凍干粉針劑過濾系統(tǒng)工藝實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上凍干粉針劑過濾系統(tǒng)工藝實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì) 目  錄摘 要 4前 言 5文獻(xiàn)綜述 6一、 凍干粉針工藝概述 7 二、 過濾除菌方式及發(fā)展趨勢(shì) 9三、化學(xué)消毒方法滅菌及個(gè)種方式的特點(diǎn) 12四、熱力滅菌簡(jiǎn)介 17實(shí)驗(yàn)部分 201儀器與試劑 201.1實(shí)驗(yàn)儀器 20 1.2實(shí)驗(yàn)試劑 202試驗(yàn)方法 202.1原理 202.1.1氣泡點(diǎn)檢測(cè)簡(jiǎn)介 202.12 CFU簡(jiǎn)介 212.2實(shí)驗(yàn)過程 21、2.2.1 過濾系統(tǒng)滅菌 212.2.2. 無菌甘露醇溶液的制備 212.2.3 完整性測(cè)試 212.2.4 微生物截留試驗(yàn) 213實(shí)驗(yàn)結(jié)果 214討論 225 結(jié)論 22

2、 參考文獻(xiàn)： 24 摘 要滅菌是指殺滅或去除環(huán)境中的一切微生物，包括病原和非病原微生物及細(xì)菌的芽孢使之完全無菌，消毒是指殺滅或去除環(huán)境中的病原微生物的過程，使之無害化，不致引起感染或致病【1】從上訴定義可知，消毒和滅菌都需外環(huán)境中的微生物，只是殺滅和去除微生物的目標(biāo)和程度不同，即消毒處理不一定能達(dá)到滅菌要求，滅菌能達(dá)到消毒目的。此論文結(jié)合了一些國(guó)內(nèi)的文獻(xiàn)和個(gè)人幾年來的生產(chǎn)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。結(jié)合近幾年文獻(xiàn)在文獻(xiàn)綜述部分對(duì)對(duì)如何控制好凍干粉針劑的滅菌工藝，控制凍干粉針無菌的關(guān)鍵工序和關(guān)鍵點(diǎn)，進(jìn)行了一些論證。在無菌環(huán)境下將藥液冷凍，將原料藥“摻”在某些輔料或溶在某些溶媒中，經(jīng)過一定的加工處理制成不同形式的制

3、劑，就是我們所說的“凍干粉針劑”。凍干粉針劑工藝中的滅菌生產(chǎn)的關(guān)鍵，如何控制好生產(chǎn)中的滅菌工藝和消毒工藝，往往成為藥品合格與否的關(guān)鍵。此論文本實(shí)驗(yàn)部分主要探討非最終滅菌注射劑生產(chǎn)過程中除菌過濾器對(duì)微生物的截留效果, 及氣泡點(diǎn)完整性實(shí)驗(yàn)。確認(rèn)過濾除菌過濾系統(tǒng)的完整性及過濾系統(tǒng)在微生物截留的有效性與安全性。實(shí)驗(yàn)方法: 采用孔徑為0. 22 m 除菌級(jí)聚醚砜濾芯, 以直徑在0. 30.4m 的缺陷假單胞菌為生物指示劑, 將菌液用濾芯過濾, 計(jì)算被過濾液體過濾前的微生物數(shù)量與過濾后的微生物數(shù)量比的常用對(duì)數(shù)值(LRV) 。結(jié)果: 菌液過濾前后微生物數(shù)量比的常用對(duì)數(shù)值LRV大于7。結(jié)論: 濾芯每平方厘米有

4、效過濾面積符合中國(guó)藥典2010年版2 部附錄滅菌法的規(guī)定, 確認(rèn)除菌過濾工藝在注射劑生產(chǎn)過程中的有效性與安全性。關(guān)鍵詞：滅菌 消毒 凍干粉針劑 過濾除菌 消毒劑殺滅微生物 LRV前 言我國(guó)衛(wèi)生部于1995年7月11日下達(dá)衛(wèi)藥發(fā)（1995）第35號(hào)"關(guān)于開展藥品GMP認(rèn)證工作的通知"。藥品認(rèn)證是國(guó)家依法對(duì)藥品生產(chǎn)企業(yè)（車間）和藥品品種實(shí)施GMP監(jiān)督檢查并取得認(rèn)可的一種制度，是國(guó)際藥品貿(mào)易和藥品監(jiān)督管理的重要內(nèi)容，也是確保藥品質(zhì)量穩(wěn)定性、安全性和有效性的一種科學(xué)的先進(jìn)的管理手段。 我國(guó)在真空冷凍干燥技術(shù)已有幾十年的歷史，但是對(duì)于無菌凍干生產(chǎn)聯(lián)動(dòng)線只有十幾年的時(shí)間，在20世紀(jì)八十

