礙維生素維生素D D缺缺乏乏佝僂病癥狀佝僂病癥狀403 3腎性佝僂病、腎性骨營養(yǎng)不良腎性佝僂病、腎性骨營養(yǎng)不良 （renal osteodystrophy） 腎功能腎功能障礙障礙1-1-羥化羥化酶下降酶下降活性維生活性維生素素D D缺

18、乏缺乏尿磷減少尿磷減少尿鈣增加尿鈣增加血磷增加血磷增加血鈣減少血鈣減少佝僂病佝僂病癥狀癥狀414.維生素維生素D依賴性佝僂?。ㄒ蕾囆载E?。╲itamin D depedent rickets，VDDR）又稱假性維生素）又稱假性維生素D缺乏癥缺乏癥。其特點(diǎn)為。其特點(diǎn)為：腎小管上皮細(xì)胞腎小管上皮細(xì)胞1-羥化酶先天性缺陷羥化酶先天性缺陷常染色體隱形遺傳常染色體隱形遺傳維生素維生素D缺乏癥狀典型，發(fā)病早缺乏癥狀典型，發(fā)病早大劑量活性維生素大劑量活性維生素D治療可使疾病緩解治療可使疾病緩解 425.維生素維生素D抵抗（抵抗（vitamin D resistance） 機(jī)體對(duì)正常劑量甚至大劑量的維生素機(jī)

19、體對(duì)正常劑量甚至大劑量的維生素D或或1,25-(OH)2D3的低反應(yīng)或無反應(yīng)現(xiàn)象的低反應(yīng)或無反應(yīng)現(xiàn)象 其特點(diǎn)為：其特點(diǎn)為：維生素維生素D受體基因突變：常染色體隱性遺傳受體基因突變：常染色體隱性遺傳 常見的有三個(gè)主要位點(diǎn)：常見的有三個(gè)主要位點(diǎn)：Q259E、G319V和和R73X臨床上具有典型的佝僂病癥狀和體征臨床上具有典型的佝僂病癥狀和體征約約50%的患者對(duì)任何形式的維生素的患者對(duì)任何形式的維生素D治療無效治療無效43鈣磷代謝的激素調(diào)節(jié)鈣磷代謝的激素調(diào)節(jié)44包括雌激素和雄激素，對(duì)處于生長階段的個(gè)體骨骼發(fā)育和包括雌激素和雄激素，對(duì)處于生長階段的個(gè)體骨骼發(fā)育和成熟十分重要。成熟十分重要。雌激素對(duì)雌激

20、素對(duì)1,25-(OH)2D3的合成、降鈣素和的合成、降鈣素和PTH分泌均有重要分泌均有重要的調(diào)節(jié)作用。的調(diào)節(jié)作用。雄性激素能促進(jìn)蛋白質(zhì)和骨基質(zhì)的合成，促進(jìn)肌肉和骨雄性激素能促進(jìn)蛋白質(zhì)和骨基質(zhì)的合成，促進(jìn)肌肉和骨骼生長。骼生長。國內(nèi)外報(bào)道中老年人骨礦物質(zhì)丟失速度與血清性激素含國內(nèi)外報(bào)道中老年人骨礦物質(zhì)丟失速度與血清性激素含量呈負(fù)相關(guān)。量呈負(fù)相關(guān)。 四、性激素四、性激素45 定義：定義：骨質(zhì)疏松癥是一種全身性的骨量減少，以骨組織顯骨質(zhì)疏松癥是一種全身性的骨量減少，以骨組織顯微結(jié)構(gòu)退化為特征，并引起骨脆性增加、骨強(qiáng)度降低的疾病。此時(shí)微結(jié)構(gòu)退化為特征，并引起骨脆性增加、骨強(qiáng)度降低的疾病。此時(shí)骨礦物質(zhì)和

