丹皮活性成分綜合提取工藝的研究

1、丹皮活性成分綜合提取工藝的研究         【摘要】  目的：綜合提取制備丹皮內(nèi)丹皮多糖、丹皮酚、丹皮總苷三種活性成分。方法：丹皮破碎后，水提醇沉，凍干后得丹皮多糖。剩余藥渣用水蒸汽蒸餾法提取丹皮酚。蒸餾所剩殘?jiān)袡C(jī)溶劑法提取丹皮總苷。結(jié)果：依次提取出三種活性物質(zhì)，其中丹皮多糖得率1.27%，丹皮酚得率為1.76%，丹皮總苷得率為3.92%。結(jié)論：該提取方法切實(shí)可行，丹皮內(nèi)各活性物質(zhì)均得到較完全分離，為大工業(yè)化生產(chǎn)提供了理論依據(jù)。 【關(guān)鍵詞】  綜合提取 丹皮多糖 丹皮酚 丹皮總苷 

2、;  Study on multible-extracting techology of cortex moudan   【Abstract】Objective: To study on the multible-extracting technology of Cortex moutan.Methods:Polysaccharide could be extracted by water.The other ethanol component could be extracted after it has dried.The paeonol can distil

3、led by steam distillation method,the remains can excract the third component.Results:The content of polysaccharides was 1.27%,the paeonol was 1.73% and the total glucoside is 3.84%.Conclusion:The technology of multible-extracting is available for the industrialization.Every component can be distille

4、d by this method.   【Key words】multible-extracting techology;polysaccharide;paeonol;total glucoside of cortex moutan   牡丹皮（Cortex Moutan）為毛茛科植物Paeonia suffruticosa Andr.的干燥根皮1。廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、香料和化學(xué)領(lǐng)域。丹皮中主要活性成分包括丹皮多糖、丹皮酚、丹皮苷、芍藥苷元、白樺脂酸、白樺脂醇等。其中丹皮苷、芍藥苷元、白樺脂酸、白樺脂醇合稱為丹皮總苷?，F(xiàn)代研究表明，丹皮多糖具有降血糖和免疫作

5、用。丹皮酚具有抗菌、抗變態(tài)和抗腫瘤作用。丹皮總苷具有抗炎、免疫調(diào)節(jié)作用。   丹皮作為我國一種傳統(tǒng)中藥，常年來未得到較完全的利用。大部分丹皮產(chǎn)品只進(jìn)行其中丹皮酚的提取就廢棄了。隨著對(duì)丹皮研究的日益廣泛，丹皮內(nèi)其他活性成分的提取也越來越受到重視。所以充分提取丹皮內(nèi)各種活性物質(zhì)顯得非常必要。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)丹皮內(nèi)三種活性物質(zhì)不同的理化性質(zhì)，依次分級(jí)分離三種活性物質(zhì)，達(dá)到一次性提取丹皮內(nèi)三種活性物質(zhì)的目的。節(jié)約資源，提高產(chǎn)品利用率。   1  材料與儀器   安徽青陽三年生牡丹皮，9月份采集，離心機(jī)（上海醫(yī)用分析儀器廠）、電熱鼓風(fēng)干燥箱

6、（南京實(shí)驗(yàn)儀器廠）、SHZ-3循環(huán)水多用真空泵（上海青浦滬西儀器廠）、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海青浦滬西儀器廠）、DK-S26型電熱恒溫水浴鍋（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）、ALPHA1-2冷凍干燥機(jī)（德國Christ），HPLC（美國Agilent 1100）。Dextran T40(Phamacia 公司)，95%乙醇、濃硫酸、苯酚等均為國產(chǎn)分析純。丹皮酚標(biāo)準(zhǔn)品（購自中國藥品鑒定所，產(chǎn)品批號(hào)：11070-200205）。芍藥苷標(biāo)準(zhǔn)品（購自中國藥品鑒定所，產(chǎn)品批號(hào)：1107036-200731）。   2  實(shí)驗(yàn)方法   2.1  提取方法&#

7、160;  丹皮粉碎   圖1  綜合提取實(shí)驗(yàn)流程圖   丹皮經(jīng)粉碎機(jī)粉碎后，取丹皮粉末分別放入重蒸水中浸泡。然后收集浸泡液加入乙醇，醇沉過夜，于次日離心析出沉淀。加少量水溶解后冰箱冷藏12h。冷凍干燥得丹皮多糖粗品，苯酚硫酸法檢測(cè)糖含量。   丹皮殘?jiān)麴s水浸泡水浴鍋調(diào)節(jié)溫度水蒸汽蒸餾冷藏蒸餾液過夜過濾10%乙醇重結(jié)晶干燥得丹皮酚結(jié)晶，HPLC法檢測(cè)丹皮酚含量。   蒸餾剩余殘?jiān)魇铣樘?，石油醚脫脂加入乙?水溶液溫浸離心取上清旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)冷凍干燥甲醇溶解，HPLC法測(cè)總苷含量。 