5、年代前，對(duì)于無菌凍干生產(chǎn)聯(lián)動(dòng)線依賴于進(jìn)口。在20世紀(jì)70年代我國(guó)的凍干制藥設(shè)備才處于萌芽狀態(tài)，當(dāng)時(shí)的設(shè)備處于半工半機(jī)械之中，在80年代時(shí)期，改進(jìn)為單機(jī)自動(dòng)化生產(chǎn)設(shè)備，90年代我國(guó)生產(chǎn)線改進(jìn)為洗瓶機(jī)，隧道烘箱，灌裝，單機(jī)連線的簡(jiǎn)單半自動(dòng)聯(lián)動(dòng)生產(chǎn)線。在99年的SFDA發(fā)布藥品GMP認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)出臺(tái)刺激了我國(guó)的制藥機(jī)械的突飛猛進(jìn)，隨著國(guó)外先進(jìn)制藥設(shè)備引進(jìn)，凍干生產(chǎn)線聯(lián)動(dòng)生產(chǎn)線才得到完善。為了滿足更好的提高藥品的質(zhì)量，的滿足生產(chǎn)需求，以下將對(duì)凍干粉針的無菌工藝進(jìn)行介紹，凍干粉針的由于是最終滅菌，無菌要求特別嚴(yán)格。而滅菌消毒更需要認(rèn)真，本人結(jié)合文獻(xiàn)，與個(gè)人經(jīng)驗(yàn)。對(duì)滅菌除菌和消毒進(jìn)行了總結(jié)和研究。這些對(duì)生產(chǎn)有

6、一些借鑒作用在實(shí)驗(yàn)部分，為了證明過濾系統(tǒng)的完整性和安全性，對(duì)過濾濾系統(tǒng)氣泡點(diǎn)及微生物截留進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，主要是為了保證凍干粉針無菌生產(chǎn)的質(zhì)量安全。文 獻(xiàn) 綜 述凍干粉針劑是非最終滅菌產(chǎn)品，非最終滅菌產(chǎn)品潔凈度的要求相對(duì)要高。過濾設(shè)備的升級(jí)，過濾產(chǎn)品材質(zhì)的升級(jí)，操做自動(dòng)化提高，檢測(cè)設(shè)備的完善，都有力的保證了凍干粉針生產(chǎn)無菌的要求。以除菌過濾產(chǎn)品為例，針對(duì)不同的藥液，使用不同材質(zhì)的濾膜，同時(shí)過濾器完整性檢測(cè)儀的應(yīng)用，又能夠檢測(cè)濾膜的完整性及過濾系統(tǒng)的密閉性，他們都為半成品的無菌做了可靠保障。車間滅菌方法為例，除常規(guī)滅菌方法外，臭氧和環(huán)氧乙烷滅菌的應(yīng)用，殺滅了死角的細(xì)菌，給無菌生產(chǎn)提供了保障，在常規(guī)加熱滅

7、菌中，分為濕熱滅菌和干熱滅菌，其中濕熱滅菌的穿透力比較強(qiáng)，而干熱滅菌可除去內(nèi)毒素。 凍干工藝在藥物生產(chǎn)安全性方面就存在很多風(fēng)險(xiǎn).物料,人員,設(shè)備,環(huán)境是直接影響著成品的質(zhì)量.所謂物料就是指用于包裝的原料、輔料和包裝材料。藥品的生產(chǎn)是與各種物料開始的，即使藥品生產(chǎn)過程控制的十分完美，但是所用的物料達(dá)不到規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，那么藥品的生產(chǎn)過程就沒有意義了。因此藥品生產(chǎn)要從物料開始。人員主要的污染源，所以要對(duì)人員進(jìn)行GMP衛(wèi)生培訓(xùn)，設(shè)備：無論藥品生產(chǎn)企業(yè)的規(guī)模大小，還是生產(chǎn)何種類型的藥品或品種數(shù)量都離不開組織生產(chǎn)必不可少的要素設(shè)備。設(shè)備是藥品生產(chǎn)中物料投入到轉(zhuǎn)化成品的工具和載體，所以藥品質(zhì)量的優(yōu)略與設(shè)備與設(shè)備

8、這個(gè)生產(chǎn)的主要息息相關(guān)，在生產(chǎn)中，設(shè)備的 設(shè)計(jì)、選型、安裝應(yīng)符合生產(chǎn)要求,易于清洗、消毒或滅菌,便于生產(chǎn)操作和維修防止差錯(cuò)和減少污染.干燥滅菌設(shè)備、配制的微生物截留濾灌裝加塞設(shè)備、加塞后與凍干之間的轉(zhuǎn)運(yùn)、膠塞轉(zhuǎn)運(yùn)等存在很大影響產(chǎn)品質(zhì)量的風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)生產(chǎn)的安全性形成很大的挑戰(zhàn)。主要表現(xiàn)在：干燥滅菌機(jī)的熱分布、熱穿透性能試驗(yàn)不能滿足要求，還有些生產(chǎn)使用廠家由于沒有配備必要檢測(cè)設(shè)備，在生產(chǎn)前根本沒有對(duì)其性能進(jìn)行驗(yàn)證就投入運(yùn)行，另外對(duì)干燥滅菌機(jī)的生產(chǎn)速度與工藝要求的匹配性非常陌生，根本無法滿足抗生素瓶的無菌要求；灌裝加塞設(shè)備國(guó)內(nèi)很多廠家采用的是敞開式層流系統(tǒng)，操作人員可以隨意進(jìn)入到百級(jí)層流下，灌裝藥液管路