21、骨基質(zhì)等比例減少，基本特點(diǎn)在于單位體積內(nèi)骨組織量骨礦物質(zhì)和骨基質(zhì)等比例減少，基本特點(diǎn)在于單位體積內(nèi)骨組織量減少。減少。 分類：分類： 原發(fā)性原發(fā)性 繼發(fā)性（其中退行性骨質(zhì)疏松癥發(fā)病率最高繼發(fā)性（其中退行性骨質(zhì)疏松癥發(fā)病率最高 ）骨質(zhì)疏松癥骨質(zhì)疏松癥46退行性骨質(zhì)疏松癥的分型退行性骨質(zhì)疏松癥的分型型骨質(zhì)疏松癥（絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥）型骨質(zhì)疏松癥（絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥）型骨質(zhì)疏松癥（老年性骨質(zhì)疏松癥）型骨質(zhì)疏松癥（老年性骨質(zhì)疏松癥）47（一）（一）型骨質(zhì)疏松癥型骨質(zhì)疏松癥基本原因是雌激素分泌不足基本原因是雌激素分泌不足破骨細(xì)胞過于活躍，骨轉(zhuǎn)換增加破骨細(xì)胞過于活躍，骨轉(zhuǎn)換增加 骨礦含量減少，導(dǎo)致骨質(zhì)疏松骨礦

22、含量減少，導(dǎo)致骨質(zhì)疏松 表現(xiàn)為單位體積內(nèi)的骨量減少表現(xiàn)為單位體積內(nèi)的骨量減少 血液生化指標(biāo)基本正常血液生化指標(biāo)基本正常 但骨形成和骨吸收的指標(biāo)有增高但骨形成和骨吸收的指標(biāo)有增高 48（二）（二）型骨質(zhì)疏松癥型骨質(zhì)疏松癥中老年人骨的吸收大于骨形成，導(dǎo)致骨質(zhì)疏松中老年人骨的吸收大于骨形成，導(dǎo)致骨質(zhì)疏松 細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)：破骨細(xì)胞的吸收增加細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)：破骨細(xì)胞的吸收增加 成骨細(xì)胞功能衰減成骨細(xì)胞功能衰減主要由于老年人身體各機(jī)能退化而致主要由于老年人身體各機(jī)能退化而致骨形成與骨吸收的生化指標(biāo)均有降低傾向骨形成與骨吸收的生化指標(biāo)均有降低傾向 返回章目錄返回章目錄49第三節(jié)第三節(jié)血清鈣磷鎂的測(cè)定血清鈣磷鎂的測(cè)定

23、 50一、血清鈣的測(cè)定一、血清鈣的測(cè)定（一）血清鈣測(cè)定方法概述（一）血清鈣測(cè)定方法概述總鈣測(cè)定總鈣測(cè)定 標(biāo)標(biāo) 本：本：血清或低濃度肝素抗凝血漿血清或低濃度肝素抗凝血漿測(cè)定方法：滴定法、比色法、火焰光度法、測(cè)定方法：滴定法、比色法、火焰光度法、 原子吸收分光光度法、同位素稀釋質(zhì)譜法等原子吸收分光光度法、同位素稀釋質(zhì)譜法等 決定性方法：同位素稀釋決定性方法：同位素稀釋- -質(zhì)譜法質(zhì)譜法 （IFCC）參考方法：原子吸收分光光度法參考方法：原子吸收分光光度法 （IFCC）常規(guī)方法：鄰甲酚酞絡(luò)合酮常規(guī)方法：鄰甲酚酞絡(luò)合酮（O-CPC）法法 （衛(wèi)生部）（衛(wèi)生部）51（二）血清鈣測(cè)定方法概述（二）血清鈣測(cè)定

24、方法概述離子鈣測(cè)定離子鈣測(cè)定 標(biāo)標(biāo) 本：本： 血清、低濃度肝素抗凝血漿或全血血清、低濃度肝素抗凝血漿或全血測(cè)定方法：生物學(xué)法、透析法、超濾法、測(cè)定方法：生物學(xué)法、透析法、超濾法、 金屬指示劑法、金屬指示劑法、ISE法等法等參考方法：參考方法： ISE法法52（三）血清鈣測(cè)定（三）血清鈣測(cè)定總鈣測(cè)定總鈣測(cè)定O-CPC 法法1. 測(cè)定原理測(cè)定原理（總）鈣（總）鈣O-CPC紫紅色螯合物紫紅色螯合物（575nm）pH108-羥基喹啉羥基喹啉2. 方法評(píng)價(jià)方法評(píng)價(jià)操作簡便、快速、穩(wěn)定，同時(shí)適于手工和自動(dòng)化分析操作簡便、快速、穩(wěn)定，同時(shí)適于手工和自動(dòng)化分析反應(yīng)體系的反應(yīng)體系的pH值對(duì)結(jié)果影響較大值對(duì)結(jié)果影

