檢驗技術操作規(guī)程

1、檢驗技術操作規(guī)范目 錄第一節(jié) 全自動血液細胞分析儀操作規(guī)程第二節(jié) 尿液分析儀使用規(guī)程第三節(jié) 自動凝血儀操作規(guī)程第四節(jié) 半自動生化分析儀操作規(guī)程第五節(jié) 血常規(guī)檢驗操作規(guī)程第六節(jié) 尿常規(guī)檢驗操作規(guī)程第七節(jié) 肝功能檢驗操作規(guī)程 第八節(jié) 腎功能檢驗操作規(guī)程 第九節(jié) 血脂檢驗操作規(guī)程第十節(jié) 血液葡萄糖測定技術操作規(guī)程 第十一節(jié) 凝血四項檢驗操作規(guī)程第十二節(jié)AB0血型正、反血型鑒定技術操作規(guī)程 第十三節(jié) 交叉配血試驗技術操作規(guī)程第一節(jié) 全自動血液細胞分析儀操作規(guī)程1、樣品分析前準備1.1開機前的檢查、準備在開啟分析儀電源之前，操作者須按以下要求進行檢查:檢查稀釋液、清洗液、溶血素是否充足，有無過期; 試劑

2、管路是否彎折，連接是否可靠。 電源線是否正確連接。 廢液桶是否清空。 UPS電是否足夠，打印紙安裝是否正確，是否足夠。 確保鍵盤正確連接到鍵盤接口上。 打開分析儀后面的電源開關,電源指示燈亮，屏幕上顯示“Initializing”. 分析儀進行初始化，整個初始化過程持續(xù)約47分鐘。 初始化過程結束后，系統(tǒng)自動進入“計數(shù)”界面。1.3 動物類型選擇 按菜單鍵，移動光標，選擇“動物”，按確認進入“動物”界面。 操作者根據(jù)測量的動物類型，選擇需要分析的動物類型。 按菜單鍵，選擇“計數(shù)”，進入“計數(shù)”界面。再按模式鍵，將當前模式設置為“全血”模式。 確認狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“就緒”，工作模式為“全血

3、”。 將準備好的全血樣本放到采樣針下，使采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持一定距離。 按計數(shù)鍵，啟動樣本分析過程。此時，狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“運行”。 采樣針自動吸取13ul的樣本后蜂鳴器響，在采樣針抬起后，移開樣本。 分析完成后，按F4鍵進入“樣本信息編輯”界面。按F9鍵進入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下，按F8鍵在全拼和五筆輸入法之間進行切換，輸入樣本信息 ，輸入完成后，點擊“確認”，保存輸入的內容并返回到“計數(shù)”界面。 按打印鍵打印樣本分析報告。 按照此操作過程進行其余樣本的分析。2.2 預稀釋樣本分析 按菜單鍵，選擇“計數(shù)”，進入“計數(shù)”界面。再按模式鍵，將當前模式設置為“預稀釋”模式。按

4、稀釋鍵，屏幕彈出“加稀釋液”對話框，取一個干凈的樣本杯放在采樣針下，按計數(shù)鍵，微傾斜樣本杯一定角度讓分析儀自動排出的1.6ml稀釋液沿管壁流入樣本杯中，避免產(chǎn)生氣泡或濺出。 加完稀釋液后，按確認鍵，“加稀釋液”對話框關閉，分析儀自動清洗采樣針。 采集20ul血液迅速注入盛有稀釋液的樣本杯中混勻。 確認狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“就緒”，工作模式為“預稀釋”。將準備好的預稀釋樣本放到采樣針下，使采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持一定距離。 按計數(shù)鍵，啟動樣本分析過程。此時，狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“運行”。 采樣針自動吸取0.7ml的樣本后蜂鳴器響，在采樣針抬起后，移開樣本。分析完成后，按F4鍵進入

5、“樣本信息編輯”界面。按F9鍵進入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下，按F8鍵在全拼和五筆輸入法之間進行切換，輸入樣本信息 ，輸入完成后，點擊“確認”，保存輸入的內容并返回到“計數(shù)”界面。按打印鍵打印樣本分析報告。按照此操作過程進行其余樣本的分析。3、樣品分析結束后3.1 按菜單鍵，彈出系統(tǒng)菜單，選擇“關機”。3.2界面彈出“關機”對話框，點擊“確認”進入關機界面。3.3 將E-Z清洗液放到采樣針下，按計數(shù)鍵，采樣針將自動吸取E-Z清洗液，執(zhí)行液路和計數(shù)池的清洗。3.4 按照界面提示信息，將E-Z清洗液放到采樣針下，按計數(shù)鍵，采樣針將再次自動吸取E-Z清洗液，執(zhí)行液路和計數(shù)池的清洗。3.5 執(zhí)行完成后，界

