人參須超微粉醇提液對(duì)去卵巢大鼠血脂的影響

1、人參須超微粉醇提液對(duì)去卵巢大鼠血脂的影響    Tags：卵巢 人參 血脂 作者：張益嘉，吳鐵，吳怡，崔燎，張新樂，吳光樑， 周湘君，李彬【摘要】 目的觀察人參須超微粉醇提液對(duì)去卵巢大鼠血脂水平的調(diào)節(jié)作用。方法32 只 SD 雌性大鼠隨機(jī)分為 4 組，每組 8 只，以去卵巢大鼠為血脂紊亂模型，預(yù)防用藥90 d ，觀察人參須超微粉醇提液中、低劑量等分別對(duì)大鼠血脂譜各值以及體重、肝臟、子宮重量等的影響。結(jié)果與假手術(shù)組比，去卵巢組大鼠體重、總膽固醇(TC)明顯升高(P0.01或P0.05)，甘油三酯(TG)升高不明顯，高密度脂蛋白膽固醇(HDL-c)和子宮重量

2、顯著下降(P0.01或P0.05)；與去卵巢組相比，人參須超微粉醇提液中、低劑量可顯著降低 TC水平、升高 HDL-c 水平(P0.05或P0.01)，對(duì)體重、子宮重量沒有顯著影響，中劑量人參醇提液還能降低 TG(P0.05)與升高 HDL-c/TC 值(P0.01)。 結(jié)論去卵巢能造成大鼠血脂紊亂，中藥人參須的超微粉醇提液能有效改善其血脂水平。 【關(guān)鍵詞】 人參須 去卵巢大鼠 血脂類Abstract：ObjectiveTo study the regulatory effects of the alcohol extracts of Ginseng fibrous root on the b

3、lood lipid of ovariectomized rats. Methods32 female Sprague-Dawley rats were randomly divided into sham operation group (sham)，ovariectomized group (OVX) and two different dosages of the alcohol extracts of ginseng fibrous root treated groups(GSL&GSM) The levels of serum lipid and body weights，l

4、iver and uterus weight were measured after 90 days treatment.ResultsOvariectomized rats had much higher total cholesterol(TC) (P 0.05) and body weight (P 0.01) as compared to Sham groupA significant decrease in high density lipoprotein cholesterol(HDL-C) (P 0.01) and uterus weight(P 0.05) were also

5、observed though no significant elevation in triglyeride (TG) was reported. GSL and GSM lowered serum TC(P 0.01) and enhanced HDL-C(P 0.05 or P 0.01)，and had no effect on body weight or uterus weight. GSM also enhanced HDL/TC value(P 0.01) and lowered TG(P 0.05) as well. Conclusio

6、nThe alcohol extracts of Ginseng fibrous root can regulate the blood lipid in ovarieetomized rats.Key words：Ginseng fibrous root； Ovariectomy； Blood-lipid Spectrum在當(dāng)今人口老齡化的趨勢(shì)下，諸如女性絕經(jīng)后動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病、骨質(zhì)疏松癥等多種老年性疾病的防治日益受人們關(guān)注。女性進(jìn)入更年期后，由于卵巢內(nèi)分泌功能衰退，雌激素水平下降而導(dǎo)致脂肪和膽固醇代謝失常1，使絕經(jīng)女性血脂升高，使心血管疾病發(fā)病率和死亡率增加。亦有文獻(xiàn)報(bào)道以去卵巢大鼠為

7、血脂紊亂模型觀察多種中藥調(diào)節(jié)血脂的作用2，3。人參須為名貴中藥材、五加科植物人參的細(xì)支根及須根，亦有益氣活血之功效。有研究發(fā)現(xiàn)，人參的主要有效成分人參皂苷對(duì)高膽固醇模型大鼠有一定降血脂作用 4，但由于價(jià)格昂貴，從人參中提取皂苷成本較高。人參須價(jià)格一般僅為人參的1/l01/2，而其總皂苷的含量甚至可以高于人參中皂苷的含量5。為進(jìn)一步開發(fā)中藥人參，研究其調(diào)節(jié)血脂、抗動(dòng)脈硬化機(jī)制，為其防治婦女絕經(jīng)后血脂紊亂及動(dòng)脈硬化提供藥理學(xué)依據(jù)，本實(shí)驗(yàn)采用大鼠去卵巢模型，觀察超微粉醇提工藝制備的人參須提取液對(duì)去卵巢大鼠血清脂質(zhì)譜 TG，TC，HDL-c，HDL-c/TC 值等指標(biāo)以及體重增長(zhǎng)量和肝臟、子宮重量的影

