茶多酚對酒精性肝損傷的保護作用

1、茶多酚對酒精性肝損傷的保護作用        【摘要】  目的建立家兔酒精性肝損傷病理模型，探討茶多酚對酒精性肝損傷的作用。方法家兔分為4組：對照組，茶多酚低劑量組、中劑量、高劑量組。茶多酚低、中、高組分別灌胃以濃度為10，20，40 mg/ml的茶多酚溶液進行治療，實驗期2周。測定肝組織中超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量，并取肝組織制作石蠟切片，HE染色，普通光鏡觀察。結果茶多酚能夠直接降低MDA含量，且中劑量（20 mg/ml）和高劑量（40 mg/ml）能夠有效地清除活性氧和自由基

2、。結論茶多酚對酒精性肝損傷有良好的治療和保護作用。 【關鍵詞】  茶多酚； 肝損傷； 超氧化物歧化酶； 丙二醛        茶多酚是從茶葉中提取的有效成分之一，由多種酚性物質組成，是一種多酚類化合物，具有清除自由基和抗氧化等作用的生物活性。Marnewick1也發(fā)現(xiàn)，喂飼綠茶和紅茶的大鼠，其肝組織勻漿中氧自由基濃度明顯下降。本實驗試圖建立酒精性肝損傷病理模型，運用茶多酚治療的方法，從組織學與病的角度研究茶多酚在酒精性肝損傷中起到的治療作用，同時研究其機制。1  材料與方法1.1  材料98%的

3、茶多酚15g，超氧化物歧化酶試劑盒（南京建成生物工程公司）、丙二醛試劑盒（南京建成生物工程公司）。1.2 動物和分組 3月齡雌性大耳白兔24只，體質量11.5 kg，體質健康。統(tǒng)一編號后隨機分為4組，各組6只，分籠喂養(yǎng)，自由飲水攝食。1.3  酒精性肝損傷病理模型建立2通過連續(xù)10d對4組實驗動物灌胃50%的酒精5 ml建立酒精性肝損傷模型；同時，對照組灌胃生理鹽水，低劑量組灌胃10 mg/ml的茶多酚溶液5ml(相當于25mg·kg-1·d-1)治療，中劑量組灌胃20 mg/ml的茶多酚溶液5 ml(相當于50 mg·kg-1·d-

4、1)治療，高劑量組灌胃40 mg/ml的茶多酚溶液5 ml(相當于100 mg·kg-1·d-1)治療。治療兩周，觀察并作相關記錄。1.4  觀察指標和方法取家兔肝組織制備勻漿液，測定蛋白質的含量，采用超氧化物歧化酶（SOD）活力試劑盒和丙二醛（MDA）含量試劑盒分別測定SOD的活力和MDA的含量；同時對肝組織常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片，HE染色，光學顯微鏡觀察并記錄。2  結果2.1   剖檢變化 解剖前，家兔身體消瘦，食欲不振，體毛蓬松，其中對照組有2只家兔死亡，低劑量組有1只家兔死亡，高劑量組體重無明顯變化，能夠正常飲食，

5、毛色光滑雪白。      解剖后，對照組肝組織質地松軟，顏色為土黃色；低劑量組肝組織質地較松軟，顏色為土黃色；中劑量組肝組織質地輕度松軟，顏色為深紅色；高劑量組肝組織有韌性，顏色為深紅色。1         2.2  肝組織中SOD活力和MDA 含量的變化隨著對酒精性肝損傷的, 模型組 SOD 活性和MDA 含量都顯著性下降。經(jīng)方差分析，高劑量組和低劑量組SOD的活力與對照組比差異極顯著，低劑量組與對照組之間無顯著差異；高劑量組MDA 含量與對照組比差異極

