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文檔簡介
1、組織學和胚胎學組織學和胚胎學 Histology and Embryology授課教師授課教師 焦艷焦艷首先,開課前問幾個問題? 你是由什么構(gòu)成的? 你是怎么來的?腎組織胚 胎本課程的結(jié)構(gòu) 本課程共十五章,共20學時 課程共分成兩個部分 基本組織 器官與系統(tǒng)緒論緒論一、組織學和胚胎學的學習內(nèi)容組織學(histology):用顯微鏡技術(shù)研究正常 人體微細結(jié)構(gòu)及其相關(guān) 功能的學科 胚胎學(embryology):研究人體發(fā)生、 生長及其發(fā)育機 制的一門科學胚胎學研究內(nèi)容:受精卵組織學研究內(nèi)容:細胞細胞間質(zhì)組織上皮組織結(jié)締組織肌肉組織神經(jīng)組織器官和系統(tǒng)人體胚胎兒(28周)(938周)與其它課程的關(guān)系
2、 基礎(chǔ)課程 結(jié)構(gòu)決定了功能,學習組織學是為學習生理學打基礎(chǔ) 正常的組織結(jié)構(gòu)是異常的病理改變的對照標本,只有掌握了“正?!保拍茏R別“異?!保詫W習組織學也是為學習病理學打基礎(chǔ)正常腎皮質(zhì)急性滲出性腎小球腎炎組織學的發(fā)展二、組織學和胚胎學研究技術(shù) 光學顯微鏡術(shù) 電子顯微鏡術(shù) 組織化學技術(shù) 其他技術(shù)(一)光鏡技術(shù)(LM)分辨率約為0.2m可將物體放大約1500倍。石蠟切片術(shù)(paraffin sectioning)其基本操作程序是: 取材固定(甲醛)脫水(酒精)透明(二甲苯)包埋(石蠟)切片(切片機,5-7m)脫蠟(二甲苯)染色(HE染色)封固最常用的是蘇木精伊紅染色法 (hematoxylin
3、eosin staining),簡稱H-E染色法 蘇木精為堿性染料,能將細胞核內(nèi)的染色質(zhì)和胞質(zhì)中的核糖體染成紫蘭色。伊紅為酸性染料,能使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)的成分染成紅色。何謂嗜堿性和嗜酸性? 組織中的某些結(jié)構(gòu),易于被堿性染料著色的性質(zhì),稱嗜堿性(basophilia),嗜堿性結(jié)構(gòu)可被蘇木精染成紫藍色 易于被酸性染料著色的性質(zhì),稱嗜酸性(acidophilia)。嗜酸性結(jié)構(gòu)可被伊紅染成紅色 對堿性或酸性染料親和力均不強者,稱為中性其它常用特殊染色法 鍍銀染色:如將神經(jīng)組織切片標本浸泡在硝酸銀溶液中,可將神經(jīng)元染成棕黑色或棕黃色。 若將網(wǎng)狀組織切片標本浸泡在氫氧胺銀溶液中,再經(jīng)5%甲醛液還原,能將
4、網(wǎng)狀纖維染成黑色,膠原纖維呈褐色。 醛復(fù)紅彈性纖維染成紫色 有些結(jié)構(gòu)染色后其呈現(xiàn)的顏色與所用染料的顏色不同,例如用藍色染料(甲苯胺藍)染肥大細胞時,其胞質(zhì)中的顆粒呈現(xiàn)紫紅色,這種現(xiàn)象稱為異染性除石蠟切片外,還有 火棉膠包埋:眼球、睪丸 冰凍切片將組織塊立即放置到液氮(-196)內(nèi)快速凍結(jié),用恒冷箱切片機制成冷凍切片。 涂片將游離的細胞直接涂在玻片上染色,如血液涂片、宮頸粘液涂片 鋪片將疏松結(jié)締組織、腸系膜等撕成薄片,鋪在載玻片上 磨片將骨、牙等硬組織切割成片后再磨成薄片(二)電鏡技術(shù) 電子顯微鏡與一般光鏡不同:以電子束代替可見光;以電子透鏡代替光學透鏡;用熒光屏使電子束呈像;可將微細結(jié)構(gòu)放大幾
5、萬倍至幾十萬倍,分辨率可達0.2nm,而光學顯微鏡只放大約1000倍,最高分辨為0.2m。1. 透射電鏡術(shù)(TEM) 取材(更新鮮)和固定(戊二醛和鋨酸) 脫水和包埋 切片:用超薄切片機切片,切成厚約50100nm的超薄片。 染色(硝酸鉛、醋酸鈾等重金屬鹽)超薄切片機透射電鏡帶掃描附件, 可觀察樣品內(nèi)部及表面的超微結(jié)構(gòu)透射電鏡下的線粒體2. 掃描電鏡術(shù)(SEM) 用于觀察組織、細胞和器官表面的立體結(jié)構(gòu),分析物體的立體形象。不需要制成薄切片。 固定脫水干燥噴鍍金屬掃描電鏡下的紅細胞(三)組織化學術(shù) 是應(yīng)用物理、化學反應(yīng)原理,研究細胞組織內(nèi)某種化學物質(zhì)的分布和數(shù)量,從而探討與其有關(guān)的技能活動。 一般組織化學:PAS反應(yīng)(使細胞內(nèi)的多糖形成紫紅色) 糖類PAS 脂類油紅、尼羅藍、蘇丹類燃料 核酸福爾根反應(yīng)(DNA) 甲基綠-派若寧反應(yīng):DNA綠色,RNA紅色酶類通過酶的催化活性以表示酶的存在 基本原理是:多醛糖強氧化劑過碘酸氧 化品紅硫酸復(fù)合物(希夫試劑)結(jié) 合紫紅色反應(yīng)物肝細胞PAS反應(yīng)示糖原顆粒25免疫組織化學 是根據(jù)抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,檢測肽和蛋白質(zhì)的技術(shù)。免疫組織化學顯示
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