9、及灌裝泵不能實(shí)現(xiàn)；膠塞轉(zhuǎn)運(yùn)、半加塞后轉(zhuǎn)運(yùn)至凍干機(jī)均采用人工進(jìn)行，對(duì)整個(gè)分裝冷凍干燥過程的無菌要求形成巨大挑戰(zhàn)；軋蓋機(jī)在非百級(jí)層流下工作也對(duì)膠塞要求在無菌環(huán)境下進(jìn)行軋蓋封口形成挑戰(zhàn)。環(huán)境：主要包括外部環(huán)境和內(nèi)部環(huán)境，外部環(huán)境包括廠址的選擇，選擇的一個(gè)原則就是防止污染，就是從廠房設(shè)計(jì)與布局總體去考慮，如何預(yù)防、減少與消除生產(chǎn)環(huán)境有可能對(duì)藥品生產(chǎn)所產(chǎn)生的污染。【2】   對(duì)于以上問題，本文在結(jié)合大量文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，總結(jié)出了一些設(shè)計(jì)方案，并提出了一些用于合理化的設(shè)計(jì)方案，以改進(jìn)凍干粉針的滅菌工藝的，達(dá)到成品無菌一 凍干粉針工藝概述1凍干粉針簡(jiǎn)介凍干粉針是藥物的一種

10、制劑形式，是將藥用成分（原料）及輔助成分（輔料），用溶媒（例如水）溶解后，配制成一定濃度的溶液，分裝于安瓿或西林瓶等容器中，在無菌密閉環(huán)境中，低溫下凍結(jié)，再通過降低環(huán)境氣壓，緩慢升高制品溫度的方法使制品中的溶媒（例如水）升華，留下固體形態(tài)的疏松塊狀或粉末狀藥物而成的制劑。在使用時(shí)，需要加入溶媒（如水），將藥物溶解成溶液再用于注射或輸液治療疾病。2凍干粉針工藝流程 3凍干粉針工藝無菌關(guān)鍵流程 圖一為凍干工藝生產(chǎn)過程，原料藥配制后的，初濾和精濾是除菌過程；膠塞清洗后是滅菌工序，西林瓶的洗烘聯(lián)動(dòng)也能除內(nèi)毒素和細(xì)菌，灌裝和半壓塞工序在百級(jí)下操作，操作的無菌要求也極其高， 配制工序過程稱量配制過程在十萬

11、級(jí)環(huán)境下進(jìn)行，易染菌，主要控制點(diǎn)是染菌的程度和配制的時(shí)間，室溫溫度，濕度等。物測(cè)試。 配制時(shí)間在工藝設(shè)計(jì)時(shí)也應(yīng)考慮，如果生產(chǎn)時(shí)間過長(zhǎng)，潔凈間溫度，濕度適宜細(xì)菌的繁殖過快，細(xì)菌量達(dá)到了過濾系統(tǒng)的承受量，半成品的染菌程度 加大，將嚴(yán)重影響成品的質(zhì)量初濾和精濾工序?qū)Νh(huán)境的要求相對(duì)嚴(yán)格，對(duì)濾膜的材質(zhì)，完整性都有著嚴(yán)格的要求膠塞是在萬級(jí)下滅菌，百級(jí)分裝，不太容易染菌，主要注意點(diǎn)是，滅菌后放置時(shí)間不易過長(zhǎng)。加入加塞器時(shí)注意不要染菌。洗瓶工序由于都是洗烘聯(lián)動(dòng)，細(xì)菌的清除率極高。染菌的可能性不大。分裝工序，由于凍干粉針為非最終滅菌產(chǎn)品，所以這道工序是凍干粉針是否合格的關(guān)鍵。所以此道工序減少人為污染，保持環(huán)境無

12、菌狀態(tài)，由為重要。分裝主要培養(yǎng)操作人員的無菌意識(shí)，如果能夠?qū)崿F(xiàn)機(jī)械的自動(dòng)化程度，應(yīng)該是最終解決辦法。環(huán)境這一塊，隨時(shí)監(jiān)控好生產(chǎn)車間的溫度，濕度，空氣漂浮物數(shù)量等等。生產(chǎn)后徹底清場(chǎng)。注意消毒液的更換，等等。4國(guó)內(nèi)凍干粉針生產(chǎn)工藝的進(jìn)展 凍干粉針無菌工藝，近幾年，主要向著機(jī)械自動(dòng)化，和消毒設(shè)備無害化方向進(jìn)展，檢測(cè)設(shè)備的簡(jiǎn)易化都有較大提高。凍干機(jī)結(jié)構(gòu)緊湊占地面積小、生產(chǎn)效率高、節(jié)能和自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，但普遍沒有解決滅菌問題，成為生產(chǎn)上的遺憾。 完整性檢測(cè)方面，現(xiàn)在的儀器能夠進(jìn)行氣泡點(diǎn)、擴(kuò)散流、水侵入和壓力衰減測(cè)試，運(yùn)用這些工業(yè)上可接受的物理測(cè)試，檢測(cè)濾材及濾器的過濾精度及完整性，這些方法滿足我國(guó)藥