25、響較大 53（四）血清鈣測(cè)定（四）血清鈣測(cè)定離子鈣測(cè)定離子鈣測(cè)定ISE 法法1. 測(cè)定原理測(cè)定原理 Nernst方程式：在一定條件下，方程式：在一定條件下，ISE的電位與溶的電位與溶液中的被測(cè)離子濃度的對(duì)數(shù)成正比液中的被測(cè)離子濃度的對(duì)數(shù)成正比 2. 方法評(píng)價(jià)方法評(píng)價(jià)操作簡便、快速、重復(fù)性好操作簡便、快速、重復(fù)性好準(zhǔn)確度和敏感性高，影響因素少準(zhǔn)確度和敏感性高，影響因素少 54二、血清磷的測(cè)定二、血清磷的測(cè)定（一）血清磷測(cè)定方法概述（一）血清磷測(cè)定方法概述標(biāo)標(biāo) 本：血清、肝素化血漿本：血清、肝素化血漿常用方法：磷鉬酸還原法、磷鉬酸紫外分光光度法、酶法、原子吸收常用方法：磷鉬酸還原法、磷鉬酸紫外分光

26、光度法、酶法、原子吸收分光光度法、同位素稀釋質(zhì)譜法等分光光度法、同位素稀釋質(zhì)譜法等決定性方法：同位素稀釋質(zhì)譜法決定性方法：同位素稀釋質(zhì)譜法常規(guī)方法：磷鉬酸紫外分光光度法、磷鉬酸還原法常規(guī)方法：磷鉬酸紫外分光光度法、磷鉬酸還原法55（二）血清磷測(cè)定（二）血清磷測(cè)定磷鉬酸還原法磷鉬酸還原法 1. 測(cè)定原理測(cè)定原理無機(jī)磷無機(jī)磷鉬酸銨鉬酸銨 磷鉬酸磷鉬酸復(fù)合物復(fù)合物 鉬藍(lán)（鉬藍(lán)（650nm）硫酸亞鐵硫酸亞鐵或米吐爾或米吐爾2. 方法評(píng)價(jià)方法評(píng)價(jià)方法簡便、快速，穩(wěn)定方法簡便、快速，穩(wěn)定體系中加入體系中加入Triton X-100等表面活性劑，則不需要除蛋白等表面活性劑，則不需要除蛋白即可直接測(cè)定即可直接

27、測(cè)定56（三）血清磷測(cè)定（三）血清磷測(cè)定酶法酶法 1. 測(cè)定原理測(cè)定原理次黃嘌次黃嘌呤核苷呤核苷 嘌呤核苷嘌呤核苷磷酸化酶磷酸化酶 次黃次黃嘌呤嘌呤 黃嘌呤氧化酶黃嘌呤氧化酶 H H2 2O O2 2尿尿酸酸無機(jī)磷無機(jī)磷TrinderTrinder反應(yīng)反應(yīng) 2. 方法評(píng)價(jià)方法評(píng)價(jià)血清磷測(cè)定的發(fā)展方向血清磷測(cè)定的發(fā)展方向顯色穩(wěn)定，線性范圍寬，干擾因素小，可用于自動(dòng)化分析顯色穩(wěn)定，線性范圍寬，干擾因素小，可用于自動(dòng)化分析所用的酶試劑比較貴所用的酶試劑比較貴 57三、血清鎂的測(cè)定三、血清鎂的測(cè)定（一）血清鎂測(cè)定方法概述（一）血清鎂測(cè)定方法概述標(biāo)標(biāo) 本：血清（本：血清（ 非鈣離子絡(luò)合抗凝劑）非鈣離子絡(luò)