6、面提示“請關閉電源”是，關閉分析儀的電源開關。3.6 關閉電源后檢查分析儀是否有滲漏，并將血液分析儀的周邊環(huán)境打掃干凈。第二節(jié) 尿液分析儀使用規(guī)程本測試儀是一項精密儀器，為了更好的維護和使用本儀器必須遵照以下操作規(guī)程。一、操作步驟1. 尿液分析儀的通訊電纜與電腦背面的通訊端口相連，接通電源，先打開電腦，再打開分析儀；儀器啟動，風扇轉動，推進器移動，屏幕顯示 “系統(tǒng)正在測試”，此時系統(tǒng)正在自檢，顯示屏顯示主菜單，工作臺檢條區(qū)有紅色光交替閃爍，用戶可以開始測試2. 點擊電腦桌面尿液分析軟件；3. 將試紙條的試劑區(qū)完全浸入新鮮的、充分混合的、未離心的樣本中立即取出，將試紙條的側邊沿尿樣容器的管壁刮去

7、多余尿液；4. 將蘸有尿液的試紙平放在工作臺的檢條區(qū)，確保試紙同工作臺前壁接觸；5. 儀器檢測到試紙存在后，推進器將試紙推到測試區(qū)進行測試；6. 當推進器退回原位，放下一條試紙，這樣實現(xiàn)連續(xù)測試；7. 當工作臺上所有的試紙條測試完畢，打印結果輸出結束后，按菜單鍵進入儀器設置，將電源開關撥到 “ 斷（）”位置，關閉儀器電源。二、儀器維護1. 不要在儀器通電狀態(tài)下清潔儀器；2. 不要用汽油、油漆稀釋劑、苯化合物等可能腐蝕儀器的有機溶劑擦拭儀器；3. 不要用水清洗液晶屏，不要用任何會擦傷工作臺和白基準的物質擦拭工作臺；4. 不要用任何溶劑清潔白基準，如果白基準有明顯劃痕或損壞，請與供應商聯(lián)系；5.

8、用柔軟干布或沾有溫和去污劑的軟布擦拭儀器，保持儀器清潔；6. 用柔軟、無磨損的布擦拭液晶屏；7. 為使儀器正常運行并提供準確的測試結果，必須定期從儀器中取下推進器、工作臺、步進板、用清水沖洗，用軟布依次擦干保持工作臺的清潔。三、注意事項1. 測試時不要將儀器放置在陽光直射的地方,以免影響測試精度；2. 請在測試前核對尿液分析試紙型號，避免因使用的尿液分析試紙型號不正確而導致測試結果錯誤；3. 請勿使用過有效期或變質的尿液分析試紙；4. 尿樣本中血的濃度高時，可影響測試的準確性，儀器能夠識別出高濃度血尿并打印出 “結果無效”的提示；5. 必須在推進器動作前，將待測試紙條放好；6. 在放置試紙條時

9、應確保試紙條前端接觸工作臺前壁；7. 如果儀器測試頭下發(fā)生故障導致紙條運行受阻。關掉儀器，拉出工作臺，取出受阻試紙條后，重新安裝工作臺。開機自檢后，對未得出結果的樣本重測。第三節(jié) 自動凝血儀操作規(guī)程1、儀器的常規(guī)操作1.1打開電源開關前的檢查。 檢查廢液瓶及洗液瓶。如果洗液瓶中洗液的液面過低，請用蒸餾水或去離子水將罐充滿。清空廢液瓶。 管道連接 檢查各種管線的連接。確保沒有管子脫落或扭結，電源線被安全的插入交流插座。確保打印機中有足夠的紙張以供打印當天所需處理的所有樣本結果。 補充反應杯 丟棄用過的反應杯，加入適量的干凈的反應杯。 1.2打開電源 開機順序：打印機 壓力單元電源單元和主單元（右

10、側）。 打開電源后，儀器自動進入自檢。 將病人樣本，質控與試劑分別按要求準備就緒，進入分析過程： 試劑準備 Set Reagent 輸入確認試劑體積 補充反應杯 安放樣本架 1.3樣本分析: Work List ID No.Entry 輸入樣本號 ENTER 選擇所需檢測的項目(變?yōu)?,確認所有的設置結束后 ENTER 按屏幕右上方“Start”鍵,執(zhí)行分析。 分析完畢,儀器進入準備狀態(tài)。 1.4關機前的工作 每日清潔所有樣本針和試劑針： 在主菜單屏上按下【Rinse probe】鍵。將出現(xiàn)清洗針屏。按下【Excute】鍵。 1.5關機 關閉電源。 2. 儀器保養(yǎng)2.1每日保養(yǎng)清洗樣品針每次做

