植物生理生化實(shí)驗(yàn)柯玉琴期末試卷AB

1、福建農(nóng)林大學(xué)考試試卷 （A卷）2006 2007 學(xué)年第二學(xué)期課程名稱： 植物生理生化實(shí)驗(yàn) 考試時(shí)間 90分鐘專業(yè) 年級(jí) 班 學(xué)號(hào) 姓名 _題 號(hào)一二三四五總得分得 分評(píng)卷人簽 字 復(fù)核人簽 字得分一、名詞解釋（每小題2分，共20分）1、標(biāo)準(zhǔn)曲線：2、離心技術(shù)：3、同工酶：4、酶活力：5、誘導(dǎo)酶：6、呼吸速率：7、種子生活力： 8、抗逆性：9、超氧化物歧化酶（SOD）：10、光合速率：得分二、填空題（每格1分，共32分）1、測(cè)定植物組織中可溶性蛋白質(zhì)含量的方法有_、_和_等。2、在測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)含量時(shí)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線是以 為橫坐標(biāo)，以_ 為縱坐標(biāo)。3、用茚三酮顯色法測(cè)定植物組織氨基酸含量時(shí)

2、，茚三酮溶液與氨基酸共熱生成_， _與茚三酮和還原性茚三酮反應(yīng)，生成_。該化合物顏色的深淺與氨基酸的含量成_，可通過(guò)測(cè)定_nm處的光密度，求出氨基酸的含量。4、在測(cè)定淀粉酶的活性時(shí)：淀粉酶不耐 ，淀粉酶不耐 。5、測(cè)定淀粉酶活性時(shí)，3，5二硝基水楊酸試劑（DNS）的作用是_和_。6、聚丙烯酰胺凝膠電泳分離過(guò)氧化物同工酶實(shí)驗(yàn)中，電泳存在三大效應(yīng)，分別是_、 _ _ 和 。7、測(cè)定硝酸還原酶活性的方法有_和_。8、類胡蘿卜素吸收光譜最強(qiáng)吸收區(qū)在 _ ，它不僅可以吸收傳遞光能，還具有_ 的作用。9、葉綠素溶液在透射光下呈 色，在反射光下呈 色。10、在研究植物礦質(zhì)元素中,常用的植物溶液培養(yǎng)法有 _

3、、 _ 和_。 11、水培時(shí)要選用黑色容器裝營(yíng)養(yǎng)液，這是為了防止 _ 。 12、常用 _ 法確定植物生長(zhǎng)的必需元素。 13、用活體法測(cè)定硝酸還原酶的材料，取樣前葉子需進(jìn)行一段時(shí)間的光合作用，以積累_，產(chǎn)生更多_，加速硝酸鹽的還原。14、植物光合速率測(cè)定方法有_和_等。得分三、選擇題(每題1分，共10分)1、進(jìn)行酶活力測(cè)定時(shí)（ ）A、底物濃度必須極大于酶濃度 B、酶濃度必須極大于底物濃度，D、酶能提高反應(yīng)的平衡點(diǎn) C、與底物濃度無(wú)關(guān)2、蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸。它們具有吸收紫外光的性質(zhì)，其吸收高峰在（ ）波長(zhǎng)處。 A、260nm B、650nm C、540nm D、

4、280nm3、斐林(Folin)-酚試劑法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度時(shí)，應(yīng)選用的波長(zhǎng)是（ ）。A、260nm B、650nm C、540nm D、280nm4、葉綠素提取時(shí)，葉片勻漿時(shí)加入少許CaCO3，其目的是（ ）A、使研磨更充分 B、加速葉綠素溶解C、使葉綠素a、b分離 D、保護(hù)葉綠素5、一般而言，正常植物葉片的葉綠素與類胡蘿卜素的比值為（ ）A、2:1 B、3:1 C、1 :2 D、1:36、測(cè)定葉綠素總量時(shí)，分光光度計(jì)選用的波長(zhǎng)是（ ） A、663nm B、645nm C、430nm D、652nm7、葉綠素卟啉環(huán)的中心原子是（ ） A、Cu B、 Fe C、Mg D、Mn8、小藍(lán)子法測(cè)定呼吸強(qiáng)

