哮喘發(fā)作期和穩(wěn)定期患兒誘導(dǎo)痰液分析與評(píng)價(jià)

1、    哮喘發(fā)作期和穩(wěn)定期患兒誘導(dǎo)痰液分析與評(píng)價(jià)盛軍邵潔傅曼芬李云珠俞善昌 為觀察哮喘急性發(fā)作期患兒經(jīng)藥物治療后痰液細(xì)胞的變化,并了解臨床癥狀的改善與痰液中嗜酸性細(xì)胞的關(guān)系,我們對(duì)急性發(fā)作期和穩(wěn)定期患兒進(jìn)行了誘導(dǎo)痰液分析,并進(jìn)行評(píng)價(jià)。 對(duì)象:(1) 哮喘急性發(fā)作組:選擇1997年5月10月本院住院或門診哮喘急性發(fā)作期患兒。共37例，男20例，女17例，年齡313歲(6.7±2.4歲)。診斷標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)文獻(xiàn)1。(2)哮喘穩(wěn)定期組: 選擇1997年5月12月本院住院或門診哮喘患兒，男23例，女12例，年齡4.512歲(7±2.5歲)。給予潑尼

2、松或地塞米松治療3天，隨后改為丁地去炎松或丙酸倍氯米松吸入治療714天，臨床上無咳嗽(或偶咳)，無喘息，兩肺聽診無哮鳴音。平均PEF值218±49.17，共35例。 方法:(1)獲取痰液:用MP-1型面罩式超聲霧化儀分別吸5%高滲鹽水1、2、4分鐘,每次間隔12分鐘,累積霧化時(shí)間不超過20分鐘,每次霧化間隙測(cè)定PEF值。每個(gè)劑量的鹽水吸入后都鼓勵(lì)受檢者深吸氣,咳嗽,將痰液吐入無菌容器內(nèi)。(2)痰液確定:痰栓為乳白色或黃色成團(tuán)狀或小斑片狀粘稠物,而唾液在吸管內(nèi)呈透明、清亮狀液體。用玻璃吸管小心吸取棄去唾液后的痰栓。(3)痰液分析:總細(xì)胞計(jì)數(shù)取痰栓600 l,加1%DTT溶液2.4 ml

3、，在旋渦式混合器上震蕩10分鐘,使痰液離散于DTT溶液內(nèi)，成為均勻一致的痰溶液,加入等量的1.5%冰醋酸,混勻后取少量置于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行總細(xì)胞計(jì)數(shù)。分類計(jì)數(shù)：取痰栓直接置于玻片上,壓涂痰片5張,空氣自然干燥后,3張用瑞氏染色法染色，另兩張用1%甲苯胺藍(lán)染色。每份標(biāo)本計(jì)數(shù)500個(gè)細(xì)胞，用單盲法進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類。(4)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用t檢驗(yàn)和直線相關(guān)性檢驗(yàn)。 結(jié)果:(1)35例哮喘穩(wěn)定期兒童成功獲取痰液31例(89%)，37例哮喘急性發(fā)作期患兒成功獲取痰液31例(84%)。(2)所有受檢者均能耐受痰誘導(dǎo)而無副作用。在痰誘導(dǎo)過程中，PEF從基礎(chǔ)值下降的平均值在發(fā)作期為4%，穩(wěn)定期為0，兩組比較差異無

4、顯著意義。(3)痰液細(xì)胞分析:總細(xì)胞計(jì)數(shù)中兩組比較差異無顯著意義。分類計(jì)數(shù)中急性發(fā)作組的嗜酸性細(xì)胞、肥大細(xì)胞高于穩(wěn)定期組,兩組比較差異有非常顯著意義(P< 0.01)(附表)。(4)誘導(dǎo)痰液中的嗜酸性細(xì)胞與PEF的關(guān)系，在穩(wěn)定期r=-0.866，P< 0.01，急性發(fā)作期r=-0.71，P< 0.01。 附表哮喘急性發(fā)作期和穩(wěn)定期患兒誘導(dǎo)痰液細(xì)胞計(jì)數(shù)比較 組別 例數(shù) 總細(xì)胞計(jì)數(shù) (×109/L) 細(xì)胞分類計(jì)數(shù)() EC N M L E MC 發(fā)作期組 31 11±9 7±5 23±11 40±15 5±5 18