11、完試驗都必須清洗樣品針，主要是預防堵針，執(zhí)行Rinse ProbeExcute清空垃圾箱2.2清空廢液查看儀器后面防逆流瓶Trap Chamber有無水，防止因為有水而導致真空泵不能抽真空在洗液瓶中注蒸餾水，最高不要超過上面的凹槽，防止因水過滿，工作時水回流到壓力泵和壓力傳感器上導致人為破壞。2.3每周保養(yǎng)做一次管路清潔，執(zhí)行Special Operate Rinse&Prepare清潔儀器2.4每半年保養(yǎng)清洗洗液瓶內部，清洗洗液瓶出水管上的過濾網(wǎng)一次。2.5每三或六個月保養(yǎng)清潔傳動滑軌(X軸、Y軸)并上潤滑油。防止因積塵而使樣品針運行不到位，向下扎錯位置造成樣品針彎曲或斷裂第四節(jié) 半

12、自動生化分析儀操作規(guī)程【操作規(guī)程】1.開機之前檢查電源線是否連接無誤，電源要求接地良好;連接打印機電源線，接通打印機電源開關;將廢液管插入廢液容器內;接通顯示器開關及主機背部電源開關。2.開機自檢后鍵入Enter，確定已設定測試參數(shù)鍵入Enter，進入編制工作表在設置欄，開啟聯(lián)機打印儀器預熱20分鐘后，調用已設定測試項目進行樣品測定打印結果清洗儀器關機。3.吸液口由不銹鋼保護管和鋼管內聚四氟乙烯吸液管組成，應注意保護，不要碰彎。4.切忌在帶電狀態(tài)下連接任何連接口?！緝x器的保養(yǎng)與維護】1.日常保養(yǎng)工作主要是清洗流動比色皿，每天工作結束后，要用蒸餾水清洗。具體方法如下：將吸液管插入蒸餾水中，向上扳

13、動吸液開關，反復沖洗流動比色皿，直到蒸餾水的吸光度值正常為止。2.每周要用專門的清洗劑清洗一次流動比色皿，清洗時，讓清洗劑停留在比色皿中約半小時，然后排掉，再用蒸餾水沖洗干凈，最后注入蒸餾水。3.不使用儀器時，流動比色皿內一定要保證充滿蒸餾水。4.更換打印機色帶時，嚴格遵照打印機操作手冊，避免不規(guī)范操作。5.光源燈更換時一定要先切斷儀器的電源，手不可觸摸光源燈的玻璃部分，萬一光源燈的玻璃部分弄臟了，可用無水乙醇將污物除去。6.更換的蠕動泵管尺寸材料應與原泵管一致，如不一致則要重新調整吸液量。第五節(jié) 血常規(guī)檢驗操作規(guī)程 【 標 本 】 抗凝靜脈血（有些儀器也可用末梢血）。 【 方 法 】 血液細

14、胞自動分析儀測定法。 【 試 劑 】 血液細胞自動分析儀配套試劑。 【 操 作 】 詳見血液細胞自動分析儀使用手冊。 【 附 注 】 1. 血常規(guī)包括白細胞計數(shù)及分類、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白濃度、紅細胞比積、血小板計數(shù)等項目。這些項目亦有相應的手工方法，詳見有關資料。 2. 半自動及全自動血液細胞分析儀從設計上均要求用抗凝靜脈血。其優(yōu)點為： （1）靜脈血能正確地反映病人實際情況，重復性好； （2）利于延長儀器的使用壽命； （3）解決了采血盤的交叉感染問題等。 3. 血細胞計數(shù)應用EDTA·K2：為抗凝劑（EDTA·K2·2 H2O 1.52.2mg可抗凝1ml血）。

15、 4. 貯血容器應選用有蓋塑料管。抗凝血采集后在室溫中貯存應不超過6h；如需制作血涂片應在2h內完成。 5. 測定前必須將EDTA·K2抗凝血充分混勻。 6. 血細胞分析儀測定最適溫度為1822，低于15或高于30，均可使細胞體積發(fā)生改變，影響各參數(shù)的結果。7. 血細胞分析儀用于白細胞分類只能當作一種過篩手段，當白細胞、紅細胞、血紅蛋白和血小板的任何一項有明顯升高或降低；白細胞分類出現(xiàn)異常結果（中間細胞群百分率8.0%）；紅細胞、白細胞和血小板的任何一個直方圖出現(xiàn)異常圖形等情況，須用顯微鏡檢查及分類。第六節(jié) 尿常規(guī)檢驗操作規(guī)程 【 標 本 】 新鮮尿液。 【 方 法 】 化學試帶法。