5、度生成的白色沉淀是( ) A、 BaCO3 B、Ba(COO)2 C、Ba(OH)2 D、CaCO39、TTC法測(cè)定種子生活力的試驗(yàn)中，活種子的現(xiàn)象為 ( )。A、種胚全部染成紅色 B、種胚全部未染色C、種胚全部染成黑色 D、種胚非關(guān)鍵部位染色，而胚根和胚芽的尖端都不染色10、小籃子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度中，若在滴定時(shí)，外界CO2進(jìn)入呼吸測(cè)定裝置內(nèi)，會(huì)使測(cè)得的結(jié)果( )。A、偏大 B、偏小 C、不變 D、不一定得分四、問(wèn)答題(7題任選6題答。每小題5分，共30分)1、 簡(jiǎn)述分光光度計(jì)的使用方法。2、簡(jiǎn)述“聚丙烯酰胺凝膠電泳分離植物過(guò)氧化物酶同工酶”實(shí)驗(yàn)中所用的過(guò)硫酸銨、四甲基乙二胺、蔗糖、溴酚藍(lán)、H2

6、O2等試劑的作用是什么？3、為了準(zhǔn)確測(cè)定果蔬的維生素C含量，在測(cè)定過(guò)程應(yīng)注意些什么？4、葉綠素a、b在藍(lán)紫光區(qū)也有吸收峰，能否用這一吸收峰波長(zhǎng)進(jìn)行葉綠素a、b的定量分析？為什么？5、測(cè)定SOD活性時(shí)，為什么要設(shè)照光對(duì)照管和暗對(duì)照管？6、植物缺素病癥有的出現(xiàn)在頂端幼嫩枝葉上，有的出現(xiàn)在下部老葉上，為什么？舉例加以說(shuō)明。 7、作物溶液培養(yǎng)過(guò)程應(yīng)注意哪些關(guān)鍵技術(shù)？ 得分五、計(jì)算題(8分)用斐林酚試劑法測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)時(shí)，以標(biāo)準(zhǔn)蛋白含量為橫坐標(biāo)，以650nm吸光度為縱座標(biāo)，所得標(biāo)準(zhǔn)曲線如下圖所示。實(shí)驗(yàn)中稱取鮮樣0.5g，用5ml蒸餾水提取，取0.1ml提取液同標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定650nm處吸光度為0.3

7、00，請(qǐng)從標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的蛋白質(zhì)含量（ug），根據(jù)有關(guān)公式，求出每克樣品中的蛋白質(zhì)毫克數(shù)。福建農(nóng)林大學(xué)考試試卷 （B卷）2006 2007 學(xué)年第二學(xué)期課程名稱： 植物生理生化實(shí)驗(yàn) 考試時(shí)間 90分鐘 專業(yè) 年級(jí) 班 學(xué)號(hào) 姓名 _題 號(hào)一二三四五總得分得 分評(píng)卷人簽 字 復(fù)核人簽 字得分一、名詞解釋（每小題2分，共20分）1、淀粉酶： 2、標(biāo)準(zhǔn)曲線：3、電泳：4、酶的比活力：5、硝酸還原酶：6、溶液培養(yǎng)：7、種子生活力： 8、逆境：9、超氧化物歧化酶（SOD）：10、光合作用：得分二、填空題（每格1分，共32分）1、用斐林酚試劑法測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)含量受_和_等物質(zhì)的干擾。2、用茚三酮顯

8、色法測(cè)定植物組織氨基酸時(shí)，加入Vc可以防止_, 以抗壞血酸為_(kāi)可提高反應(yīng)的靈敏度，并使顏色穩(wěn)定。3、用茚三酮顯色法測(cè)定植物組織氨基酸含量時(shí)，茚三酮溶液與氨基酸共熱生成_， _與茚三酮和還原性茚三酮反應(yīng)，生成_。該化合物顏色的深淺與氨基酸的含量成_，可通過(guò)測(cè)定_nm處的光密度，求出氨基酸的含量。4、在測(cè)定淀粉酶的活性時(shí)，將酶液和淀粉溶液分別放在40水浴中預(yù)保溫，其目的是_。5、測(cè)定淀粉酶活性時(shí)，3，5二硝基水楊酸試劑（DNS）的作用是_和_。6、聚丙烯酰胺凝膠電泳分離過(guò)氧化物同工酶實(shí)驗(yàn)中，聚丙烯酰胺凝膠是由_ 、 _ 、_、_ 和_聚合交聯(lián)成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠。7、測(cè)定硝酸還原酶活性的方法有_和