13、典及GMP規(guī)范中對(duì)除菌過濾器進(jìn)行驗(yàn)證的要求，既可以離線測(cè)試又可以在線測(cè)試，既可以判斷濾材精度是否合格又可以檢查濾殼以及密封件是否完好，測(cè)試時(shí)不影響下游的無菌狀態(tài)過濾的完整性檢測(cè)，檢測(cè)，對(duì)過濾系統(tǒng)的完整性及藥物無菌的安全性。有了可靠保障消毒設(shè)備中，臭氧的應(yīng)用，也減小了消毒劑殘留所帶來的危害。對(duì)潔凈間整體環(huán)境的提升，起到了有利作用。大型臭氧發(fā)生器谷稱公斤級(jí)臭氧發(fā)生器，主要由空氣壓縮及凈化系統(tǒng)、冷卻系統(tǒng)、臭氧發(fā)生系統(tǒng)、電源控制系統(tǒng)、臭氧化氣體處理系統(tǒng)五大部件組成。采用當(dāng)今最新型功率電子模塊組成的變頻電源電路、脈沖寬度調(diào)控控制等系列新技術(shù)、新工藝，產(chǎn)品操作簡(jiǎn)便，結(jié)構(gòu)緊湊，性能穩(wěn)定，臭氧量高，易于維護(hù)。

14、二 除菌過濾方式及發(fā)展趨勢(shì)1除菌過濾系統(tǒng)簡(jiǎn)介過濾是一種通用的滅菌方法，除菌行過濾器應(yīng)該得到驗(yàn)證，從而可在線的去除流體中的活性微生物，生成無菌濾出液【3】過濾除菌用物理阻留法去除懸浮于介質(zhì)中的微生物，稱為過濾除菌。過濾須通過致密的濾材，僅適于液體與氣體等流動(dòng)物質(zhì)的處理?！?】?jī)龈煞坩樄に囍械倪^濾系統(tǒng)粗濾系統(tǒng)和精濾系統(tǒng)組成，其中包括微孔濾膜,平板濾器、硅膠管、蠕動(dòng)泵等組成。凍干粉針劑生產(chǎn)以微孔濾膜,濾膜以混合纖維素，聚酰胺類，聚醚砜( PES) 微孔濾膜等最為常用，平板濾器的材質(zhì)為316L。生產(chǎn)前整個(gè)過濾系統(tǒng)需滅菌，生產(chǎn)前后濾膜都需做氣泡點(diǎn)實(shí)驗(yàn)。 2.微孔濾膜簡(jiǎn)介: ：微孔濾膜由精制硝化棉，加入適

15、量醋酸纖維素、丙酮、正丁醇、乙醇、等制成，親水，具有無毒衛(wèi)生，是一種多孔性的薄膜過濾材料，孔徑分布比較均勻穿透性的微孔，微孔率高達(dá)80的絕對(duì)孔徑。主要用于水系溶液的過濾，故也稱水系膜。 易燃，保存時(shí)應(yīng)注意密封，防潮濕，防火?！?】 特點(diǎn)：孔徑比較均，孔隙率高，無介質(zhì)脫落，質(zhì)地薄，阻力小，吸附極小。 微孔濾膜，有親水性和疏水性之分，在現(xiàn)在的眾多微孔濾膜中PVDF材料的是應(yīng)用最廣的，效果最好的3各種微孔濾膜的種類及特點(diǎn)（1）混合纖維素( CN- CA)CN - CA 是一種較標(biāo)準(zhǔn)的常用微孔濾膜,開發(fā)最早,應(yīng)用也比較成熟. 由于成孔性能良好,親水性強(qiáng),因此該種濾膜的系列孔徑規(guī)格分級(jí)最多,從0.05m

16、 到8m， 【6】國(guó)內(nèi)制膜企業(yè)普遍生產(chǎn)的的一種濾膜，凍干過濾工序常用此膜，質(zhì)量良莠不齊。藥廠使用性價(jià)比較高（2） 聚酰胺類如尼龍6 ( PA - 6) 和尼龍66 ( PA - 66) 微孔濾膜,這類膜親水性好,較耐堿而不耐酸. 在酮、酚、醚及高分子量醇類中,不易被浸蝕. 孔徑型號(hào)也較多.質(zhì)地堅(jiān)固，個(gè)別品種注意溶出度。價(jià)格適中。 （3） 聚醚砜( PES) 微孔濾膜PES特性 耐熱性優(yōu)越，熱變形溫度200，高溫下強(qiáng)度大。 耐水性優(yōu)越，耐酸、堿。 難燃性，燃燒時(shí)發(fā)煙少。 透明、無毒?！?】該類膜具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性,耐輻射,濾速快,應(yīng)用面也較廣.膜產(chǎn)品已得到認(rèn)可和應(yīng)用.是比較理想的濾膜