16、 【 試 劑 】 各型號尿液化學分析儀配套試帶。 【 操 作 】 詳見尿液化學分析儀使用手冊。 【 附 注 】 1. 尿常規(guī)檢查使用尿液化學分析儀，目前能進行810項檢測（PH、蛋白、葡萄糖、酮體、隱血、尿膽紅素、尿膽素原、亞硝酸鹽、比重、白細胞）。這些項目亦有相應的手工方法，詳見有關資料。 2. 必須了解所用試帶各膜塊注意事項、藥物干擾。 3. 要注意尿液化學分析儀測定結果與手工法的差異，必要時用手工法復查。 4. 尿液化學分析儀檢測僅是一個過篩手段，當?shù)鞍?、隱血、白細胞等出現(xiàn)異常結果（如尿蛋白“”或以上）時，應進行鏡檢。5. 尿液顏色、透明度等一般性狀異常時也應報告。第七節(jié) 肝功能檢驗操作

17、規(guī)程血清總膽紅素（TBIL）和結合膽紅素（DBIL）測定 改良JG法 【 試 劑 】 參照書刊文獻（如全國臨床檢驗操作規(guī)程第二版）自配，配制標準液的膽紅素應符合如下標準，純膽紅素的氯仿溶液在25當光徑1.000±0.001Cm,波長453nm條件下其摩爾吸光系數(shù)應在60700±1600范圍內，偶氮膽紅素的摩爾吸光系數(shù)應在74380±866范圍內，配制標準液的稀釋劑須含白蛋白，可用牛血清白蛋白或人血清代替人血清白蛋白。標準液應貯於棕色瓶中避光保存，在市售試劑中以含堿性酒石酸的靈敏度特異性高。 【 操 作 】 按試劑盒說明書或相應書刊文獻規(guī)程手工操作，比色測定，波長6

18、00nm.制作準曲線。血樣測定，從標準曲線上求TBIL及DBIL的含量以umo1/L報告。 也可按廠家提供的試劑及儀器使用的說明書的要求將相應的程序及參數(shù)設入，用自動生化分析儀測定。 【 標 本 】 血清，空腹血為宜，脂血、脂溶性色素及嚴重溶血干擾此測定，暫不能測定的標本應避光保存，室溫可穩(wěn)定8h，28可保存48h。 含疊氮鈉作防腐劑的質控血清不宜用此法測定膽紅素。 膽紅素氧化酶（BOD）法 【 試 劑 】 市售成套試劑。BOD試劑復溶后28可保存一周。 【 操 作 】 按廠家提供的試劑及儀器說明書要求設置程序輸入?yún)?shù)用自動生化分析儀測定。波長450或460nm。 【 標 本 】 血清要求與改

19、良J一G法相似。 二甲亞楓（DMSO）法 【 試 劑 】 市售現(xiàn)成試劑。 【 操 作 】 按試劑盒說明書手工操作比色測定或用自動生化儀測定。波長560nm。 【 標 本 】 血清、輕度脂血，溶血標本對結果無明顯影響、重度脂血、溶血標本須作標本空白進行較正。血氨測定 【 方 法 】 酶兩點法。 【 試 劑 】 市售成套試劑。 【 操 作 】 按試劑及儀器使用說明書要求，設入相應的程序及各項參數(shù)、用自動生化分析儀測定。波長340nm。 【 標 本 】 EDTA.Na2抗凝血漿。靜脈采血后與EDTA.Na2混勻，立即置冰水中盡快分離出血漿，加塞置24保存，在23h內分析，-20可穩(wěn)定24h。溶血標本

20、忌用。第八節(jié) 腎功能檢驗操作規(guī)程尿素氮1.檢測目的：檢測血清、血漿或尿液中尿素的含量，為臨床對相關疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果，以及對健康人群正常生理指標的監(jiān)測提供重要的參考價值。2.標本要求：2.1病人準備：空腹12小時。2.2標本類型：血清、肝素化的血漿或24小時尿。3.設備和試劑：3.1儀器設備：邁瑞半自動生化分析儀3.2試劑材料：試劑3.3試劑的貯存：3.3.1 28密閉避光貯存至標簽所注失效期。3.3.2開蓋上機28避光穩(wěn)定30天。3.3.3變質指示：試劑混濁變色或空白吸光度值<1.000時，不能繼續(xù)使用。3.4注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，吞下有害。試劑含有疊氮

21、化鈉，誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗，必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應形成爆炸性化合物，故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。3.5試劑準備：即開即用的，無需特殊準備。4.操作步驟：見生化分析儀操作流程。5.質量控制：5.1質控物：RANDOX多項人基質血清5.2質控措施：5.2.1室內質控：每日日常工作前進行。5.2.2室間質控：參加北京臨床檢驗中心臨床化學室間質評。6.干擾因素：總膽紅素40mg/dL，血紅蛋白450mg/dL，抗壞血酸400mg/dL對本法無干擾。7.參考區(qū)間及可報區(qū)間：7.1參考范圍：血清/血漿 2.868.20mmol/L24小時尿 15