9、_。8、在研究植物礦質(zhì)元素中,常用的植物溶液培養(yǎng)法有 _、_和_等。 9、水培時(shí)要選用黑色容器裝營(yíng)養(yǎng)液，這是為了防止 _ 。 12、活體法酶促反應(yīng)在_條件下進(jìn)行，以防止亞硝酸鹽還原為_(kāi)。 13、植物呼吸強(qiáng)度的測(cè)定方法有:_、_和_等。 14、測(cè)定植物光合作用的方法有:_、_、_和_等。得分三、選擇題(每題1分，共10分)1、測(cè)定淀粉酶活性時(shí)，最適宜的反應(yīng)溫度和pH值是（ ）A、37 , pH 4.5 B、37 , pH 7.0 C、40 , pH 5.62、酶的分離提純過(guò)程中，不正確的操作是（ ）。A、需在低溫下進(jìn)行，一般在05之間B、酶制劑制成干粉后可保存于4冰箱中C、需經(jīng)常使用巰基乙醇以防

10、止酶蛋白二硫鍵發(fā)生還原 D、提純時(shí)間盡量短3、斐林(Folin)-酚試劑法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度時(shí)，應(yīng)選用的波長(zhǎng)是（ ）。A、260nm B、650nm C、540nm D、280nm4、葉綠素卟啉環(huán)的中心原子是（ ） A. Cu B. Fe C. Mg D. Mn5、一般而言，正常植物葉片的葉綠素與類胡蘿卜素的比值為（ ）A、2:1 B、3:1 C、1 :2 D、1:36、高等植物的老葉由于缺少某一種元素而發(fā)病，下面元素屬于這一類的有（ ）A、氮 B、鈣 C、鐵 7、在95%提取液中,葉綠素a在紅光區(qū)的最大吸收峰為 ( )。A、 470 nm B、649 nm C、 656 nm D、665 nm8

11、、小藍(lán)子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度生成的白色沉淀是( ) A、 BaCO3 B、Ba(COO)2 C、Ba(OH)2 D、CaCO39、TTC法測(cè)定種子生活力的試驗(yàn)中，活種子的現(xiàn)象為 ( )。A、種胚全部染成紅色 B、種胚全部未染色C、種胚全部染成黑色 D、種胚非關(guān)鍵部位染色，而胚根和胚芽的尖端都不染色10、呼吸作用的底物為( )。A、有機(jī)物和O2 B、 CO2和H2O C、有機(jī)物和CO2得分四、問(wèn)答題(7題任選6題答。每小題5分，共30分)1、簡(jiǎn)述分光光度計(jì)的使用方法。2、簡(jiǎn)述斐林酚試劑法測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)的原理。3、為什么用2,6-二氯酚靛酚滴定法測(cè)定維生素C含量時(shí)，要在測(cè)定的同時(shí)進(jìn)行2,6-二氯酚

12、靛酚溶液的標(biāo)定? 4、為什么提取葉綠素時(shí)干材料一定要用80%的丙酮，而新鮮的材料可以用無(wú)水丙酮提?。?5、影響SOD活力測(cè)定準(zhǔn)確性的主要因素是什么？應(yīng)如何克服？6、植物缺素病癥有的出現(xiàn)在頂端幼嫩枝葉上，有的出現(xiàn)在下部老葉上，為什么？舉例加以說(shuō)明。 7、進(jìn)行溶液培養(yǎng)或砂基培養(yǎng)有時(shí)會(huì)失敗，主要原因何在? 得分五、計(jì)算題(8分)稱取1g葉片和0.3g花瓣，用5 mL提取液分別提取它們的SOD粗酶液，在3 mL反應(yīng)體系中加入10 L粗酶液, 混合均勻，照光20 min后測(cè)得560nm OD值分別為： 560nm 葉片 花瓣 未加酶液對(duì)照OD值 0.372 0.405 0.727SOD活性單位以抑制NB