8、60; 2.2  樣品含量測(cè)定   丹皮多糖總量/原料質(zhì)量×100%。            3  結(jié)果與分析   3.1  丹皮多糖的提取工藝  根據(jù)單因素初步試驗(yàn)，影響丹皮多糖提取率的主要因素有浸提時(shí)間、浸提溫度、料水比、醇沉濃度，為綜合分析各因素的影響，以多糖提取率為指標(biāo)，采用L9（34）正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，確定最佳提取工藝。正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案及結(jié)果見表1。表1 丹皮多糖正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案及結(jié)果從上表可以看出影

9、響丹皮多糖得率的各因素排序?yàn)榻釡囟冉釙r(shí)間醇沉濃度料液比。綜合各因素K值和極差分析，得出丹皮多糖的最佳提取工藝為：溫度45，提取時(shí)間11h，料液比1:9，醇沉濃度80%，此工藝條件下丹皮多糖的得率為1.27%。   3.2  丹皮酚提取工藝  在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選擇影響丹皮酚溶出的4個(gè)主要因素：料液比、浸泡時(shí)間、浸泡溫度和溶液PH，以丹皮酚得率為指標(biāo)采用L16（45）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，確定最佳提取工藝。正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案及結(jié)果見表2。表2   丹皮酚正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案及結(jié)果對(duì)上述正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，浸泡溫度為丹皮酚得率的主要影響因素。

10、綜合各因素K值和極差分析，丹皮酚的最佳提取工藝為料水比為1:11，浸泡溫度40。浸泡時(shí)間3h，溶液PH6。此工藝條件下丹皮酚的得率為1.76%。   3.3  丹皮總苷提取工藝   根據(jù)單因素初步試驗(yàn)，影響丹皮總苷提取率的主要因素有浸提時(shí)間、浸提溫度、料水比、乙醇濃度，為綜合分析各因素的影響，以總苷提取率為指標(biāo)，采用L9（34）正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，確定最佳提取工藝。正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案及結(jié)果見表3。 表3丹皮酚正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案及結(jié)果通過以上數(shù)據(jù)綜合得出，影響丹皮總苷得率的各因素排序?yàn)榻釡囟冉釙r(shí)間料液比乙醇濃度。綜合各因素K值和極差分析，得出丹皮總苷的

11、最佳提取工藝為：溫度70，提取時(shí)間6h，料液比1:10，醇沉濃度90%。此工藝條件下丹皮總苷的得率為3.92%。   4  結(jié)論   首先進(jìn)行丹皮多糖的提取，在溫度45，提取時(shí)間11h，料液比1:9，醇沉濃度80%條件下，多糖得率為1.27 %。浸提藥渣烘干后，在溶液PH6，料水比1:11，溫度40，浸泡時(shí)間3h條件下進(jìn)行水蒸汽蒸餾提取丹皮酚，得率為1.76%。蒸餾后所剩余藥渣用乙醇提取法提取丹皮中剩余的總苷類物質(zhì)，在1:10料水比，溫度70，浸泡6h，90%乙醇條件下，總得率為3.92%。   經(jīng)此工藝連續(xù)提取出的各活性物

12、質(zhì)，多糖得率與文獻(xiàn)報(bào)道相近，丹皮酚含量與文獻(xiàn)報(bào)道相接近。總苷類含量略低于文獻(xiàn)報(bào)道?？赡茉蚴窃诘谝徊糠炙岫嗵菚r(shí)，有部分小分子苷類物質(zhì)溶入水中，致使后期總苷類物質(zhì)有小部分的損失。   筆者采用連續(xù)提取工藝，實(shí)現(xiàn)了丹皮內(nèi)各活性物質(zhì)的連續(xù)分離。本工藝的特點(diǎn)就是根據(jù)丹皮內(nèi)各活性物質(zhì)不同的理化性質(zhì)，分步分離出三種主要活性成分，既節(jié)省了時(shí)間，又實(shí)現(xiàn)了單一原料多產(chǎn)物的問題，大大提高了原料的利用率?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】  1 國家藥典委員會(huì)中華人民共和國藥典（一部）S北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：119劉麗萍，洪浩丹皮多糖-2b降血糖作用的實(shí)驗(yàn)研究J中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2002，7（5）：424427章靈華，尚陪根，黃藝，等丹皮酚的藥理與臨床研究進(jìn)展J中國中西藥結(jié)合雜志，1996，16（3）：187189湯文路，李俊，徐叔云，等丹皮總苷的抗炎免疫作用及部分機(jī)制研究J中國藥理學(xué)通報(bào)，200