17、。只是此膜大多依靠進(jìn)口，或國(guó)外提供原料國(guó)內(nèi)加工，價(jià)格較貴。適用于貴重藥液過濾和大批量藥液過濾除此之外聚氟乙烯類，聚碳酸酯和聚酯類如聚偏氟乙烯膜( PVDF) 和聚四氟乙烯膜(PTFE) . 這兩類微孔濾膜,都有極好的化學(xué)穩(wěn)定性,適合在高溫下使用. 特別是PTFE 膜,其使用溫度- 40 260 ,一部分是采用聚氟類微孔濾膜.還有聚碳酸酯和聚酯類聚 ，烯烴類，無機(jī)基材類微孔濾膜等。藥廠有時(shí)也有應(yīng)用。4氣泡點(diǎn)檢測(cè)簡(jiǎn)介氣泡點(diǎn)檢測(cè)原理：截留效率是微孔膜最重要的性能指標(biāo)，它受控于膜的最大孔徑和膜的孔徑分布。用來測(cè)量膜最大孔徑的最普通最經(jīng)典的方法是泡點(diǎn)壓力法，其原理是基于假定微孔膜是由很多圓形毛細(xì)管狀的孔

18、道組成。測(cè)泡點(diǎn)壓力時(shí)，是先將微孔膜完全濕潤(rùn) (親水性的膜一般用純水濕潤(rùn)，疏水性的膜可用甲醇、異丙醇等溶劑濕潤(rùn))，然后在裝置中對(duì)膜一側(cè)施加氣體壓力，在膜另一側(cè)看氣泡的最低壓力值時(shí)稱這個(gè)壓力點(diǎn)為泡點(diǎn)，膜孔徑與泡點(diǎn)壓力之間的關(guān)系是【8】P=4cos/D其中：P壓差 表面壓力 浸潤(rùn)液與濾材的接觸角 D孔徑（厘米） 氣泡點(diǎn)檢測(cè)是證明過濾系統(tǒng)是針對(duì)濾膜完整性的一種重要手段，三 化學(xué)消毒劑在凍干粉針工藝上的應(yīng)用1化學(xué)消毒劑簡(jiǎn)介：定義：化學(xué)消毒滅菌法是利用化學(xué)物質(zhì)抑制和殺死微生物?？捎媒?、噴霧和熏蒸等方法 理想的化學(xué)消毒劑特質(zhì) （1）殺菌譜廣； （2）使用有效濃度低； （3）殺菌作用速度快； （4）性能穩(wěn)定

19、； （5）易溶于水； （6）可在低溫下使用； （7）不易受各種物理化學(xué)因素影響； （8）對(duì)物品無腐蝕性； （9）無臭無味，無色； （10）毒性低，消毒后無殘留毒害； （11）使用安全，不易燃燒； （12）價(jià)格低廉； （13）運(yùn)輸方便； （14）可大量生產(chǎn)供應(yīng)?！?】化學(xué)消毒劑的使用原則：（1）有針對(duì)性地根據(jù)所要?dú)缥⑸锏奶攸c(diǎn)，選用合適的消毒劑。（2）嚴(yán)格掌握消毒劑的濃度、消毒時(shí)間及消毒方法，否則達(dá)不到消毒滅菌的作用。（3）被消毒的物品，在消毒前必須清洗干凈。（4）浸泡消毒時(shí)，物品必須全部浸泡在溶液內(nèi)，軸節(jié)應(yīng)打開。（5）對(duì)易揮發(fā)的消毒溶液，必須將蓋蓋嚴(yán)，定期測(cè)量比重，以保證濃度。（6）浸泡的器

20、械在使用前應(yīng)用滅菌蒸餾水或生理鹽水將消毒液沖洗干凈，以免刺激人體組織?！?0】目前的化學(xué)消毒劑中，沒有一種能夠完全符合上述要求的！因此在使用中，只能根據(jù)被消毒物的特點(diǎn)使用 2 GMP對(duì)藥廠使用化學(xué)消毒劑的規(guī)定（1）應(yīng)按照操作規(guī)程對(duì)潔凈區(qū)進(jìn)行必要的清潔和消毒。所采用消毒劑的種類應(yīng)多于一種。為及時(shí)發(fā)現(xiàn)是否出現(xiàn)耐受菌株及其蔓延情況，應(yīng)定期進(jìn)行環(huán)境監(jiān)測(cè)。紫外線殺菌效力有限，不能用以替代化學(xué)消毒劑。(2) 應(yīng)監(jiān)測(cè)消毒劑和清潔劑的微生物污染狀況，配制后的消毒劑和清潔劑應(yīng)存放在事先清潔過的容器內(nèi)，存放期不得超過規(guī)定時(shí)限。A/B級(jí)區(qū)應(yīng)使用經(jīng)除菌過濾的消毒劑和清潔劑。(3) 必要時(shí)可采用熏蒸的方法以降低潔凈區(qū)內(nèi)

