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文檔簡介

q掌握分光光度法1.取三支試管分兩組,按下表操作試管編號 0 1 2牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn) - 1.0 -蒸餾水(mL) 1.0 - -待測蛋白質(zhì)溶液(mL) - - 1.02. 各管加入試劑甲5ml混勻放置10分鐘。3.各管加入試劑乙0.5ml后立即混勻,37 水浴30分鐘后用500nm單色光比色測定。4.計算 樣品蛋白質(zhì)含量(ug/ml)各管加酚試劑時必須快速,并立即搖勻,不應(yīng)出各管加酚試劑時必須快速,并立即搖勻,不應(yīng)出現(xiàn)混濁?,F(xiàn)混濁。q 移液管使用前要看清楚刻度和是否寫著快、吹,移液管使用前要看清楚刻度和是否寫著快、吹,如有則需要用洗耳球吹出剩余液體如有則需要用洗耳球吹出剩余液體q 進(jìn)行測定時,加進(jìn)行測定時,加F olinF olin酚試劑時要特別小心,因酚試劑時要特別小心,因為該試劑僅在酸性為該試劑僅在酸性pHpH條件下穩(wěn)定,但上述還原反應(yīng)只在條件下穩(wěn)定,但上述還原反應(yīng)只在pH=10pH=10的情況下發(fā)生,故當(dāng)?shù)那闆r下發(fā)生,故當(dāng)FolinFolin一酚試劑加到堿性的一酚試劑加到堿性的銅銅蛋白質(zhì)溶液中時,必須立即混勻,以便在磷鉬酸蛋白質(zhì)溶液中時,必須立即混勻,以便在磷鉬酸磷鎢酸試劑磷鎢酸試劑 被破壞之前,還原反應(yīng)即能發(fā)生。被破壞之前,還原反應(yīng)即能發(fā)生。 q分光光度計使用前需預(yù)熱,絕對調(diào)零和空白管調(diào)節(jié)分光光度計使用前需預(yù)

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