惡性胸腔積液實驗室檢查進展

1、    惡性胸腔積液實驗室檢查進展作者：汪文娟作者單位：寧波天一職業(yè)技術(shù)學(xué)院，浙江 寧波 315100【關(guān)鍵詞】 胸腔積液,實驗室,進展胸腔積液是常見的臨床癥狀之一，由多種原因引起，因此胸腔積液的實驗室診斷十分重要。近年來胸腔積液的實驗室檢查取得了重要進展，本文將做一簡要綜述如下。1 細胞學(xué)檢查1.1 腫瘤細胞學(xué)檢查 胸腔積液中找到典型惡性腫瘤細胞是有力的證據(jù),是診斷惡性腫瘤細胞最簡便易行的方法,關(guān)鍵在于提高腫瘤細胞檢出的陽性率。密度梯度離心法檢出腫瘤細胞的陽性率(78%)高于離心沉渣法(30%)和直接涂片法(11%)1。1.2 細胞化學(xué)染色 胸腔積液是

2、自然培養(yǎng)基，脫落的腫瘤細胞在其無限增殖，形態(tài)上很難診斷。腫瘤細胞的過氧化物酶染色(POX)、蘇丹黑B 染色(SB) 均呈陰性; 而糖原染色(PAS)、堿性磷酸酶染色(ALP)、特異性脂酶染色(ASD2CE)、非特異性脂酶染色(A2NAE )、酸性磷酸酶染色(ACP) 等呈不同程度的陽性反應(yīng)2。1.3 染色體檢查 腫瘤細胞在胸腔積液中可發(fā)生異常增生，常出現(xiàn)超二倍體，若病理分裂象超過10%，對惡性積液有一定的診斷意義。1.4 流式細胞儀分析(FCM) 在FCM進行胸腔積液脫落細胞DNA定量分析過程中，異倍體出現(xiàn)的高度將提示惡性胸腔積液3。腫瘤細胞的發(fā)生和演化過程中往往有染色體數(shù)量和結(jié)構(gòu)的畸變，而檢

3、測細胞核DNA含量和倍體分布能直接反映這種畸變，使細胞學(xué)診斷由形態(tài)學(xué)定性診斷提升到了定量診斷水平，二者結(jié)合可盡量避免認為誤差4。根據(jù)FCM診斷腫瘤細胞標準,結(jié)果惡性胸腔積液FCM法敏感性達82.6%,特異性91.2%,診斷準確性85.7%5。2 腫瘤標志物檢測2.1 2微球蛋白(2MG) 通過檢測31例惡性胸腔積液和40例胸腔積液患者的血和胸腔積液中2MG含量,結(jié)果表示惡性組胸腔積液2MG與血清值明顯相關(guān)6。2.2 癌胚抗原(CEA)與糖鏈抗50(CA50) 在惡性胸腔積液中CEA升高明顯, CA50有助于發(fā)現(xiàn)CEA陰性的的惡性胸腔積液7。動態(tài)檢測CEA，并與血清CEA相對照，對惡性腫瘤診斷的

4、符合率可達80%8。研究表明, CEA檢測惡性胸腔積液的靈敏度為60%,特異度為89%9。2.3 乳酸脫氫酶(LD)8 胸腔積液中LD增高與惡性積液呈相關(guān)，如果積液LD/血清LD>1.0，則為惡性積液，這是由于惡性腫瘤細胞分泌大量LD，致使積液LD活性增高。2.4 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)8 若ACE胸腔積液ACE<25 U/L，積液ACE/血清ACE比值<1.0,則為惡性胸腔積液。2.5 鐵蛋白8 癌細胞具有較強的合成鐵蛋白的能力,因而鐵蛋白可作為惡性腫瘤的標志物之一。如果鐵蛋白明顯增高,積液鐵蛋白/血清鐵蛋白比值>1.0,而溶菌酶不高,則為惡性積液。2.6 端粒酶

5、測定 端粒酶是一種核糖核蛋白酶,由核糖核酸(RNA)和蛋白質(zhì)亞基組成的一種特殊的逆轉(zhuǎn)錄酶,與生物細胞染色質(zhì)末端的特殊結(jié)構(gòu)合成有關(guān)。該酶的活性和腫瘤細胞之間存在著相互激發(fā)關(guān)系，許多研究表明，惡性胸腔積液中端粒酶活性增高。用PCRELISA法(聚合酶聯(lián)反應(yīng)酶聯(lián)免疫吸附分析法)檢測30例惡性胸腔積液和35例非惡性胸腔積液的端粒酶活性，結(jié)果非惡性胸腔積液中端粒酶活性陽性占5.7%,而惡性胸腔積液中端粒酶活性陽性90%,因此端粒酶活性測定診斷惡性胸腔積液靈敏度為90%,特異度為89%9。2.7 細胞角蛋白 細胞角蛋白是一種分子量40 ku68 ku的細胞結(jié)構(gòu)蛋白，惡性胸腔積液中細胞角蛋白19(CYFRA