28、合抗凝劑）測(cè)定方法：比色法、原子吸收分光光度法測(cè)定方法：比色法、原子吸收分光光度法 酶法、同位素稀釋質(zhì)譜法等酶法、同位素稀釋質(zhì)譜法等決定性方法：同位素稀釋質(zhì)譜法決定性方法：同位素稀釋質(zhì)譜法參考方法：原子吸收分光光度法參考方法：原子吸收分光光度法常規(guī)方法：甲基麝香草酚藍(lán)（常規(guī)方法：甲基麝香草酚藍(lán)（MTB）比色法）比色法 Calmagite染料結(jié)合法染料結(jié)合法58（二）血清鎂測(cè)定（二）血清鎂測(cè)定比色法比色法1. 測(cè)定原理測(cè)定原理鎂離子鎂離子MTBEGTA掩蔽鈣離子掩蔽鈣離子藍(lán)紫色復(fù)合物藍(lán)紫色復(fù)合物（600nm600nm）2. 方法評(píng)價(jià)方法評(píng)價(jià)方法簡單、實(shí)用，可用于自動(dòng)化分析方法簡單、實(shí)用，可用于自

29、動(dòng)化分析采血后應(yīng)盡快分離血清，而且避免溶血采血后應(yīng)盡快分離血清，而且避免溶血 EGTA(乙二醇二乙醚二胺四乙酸 EGTA：乙二醇二乙醚二胺四乙酸乙二醇二乙醚二胺四乙酸 59（三）血清鎂測(cè)定（三）血清鎂測(cè)定酶法酶法1. 測(cè)定原理測(cè)定原理異檸檬酸異檸檬酸 -酮戊二酸酮戊二酸 NADPNADP+ +NADPHNADPH（340nm340nm處吸光度下降）處吸光度下降） 鎂離子，鎂離子，ICD2. 方法評(píng)價(jià)方法評(píng)價(jià)成本低廉、影響因素小，線性范圍寬成本低廉、影響因素小，線性范圍寬試劑穩(wěn)定性欠佳，試劑穩(wěn)定性欠佳，4下只能保存下只能保存2周左右周左右 返回章目錄返回章目錄60第四節(jié)第四節(jié) 骨代謝異常的生物化

30、學(xué)測(cè)定骨代謝異常的生物化學(xué)測(cè)定61一、骨代謝調(diào)節(jié)激素的測(cè)定一、骨代謝調(diào)節(jié)激素的測(cè)定（一）甲狀旁腺素的測(cè)定（一）甲狀旁腺素的測(cè)定1. 測(cè)定方法概述測(cè)定方法概述 存在形式：存在形式：PTH-N、PTH-C和和PTH-M測(cè)定形式：測(cè)定形式：PTH-C、PTH-M和完整和完整PTH主要方法：主要方法： RIA、IRMA、ELISA、ICMA等等 國外采用國外采用IRMA法和法和ICMA法測(cè)定完整的法測(cè)定完整的PTH分子分子 國內(nèi)應(yīng)用最普遍的是國內(nèi)應(yīng)用最普遍的是RIA法法62IRMA：免疫放射法：免疫放射法ICMA：免疫化學(xué)發(fā)光法：免疫化學(xué)發(fā)光法 2. RIA法測(cè)定法測(cè)定PTH測(cè)定對(duì)象：測(cè)定對(duì)象：PTH

31、-M和和PTH-C方法類型：競(jìng)爭(zhēng)性方法類型：競(jìng)爭(zhēng)性RIA法法 125I 標(biāo)記標(biāo)記PTH-M和和PTH-C 125I標(biāo)記的標(biāo)記的PTH-M和和PTH-C與病人樣本中的與病人樣本中的PTH- M和和PTH-C競(jìng)爭(zhēng)抗體結(jié)合位點(diǎn)。競(jìng)爭(zhēng)抗體結(jié)合位點(diǎn)。63（二）維生素（二）維生素D的測(cè)定的測(cè)定1. 測(cè)定方法概述測(cè)定方法概述 25-(OH)D3是反映機(jī)體維生素是反映機(jī)體維生素D營養(yǎng)狀態(tài)的理想指標(biāo)營養(yǎng)狀態(tài)的理想指標(biāo) 1,25-(OH)2D3更適合用受體結(jié)合法進(jìn)行分析更適合用受體結(jié)合法進(jìn)行分析 25-(OH)D3的測(cè)定方法：的測(cè)定方法：RIA-CPB和和HPLC等等 1,25-(OH)2D3的測(cè)定方法：的測(cè)定方