13、T光化還原的50時(shí)加入的酶量為一個(gè)酶活性單位，請(qǐng)分別計(jì)算葉片和花瓣的SOD活性。福建農(nóng)林大學(xué)考試試卷 （A卷）答案2006 2007 學(xué)年第二學(xué)期課程名稱： 植物生理生化實(shí)驗(yàn) 考試時(shí)間 90分鐘 專業(yè) 年級(jí) 班 學(xué)號(hào) 姓名 _ 題 號(hào)一二三四五總得分得 分評(píng)卷人簽 字 復(fù)核人簽 字得分一、名詞解釋（每小題2分，共20分）1、標(biāo)準(zhǔn)曲線：用標(biāo)準(zhǔn)溶液制成的曲線。先配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液, 在溶液吸收最大波長(zhǎng)下,逐一測(cè)定吸光度,然后用坐標(biāo)紙以溶液濃度為橫坐標(biāo), 吸光度為縱坐標(biāo)作圖, 若被測(cè)物質(zhì)對(duì)光的吸收符合光的吸收定律, 必然得到一條通過(guò)原點(diǎn)的直線, 即標(biāo)準(zhǔn)曲線。2、離心技術(shù)：是根據(jù)物質(zhì)顆粒在一

14、個(gè)實(shí)用的離心場(chǎng)中的行為而發(fā)展起來(lái)的，它是分離細(xì)胞器和生物大分子物質(zhì)的必備的手段之一，也是測(cè)定某些純品物質(zhì)的部分性質(zhì)的一種方法。差速離心法基于待測(cè)物質(zhì)顆粒的大小，密度不相同，其沉降速度不一樣而得到分離。3、同工酶：指催化同一種化學(xué)反應(yīng)，但其酶本身的組成卻有做不同的一組酶。4、酶活力：也稱為酶活性，是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力。5、誘導(dǎo)酶：又稱適應(yīng)酶，指植物體內(nèi)本來(lái)不含有，但在特定外來(lái)物質(zhì)的誘導(dǎo)下誘導(dǎo)生成的酶。如硝酸還原酶可為NO3-所誘導(dǎo)生成。6、呼吸速率：?jiǎn)挝粫r(shí)間鮮重或干重植物組織或原生質(zhì)釋放的CO2或吸收O2的量來(lái)表示7、種子生活力：指種子發(fā)芽的潛在能力或種胚所具有的生命力。8、抗逆性：植物

15、對(duì)逆境的抵抗和忍耐能力，簡(jiǎn)稱為抗性。9、超氧化物歧化酶（SOD）：普遍存在于動(dòng)、植物體內(nèi)，是一種清除超氧陰離子自由基的酶。10、光合速率：?jiǎn)挝粫r(shí)間、單位葉面積吸收CO2或放出O2的量。得分二、填空題（每格1分，共32分）1、測(cè)定植物組織中可溶性蛋白質(zhì)含量的方法有 Folin-酚試劑法(Lowry法) 、 考馬斯亮藍(lán)法 和紫外分光光度法 等。2、在測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)含量時(shí)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線是以 標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)濃度 為橫坐標(biāo)，以 吸光值 為縱坐標(biāo)。3、用茚三酮顯色法測(cè)定植物組織氨基酸含量時(shí)，茚三酮溶液與氨基酸共熱生成 氨 ， 氨 _與茚三酮和還原性茚三酮反應(yīng)，生成_ 藍(lán)紫色的二酮茚胺 。該化合物顏色的深

16、淺與氨基酸的含量成 正比 ，可通過(guò)測(cè)定 570 nm處的光密度，求出氨基酸的含量。4、在測(cè)定淀粉酶的活性時(shí)：淀粉酶不耐 酸 ，淀粉酶不耐 熱 。5、測(cè)定淀粉酶活性時(shí)，3，5二硝基水楊酸試劑（DNS）的作用是 與還原糖顯色生成棕紅色的3-氨基-5-硝基水楊酸 和 終止酶活性 。6、聚丙烯酰胺凝膠電泳分離過(guò)氧化物同工酶實(shí)驗(yàn)中，電泳存在三大效應(yīng)，分別是 濃縮效應(yīng) 、 分子篩效應(yīng) 和 電荷效應(yīng) 。7、測(cè)定硝酸還原酶活性的方法有 活體法 和 離體法 。8、類胡蘿卜素吸收光譜最強(qiáng)吸收區(qū)在 藍(lán)紫光 ，它不僅可以吸收傳遞光能，還具有 保護(hù)葉綠素 的作用。9、葉綠素溶液在透射光下呈 綠 色，在反射光下呈暗紅 色

