淺析胃舒散對(duì)五氯硝基苯致肝損傷的保護(hù)作用

1、淺析胃舒散對(duì)五氯硝基苯致肝損傷的保護(hù)作用    摘要：  【目的】觀察胃舒散對(duì)五氯硝基苯(PCNB)所致肝損傷的保護(hù)作用?！痉椒ā縎D大鼠隨機(jī)分為4組，即正常組，模型組，胃舒散高、低劑量組(劑量分別為250、125 g·kg-1·d-1);除正常組外，其他組均在給藥后1 h灌胃PCNB(劑量為400 mg·kg-1·d-1),連續(xù)15 d。檢測(cè)各組肝臟指數(shù)，血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、堿性磷酸酶(ALP)水平和肝組織丙二醛(MDA)含量，并行肝組織病理學(xué)檢查。【結(jié)果】與正常組比較，模型組肝臟指數(shù)，血清GOT

2、、ALP水平，肝組織MDA含量均顯著升高(P<005或P<001),肝組織壞死灶數(shù)顯著增加(P<001);胃舒散高、低劑量組可顯著降低肝臟指數(shù)，血清GOT、ALP水平和肝組織MDA含量，減少肝組織壞死灶數(shù)(與模型組比較，P<005或P<001),減輕肝組織病理?yè)p傷?！窘Y(jié)論】胃舒散對(duì)PCNB所致肝損傷具有一定的保護(hù)作用。 關(guān)鍵詞：  胃舒散/藥理學(xué);肝損傷/中藥療法;肝/病理學(xué);疾病模型，動(dòng)物;大鼠胃舒散是汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院自配制劑，該方由甘草、大黃、陳皮、木香、石菖蒲、雞骨香、堿式碳酸鉍、氧化鎂等組成，有行氣止痛、祛風(fēng)除濕之功效，用于慢性胃炎、胃

3、及十二指腸潰瘍，對(duì)慢性肝炎證屬肝脾不和者療效確切1。前期研究顯示2-3，胃舒散對(duì)四氯化碳(CCl4)所致急性和慢性肝損傷實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均有一定程度的保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)旨在觀察胃舒散對(duì)五氯硝基苯(PCNB)致肝損傷大鼠的保護(hù)作用，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。1材料與方法11藥物胃舒散由汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院制劑室提供(制劑批準(zhǔn)文號(hào)：粵Z20070715，批號(hào)：20080416)，用5 g/L甲基纖維素鈉(CMCNa)配成所需給藥濃度。12主要試劑與儀器PCNB由山西臨汾有機(jī)化工廠生產(chǎn)(批號(hào)：060530);谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)和堿性磷酸酶(ALP)試劑盒均由德賽診斷系統(tǒng)(上海)有限公司提供;丙二醛(MDA)試

4、劑盒由南京建成生物工程研究所提供;甲醛(化學(xué)純)溶液由廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)(批號(hào)：20070606);UV2100分光光度計(jì)(日本島津);JY922D超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)(寧波新芝生物科技股份有限公司)。13動(dòng)物SD大鼠，體質(zhì)量200250 g，清潔級(jí)，雌雄不限，購(gòu)自廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合格證號(hào)：2005A011。14動(dòng)物分組、模型復(fù)制4及給藥方法將SD大鼠隨機(jī)分為4組，每組10只，即正常組，模型組，胃舒散低劑量組(劑量為125 g ·kg-1·d-1)，胃舒散高劑量組(劑量為250 g ·kg-1·d-1)。除正常組外，其他各組在給藥1 h后灌胃PCNB

5、(劑量為400 mg ·kg-1·d-1)，正常組則給予等容積的50 g/L CMCNa，連續(xù)15 d。全部動(dòng)物于末次給藥后禁食24 h，稱質(zhì)量后經(jīng)眶靜脈取血，脫頸椎處死，迅速取出肝臟稱質(zhì)量，計(jì)算肝臟指數(shù)：w=mliver/mbody。所取血液經(jīng)1 500 r/min離心10 min,分離血清，按試劑盒操作步驟測(cè)定血清GOT、ALP含量。每只大鼠取相同部位肝臟用體積分?jǐn)?shù)10%的甲醛溶液固定，石蠟包埋切片，蘇木素伊紅(HE)染色，然后在光學(xué)顯微鏡下觀察并計(jì)算每個(gè)視野下肝組織壞死灶數(shù)目。另取肝組織適量，冰浴下用生理鹽水抽取100 g/L肝勻漿，采用硫代巴比妥酸法5測(cè)定肝組織MD