22、35g/24h7.2可報范圍：0.0035.00mmol/L。樣品Urea含量超過線性范圍應用生理鹽水稀釋重做，結果乘以稀釋倍數(shù)。8.異常結果處理：結果異常、與臨床診斷不符，應復查或與臨床聯(lián)絡。肌酐1.檢測目的：檢測血清、血漿或尿液中肌酐的含量，為臨床對相關疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果，以及對健康人群正常生理指標的監(jiān)測提供重要的參考價值。3.標本要求：3.1病人準備：空腹12小時。3.2標本類型：血清、肝素化的血漿或尿液。4.設備和試劑：4.1儀器設備：邁瑞半自動生化分析儀4.2試劑材料：試劑4.3試劑的貯存： 28密閉避光貯存至標簽所注失效期。開蓋上機28避光穩(wěn)定30天。變質指示：試

23、劑混濁變色或空白吸光度值>0.050時，不能繼續(xù)使用。4.4注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，吞下有害。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗，必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應形成爆炸性化合物，故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。4.5試劑準備：即開即用的，無需特殊準備。5.操作步驟：見半自動生化分析儀操作流程。6.質量控制：6.1質控物：RANDOX多項人基質血清6.2質控措施：6.2.1室內質控：每日日常工作前進行。6.2.2室間質控：參加臨床化學室間質評。7.干擾因素：直接膽紅素257mol/L，血紅蛋白0.5g/L，抗壞血酸3mmol/

24、L,甘油三酯15.0mmol/L,肝素50KU/L，枸櫞酸鈉10g/L對本法無干擾。8.參考區(qū)間及可報區(qū)間：8.1參考范圍：血清/血漿53.0123.0mol/L (男性)44.0106.0mol/L (女性)首次晨尿 153015320mol/L24小時尿 6.615.0mmol/24h8.2可報范圍：0.08840.0mol/L。樣品Crea含量超過線性范圍應用生理鹽水稀釋重做，結果乘以稀釋倍數(shù)。9.異常結果處理：結果異常、與臨床診斷不符，應復查或與臨床聯(lián)絡。9.危急值及處理方法：>177mol/L。及時與臨床聯(lián)絡。10.實驗室解釋：增高：嚴重腎功能不全、各種腎障礙、肢端肥大癥等。降

25、低：營養(yǎng)不良、多尿等。第九節(jié) 血脂檢驗操作規(guī)程標本采集與處理 1受檢者抽血前二周應保持平衡的飲食習慣，近期體重穩(wěn)定無外傷，手術等意外情況。并注意如有使用降糖、降脂、降壓、避孕藥，-受體阻滯劑，免疫抑制劑，激素藥物等，則應根據(jù)所用藥物特性停藥數(shù)天或數(shù)周后再作血液脂類檢測。 2空腹抽血，TG，脂蛋白，載脂蛋白測定應至少禁食12小時（僅作膽固醇測定不必強求空腹）24小時內不作劇烈運動。抽血前不要久站立。至少應靜坐5分鐘。抽血時止血帶使用不可超過1分鐘。 3標本用血清，也可用肝素或EDTA.Na2抗凝之血漿。EDTA.Na2濃度不宜太高。 4血標本室溫放置不得超過3h，放置3045分鐘后應即時分離出血

26、清（漿）蓋封於4冰箱中可穩(wěn)定至少4天，如需長期保存，應於-70中冰凍存放，不可反復凍融。血清總膽固醇（TC）測定 酶法（CHODPAP法） 【 試 劑 】 市售現(xiàn)成試劑。 【 操 作 】 按試劑及儀器使用說明書要求設定程序，輸入?yún)?shù)用自動或半自動生化分析儀測定（速率法）終點法可手工操作，用普通分光光度計比色測定。波長500nm或520nm。 【 標 本 】 血清（漿）參看本節(jié)的標本采集與處理。 【 附 注 】 本法為中華醫(yī)學會檢驗學會推薦的TC測定常規(guī)方法（中華醫(yī)學檢驗雜志，1995、18：185）。 膽固醇標準液以定值參考血清為宜，而不宜用Chol的水溶液作標準。Chol定值質控血清亦不應用

27、作標準液。 主要技術指標：終點法批內CV1.5%、批間CV2.5%。靈敏度：顯色劑用酚時，TC5.2mmo1/L(200mg/dl)時的吸光度（A 500nm）約0.300.35，故A 500nm=0.005時TC濃度約為0.08mmo1/L(3mg/dL)。測定范圍：當血清與試劑用量之比為1:100時其測定的上界為13mmo1/L(500ng/dL)。血清甘油三酯（TG）測定 酶法（GPOPAP法） 【 試 劑 】 市售現(xiàn)成試劑。有兩種。 一步酶法單一試劑，二步酶法雙試劑。 標準液（參考物）一步酶法之用三油酸甘油酯水溶液，也可用甘油，但甘油不適用於二步酶法。 【 操 作 】 按試劑及儀器使用

