微生物實(shí)驗(yàn)室儀器使用指導(dǎo)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上目錄1. 目的和適用范圍本文件規(guī)范微生物實(shí)驗(yàn)室儀器的使用，對(duì)儀器使用進(jìn)行指導(dǎo)。本文件適用于微生物實(shí)驗(yàn)室的儀器的使用和維護(hù)。2. 職責(zé)2.1 微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員按照本規(guī)程使用儀器，對(duì)儀器進(jìn)行日常維護(hù)和操作使用登記。2.2 儀器設(shè)備管理員負(fù)責(zé)對(duì)設(shè)備正常運(yùn)行進(jìn)行檢查，并對(duì)設(shè)備進(jìn)行定期維護(hù)、保養(yǎng)。2.3 質(zhì)量負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)對(duì)設(shè)備正常運(yùn)行進(jìn)行監(jiān)督管理。3. 儀器分類3.1 溫度控制類：生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、冷藏冰箱、超低溫冰箱、恒溫水浴鍋和烘箱。3.2 操作臺(tái)類：超凈工作臺(tái)、生物安全柜。3.3 滅菌類：高溫高壓蒸汽滅菌鍋3.4 讀數(shù)類：電子天平、pH計(jì)3.5 其他類：電加熱板、

2、不銹鋼過(guò)濾系統(tǒng)和真空泵、顯微鏡、紫外檢測(cè)燈、菌落計(jì)數(shù)器、高速振蕩無(wú)菌均質(zhì)器。4. 儀器使用指導(dǎo)4.1 溫度控制類4.1.1 生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱類使用時(shí)按照規(guī)定的培養(yǎng)溫度進(jìn)行培養(yǎng)，未到規(guī)定時(shí)間進(jìn)行觀察時(shí)，請(qǐng)輕拿輕放。特別是霉菌培養(yǎng)時(shí)，需每天進(jìn)行觀察并記錄數(shù)據(jù)，非必要不觸碰培養(yǎng)皿，防止霉菌孢子擴(kuò)散，可用封口膜密封培養(yǎng)皿防止孢子擴(kuò)散。同時(shí)，記錄好培養(yǎng)溫度與時(shí)間，將記錄填寫進(jìn)培養(yǎng)箱使用記錄。4.1.2 冷藏冰箱保存需要冷藏環(huán)境的試劑和工作菌株，拿取后請(qǐng)盡快關(guān)門。超低溫冰箱用于保存標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株，僅在需要使用標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株時(shí)與維護(hù)除冰時(shí)打開(kāi)。取出菌株后及時(shí)關(guān)閉冰箱門。工作日期間每天檢查一次冰箱的溫度，并

3、填寫進(jìn)相應(yīng)的冰箱溫度記錄表。4.1.3 恒溫水浴鍋用于試劑恒溫，試劑預(yù)熱。將水浴鍋設(shè)定至想要的溫度，把試劑放進(jìn)去。水不夠可補(bǔ)加一級(jí)水，切勿使用自來(lái)水。4.1.4 烘箱用于清洗干凈的玻璃器皿進(jìn)行烘干，把待烘干玻璃器皿放進(jìn)烘箱，設(shè)定溫度后，烘干后拿出關(guān)閉電源。4.2 操作臺(tái)類4.2.1 超凈工作臺(tái)位于無(wú)菌操作室內(nèi)，用于操作檢測(cè)樣品的計(jì)數(shù)和增菌等。具體操作參考微生物實(shí)驗(yàn)室工作流程指導(dǎo)4.1步驟詳解，每次使用請(qǐng)?zhí)顚懹涗洺瑑艄ぷ髋_(tái)使用維護(hù)記錄，做檢測(cè)工作單時(shí)要把樣品編號(hào)寫在使用項(xiàng)目一欄上。4.2.2 生物安全柜位于生物安全操作室內(nèi)，用于樣品的后續(xù)分離與鑒定，具體操作參考微生物實(shí)驗(yàn)室工作流程指導(dǎo)4.1步驟

