高中生物二輪復(fù)習(xí)基因工程及克隆技術(shù)基礎(chǔ)自修課

1、高中生物二輪復(fù)習(xí)基因工程及克隆技術(shù)基礎(chǔ)自修課“基因工程與克隆技術(shù)基因工程與克隆技術(shù)”課前診斷課前診斷卷卷點(diǎn)擊鏈接點(diǎn)擊鏈接限制酶限制酶DNA 連接酶連接酶載體載體作用作用切割切割_和載體和載體拼接拼接DNA 片段，片段，形成形成_攜帶目的基因攜帶目的基因進(jìn)入進(jìn)入_作用作用部位部位兩個(gè)核苷酸之間的兩個(gè)核苷酸之間的_限制酶限制酶DNA 連接酶連接酶載體載體作用作用特點(diǎn)特點(diǎn)(條件條件)識別雙鏈識別雙鏈DNA 分子的分子的某種某種_在特定位點(diǎn)在特定位點(diǎn)上切割上切割Ecoli DNA 連接酶只能連連接酶只能連接接_T4 DNA 連接連接酶能連接酶能連接_和平末端和平末端能在宿主細(xì)胞能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并

2、大內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制量復(fù)制有多個(gè)有多個(gè)_具有特殊的具有特殊的_常用常用類型類型EcoR 限制限制酶酶 Sma 限限制酶制酶Ecoli DNA 連連接酶、接酶、T4 DNA 連接酶連接酶質(zhì)粒、質(zhì)粒、噬菌體噬菌體的衍生物、動(dòng)植的衍生物、動(dòng)植物病毒等物病毒等方法方法具體操作具體操作直接分離直接分離從自然界已有的物種中分離，如從從自然界已有的物種中分離，如從_中獲取中獲取人人工工合合成成化學(xué)合成化學(xué)合成已知核苷酸序列的已知核苷酸序列的_，直接利用，直接利用DNA合成儀用化學(xué)方法合成，不需要模板合成儀用化學(xué)方法合成，不需要模板逆轉(zhuǎn)錄法逆轉(zhuǎn)錄法 以以RNA為模板，在為模板，在_作用下人工合成作用下人工合

3、成PCR技術(shù)技術(shù)擴(kuò)增擴(kuò)增目的基因目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈，引物受熱變性后解鏈為單鏈，引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，然后在與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，然后在_作用下延伸作用下延伸植物細(xì)胞植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用常用方法方法_法、法、基因槍法、基因槍法、_法法_技術(shù)技術(shù)_法法(用用Ca2處理處理)受體受體細(xì)胞細(xì)胞受精卵、體細(xì)胞受精卵、體細(xì)胞_原核細(xì)胞原核細(xì)胞項(xiàng)目項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)取材取材植物植物_或出生不久的幼齡或出生不久的幼齡動(dòng)物的動(dòng)物的_項(xiàng)目項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程過程項(xiàng)目項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)

4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果結(jié)果獲得植株個(gè)體，可以體獲得植株個(gè)體，可以體現(xiàn)現(xiàn)_新的細(xì)胞，不新的細(xì)胞，不_，不體現(xiàn)全能性不體現(xiàn)全能性條件條件無菌無菌營養(yǎng)營養(yǎng)適宜條件適宜條件無菌、無毒無菌、無毒營養(yǎng)，營養(yǎng)，_等等溫度和溫度和pH氣體環(huán)境：氣體環(huán)境：_應(yīng)用應(yīng)用植株快速繁殖植株快速繁殖脫毒植株的培養(yǎng)脫毒植株的培養(yǎng)人工種子人工種子生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等轉(zhuǎn)基因植物的培育轉(zhuǎn)基因植物的培育蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)皮膚移植材料的培育皮膚移植材料的培育檢測有毒物質(zhì)檢測有毒物質(zhì)生理、病理、藥理學(xué)的生理、病理、藥理學(xué)的研究研究項(xiàng)目項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合原理原理 細(xì)胞膜的細(xì)胞膜的_、細(xì)胞的、細(xì)胞的_細(xì)胞膜的細(xì)胞膜的_過程過程項(xiàng)目項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合相關(guān)酶相關(guān)酶纖維素酶和纖維素酶和_或膠原蛋白酶或膠原蛋白酶融合方融合方法法物理法：離心、電激、物理法：離心、電激、振動(dòng)；振動(dòng)；化學(xué)法：聚乙二醇等試化學(xué)法：聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)除物理法和化學(xué)法外還除物理法和化學(xué)法外還可以用可以用_誘導(dǎo)誘導(dǎo)結(jié)果結(jié)果雜種植株雜種植株雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞 意義意義克