5、77;12 1.1±1.1 穩(wěn)定期 31 8±4 14±4 19±6 47±8 12±5 7±4 0.3±0.3 t值 1.6 6.4 1.6 2.1 5.64 5.15 3.8 P值 >0.05 < 0.01 >0.05 < 0.05 < 0.01 < 0.01 < 0.01 注：EC=上皮細(xì)胞，N=中性粒細(xì)胞，M=單核細(xì)胞，L=淋巴細(xì)胞，E=嗜酸性細(xì)胞，MC=肥大細(xì)胞 討論:(1)穩(wěn)定期患兒痰液分析:本結(jié)果顯示穩(wěn)定期組痰液中的嗜酸性細(xì)胞、肥大細(xì)胞明顯低于急性發(fā)作期組(P

6、< 0.01)。這一結(jié)果不僅進(jìn)一步證實(shí)了嗜酸性細(xì)胞、肥大細(xì)胞是哮喘發(fā)作的主要效應(yīng)細(xì)胞，參與了氣道高反應(yīng)的形成，同時(shí)也證明了哮喘患兒經(jīng)過正規(guī)治療后氣道炎癥能得以改善。Pizzichini等2曾對(duì)10位急性發(fā)作期成人的痰液進(jìn)行研究，并隨訪其用藥后1、2、3、 7、21天的誘導(dǎo)痰液，結(jié)果顯示患者痰液嗜酸性細(xì)胞在治療后第2天即明顯下降(P< 0.01)，至第7天為最明顯(P< 0.001)，并發(fā)現(xiàn)嗜酸性細(xì)胞下降的量與痰中ECP(嗜酸性細(xì)胞陽離子蛋白)、白介素-5相關(guān)。我們研究發(fā)現(xiàn)在痰液的總細(xì)胞計(jì)數(shù)方面，穩(wěn)定期組與急性發(fā)作期組之間差異無顯著意義,淋巴細(xì)胞在穩(wěn)定期組明顯增高，可能為哮喘患

7、兒氣道的慢性炎癥所致。(2)嗜酸性細(xì)胞的浸潤(rùn)強(qiáng)度與急性發(fā)作期和穩(wěn)定期氣道阻塞的嚴(yán)重程度顯著相關(guān)(r=-0.7068，P< 0.01;r=-0.866 P< 0.01)，說明嗜酸性細(xì)胞直接參與了氣道的高反應(yīng)，造成通氣障礙。隨著氣道內(nèi)嗜酸性細(xì)胞的減少，氣道阻塞狀況的改善，PEF值上升。(3)哮喘患兒經(jīng)正規(guī)潑尼松和吸入皮質(zhì)激素后12周，病情趨于穩(wěn)定，癥狀消失，PEF值上升，痰液中嗜酸性細(xì)胞，肥大細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯下降,氣道的炎癥得以改善。 穩(wěn)定期哮喘患兒的痰液誘導(dǎo)、分析，有利于了解穩(wěn)定期哮喘患兒氣道炎癥狀況，指導(dǎo)臨床對(duì)哮喘患兒的長(zhǎng)期管理和治療。 作者單位:200025 上海第二醫(yī)科大學(xué)附屬瑞金醫(yī)院兒科(第一作者現(xiàn)在上海嘉定區(qū)南翔醫(yī)院兒科) 參考文獻(xiàn) 1全國(guó)兒科哮喘防治協(xié)作組.兒童哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)和治療常規(guī).中華兒科雜志,1993,31:222-224. 2Pizzichini MMM,Pizzichini E,Clelland