6、顯著，中劑量組與對照組之間差異顯著，低劑量組與對照組之間無顯著差異。結果見表1。表1  肝組織中SOD的活力和MDA的含量（略）2.3  肝組織病理變化光鏡下，對照組肝組織受損較嚴重，肝細胞條索狀不明顯，且雜亂無章，肝板間隙較小，肝小葉邊緣模糊，界限不清（圖1）。肝細胞結構不完整，細胞膜破損，雙核現(xiàn)象較多（圖2）。低劑量組與正常組的變化基本相同（圖34）。茶多酚中劑量組肝小葉邊緣界限清楚，肝細胞以中央靜脈為中心呈發(fā)射狀排列，肝板間隙較大（圖5）。細胞核雙核較多，細胞膜完整（圖6）。高劑量組肝細胞呈有的條索狀，肝板間隙較大（圖7）。細胞結構完整，雙核現(xiàn)象較少（圖8）。3

7、60; 討論    研究表明，茶多酚清除自由基的能力大大超過目前已知的抗氧化劑維生素C和維生素E，其抗氧化能力是維生素C的310倍，是維生素E的39倍3。通過對組織中SOD活力和MDA含量的測定可以間接反映出茶多酚清除活性氧與自由基的能力。MDA的測定常常與SOD的測定相互配合，SOD活力的高低間接反映了機體清除氧自由基的能力，而MDA的高低又反映了機體細胞受自由基攻擊的嚴重程度。許多研究表明，茶多酚不僅能防護體內抗氧化酶，還能促進和調動機體內各種抗氧化酶的活性，生物體內的抗氧化酶主要有超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽酶(GSH)和過氧化氫酶(CAT)。因此，茶

8、多酚對氧自由基的清除主要表現(xiàn)在能使SOD活性顯著提高，MDA水平顯著降低，且呈劑量效應關系4。本研究通過對酒精性肝損傷家兔動物模型進行茶多酚治療實驗，檢測了肝損傷中相關酶的活性，發(fā)現(xiàn)肝組織中SOD活力和MDA含量都呈下降趨勢，茶多酚高劑量組和低劑量組SOD的活力與對照組比差異極顯著；茶多酚高劑量組MDA含量與對照組比差異極顯著，中劑量組與對照組之間差異顯著。說明茶多酚能顯著降低肝組織中丙二醛的含量，但不能顯著提升超氧化物歧化酶的活性，此結果與以往大多數(shù)研究結果并不完全一致。究其原因，可能與茶多酚抗自由基機理的多樣性有關，茶多酚并沒有提高抗氧化物酶活性和協(xié)同抗氧化物酶清除自由基。對于肝臟的損害，

9、主要是氧自由基形成的脂質過氧化引起的。鐵離子能促使氧自由基生成，催化脂質過氧化物裂解，引發(fā)新的脂質過氧化鏈式反應，而茶多酚能有效絡合鐵離子與低分子鐵結合成配合物，促使低分子鐵排出體外，從而減少自由基的形成5，6，說明茶多酚可以自身直接清除組織細胞中的MDA，因此隨著茶多酚的濃度不斷增高，MDA的含量逐漸降低。通過此途徑減輕自由基對機體的損傷可能是造成本實驗結果的主要原因。另一方面，通過組織學的觀察發(fā)現(xiàn)隨著灌喂的茶多酚濃度的增加，肝組織的受損程度就越低。其中中劑量和高劑量的濃度對該病理現(xiàn)象起到了很好的治療效果。    綜上所述，茶多酚有眾多的生物學活性，本研究表明茶

10、多酚對家兔酒精性肝損傷有一定的預防和治療效果，具有廣泛的臨床應用價值，但其機理還有待于進一步研究?！尽?#160; 1Marneurick. The inhibition of mitochondrial peroxidation by ubiquinone and ubiquinolJ.The Journal of Biological Chemistry，1966，2 41(19):4353.2杜施霖,遲寶榮.酒精性肝損傷動物模型的研究J.白求恩醫(yī)科大學學報,2001,27(6):682.3龔盛昭,葉孝兆,駱雪萍.利用廢茶制備茶多酚護膚霜的研究J.廣西化工,2002,31(1):12.4李春美,謝筆鈞,姚 平.茶色素體外清除氧自由基及對老齡