21、衛(wèi)生死角的微生物污染，應(yīng)對(duì)熏蒸劑的殘留水平予以驗(yàn)證?！?1】3消毒藥物的選擇： （1）.消毒藥對(duì)微生物有一定選擇性，針對(duì)所要?dú)绲奈⑸锏奶攸c(diǎn)，選擇合適的消毒劑是消毒工作成敗的關(guān)鍵。如果要?dú)缂?xì)菌芽孢，則必須選擇高效的化學(xué)消毒劑才能取得可靠的消毒效果。季銨鹽類是陽離子表面活性劑，因殺菌作用的陽離子具有親脂性，而革蘭陽性菌的細(xì)胞壁含類脂多于革蘭陰性菌，故革蘭陽性菌更易被季銨鹽類消毒劑滅活。 （2）消毒劑的配合： 消毒劑的正確配合運(yùn)用也是有效使用消毒劑的關(guān)鍵。和季銨鹽類消毒劑用70%酒精配制比用水配制穿透力強(qiáng)，殺菌效果更好。酚在水中的溶解度低，制成甲酚的肥皂溶液，可殺滅大多數(shù)細(xì)菌繁殖體，對(duì)結(jié)核桿菌

22、亦能在15分鐘內(nèi)殺滅。 （3）消毒劑的濃度： 一般來說，消毒劑的濃度和消毒效果成正比，即消毒劑越濃，其消毒效力越強(qiáng)。如石炭酸的濃度降低1/3，其效力降低1/7291/81，但也不能一概而論，如70%酒精比其他濃度酒精消毒效力都強(qiáng)。但濃度越大，對(duì)機(jī)體或器具的損傷或破壞作用也越大。因此，在配制消毒劑時(shí)，要按消毒對(duì)象的重量或體積計(jì)算選擇其最有效而又安全的濃度，不可隨意加大或減少藥物濃度。 （4）.環(huán)境溫度、濕度和酸堿度： 一般來說，消毒劑隨溫度升高其殺菌能力增強(qiáng)。溫度每升高10，石炭酸的消毒作用可增加58倍，金屬鹽類增加25倍?！?2】 4常用的化學(xué)消毒劑（1）酒精消毒劑: 簡(jiǎn)介：70%-75%的酒

23、精用于滅菌消毒，藥廠應(yīng)為75%的酒精。用于包括皮膚消毒、設(shè)備消毒等。 有人以為，酒精濃度越高，消毒效果越好，這是錯(cuò)誤的。酒精消毒的作用是凝固細(xì)菌體內(nèi)的蛋白質(zhì)，從而殺死細(xì)菌。但95%的酒精能將細(xì)菌表面包膜的蛋白質(zhì)迅速凝固，并形成一層保護(hù)膜，阻止酒精進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)，因而不能將細(xì)菌徹底殺死。如果酒精濃度低于70%，雖可進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)，但不能將其體內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固，同樣也不能將細(xì)菌徹底殺死。只有70%-75%的酒精即能順利地進(jìn)入到細(xì)菌體內(nèi)，又能有效地將細(xì)菌體內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固，因而可徹底殺死細(xì)菌。乙醇屬中效消毒劑，目前醫(yī)藥生產(chǎn)單位使用很普遍。 【13】主要優(yōu)缺點(diǎn)： 優(yōu)點(diǎn)：具有中效、速效的殺菌作用； 無毒、無刺激

24、，對(duì)金屬無腐蝕性； 缺點(diǎn)：受有機(jī)物影響大； 易揮發(fā)，不穩(wěn)定。 殺菌作用：乙醇為中效消毒劑，能殺滅細(xì)菌繁殖體、結(jié)核桿菌及大多數(shù)真菌和病毒， 但不能殺滅細(xì)菌芽胞。 適用范圍：適用于皮膚、環(huán)境表面及設(shè)備表面消毒。 配制方法：取95%的酒精，按比例加入純化水到75%，經(jīng)0.45nM的濾膜過濾，放置在密閉容器內(nèi)，有效期7天。 2 新潔爾滅 新潔爾滅屬季銨鹽類消毒劑，它是一種陽離子表面活性劑，在消毒學(xué)分類上屬低效消毒劑。 （1） 殺菌原理： 該消毒劑殺菌作用機(jī)制主要有：改變細(xì)胞的滲透性，使細(xì)菌破裂；使蛋白質(zhì)變性； 抑制細(xì)菌體內(nèi)某些酶，使之失去活性；因其有良好的表面活性，可高濃度聚集于菌體表面，影響細(xì)胞的新