17、。10、在研究植物礦質(zhì)元素中,常用的植物溶液培養(yǎng)法有 水溶液培養(yǎng)法 、 砂基培養(yǎng)法 和 氣栽法 。 11、水培時(shí)要選用黑色容器裝營(yíng)養(yǎng)液，這是為了防止 藻類滋生 。 12、常用 水溶液培養(yǎng)法 確定植物生長(zhǎng)的必需元素。 13、用活體法測(cè)定硝酸還原酶的材料，取樣前葉子需進(jìn)行一段時(shí)間的光合作用，以積累 光合產(chǎn)物 ，產(chǎn)生更多 NADH ，加速硝酸鹽的還原。 14、植物光合速率測(cè)定方法有 紅外線CO2氣體分析法 和 改良半葉法 等。得分三、選擇題(每題1分，共10分)1、進(jìn)行酶活力測(cè)定時(shí)（ A ）A、底物濃度必須極大于酶濃度 B、酶濃度必須極大于底物濃度，D、酶能提高反應(yīng)的平衡點(diǎn) C、與底物濃度無(wú)關(guān)2、蛋

18、白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸。它們具有吸收紫外光的性質(zhì)，其吸收高峰在（ D ）波長(zhǎng)處。 A、260nm B、650nm C、540nm D、280nm3、斐林(Folin)-酚試劑法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度時(shí)，應(yīng)選用的波長(zhǎng)是（ B ）。A、260nm B、650nm C、540nm D、280nm4、葉綠素提取時(shí)，葉片勻漿時(shí)加入少許CaCO3，其目的是（ D ）A、使研磨更充分 B、加速葉綠素溶解C、使葉綠素a、b分離 D、保護(hù)葉綠素5、一般而言，正常植物葉片的葉綠素與類胡蘿卜素的比值為（ B ）A、2:1 B、3:1 C、1 :2 D、1:36、測(cè)定葉綠素總量時(shí)，分光光度計(jì)選用

19、的波長(zhǎng)是（ D ） A、663nm B、645nm C、430nm D、652nm7、葉綠素卟啉環(huán)的中心原子是（ C ） A、Cu B、 Fe C、Mg D、Mn8、小藍(lán)子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度生成的白色沉淀是( A ) A、 BaCO3 B、Ba(COO)2 C、Ba(OH)2 D、CaCO39、TTC法測(cè)定種子生活力的試驗(yàn)中，活種子的現(xiàn)象為 ( A )。A、種胚全部染成紅色 B、種胚全部未染色C、種胚全部染成黑色 D、種胚非關(guān)鍵部位染色，而胚根和胚芽的尖端都不染色10、小籃子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度中，若在滴定時(shí)，外界CO2進(jìn)入呼吸測(cè)定裝置內(nèi)，會(huì)使測(cè)得的結(jié)果( A )。A、偏大 B、偏小 C、不變 D、不一

20、定得分四、問(wèn)答題(7題任選6題答。每小題5分，共30分)2、 簡(jiǎn)述分光光度計(jì)的使用方法。答： 開(kāi)啟電源開(kāi)關(guān)，預(yù)熱約20min 打開(kāi)樣品室選擇需要的波長(zhǎng)，將選擇開(kāi)關(guān)扳到“T”（透光率）位置后，調(diào)節(jié)“0”旋鈕，使讀數(shù)顯“0.00”，然后合上樣品室蓋，調(diào)節(jié)“100%”，旋鈕使讀數(shù)顯示“100”放空白于比色皿架上，拉動(dòng)拉桿，使空白進(jìn)入光路，按調(diào)整“0”和“100%”再將選擇開(kāi)關(guān)扳至“A”（吸光度）位置后，調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕，使讀數(shù)顯示“0.00” 將待測(cè)樣品移入光路，讀出吸光度“A”3、 簡(jiǎn)述“聚丙烯酰胺凝膠電泳分離植物過(guò)氧化物酶同工酶”實(shí)驗(yàn)中所用的過(guò)硫酸銨、四甲基乙二胺、蔗糖、溴酚藍(lán)、H2O2等試劑