4、詳解。4.3 滅菌類4.3.1 高溫高壓蒸汽滅菌鍋用于滅菌處理，一臺(tái)滅菌鍋用于試劑和玻璃器皿滅菌，位于準(zhǔn)備室。另一臺(tái)滅菌鍋用于陽(yáng)性培養(yǎng)物滅菌，位于P2生物安全實(shí)驗(yàn)室滅菌室內(nèi)。使用時(shí)注意補(bǔ)水，設(shè)定所需的滅菌溫度與時(shí)間。試劑滅菌一般為121，15min、10min與20min。陽(yáng)性培養(yǎng)物滅菌設(shè)置為121，30min（時(shí)間不能低于30min）。滅菌完畢，取出試劑請(qǐng)戴硅膠手套防止?fàn)C傷。每次滅菌需要用化學(xué)指示卡監(jiān)控滅菌溫度，填寫滅菌鍋使用維護(hù)記錄。定期每三個(gè)月用生物指示劑進(jìn)行監(jiān)控，化學(xué)指示卡與生物指示劑拍照留底，并填寫滅菌效果監(jiān)測(cè)記錄。4.4 讀數(shù)類4.4.1 電子天平主要用于樣品稱量和配制試劑稱量。無(wú)

5、菌操作室有一臺(tái)電子天平（GZAN-C-005），主要用于樣品的稱量。準(zhǔn)備室有一臺(tái)電子天平（GZAN-C-006），主要用于配制試劑的稱量。稱量前先將天平放置于水平位置（GZAN-C-005放置于超凈工作臺(tái)內(nèi)），用水平工具輔助調(diào)至水平位置，按開(kāi)機(jī)鍵，歸零后將校準(zhǔn)砝碼放置在托盤上，記錄讀數(shù)，并記錄使用時(shí)間于電子天平使用維護(hù)記錄，換用容器時(shí)清零后再稱量。稱量樣品的電子天平（GZAN-C-005）還需要把樣品編號(hào)寫在稱量記錄上。使用完畢后將天平清理干凈后，關(guān)閉電源并放置在遠(yuǎn)離劇烈振蕩，遠(yuǎn)離高溫，遠(yuǎn)離環(huán)境變化劇烈的位置。4.4.2 pH計(jì)主要用于測(cè)量配制試劑的pH值。使用前先使用校準(zhǔn)液校準(zhǔn)三個(gè)點(diǎn)，分別為

6、4.00,7.00和10.00。校準(zhǔn)完畢且合格后方可使用。將干凈的探頭伸進(jìn)待測(cè)液，攪拌搖勻得出讀數(shù)后，觀察待測(cè)液pH是否位于適合pH值區(qū)間內(nèi)，區(qū)間外就需調(diào)節(jié)pH值。將校準(zhǔn)點(diǎn)的信息記錄于pH計(jì)使用維護(hù)記錄，將待測(cè)液的pH值記錄在培養(yǎng)基配制與滅菌記錄上。使用完畢后清洗探頭并用紙擦干，用保養(yǎng)液浸泡探頭，關(guān)閉電源。4.5 其他類4.5.1 電加熱板主要用于加熱煮沸滅菌的培養(yǎng)基的滅菌。電加熱板通電，設(shè)定350-400之間，然后將預(yù)熱的培養(yǎng)基放置在面板上加熱。操作期間佩戴硅膠手套防止?fàn)C傷。填寫電加熱板使用維護(hù)記錄。4.5.2 不銹鋼過(guò)濾系統(tǒng)和真空泵用于濾膜法檢測(cè)飲用天然礦泉水的微生物指標(biāo)。使用前將不銹鋼杯

7、與墊片置于滅菌鍋內(nèi)121滅菌15min。然后與過(guò)濾系統(tǒng)一同放入超凈工作臺(tái)內(nèi)紫外滅菌，連接過(guò)濾系統(tǒng)與真空泵，將待測(cè)水樣置于水杯內(nèi)進(jìn)行抽濾。完畢后將濾膜置于相應(yīng)培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。詳細(xì)操作請(qǐng)參考飲用天然礦泉水檢測(cè)。4.5.3 顯微鏡用于鑒定時(shí)的染色鏡檢。目鏡的常用倍數(shù)為10X，物鏡有4X、10X、40X、100X，先將經(jīng)過(guò)處理的載玻片固定于載物臺(tái)上，先用4X物鏡找到視野，然后依次用10X、40X去尋找，使用油鏡（100X）時(shí)，先滴一滴香柏油于觀察區(qū)域，慢慢調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋，頭偏一側(cè)觀察油鏡頭剛好浸入到油滴中。用目鏡觀察并用粗準(zhǔn)焦螺旋緩慢調(diào)節(jié)直至看到物象，換用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋直至物象清晰可見(jiàn)后進(jìn)行觀察，并判斷