28、說明書要求設定程序和參數(shù)，用自動或半自動生化分析儀測定，終點法可用普通分光光度計手工操作，比色測定。波長500nm。 【 標 本 】 血清（漿）參看本節(jié)標本采集與處理。 【 附 注 】 本法在操作程序上分為一步酶法與二步酶法，二步酶法為中華醫(yī)學檢驗學會的推薦方法（中華醫(yī)學檢驗雜志1995、18：249）?，F(xiàn)階段允許二法并存，要求逐步過渡到統(tǒng)一采用二步酶法，在方法尚未統(tǒng)一前，實驗室報告TG測定結果時應注明“除FG值”或“未除FG值”。 主要枝術指標：酶試劑用緩沖液配制后，2025應穩(wěn)定1天，4可穩(wěn)定37天，試劑空白為A500nm0.05；顯色后穩(wěn)定30min：測定上界11.3mmo1/L(100

29、mg/dL)；精密度：批內CV3%，批間CV5%：靈敏度：2mmo1/L TG A 500nm0.2。血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)測定 磷鎢酸鎂沉淀法 【 試 劑 】 市售成套試劑，沉淀劑，酶試劑（同TG測定）。 【 操 作 】 按試劑盒說明書操作。 1沉淀含apoB的脂蛋白。 2測定上清液（只含HDL）的膽固醇含量（方法同酶法TC測定）。 【 標 本 】 血清（漿）。 硫酸葡聚糖一鎂沉淀法 【 試 劑 】 市售成套試劑：總HDL試劑，HDL3試劑，酶試劑（同TC試劑）。 【 操 作 】 按試劑說明書操作： 1沉淀含apoB的脂蛋白，（總HDL試劑）； 2沉淀含apoB的脂蛋白及HDL

30、2（HDL3試劑）； 3測定總HDLC及HDL3C（同酶法TC測定），并計算出HDL2C量。 【 標 本 】 血清（漿）血樣在室溫中不宜久放，應即時測定，原則應低溫保存。 直接HDLC測定法 【 試 劑 】 市售專門的試劑，無沉淀劑。酶試劑同TC測定。（如日本第一化學藥品株式會社的產(chǎn)品）。 【 操 作 】 按試劑盒及儀器使用說明書要求設置程序，輸入?yún)?shù)直接用自動或半自動生化分析儀測定，無須沉淀離心分離出HDL步驟。 【 標 本 】 血清（漿）。血清低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）測定 1Friedwald工式計算法： （1）LDL-C=TCHDL-CTG/5（以mg/dl為單位計）； （2）L

31、DL-C=TCHDL-CTG/2.2 (以mmo1/L為單位計)； （3）只有當血TG4.52mmo/L結果才較準確； （4）只有TC、TG、HDL-C三項測定都準確且符合標準化要求時，才可計算出LDL-C的近似值。 2聚乙烯硫酸沉淀法 【 試 劑 】 沉淀劑市售，酶試劑同TC測定。 【 操 作 】 1TC測定。 2選擇性沉淀血清中LDL，測定上清液之HDLC與VLDLC之和的量，（同TC測定）。 3計算出LDLC的含量。 【 標 本 】血清。血清載脂蛋白A1（apoA1）測定 免疫透射比濁法。波長340nm，本法批間CV5%。 【 試 劑 】 市售試劑盒，試劑28保存，不同批號試劑不能混合使

32、用，抗血清效價不應低於16。 【 操 作 】 按試劑及儀器使用說明書要求，設定程序和參數(shù)用自動生化分析儀測定，也可用特定蛋白分析儀作速率法散射比濁測定，或用含340nm的分光光度計手工操作測定。 【 標 本 】 血清。血清載脂蛋白B（apoB）測定 免疫透射比濁法。波長340nm，本法批間CV5%。 【 試 劑 】 市售試劑，28保存，不同批號試劑不能混合使用，抗血清效價不應低於1：128。 【 操 作 】 參看apoA1測定。 【 標 本 】 血清。 第十節(jié) 血液葡萄糖測定技術操作規(guī)程1.檢測目的：檢測血清或血漿中葡萄糖的含量，為臨床對相關疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果，以及對健康人群

33、正常生理指標的監(jiān)測提供重要的參考價值。3.標本要求：3.1病人準備：空腹12小時。3.2標本類型：血清或NaF抗凝的血漿。采血后及時分離，以避免血清或血漿中葡萄糖被細胞利用而降低。4.設備和試劑：4.1儀器設備：奧林巴斯AU600生化分析儀4.2試劑材料：四川邁克公司試劑參與反應成份：R1：酚（12.0mmol/L）R2：GOD（35KU/L）、POD（5KU/L）、4-AAP（1.20mmol/L）4.3試劑的貯存： 28密閉避光貯存至標簽所注失效期。開蓋上機28避光穩(wěn)定30天。變質指示：試劑混濁變色或空白吸光度值>0.150時，不能繼續(xù)使用。4.4注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，