21、的作用是什么？答： 過(guò)硫酸銨：起催化作用、引發(fā)劑四甲基乙二胺：催化作用并可調(diào)節(jié)聚合作用的時(shí)間蔗糖：防止樣品的擴(kuò)散.溴酚藍(lán)：做前沿指示劑。 H2O2：過(guò)氧化物酶通過(guò)催化H2O2，能把聯(lián)苯胺氧化成藍(lán)色后變成棕褐色產(chǎn)物。4、 為了準(zhǔn)確測(cè)定果蔬的維生素C含量，在測(cè)定過(guò)程應(yīng)注意些什么？答：在研磨時(shí)要快速均漿并加2%的草酸溶液，可有效地抑制抗壞血酸氧化酶，防止被氧化； 樣品中的色素會(huì)干擾對(duì)終點(diǎn)的判斷，如提取液有色要用白陶土脫色素； 滴定過(guò)程宜迅速，一般不超過(guò)分鐘。以防其他雜質(zhì)還原2,6-D染料； 2,6二氯酚靛酚染料不穩(wěn)定，易氧化，臨用前要標(biāo)定。5、 葉綠素a、b在藍(lán)柴光區(qū)也有吸收峰，能否用這一吸收峰波長(zhǎng)

22、進(jìn)行葉綠素a、b的定量分析？為什么？答：不能，因?yàn)樵谒{(lán)柴光區(qū)類胡蘿卜素也有吸收峰，會(huì)干擾葉綠素的吸收，不能準(zhǔn)確測(cè)定葉綠素a 、b的含量。6、 測(cè)定SOD活性時(shí)，為什么要設(shè)照光對(duì)照管和暗對(duì)照管？答：照光對(duì)照管是為了進(jìn)行對(duì)照，暗中空白管是為了進(jìn)行參比。設(shè)照光對(duì)照管和暗中空白管可以減少誤差。設(shè)照光對(duì)照管是因?yàn)镾OD活性是以抑制NBT光化還原的50%為一個(gè)酶活性單位來(lái)表示，所以必須設(shè)照光對(duì)照管，即不加酶液的對(duì)照，才能計(jì)算出SOD活性；而暗中對(duì)照管是作為比色時(shí)的參比管，是為了消除來(lái)自試劑、操作以及儀器等的誤差。7、 植物缺素病癥有的出現(xiàn)在頂端幼嫩枝葉上，有的出現(xiàn)在下部老葉上，為什么？舉例加以說(shuō)明。 答:

23、 有些植物必需元素在植物體內(nèi)是可以移動(dòng)的, 如果培養(yǎng)過(guò)程中缺乏時(shí),新葉的生長(zhǎng)可以從老葉中奪取,病癥出現(xiàn)在下部老葉上,如N、P、K和Mg； 而有些必需元素在植物體內(nèi)是不容易移動(dòng)的，當(dāng)溶液中缺乏這些元素時(shí)，新葉生長(zhǎng)所需的元素不能從老葉中奪取，所以病癥往往表現(xiàn)在頂端幼嫩枝葉上，如S、Fe和Ca等。8、 作物溶液培養(yǎng)過(guò)程應(yīng)注意哪些關(guān)鍵技術(shù)？答：作物溶液培養(yǎng)過(guò)程中，要注意下列要點(diǎn)：1. 培養(yǎng)液必需是平衡液、pH值要適宜2. 營(yíng)養(yǎng)液要通氣3. 及時(shí)更換或補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)液4. 培養(yǎng)容器不能透光5. 幼苗剛移栽時(shí)要注意遮陰 得分五、計(jì)算題(8分)用斐林酚試劑法測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)時(shí)，以標(biāo)準(zhǔn)蛋白含量為橫坐標(biāo)，以650

24、nm吸光度為縱座標(biāo)，所得標(biāo)準(zhǔn)曲線如下圖所示。實(shí)驗(yàn)中稱取鮮樣0.5g，用5ml蒸餾水提取，取0.1ml提取液同標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定650nm處吸光度為0.300，請(qǐng)從標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的蛋白質(zhì)含量（ug），根據(jù)有關(guān)公式，求出每克樣品中的蛋白質(zhì)毫克數(shù)。計(jì)算：樣品中蛋白的含量（）CVT/（VsFW1000）1005/（0.10.51000）10.00 mg/g鮮重式中：C查標(biāo)準(zhǔn)曲線值（g）； VT提取液總體積（ml）；FW樣品鮮重（g）；Vs測(cè)定時(shí)加樣量（ml）；1000-將微克換算為毫克。福建農(nóng)林大學(xué)考試試卷 （B卷）2006 2007 學(xué)年第二學(xué)期課程名稱： 植物生理生化實(shí)驗(yàn) 考試時(shí)間 90分鐘 專業(yè) 年