32、法：RIA、RRA、生物學(xué)方法等、生物學(xué)方法等 以以RRA和和RIA最為普遍最為普遍RIA-CPB：放免競(jìng)爭(zhēng)性蛋白結(jié)合法：放免競(jìng)爭(zhēng)性蛋白結(jié)合法RRA：放射受體法：放射受體法 642. 25-(OH)D3的測(cè)定的測(cè)定 目前主要采用目前主要采用RIA法法佝僂病大鼠血清中維生素佝僂病大鼠血清中維生素D結(jié)合蛋白為特異性的結(jié)合物結(jié)合蛋白為特異性的結(jié)合物基本流程：基本流程：有機(jī)溶劑提取血清有機(jī)溶劑提取血清 與放射性標(biāo)記物競(jìng)爭(zhēng)與維生素與放射性標(biāo)記物競(jìng)爭(zhēng)與維生素D結(jié)合蛋白結(jié)合結(jié)合蛋白結(jié)合 反應(yīng)平衡后分離游離型和結(jié)合型標(biāo)記物反應(yīng)平衡后分離游離型和結(jié)合型標(biāo)記物 液閃計(jì)數(shù)、計(jì)算濃度液閃計(jì)數(shù)、計(jì)算濃度評(píng)價(jià)：評(píng)價(jià)： 方

33、法簡便，結(jié)合蛋白較穩(wěn)定方法簡便，結(jié)合蛋白較穩(wěn)定 測(cè)定前都需要對(duì)測(cè)定前都需要對(duì)25-(OH)D3提取純化提取純化653. 1,25-(OH)2D3的測(cè)定的測(cè)定 （1）RRA采用維生素采用維生素D缺乏或正常的雞腸道維生素缺乏或正常的雞腸道維生素D受體受體采用采用Sep-Pak色譜柱代替高效液相色譜的純化步驟色譜柱代替高效液相色譜的純化步驟（2）RIA采用佝僂病大鼠血清中維生素采用佝僂病大鼠血清中維生素D結(jié)合蛋白作為特異性的結(jié)合結(jié)合蛋白作為特異性的結(jié)合物，比受體更穩(wěn)定，更方便物，比受體更穩(wěn)定，更方便66（三）降鈣素的測(cè)定（三）降鈣素的測(cè)定1. 生物分析法：降血鈣效應(yīng)分析生物分析法：降血鈣效應(yīng)分析2.

34、 放射免疫分析法：樣品放射免疫分析法：樣品CT、放射性標(biāo)記、放射性標(biāo)記CT競(jìng)爭(zhēng)性地與競(jìng)爭(zhēng)性地與CT特異性抗體結(jié)合特異性抗體結(jié)合 3. 夾心放射免疫分析：快速、靈敏、特異夾心放射免疫分析：快速、靈敏、特異67二、骨形成標(biāo)志物的測(cè)定二、骨形成標(biāo)志物的測(cè)定（一）骨鈣素（一）骨鈣素（osteocalcin, OC）的測(cè)定的測(cè)定又稱骨又稱骨-羧基谷氨酸蛋白（羧基谷氨酸蛋白（BGP）由成骨細(xì)胞合成和分泌的一種活性多肽由成骨細(xì)胞合成和分泌的一種活性多肽主要生理功能是維持骨的正常礦化速率主要生理功能是維持骨的正常礦化速率血骨鈣素是反映骨代謝狀態(tài)的一個(gè)特異和靈敏的生化指標(biāo)血骨鈣素是反映骨代謝狀態(tài)的一個(gè)特異和靈敏