25、陳代謝。 （2）主要優(yōu)缺點(diǎn)： 優(yōu)點(diǎn)： 無難聞的刺激性氣味； 易溶于水； 有表面活性作用； 耐光耐熱； 性質(zhì)較穩(wěn)定，可以長(zhǎng)期貯存。 缺點(diǎn)：易受有機(jī)物的影響；吸附性強(qiáng)。一塊 10cm×10cm 的紗布浸入 1000m11/1000 的新潔爾滅溶液中，可使該溶液變成 1/2000 之的濃度。 （3）殺菌作用： 新潔爾滅對(duì)化膿性細(xì)菌、腸道菌及部分病毒有一定的殺滅能力；對(duì)結(jié)核桿菌、真菌的殺 滅效果不好；對(duì)細(xì)菌芽胞僅能起抑制作用。 本消毒劑對(duì)革蘭氏陽性菌的殺滅能力一般較對(duì)革蘭氏陰性菌強(qiáng)，抑菌濃度遠(yuǎn)低于殺菌濃度。 （4）適用范圍：墻面抹擦，地漏液封，浸潤(rùn)雙手等。（5）使用方法： 對(duì)污染物品的消毒：

26、可用 0.1-0.5%濃度的溶液噴灑，浸泡或抹擦，作用10-60 分鐘。 (3) 臭氧簡(jiǎn)介：臭氧是一種廣譜殺菌劑，可殺滅細(xì)菌繁殖體和芽胞、病毒、真菌等，并可破壞肉毒桿菌毒素。 臭氧對(duì)空氣中的微生物有明顯地殺滅作用，采用 30mg/m3 濃度的臭氧，作用 15 分鐘，對(duì)自然菌的殺滅率達(dá)到 90%以上。用臭氧消毒空氣，必須是在人不在的條件下，消毒后至少 過 30 分鐘才能進(jìn)入。可用于手術(shù)室，病房，無菌室等場(chǎng)所的空氣消毒。 主要用于潔凈間的消毒滅菌，臭氧發(fā)生器可以流動(dòng)使用，對(duì)不同的罐進(jìn)行消毒，每個(gè)生產(chǎn)單元在每次換料前，都可以及時(shí)得到消毒，使用效率很高，也很方便，不要用那么多的酒精、氮?dú)?，也不要用高?/p>

27、蒸汽。所以在制藥廠就能夠得到推廣。滅菌形式：臭氧能氧化分解細(xì)菌內(nèi)部所需的酶，使細(xì)菌滅活死亡。直接與細(xì)菌、病毒作用，破壞它們的細(xì)胞器和DNA、RNA，使細(xì)菌的新陳代謝受到破壞，導(dǎo)致細(xì)菌死亡。透過細(xì)胞膜組織，侵入細(xì)胞內(nèi)，作用于外膜的脂蛋白和內(nèi)部的脂多糖，使細(xì)菌發(fā)生通透性畸變而溶解死亡。注意事項(xiàng)： 臭氧對(duì)人有毒，國(guó)家規(guī)定大氣中允許濃度為 0.2mg/m3，故消毒必須在無人條件下進(jìn) 行。 臭氧為強(qiáng)氧化劑，對(duì)多種物品有損壞，濃度越高對(duì)物品損壞越重，可使銅片出現(xiàn)綠色 銹斑、橡膠老化，變色，彈性減低，以致變脆、斷裂，使織物漂白褪色等。使用時(shí)應(yīng)注意。 溫度和濕度可影響臭氧的殺菌效果： 臭氧作水的消毒時(shí)，0最好

28、，溫度越高，越有利于臭氧的分解，故殺菌效果越差加濕有利于臭氧的殺菌作用、要求濕度>60%，濕度越大殺菌效果越好。臭氧在常溫下為爆炸性氣體，有特臭。臭氧在水中的溶解度較低（3%）。臭氧穩(wěn)定性差，在常溫下可自行分解為氧。所以臭氧不能瓶裝貯備，只能現(xiàn)場(chǎng)生產(chǎn)，立即使用。(4)環(huán)氧乙烷簡(jiǎn)介:氣體滅菌劑，在25室溫下能殺滅一切病原體。它殺滅細(xì)菌芽孢的濃度與時(shí)間為： 884mg/L，24h; 442mg/L，4h;884mg/L，2h。本品對(duì)物品的損害小，不損壞金屬、棉、毛、橡膠、合成纖維，但可損壞賽璐珞制品、聚乙烯、聚氯乙烯。本品的穿透力強(qiáng)，能穿透紙張、塑料薄膜等包裝材料?！?4】消毒方法：液體消毒