25、級(jí) 班 學(xué)號(hào) 姓名 _ 題 號(hào)一二三四五總得分得 分評(píng)卷人簽 字 復(fù)核人簽 字得分一、名詞解釋（每小題2分，共20分）1、 淀粉酶：用于淀粉的非還原端，生成麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖，同時(shí)使淀粉漿的粘 度下降。2、標(biāo)準(zhǔn)曲線：用標(biāo)準(zhǔn)溶液制成的曲線。先配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液, 在溶液吸收最大波長(zhǎng)下,逐一測(cè)定吸光度,然后用坐標(biāo)紙以溶液濃度為橫坐標(biāo), 吸光度為縱坐標(biāo)作圖, 繪制一條通過(guò)原點(diǎn)的直線, 即標(biāo)準(zhǔn)曲線。3、電泳：各種生物大分子在一定的PH條件下，可以解離成帶電電荷的顆粒，這種帶電顆粒在電場(chǎng)的作用下向相反的電極移動(dòng)的現(xiàn)象。4、酶的比活力：代表酶制劑的純度。用每毫克蛋白所含的酶活力單位數(shù)

26、表示。對(duì)于同一種酶來(lái)說(shuō)，比活力愈大，表示酶的純度愈高。5、硝酸還原酶：是植物氮素同化的關(guān)鍵酶，它催化植物體內(nèi)的硝酸鹽還原為亞硝酸鹽。硝酸還原酶活性可由產(chǎn)生的亞硝態(tài)氮的量表示。一般單位鮮重以N g （ g h ）為單位。 NR 的測(cè)定可分為活體法和離體法。6、溶液培養(yǎng)：是在含有全部或部分營(yíng)養(yǎng)元素的溶液中培養(yǎng)植物的方法。 7、種子生活力：指種子發(fā)芽的潛在能力或種胚所具有的生命力。8、逆境：對(duì)植物生長(zhǎng)不利的外界環(huán)境。9、超氧化物歧化酶（SOD）：普遍存在于動(dòng)、植物體內(nèi)，是一種清除超氧陰離子自由基的酶。10、光合作用：植物、藻類和某些細(xì)菌利用葉綠素，在可見(jiàn)光的照射下，將二氧化碳和水轉(zhuǎn)化為葡萄糖，并釋放

27、出氧氣的生化過(guò)程。得分二、填空題（每格1分，共32分）1、用斐林酚試劑法測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)含量受 還原物質(zhì)、酚類物質(zhì) 和 檸檬酸等到物質(zhì)的干擾。2、用茚三酮顯色法測(cè)定植物組織氨基酸時(shí)，加入Vc可以防止 空氣氧化 , 以抗壞血酸為 還原劑 可提高反應(yīng)的靈敏度，并使顏色穩(wěn)定。3、用茚三酮顯色法測(cè)定植物組織氨基酸含量時(shí)，茚三酮溶液與氨基酸共熱生成 氨 ， 氨 _與茚三酮和還原性茚三酮反應(yīng)，生成_ 藍(lán)紫色的二酮茚胺 。該化合物顏色的深淺與氨基酸的含量成 正比 ，可通過(guò)測(cè)定 570 nm處的光密度，求出氨基酸的含量。4、在測(cè)定淀粉酶的活性時(shí)，將酶液和淀粉溶液分別放在40水浴中預(yù)保溫，其目的是 提高酶測(cè)

28、定的活性 。5、測(cè)定淀粉酶活性時(shí)，3，5二硝基水楊酸試劑（DNS）的作用是 與還原糖顯色生成棕紅色的3-氨基-5-硝基水楊酸 和 終止酶活性 。 6、聚丙烯酰胺凝膠電泳分離過(guò)氧化物同工酶實(shí)驗(yàn)中，聚丙烯酰胺凝膠是由 單體丙烯酰胺 、交聯(lián)劑 、加速劑 和 催化劑 聚合交聯(lián)成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠。7、測(cè)定硝酸還原酶活性的方法有 活體法 和 離體法 。8、在研究植物礦質(zhì)元素中,常用的植物溶液培養(yǎng)法有 水溶液培養(yǎng)法 、 砂基培養(yǎng)法 和 氣栽法等。 9、水培時(shí)要選用黑色容器裝營(yíng)養(yǎng)液，這是為了防止 藻類滋生 。 12、活體法酶促反應(yīng)在 暗 條件下進(jìn)行，以防止亞硝酸鹽還原為 氨 。 13、植物呼吸強(qiáng)度的測(cè)定方法