6、211)濃度明顯升高，CYFRA211是有意義的腫瘤標志物。相關(guān)研究表明，CYFRA211對診斷惡性胸腔積液的特異性為90.9%,敏感性為72.2%10。3 免疫學(xué)檢測3.1 白細胞介素 白細胞介素1(IL1)在炎癥中增加血管壁的通透性，以IL1>50 ng/L為臨界值,診斷惡性胸腔積液敏感性為64%,特異性為73%,符合率為68%11。白細胞介素2(IL2)在介導(dǎo)免疫反應(yīng)中起關(guān)鍵作用，惡性胸腔積液中IL2水平均高于外周血;白細胞介素8(IL8)為8.5 ku的蛋白質(zhì),是目前公認的最強的中性粒細胞趨化因子,惡性胸腔積液中的腫瘤細胞可表達部分IL8。在惡性胸腔積液中,有胸痛等胸膜癥狀者IL

7、6水平也較高。3.2 干擾素(IFN) IFN主要由淋巴細胞在結(jié)核菌抗原的刺激下產(chǎn)生,能活化巨噬細胞,增強殺滅結(jié)核的能力并參加抗體的免疫調(diào)節(jié)機能。是診斷結(jié)核性胸腔積液有用的指標,可與惡性胸腔積液區(qū)別。3.3 腫瘤壞死因子(TNF) 及受體TNF由單核細胞和巨噬細胞產(chǎn)生,具有廣泛的生物活性,參與多種生理、病理免疫過程。有助于結(jié)核積液和惡性胸腔積液的區(qū)別診斷。3.4 P 選擇素 P 選擇素以臨界值>10 g/L診斷惡性胸腔積液,敏感度為84%,特異性為85%,臨床符合率為85 %。P 選擇素與白細胞介素1聯(lián)合測定,診斷惡性胸液的陽性率為90 %11。4 其他檢測4.1 凝血因子和纖溶因子 纖

8、維蛋白原(Fbg) 是反映凝血指標之一,D2二聚體(DD) 是交聯(lián)纖維的特異性降解產(chǎn)物,它是體內(nèi)高凝狀態(tài)和纖溶亢進的分子標志物之一。惡性胸液組中Fbg、DD、顆粒膜蛋白140(GMP140) 和血管性假血友病因子(RWF)水平明顯高于結(jié)核性胸液組, Fbg、DD、GMP140和RWF聯(lián)合檢測良惡性胸液的敏感性為99%,特異性為100%12。4.2 糖類抗原、癌胚抗原及鐵蛋白聯(lián)合檢測 劉徐桂等研究13，惡性胸腔積液中糖類抗原(CA125、CA129)、癌胚抗原(CEA)和鐵蛋白(SF)水平明顯高于良性胸腔積液，兩者具差異有顯著性(P<0.01)。有助于提高良、惡性胸腔積液的鑒別診斷。4.3

9、 組織多肽抗原(TPA)、癌胚抗原(CEA)和神經(jīng)元烯醇化酶(NSE)聯(lián)合檢測14 良性胸腔積液TPA、CEA、NSE 含量分別為(1 123±656.2)U/L,(1.23±0.90)ng/ml,(8.10±8.36)ng/ml,而惡性胸腔積液組含量分別為(4 175±2 696.9)U/L,(198.7±237.9)ng/ml,(28.03±30.7)ng/ml,良惡性胸腔積液之間三項腫瘤標志物差異具有極顯著性( P<0.001)。三項同時陽性,惡性胸腔積液44.6 % ,良性胸腔積液無一例。4.4 染色體、癌胚抗原(CEA

10、)和腺苷脫氨酶(ADA )聯(lián)合檢測15 對182例滲出性胸腔積液同時行染色體、癌胚抗原(CEA ) 和腺苷脫氨酶(ADA ) ，結(jié)果表明，以染色體、CEA 和ADA 三項檢查中某兩項同時陽性或三項同時陽性為標準, 惡性胸腔積液診斷的敏感性為62.5%76.4% , 特異性為95.5% 100%; 如以三項檢查中某兩項任一項陽性或三項任一項陽性為標準, 則其敏感性升至87.5% 97.2% , 特異性為83.6% 91.8%。【參考文獻】1 葉安霞，向旭東，譚國嬌，等.密度梯度離心法在癌性胸腔積液細胞病理學(xué)檢測中的作用J.中華結(jié)核和呼吸雜志,2001,24(7):420.2 李新岳.免疫細胞化學(xué)

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