35、的生化指標(biāo)測(cè)定測(cè)定BGP的方法應(yīng)用最多的是放射免疫法和酶聯(lián)免疫法的方法應(yīng)用最多的是放射免疫法和酶聯(lián)免疫法68（二）骨性堿性磷酸酶（二）骨性堿性磷酸酶（B-ALP）測(cè)定測(cè)定 ALP是在堿性條件下催化磷酸酯水解的酶類是在堿性條件下催化磷酸酯水解的酶類 B-ALP來自成骨細(xì)胞，是骨形成的特異性標(biāo)志物來自成骨細(xì)胞，是骨形成的特異性標(biāo)志物 血清血清B-ALP測(cè)定方法：測(cè)定方法： 總體分為電泳法和非電泳法總體分為電泳法和非電泳法 應(yīng)用較多的方法是放射免疫法應(yīng)用較多的方法是放射免疫法 HPLC是目前是目前B-ALP測(cè)定分辨率最高的方法測(cè)定分辨率最高的方法69B-ALP增高常見于：甲狀腺、甲狀旁腺功能亢進(jìn)增高

36、常見于：甲狀腺、甲狀旁腺功能亢進(jìn) 惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移 佝僂病、骨軟化病佝僂病、骨軟化病 骨折和絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥等骨折和絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥等B-ALP測(cè)定意義：測(cè)定意義： 骨病早期診斷骨病骨病早期診斷骨病 療效的評(píng)價(jià)和預(yù)后的判斷療效的評(píng)價(jià)和預(yù)后的判斷 骨轉(zhuǎn)移癌的病程和治療效果的監(jiān)測(cè)骨轉(zhuǎn)移癌的病程和治療效果的監(jiān)測(cè)70 型膠原前肽是膠原的延伸段型膠原前肽是膠原的延伸段 多檢測(cè)多檢測(cè)型前膠原羧基前肽型前膠原羧基前肽(PICP)來評(píng)價(jià)骨形成來評(píng)價(jià)骨形成 PICP的檢測(cè)大多采用的檢測(cè)大多采用RIA和電化學(xué)發(fā)光免疫分析（和電化學(xué)發(fā)光免疫分析（ECL） 血清中血清中型膠原前肽水平在一定范圍內(nèi)是反映成骨

37、細(xì)胞活動(dòng)和骨形型膠原前肽水平在一定范圍內(nèi)是反映成骨細(xì)胞活動(dòng)和骨形成以及反映成以及反映型膠原合成速率的特異指標(biāo)型膠原合成速率的特異指標(biāo)（三）（三）型膠原前肽測(cè)定型膠原前肽測(cè)定71三、骨吸收標(biāo)志物的測(cè)定三、骨吸收標(biāo)志物的測(cè)定 HOP是體內(nèi)膠原代謝的終產(chǎn)物之一是體內(nèi)膠原代謝的終產(chǎn)物之一 尿尿HOP排出量可以反映骨吸收和骨轉(zhuǎn)換程度排出量可以反映骨吸收和骨轉(zhuǎn)換程度 尿尿HOP增高見于：兒童生長期、甲狀旁腺功能亢進(jìn)增高見于：兒童生長期、甲狀旁腺功能亢進(jìn) 骨轉(zhuǎn)移癌、慢性腎功能不全骨轉(zhuǎn)移癌、慢性腎功能不全 畸形性骨炎、佝僂病和軟骨病畸形性骨炎、佝僂病和軟骨病 高轉(zhuǎn)換的骨質(zhì)疏松患者高轉(zhuǎn)換的骨質(zhì)疏松患者 尿尿HOP指標(biāo)特異性較差，也缺乏靈敏性指標(biāo)特異性較差，也缺乏靈敏性 尿尿HOP測(cè)定方法：分光光度法測(cè)定方法：分光光度法 離子交換色譜法和反相離子交換色譜法和反相HPLC法法（一）尿羥脯氨酸（一）尿羥脯氨酸（hydroxyproline, HOP）72 吡啶酚，脫氧吡啶酚吡啶酚，脫氧吡啶酚型膠原降解產(chǎn)物型膠原降解產(chǎn)物 型膠原交