8、細(xì)菌的類型并記錄數(shù)據(jù)。填寫顯微鏡使用維護(hù)記錄，取下載玻片，斷開(kāi)顯微鏡電源。用擦鏡紙蘸取少許二甲苯，清理油鏡頭。重新蓋上防塵罩。4.5.4 紫外檢測(cè)燈用于檢測(cè)培養(yǎng)物是否產(chǎn)生熒光反應(yīng)，是細(xì)菌鑒定的其中一項(xiàng)試驗(yàn)。使用紫外檢測(cè)燈是應(yīng)盡量在暗處觀察。條件達(dá)不到可置于生物安全柜內(nèi)用黑色潔凈袋套住。將待檢培養(yǎng)基置于臺(tái)上，用紫外燈照射培養(yǎng)皿，觀察熒光反應(yīng)，記錄好數(shù)據(jù)，關(guān)閉紫外檢測(cè)燈。清潔紫外燈后放置會(huì)原位置。填寫紫外檢測(cè)燈使用維護(hù)記錄。4.5.5 菌落計(jì)數(shù)器用于輔助菌落計(jì)數(shù)。打開(kāi)菌落計(jì)數(shù)器的電源并開(kāi)燈，將培養(yǎng)皿置于載物臺(tái)上，用放大鏡放大，對(duì)著培養(yǎng)皿逐個(gè)計(jì)數(shù)，記錄數(shù)據(jù)。當(dāng)菌落數(shù)量過(guò)多時(shí)可使用儀器內(nèi)置的計(jì)數(shù)筆，用

9、探筆在培養(yǎng)皿底面對(duì)所有的菌落逐個(gè)點(diǎn)數(shù)。此時(shí)菌落處被標(biāo)上顏色，蜂鳴器發(fā)生鳴叫，表示計(jì)數(shù)有效。顯示屏內(nèi)數(shù)字自動(dòng)累加。再次用放大鏡仔細(xì)檢查，確認(rèn)點(diǎn)數(shù)無(wú)遺漏，計(jì)數(shù)即已完畢。如有遺漏，可用手動(dòng)計(jì)數(shù)按鍵補(bǔ)計(jì)。4.5.6 高速振蕩無(wú)菌均質(zhì)器用于樣品均質(zhì)。樣品與稀釋液裝在無(wú)菌均質(zhì)袋內(nèi)，雙手四指分別握住均質(zhì)腔門左右側(cè)上部，拇指頂住上面的控制面板，四指與拇指反向用力掰開(kāi)均質(zhì)腔門。把裝有處理樣品的樣品袋放置在橢圓形的樣品均質(zhì)環(huán)中，并讓處理袋底部擱在均質(zhì)腔底部。抹平樣品袋上部褶皺，然后用手推合均質(zhì)腔門，這是樣品處理袋已被夾合密封。根據(jù)檢驗(yàn)需求選擇運(yùn)行程序，在準(zhǔn)備截面中按下“+”“-”鍵可切換當(dāng)前所選定程序號(hào)，程序分為