8、響?，F(xiàn)報(bào)道如下。1 材料與儀器1.1 藥品人參須超微粉醇提液的制備：人參須，粉碎，用貝利微粉機(jī)進(jìn)行微粉化，70% 乙醇浸泡 24 h ，加熱提取 2 h ，過濾，濾渣再加 40% 乙醇浸泡 24 h，加熱提取 2 h，過濾，合并濾液，濃縮，至 100%（1g生藥/ml）和 33% 兩種濃度。經(jīng) HPLC 法檢測(cè)，中劑量藥液（1 g生藥/ml）含人參皂苷 Rg1（6.63±0.26）mg/g 生藥，人參皂苷Rb1（6.52±0.48 ）mg/g 生藥， 人參皂苷 Re（8.17±0.38）mg/g 生藥。1.2 試劑 總膽固醇試劑盒（TC）、甘油三酯試劑盒（TG）、

9、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-c）試劑盒均為溫州東甌生物工程有限公司產(chǎn)品。1.3 動(dòng)物清潔級(jí)成年雌性未孕 SD 大鼠 32 只，體重（271.67±25.63）g，由廣東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，廣東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證編號(hào)：粵監(jiān)證字 2006A015 ，北京產(chǎn)大鼠維持期全價(jià)飼料飼養(yǎng)，自由攝食、攝水。1.4 儀器ELX800 型酶標(biāo)儀，美國(guó) BIO-Tek 公司產(chǎn)品； WZJ6（BFM6）型貝利微粉機(jī)，濟(jì)南倍力粉技術(shù)工程有限公司產(chǎn)品。2 方法2.1 模型建立去卵巢實(shí)驗(yàn)時(shí)除假手術(shù)組外其余各組大鼠以 3% 戊巴比妥鈉無菌溶液 0.13 ml·（100 g）-1BW 腹腔注射麻醉，無菌條

10、件下腹部手術(shù)切除雙側(cè)卵巢后縫合6，假手術(shù)組大鼠只切開肌層進(jìn)入腹腔尋找出卵巢后不切除并回納腹腔。手術(shù)后觀察傷口愈合情況并常規(guī)飼養(yǎng)，觀察 2 d 后開始作灌胃預(yù)防給藥。2.2 分組與給藥32 只大鼠隨機(jī)分為 4 組，分別為假手術(shù)組、去卵巢組、人參須超微粉醇提液中劑量組(GSM)、低劑量組(GSL)每組各 8 只。低劑量組為中劑量（100%即1 g 生藥/ml）加兩倍體積蒸餾水稀釋成 33% 的藥液。從去卵巢后 2 d 開始，各預(yù)防用藥組按 5 ml·（kg·bw）-1·d-1灌胃給藥，假手術(shù)組及去卵巢組每天給予等量蒸餾水灌胃，連續(xù) 90d 。2.3 指標(biāo)觀察與測(cè)定方法

11、實(shí)驗(yàn)過程中每天觀察大鼠進(jìn)食、飲水、活動(dòng)情況等變化并記錄，7 d 稱體重 1 次。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束前 1 d 下午開始禁食，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)心臟取血處死大鼠，取血離心收集血清，并剝離子宮、肝臟。酶法上酶標(biāo)儀比色測(cè)血清 TC，TG，HDL-c 濃度，具體步驟均按各試劑盒說明書要求操作，并計(jì)算 HDL-c/TC 值。子宮及肝臟重量（濕重）采用稱重法，計(jì)算子宮/體重比、肝臟/體重比。大鼠體重增長(zhǎng)量由實(shí)驗(yàn)結(jié)束當(dāng)周體重減去卵巢實(shí)驗(yàn)當(dāng)周體重求得。2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有測(cè)定指標(biāo)均采用±s表示，使用 SPSS 13.0 for Windows 軟件中的單因素方差分析(AN0VA)進(jìn)行檢驗(yàn)，先用 Levene

12、9;s test 對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，如方差齊用 Bonferroni 檢驗(yàn)，如方差不齊則用 Tamhane's T2 檢驗(yàn)，P0.05表示差異有顯著性。3 結(jié)果3.1 人參須超微粉醇提液對(duì)大鼠體重的影響各組體重指標(biāo)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果如表 1 所見，大鼠切除卵巢后體重增加較快，實(shí)驗(yàn)?zāi)┢谌ヂ殉步M大鼠體重明顯高于假手術(shù)組(P0.01)，體重增長(zhǎng)幅度亦明顯高于假手術(shù)組(P0.01)；和去卵巢組相比，GSM，GSL 組大鼠的體重增長(zhǎng)變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，GSM、GSL 組仍高于假手術(shù)組(P0.01)。表1 人參須超微粉醇提液對(duì)實(shí)驗(yàn)前、后大鼠體重及體重增長(zhǎng)量的影響（略）3.2 人參須超微粉醇提液對(duì)