6、A含量。15統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 110統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。2結(jié)果21一般情況模型組大鼠被毛松弛，毛色暗淡，厭食，消瘦，肝臟表面呈暗紅色，部分肝臟表面呈顆粒狀，門(mén)靜脈增粗。胃舒散高、低劑量組情況較模型組好，兩組各死亡1只，兩組大鼠肝臟表面顆粒狀結(jié)節(jié)均明顯減少。22各組肝臟指數(shù)、肝功能、MDA含量及肝組織病理檢查情況表1結(jié)果顯示，模型組大鼠血清GOT和ALP水平、肝臟指數(shù)以及肝組織MDA含量均顯著升高(與正常組比較，P005或P001)。胃舒散高、低劑量可顯著降低肝臟指數(shù)、血清GOT和ALP水平及肝組織MDA含量(與模型組比較，P005或 P001)。病理切片顯示，模型組大鼠肝組織細(xì)胞

7、出現(xiàn)變性壞死，肝小葉結(jié)構(gòu)破壞，肝索排列紊亂，纖維結(jié)締組織增生，有巨大的纖維間隔和假小葉形成，光鏡視野下肝組織壞死灶數(shù)目顯著增加(與正常組比較，P001)(圖1-b);胃舒散高、低劑量組肝組織壞死灶數(shù)目顯著減少(與模型組比較，P005或P001)，而且沒(méi)有大的纖維間隔和假小葉(圖1-c)，提示胃舒散高、低劑量可減輕肝組織病理?yè)p傷。表1各組肝臟指數(shù)、GOT和ALP水平、MDA含量及肝組織壞死灶數(shù)目比較。3討論P(yáng)CNB屬有機(jī)氯類農(nóng)藥，是一種保護(hù)性殺蟲(chóng)劑，被廣泛應(yīng)用于防治農(nóng)作物病蟲(chóng)害及蔬菜、水果的土壤處理和種子消毒。由于 PCNB容易積蓄于人體的肝臟甚至導(dǎo)致肝損傷，因此一直被列為果蔬中農(nóng)藥殘留檢測(cè)指標(biāo)

8、之一6。根據(jù)文獻(xiàn)4報(bào)道，PCNB能夠造成肝損傷。本實(shí)驗(yàn)中灌胃給予400 mg·kg-1·d-1 PCNB后大鼠血清GOT和ALP水平、肝臟指數(shù)及肝組織中MDA含量顯著升高，病理檢查表明PCNB可引起不同程度的肝細(xì)胞損傷，甚至出現(xiàn)局部壞死，表明造模成功。甘草是胃舒散的主要成分之一，在處方中所占比例最大。本草圖經(jīng)指出：“甘草能解百毒，為眾藥之要”。甘草對(duì)四氯化碳、四氯乙烯、抗結(jié)核劑及酒精引起的動(dòng)物肝傷害有保護(hù)作用，其有效成分甘草酸經(jīng)吸收后在肝臟中分解為甘草次酸和葡萄糖醛酸，后者能與毒物結(jié)合而解毒7。現(xiàn)代藥理研究證實(shí)8，減少肝毒物活性是甘草酸抗肝損傷的作用機(jī)制之一。大黃在胃舒散中

9、以生品入藥，有緩瀉的作用，其瀉下的主要成分番瀉苷A在大腸中的代謝產(chǎn)物能夠直接刺激大腸，使其排空運(yùn)動(dòng)增加而促進(jìn)排便，從而減少化學(xué)性毒物在體內(nèi)的停留時(shí)間7。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，胃舒散對(duì)PCNB所致大鼠肝損傷具有一定的保護(hù)作用，其作用機(jī)理可能與胃舒散中所含甘草的護(hù)肝作用有關(guān)，也可能是胃舒散中所有中藥協(xié)同作用的結(jié)果，有待進(jìn)一步驗(yàn)證?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】  1林旭楷，李德名. 胃舒散治療濕熱內(nèi)阻型胃脘痛53例J.江蘇中醫(yī),1998,19(痛證專輯)：79.2 林旭楷，許森源，張奕鵬，等. 胃舒散對(duì)四氯化碳性肝損傷小鼠的影響 J. 廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，21(5)：385.3 林旭楷，李德名，許森源，等. 胃舒散對(duì)四氯化碳慢性肝損傷大鼠的影響 J.醫(yī)藥論