10、系統(tǒng)默認(rèn)和自定義兩種，然后按下控制面板上的“暫停開(kāi)始”，處理器將立即開(kāi)始高速振蕩，請(qǐng)保證均質(zhì)腔門已關(guān)閉緊密，否則振蕩處理無(wú)法啟動(dòng)。當(dāng)樣品處理結(jié)束，待均質(zhì)環(huán)完全停止后，再掰開(kāi)處理器均質(zhì)腔門，拿出樣品袋。按照上述步驟進(jìn)行下一個(gè)樣品處理，如樣品狀態(tài)不一樣，可調(diào)整均質(zhì)時(shí)間。5. 儀器維護(hù)指導(dǎo)5.1 所有儀器使用完畢均需清潔。5.2 所以儀器的最佳工作溫度為5-40，避免將儀器放置在超出此范圍的區(qū)域，如環(huán)境溫度超出此范圍，使用空調(diào)進(jìn)行溫度調(diào)節(jié)。5.3 霉菌培養(yǎng)箱被霉菌孢子污染時(shí)，用消毒劑進(jìn)行消毒處理，詳情請(qǐng)參考消毒劑管理規(guī)定。5.4 注意恒溫水浴鍋內(nèi)水的多少，缺水時(shí)用一級(jí)水補(bǔ)充。5.5 生物安全柜與超凈

11、工作臺(tái)每次使用完畢后，噴灑消毒酒精于操作臺(tái)上，仔細(xì)清理每個(gè)角落。5.6 定期清理真空泵儲(chǔ)液瓶?jī)?nèi)的水，防止細(xì)菌滋生。5.7 生物安全柜與超凈工作臺(tái)的過(guò)濾網(wǎng)維護(hù)： 根據(jù)實(shí)際情況，每個(gè)季度或者半年檢查安全柜的任何物理異?；蚬收希缬挟惓＜皶r(shí)報(bào)修；將初效過(guò)濾器拆下清洗，防止積塵將導(dǎo)致進(jìn)風(fēng)量不足，而降低潔凈效果。每年請(qǐng)具備資格的認(rèn)證技術(shù)人員對(duì)安全柜進(jìn)行性能認(rèn)證，依據(jù)紫外燈使用壽命效果，進(jìn)行紫外燈的更換；當(dāng)正常調(diào)節(jié)或清洗初效空氣過(guò)濾器后，仍達(dá)不到理想的截面風(fēng)速時(shí)，則應(yīng)調(diào)節(jié)風(fēng)機(jī)的工作電壓（旋動(dòng)旋鈕），從而達(dá)到理想的均勻風(fēng)速（將調(diào)節(jié)風(fēng)速旋鈕從左向右，從低速向高速緩慢調(diào)節(jié)，新工作臺(tái)不應(yīng)調(diào)至最高風(fēng)速）。在使用十八

12、個(gè)月后當(dāng)風(fēng)機(jī)不能達(dá)到理想風(fēng)速時(shí)，則說(shuō)明高效空氣過(guò)濾器積塵過(guò)多（濾料上濾孔已基本被堵，要及時(shí)更新），一般高效空氣過(guò)濾器的使用期限為十八個(gè)月；更換高效空氣過(guò)濾器時(shí)，應(yīng)注意型號(hào)規(guī)格尺寸（原生產(chǎn)廠家配置），按箭頭風(fēng)向裝置，并注意過(guò)濾器的周邊密封，絕對(duì)無(wú)滲漏現(xiàn)象發(fā)生。6. 注意事項(xiàng)6.1 冰箱內(nèi)不能放置其他與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的物品。6.2 冰箱內(nèi)物品要合理均勻擺放，以免堆在一起導(dǎo)致保藏溫度不一致。6.3 在拿取物品時(shí)，注意及時(shí)關(guān)閉冰箱門。6.4 在需要拿取菌種進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，要佩戴耐低溫手套。6.5 如果臨時(shí)停電，在供電恢復(fù)后立馬打開(kāi)電源。6.6 對(duì)均質(zhì)器的外部及均質(zhì)腔進(jìn)行清潔時(shí)，先用溫和的肥皂水清潔，然后用柔軟的布輕輕擦干（若均質(zhì)腔被細(xì)菌感染，則用70%異丙基乙醇液進(jìn)行處理）。不要使用酸、堿、鹽及氯溶液清理處理器的外表面，另外避免有機(jī)溶劑損壞處理器。6.7 在進(jìn)行使用時(shí)，注意防止手部被燙傷，與高溫面接觸時(shí)，請(qǐng)戴上硅膠手套操作。6.8 加熱煮沸試劑時(shí)，容器切勿盛裝過(guò)多液體，防止沸騰時(shí)溢出且污染加熱板。6.9 設(shè)置加熱溫度不宜過(guò)高，防