13、大鼠子宮、肝臟重量的影響 各組臟器重量指標(biāo)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果如表 2 所見，去卵巢組去勢(shì)大鼠肝臟/體重比明顯較假手術(shù)組降低 (P0.01) ；和去卵巢組相比所有預(yù)防用藥組都使肝重明顯增加 (P0.01)；與假手術(shù)組相比，各組去勢(shì)大鼠子宮重量都明顯下降 (P0.01)；和去卵巢組相比，所有預(yù)防用藥組子宮重量無明顯差異。表2 人參須超微粉醇提液對(duì)大鼠肝臟、子宮體重比的影響（略）3.3 人參須超微粉醇提液對(duì)大鼠血脂水平的影響 各組血清測(cè)定上述各項(xiàng)血清譜指標(biāo)，測(cè)定值經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果見表3。表3 低、中劑量人參醇提液對(duì)去卵巢大鼠血脂水平的影響（略）與假手術(shù)組比較，去卵巢組大鼠血清總膽醇(TC)值明顯升高(

14、P0.01)，高密度脂蛋白(HDL-c)值顯著降低(P0.01)，HDL-c/TC值亦降低(P0.05)，血清甘油三酯(TG)值雖有所上升，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與去卵巢組比較，所有人參用藥組均能顯著降低TC (P0.01)，升高 HDL-c，差異均有顯著性(P0.01或P0.05)，但 HDL-c/TC 值只有 GSM 組明顯增高(P0.01)， TG只有GSM組降低(P0.05)。4 討論4.1 去卵巢大鼠高脂血癥可模擬絕經(jīng)期血脂紊亂本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，去勢(shì)大鼠體重有明顯增加趨勢(shì)，血清脂質(zhì)譜指標(biāo) TC，TG升高，HDL-c 明顯降低。此高脂血癥的實(shí)驗(yàn)結(jié)果和絕經(jīng)期綜合征婦女血脂紊亂的變化一致2，7，與

15、肥胖傾向的表現(xiàn)都是心血管疾病發(fā)生重要的危險(xiǎn)因素。此外去勢(shì)大鼠子宮重量都明顯下降，子宮的萎縮提示本實(shí)驗(yàn)各組動(dòng)物去卵巢造模確實(shí)造成雌激素降低，手術(shù)明確有效。肝臟是脂質(zhì)合成的重要場(chǎng)所，大鼠肝臟/體重即肝系數(shù)（hepatic index，HI）增高通常反映脂代謝紊亂使肝臟發(fā)生脂肪變或腫大8。但發(fā)現(xiàn)去卵巢大鼠HI下降反映的肝內(nèi)脂代謝紊亂和病理改變到底如何，還有待作肝臟脂質(zhì)譜檢測(cè)及組織形態(tài)學(xué)觀察以進(jìn)一步分析。4.2 人參須超微粉醇提液對(duì)去卵巢大鼠血脂紊亂有良好調(diào)節(jié)作用本實(shí)驗(yàn)中，低、中劑量的人參須超微粉醇提液均能明顯降低血清 TC，升高血清 HDL-c。HDL-c 具有逆向運(yùn)輸膽固醇的作用，減少其在心血管內(nèi)

16、皮的沉積以防止動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生，因此 HDL-c，HDL-c/TC 值等與冠心病的發(fā)病率呈明顯負(fù)相關(guān)9。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明中藥人參能升高大鼠血清 HDL-c，有利于膽固醇的清除，對(duì)防治高脂血癥及心血管疾病有效。另外中劑量的人參醇提液還能升高 HDL/TC 值和降低血清 TG 。最近的臨床前瞻性研究發(fā)現(xiàn)，反映血脂水平的另外一個(gè)重要指標(biāo)TG 是男性心血管疾病的獨(dú)立于 TC 或 HDL-c 等傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素的重要預(yù)測(cè)因素10，丹參有效降低 TG 有利于降低各種心血管疾病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。中劑量人參須超微粉醇提液較低劑量能更好的改善去卵巢大鼠血脂紊亂，提示其調(diào)節(jié)血脂有一定劑量依賴性。此外兩種人參制劑亦對(duì)大鼠子宮濕重影響小，這與其不存在性激素樣作用有關(guān)，提示其對(duì)絕經(jīng)期婦女子宮的不良反應(yīng)可能較小。4.3 人參須超微粉醇提液的皂苷成分是其調(diào)節(jié)血脂、抗動(dòng)脈硬化的活性部位群本實(shí)驗(yàn)所用的人參醇提液經(jīng)檢驗(yàn)所含人參皂苷成分Rb，Re 較多，而最近