29、有: 小筐子法 、 氧電極法 和 微量呼吸檢壓法 等。 14、測(cè)定植物光合作用的方法有: 改良半葉法 、 紅外線CO2氣體分析法 、 氧電極法 和 微量呼吸檢壓法 等。得分三、選擇題(每題1分，共10分)1、測(cè)定淀粉酶活性時(shí)，最適宜的反應(yīng)溫度和pH值是（ C ）A、37 , pH 4.5 B、37 , pH 7.0 C、40 , pH 5.62、酶的分離提純過(guò)程中，不正確的操作是（ C ）。A、需在低溫下進(jìn)行，一般在05之間B、酶制劑制成干粉后可保存于4冰箱中C、需經(jīng)常使用巰基乙醇以防止酶蛋白二硫鍵發(fā)生還原 D、提純時(shí)間盡量短3、斐林(Folin)-酚試劑法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度時(shí)，應(yīng)選用的波長(zhǎng)是（

30、B ）。A、260nm B、650nm C、540nm D、280nm4、葉綠素卟啉環(huán)的中心原子是（ C ） A. Cu B. Fe C. Mg D. Mn5、一般而言，正常植物葉片的葉綠素與類胡蘿卜素的比值為（ B ）A、2:1 B、3:1 C、1 :2 D、1:36、高等植物的老葉由于缺少某一種元素而發(fā)病，下面元素屬于這一類的有（ A ）A、氮 B、鈣 C、鐵 7、在95%提取液中,葉綠素a在紅光區(qū)的最大吸收峰為 ( D )。A、 470 nm B、649 nm C、 656 nm D、665 nm8、小藍(lán)子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度生成的白色沉淀是( A ) A、 BaCO3 B、Ba(COO)2

31、C、Ba(OH)2 D、CaCO39、TTC法測(cè)定種子生活力的試驗(yàn)中，活種子的現(xiàn)象為 ( A )。A、種胚全部染成紅色 B、種胚全部未染色C、種胚全部染成黑色 D、種胚非關(guān)鍵部位染色，而胚根和胚芽的尖端都不染色10、呼吸作用的底物為( A )。A、有機(jī)物和O2 B、 CO2和H2O C、有機(jī)物和CO2得分四、問(wèn)答題(7題任選6題答。每小題5分，共30分)1、 簡(jiǎn)述分光光度計(jì)的使用方法。答：開(kāi)啟電源開(kāi)關(guān)，預(yù)熱約20min 打開(kāi)樣品室選擇需要的波長(zhǎng)，將選擇開(kāi)關(guān)扳到“T”（透光率）位置后，調(diào)節(jié)“0”旋鈕，使讀數(shù)顯“0.00”，然后合上樣品室蓋，調(diào)節(jié)“100%”，旋鈕使讀數(shù)顯示“100”放空白于比色皿架上，拉動(dòng)拉桿，使空白進(jìn)入光路，按調(diào)整“0”和“100%”再將選擇開(kāi)關(guān)扳至“A”（吸光度）位置后，調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕，使讀數(shù)顯示“0.00”將待測(cè)樣品移入光路，讀出吸光度“A”。2、 簡(jiǎn)述斐林酚試劑法測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)的原理。答：斐林酚試劑法結(jié)合了雙縮脲試劑和酚試劑與蛋白質(zhì)反應(yīng)，其中包括2步反應(yīng)：（1）是在堿性條件下，與銅試劑作用生成蛋白質(zhì)-銅絡(luò)合物；（2）是此絡(luò)合物將磷鉬酸、磷鎢酸試劑還原，生成磷鉬藍(lán)、磷鎢藍(lán)的深藍(lán)色混合物，顏色深淺與蛋白質(zhì)含量成正相關(guān)。在650nm是比色測(cè)定的靈敏度比雙縮脲法高100倍。由于肽鍵顯色效果增強(qiáng)，從而減少了因蛋白質(zhì)種類引起的偏差。