34、吞下有害。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗，必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應形成爆炸性化合物，故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。4.5試劑準備：即開即用的，無需特殊準備。5 質量控制：5.1質控物：RANDOX多項人基質血清5.2質控措施：5.2.1室內質控：每日日常工作前進行。5.2.2室間質控：參加北京臨床檢驗中心臨床化學室間質評。6.參考區(qū)間及可報區(qū)間：6.1參考范圍：空腹3.896.11mmol/L餐后1小時7.788.89mmol/L餐后2小時3.897.78mmol/L6.2可報范圍：0.0022.30mmol/L。樣品GLU含量超

35、過線性范圍應用生理鹽水稀釋重做，結果乘以稀釋倍數(shù)。7.危急值及處理方法：<2.5mmol/L或>10mmol/L。及時與臨床聯(lián)絡。第十一節(jié) 凝血四項檢驗操作規(guī)程全血凝固時間檢驗（CT） 【 標 本 】 靜脈取血3ml。 【 方法與操作 】 試管法、硅管法操作參見全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版）。 【 附 注 】 1. 靜脈取血要一針見血，盡量減少組織液和空氣混入。 2. 水浴箱溫度要恒定，過高或過低，可影響結果?；罨糠帜蠲笗r間測定（APTT） 【 標 本 】 自靜脈取血，用109mmol/L枸椽酸鈉作1:9抗凝。 【 試 劑 】 市售成套試劑。 【 方法與操作】 按試劑及有關儀

36、器說明書要求進行。 【 附 注 】 1. 標本應及時檢測，最遲不超過2h。 2. 分離血漿應在3000r/min，離心10min。 3. 本試驗較試管法全血凝血時間敏感，能檢出因子：C25輕型血友病。血漿凝血酶原時間測定（PT，一期法） 【 標 本 】 靜脈血1.8ml，用109mmol/L枸椽酸鈉0.2ml抗凝。 【 試 劑 】 1. 組織凝血活酶浸出液； 2. 0.025mol/L CaCl2液； 【 方法與操作 】 見全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版）。 【 附 注 】 1. 采血后宜在1h內完成，置冰箱4保存,不應超過4h，-20下可放置2周，-70可放置6個月。 2. 水溫箱控制在37&

37、#177;1，過高過低均影響結果。簡易凝血活酶生成試驗（STGT） 【 標 本 】 取全血0.04ml加5ml蒸餾水，混勻，即成溶血液，備用。 【 方法與操作 】 見全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版）第十二節(jié) AB0血型正、反血型鑒定技術操作規(guī)程1.檢測目的用于檢測患者血型，實施輸血治療和組織器官移植等。2.檢測原理（正定型法）根據(jù)IgM類特異性血型抗體與紅細胞上特異性抗原結合能夠出現(xiàn)凝集反應的原理，用已知IgM類特異性標準抗血清與被檢紅細胞在室溫條件下反應，若被檢紅細胞出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，表明被檢紅細胞上有與血型抗體對應的抗原。3.標本要求新鮮全血。4.試劑標準抗A、抗B血清。5.操作步驟（玻片法）5

38、.1 標記：取一載玻片，用蠟筆畫上直徑2cm左右的兩個圓圈，分別標記抗A、抗B。5.2 抗血清：在玻片蠟筆圈內按標記所示分別滴加抗A、抗B標準抗血清各一滴。5.3 紅細胞：在抗A、抗B圈內加被檢者全血各一滴。用玻棒將紅細胞與抗體充分混勻，室溫下放置1830min（為防止天氣干燥造成玻片干涸，可把試驗玻片放在有濕紗布的蓋盤中）。5.4 血型判讀：搖動玻片，肉眼觀察玻片蠟筆圈內有無顆粒狀凝集及凝集程度，判定陰性、陽性和陽性程度。陰性指視野中紅細胞程均勻散布，無凝集顆粒，顯微鏡下紅細胞分散存在，無聚集靠攏現(xiàn)象。陽性時紅細胞出現(xiàn)凝集。 6.質量控制6.1 分型血清質量性能符合要求，用畢后應放置冰箱保存

