ABI7500校正步驟

1、ABI7500校正軟件版本：SDS2.0.4或1.4.校準前準備A.原校準文件備份到SDSDocuments中把原校準文件拷出來進行備份，以防如果本次校準某個環(huán)節(jié)沒通過，還可以使用原校準文件，以保證機器的運行。B.校正試劑板融化回復到室溫C.準備96孔反應盤托1 .校準1.ROI(regionofinterest)校準試劑板采用ROI(含各種熒光染料)，先后校正五個通道。進入1.4software中點擊instrument,在下拉菜單中選擇calibrate；A.首先點擊blockup讓熱蓋升起B(yǎng).點擊Snapshot照相，如果96孔沒有全呈現(xiàn)白色，調(diào)節(jié)ExposureTime然后再點擊Sna

2、pshot進行照相，直到96孔剛好到都呈現(xiàn)白色和極個別孔有一點點紅色之間的臨界狀態(tài)，然后點擊GenerateCalibration查看校正的結(jié)果，當WeelsFound顯示數(shù)值為96,SaveCalibration顯示為可點擊狀態(tài)時這個通道校正成功，然后點擊SaveCalibration保存校正結(jié)果，此時下面的通道符號后對應顯示為OK。依次將5個通道校正完畢。C.如果因燈光強度不足造成校正通過不了，可清潔燈泡或更換鹵素燈，然后再做校正2.背景校準:A.原理：7500使用背景校正文件去除以后實驗中的背景熒光，主要檢測通道是否有污染存在，試劑盤里為純水B.判斷標準：A-D通道不能超過72000;E

3、通道不能超過900001.4版本軟件和2.04版本軟件適用這同一標準C.校正步驟C.11.4軟件在NewDocument中的Assay的下拉菜單中選擇Background,2.04軟件在InstumentMaintenanceManage用選擇BackgroundC.2放入Background試劑盤，運行程序C.3結(jié)果分析：A-D通道不能超過72000;E通道不能超過90000C.4BLOCK清潔處理：對于Background數(shù)值超過標準的孔用純水處理BLOCK,無紡布擦干，再用10%乙醇處理BLOCK,無防布擦干。C.5清潔過后再次進行Background校正，達到標準后點擊Extract將

4、數(shù)據(jù)結(jié)果提取到文件中。圖1為09年6月17日做的背景校正，各孔線均勻整齊，都在范圍之內(nèi)。圖2為10年11月3日做的背景校正，孔A6A通道熒光值超過72000此儀器目前使用09年的校準數(shù)據(jù)，因孔的不正，有所偏移，各別孔的熒光值無法準確讀取，直接影響到CT值。3.光學校正:A.原理：7500軟件產(chǎn)生五通道對于7500系統(tǒng)物理影響的數(shù)據(jù)補償。B.試劑盤：ROI試劑盤C.校正步驟C.11.4軟件在NewDocument中的Assay的下拉菜單中選擇Calibration,2.04軟件在InstumentMaintenanceManage用選擇OpticalCalibrationC.2放入ROI試劑盤，

5、運行程序，60度5minC.3結(jié)果：5個通道都有一定的數(shù)值范圍。C.4點擊Extract將數(shù)據(jù)結(jié)果提取到文件中一1j*XfaHJ,w*41rdrmDitWmWt*Mvi*-3713-ewrJrFADI皿*.-3!fl，E.era.WRWE?BOJRVj=nw室3-1-BuwfaAAWnacfiina.孑EKOTTrn?Bii!FWU7HETt=rt產(chǎn)*aTWEq，im,aixnhiLZY至一jZXHUhEr-0jt*rT.iaFIu3y.H.一m、R立1*vuTE.1*!a-aWF2MHI*A-:WKC-.VK-L-丁、A4-%3u.jnriM*MS力?KLV一-U.-LrfinLj.lMM1

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8、正：A.原理：使用96孔純熒光反應板運行程序，獲得純熒光數(shù)據(jù)，以確定儀器中所使用的純熒光特征。對以下十種熒光進行校正。B.試劑盤：dye試劑盤C.校正步驟C.11.4軟件在NewDocument中的Assay的下拉菜單中選擇PureSpectra2.04軟件在InstumentMaintenanceManage用選擇PureSpectraC.2放入dye試劑盤，依次完成10個染料的校正，每個程序運行，60度5min每個染料校正完應進行提取保存。1. CY3CY5CBN980+/口;l汝心門劃創(chuàng)口與E依+MW，.小師”，?itrJ:一二；3or000平口l/IVdtilld/加陋廣SOICOOrwitamniMM”*auujojVdlAIVl8qa人SFEaK-R。XOd9*Hd一二-Mg(IM