39、，以免細菌污染。6.2 試管、滴管和玻片必須清潔干燥，防止溶血。6.3 按理IgM抗-A和抗-B與相應紅細胞的反應溫度以6為最強，但為了防止冷凝集現(xiàn)象的干擾，一般仍在室溫內進行試驗，36可反應減弱。6.4 觀察時應注意紅細胞呈特異性凝集、繼發(fā)性凝固以及緡錢狀排列的區(qū)別。7.干擾因素7.1 分型血清效價太低、親和力不強；7.2 受檢者紅細胞上抗原位點過少或抗原性減弱；7.3 受檢者血清中缺乏應有的抗-A/抗-B抗體；7.4 各種原因引起的紅細胞溶解，誤判為不凝集。部分溶血時，可溶性血型物質中和了相應的抗體；7.5 由細菌污染或遺傳因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因；7.6 血清中有意

40、外抗體，如自身抗-I，常引起干擾；7.7 老年人血清中抗體水平大幅度下降；7.8 更換新批號抗血清或對試劑結果有懷疑時，可設定陽性、陰性和自身對照；7.9 為避免交叉污染，尖吸管、玻棒只能一次性使用；7.10 嬰幼兒紅細胞抗原未發(fā)育完全、老年體弱者抗原性較弱；7.11 有些疾病可能使紅細胞定性出現(xiàn)困難，如：嚴重的腸道細菌感染；嚴重的細菌感染；血清中存在病理性冷凝集素與紅細胞上抗原結合；部分高球蛋白和異常高球蛋白血癥患者；7.12 輸入異型血或做過與受者血型不同的異體骨髓器官移植的病人在血型堅定時可能出現(xiàn)混合外觀。第十三節(jié) 交叉配血操作規(guī)程交叉配血試驗 （凝聚胺法）原理凝聚胺試驗是利用低離子溶液

41、促進紅細胞抗原與血清（漿）中的抗體反應，再利用凝聚胺引起紅細胞間非免疫性的凝集，讓已有抗體（IgG）反應的紅細胞間的距離縮短。距離縮短后更能引起已反應的抗體和別的紅細胞產(chǎn)生反應形成免疫性的凝集。而由凝聚胺所引起的非免疫性紅細胞凝集反應可被后來加入的復懸液所中和而散開，如有免疫反應，凝集就不會散開，為陽性反應。如沒有免疫反應，凝集就會散開，為陰性反應。交叉配血試驗是在鹽水介質的基礎上加入凝聚胺，檢測供患之間是否相合，患者血清（漿）中是否含有具臨床意義的紅細胞異體抗體。試劑組成1 潔凈試管，離心機，顯微鏡。2 0.85% 氯化鈉溶液：準確稱取氯化鈉（AR）8.5 g，用蒸餾水溶解并定容至 1000

42、 ml。  試劑啟用后，有效期為：二周。3 聚胺試劑（1）質溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸-2鈉及穩(wěn)定劑。（2） 凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化鈉及穩(wěn)定劑。（3）復懸液：含檸檬酸鈉，葡萄糖及穩(wěn)定劑。（4）陽性對照血清：含抗D血清，氯化鈉及穩(wěn)定劑。4  抗人IgG 血清。試劑保存和穩(wěn)定性1凝聚胺試劑須保存在2-25。2有效期內可使用。3抗人IgG血清低溫冰箱保存。復溶后放24冰箱保存。標本收集和準備1抽取受血者靜脈血3-4ml（操作中小心防止紅細胞破損），放入一已貼標簽干燥潔凈的試管中為血清管(也可用EDTA-K2抗凝血液)，并將注射器中余下的少量血液配成2%紅細胞生理鹽

43、水懸液，放入另一已貼標簽干燥潔凈的試管中為紅細胞懸液管。以上標本有效期為三天；若受血者抽取標本后，輸用過血液或血液制品，且輸用時間超過12 小時的，必須重新采集標本。22% 紅細胞懸液：用生理鹽水洗滌紅細胞3次。根據(jù)下表進行紅細胞懸液的配制。懸液濃度（%）          壓積紅細胞（滴）          鹽水（滴）-      2            

44、;            1                     2ml(40)      5                        1   

45、60;                 0.8ml(16)-操作步驟1 取出3支試管分別標記主，次及對照測試：主測管：加入病人血清（漿）2滴，再加入供血者3-5%紅細胞懸液1滴，次測管：加入供血者血清（漿）2滴，再加入病人3-5%紅細胞懸液1滴，對照管：加入2滴*4陽性對照血清，再加入供血者3-5%紅細胞懸液1滴。2各加入*1低離子介質溶液0.6ml，輕輕混勻，于室溫下靜置1分鐘。3 再滴入2滴*2凝聚胺溶液，輕輕混勻，于室溫下靜置15秒。4 3400rpm離心1分鐘，然后把上清液倒掉，管底保留大約0.1ml的液體。5 目測紅細胞有無變成凝塊，如果沒有凝塊，則必須重做，（請看注意事項6）。重做后仍然沒有凝集現(xiàn)象出現(xiàn)，可能試劑失效。6