29、：可于水浴中用其15%溶液浸泡數(shù)小時(shí)。此法適用于某些、培養(yǎng)基、移植物或埋藏物的滅菌。熏蒸消毒： 可于丁基橡膠尼龍袋、聚乙烯塑料袋、密閉的消毒柜或其他容器內(nèi)進(jìn)行。投藥量一般為440880mg/L，作用時(shí)間為1624h(>15);如于丁基橡膠袋中劑量加大至2500mg/L，則作用24h (>20) 即可。消毒后的物品應(yīng)徹底通風(fēng)散氣。密切接觸皮膚的乳膠或塑料制品，須通風(fēng)18h以至數(shù)日，才可使用。熱空氣或超聲波可加速其擴(kuò)散。，【15】四 熱力滅菌熱力滅菌簡(jiǎn)介：制藥工業(yè)所用滅菌設(shè)備的常用滅菌方法熱力消毒系指利用熱力作用殺滅病原微生物防止疾病傳播的處理。若將微生物全部殺滅則稱熱力滅菌。其主要作

30、用是通過菌體酶的破壞與蛋白質(zhì)的凝固使微生物死亡。干熱消毒是在無水情況下加熱以達(dá)消毒的處理。其主要作用是通過氧化，破壞細(xì)菌原生質(zhì)使微生物死亡。濕熱殺菌作用較干熱為強(qiáng)，但所有微生物均可被此兩種處理方法殺滅而達(dá)滅菌。 微生物對(duì)熱的抵抗力多用熱死亡時(shí)間表達(dá)，即在一定溫度與條件下，全部殺死該種微生物所需的時(shí)間。不同微生物在濕熱或干熱處理下的熱死亡時(shí)間不盡相同，其中以細(xì)菌芽胞最長(zhǎng)，而嗜熱脂肪芽胞桿菌芽胞又較一般病原菌芽胞的熱死亡時(shí)間為長(zhǎng)(見表1)。 微生物煮沸壓力蒸氣干 熱100121132160180細(xì)菌繁殖體*病毒真菌孢子產(chǎn)氣夾膜梭菌芽胞腐敗梭菌芽胞炭疽桿菌芽胞破傷風(fēng)梭菌芽胞肉毒桿菌芽胞嗜熱脂肪芽胞桿

31、菌芽胞222510106030030011123351212<1<1<1<1<1<1122333466123030<1<1<1<1<1<1255【17】1 濕熱滅菌法系熱法的一種，即以沸水、蒸汽和蒸汽加壓滅菌。常用的巴氏滅菌法就是濕熱滅菌，此法又有兩種方式：(1)低溫長(zhǎng)時(shí)間處理，在61.762.8攝氏度以下處理30分鐘;(2)高溫短時(shí)間處理，在71.6攝氏度或略高溫度下處理15分鐘，濕熱滅菌中，以蒸汽加壓滅菌效果最好，可用常壓蒸汽滅菌，也可在高壓蒸汽鍋中滅菌，其蒸汽溫度可達(dá)121攝氏度，能將耐熱的芽孢在30分鐘內(nèi)全部殺死。

32、但對(duì)某些易被高壓破壞的物質(zhì)，如某些糖或有機(jī)含氮化合物，宜在60千帕壓力下(110攝氏度)滅菌1530分鐘。【18】在一般情況下，熱壓滅菌法所需的溫度（蒸汽表壓）和時(shí)間的關(guān)系為：115（67kPa）、30min; 121（97kPa）、20min; 126（139kPa）、15min。在特殊情況下，可以通過試驗(yàn)確認(rèn)合適的滅菌溫度和時(shí)間。（XVIII）濕熱法是在高壓滅菌器中使用高壓蒸汽或高溫水進(jìn)行滅菌的方法。因微生物在濕熱的環(huán)境中，一些重要的蛋白發(fā)生變性和凝固，會(huì)使微生物死亡，從而達(dá)到滅菌的目的。較之干熱滅菌，在濕熱的條件下，微生物可在相對(duì)較低的溫度下被殺死。高壓滅菌器的常規(guī)操作溫度是121 ，時(shí)

33、間是1020 min；也可選擇達(dá)到相同殺滅效果的115 ，一般時(shí)間45 min。通常濕熱滅菌方法適用于可承受所需溫度，且能被濕氣穿透但不會(huì)受到不良影響的、包裝在密閉容器中的藥物制劑。蒸汽滅菌對(duì)油類、脂肪類、油性制劑、其他不能被濕氣穿透的制劑，以及可能會(huì)被凝結(jié)水破干熱滅菌：使微生物氧化，而不是蛋白質(zhì)變性。【19】2 干熱滅菌法系熱滅菌法的一種，其中有焚燒法和干烤法等。一般細(xì)菌的繁殖體在干熱80100°C經(jīng)1小時(shí)即死亡，芽胞則需160°C經(jīng)2小時(shí)才死亡。干熱滅菌法在醫(yī)療中有一定意義?！?0】干熱法是在特別設(shè)計(jì)的滅菌設(shè)備中進(jìn)行滅菌的方法，通過氣體或電加熱，設(shè)備內(nèi)溫度是可控的。干熱

34、滅菌是基于焚化或氧化使微生物脫水死亡，從而達(dá)到滅菌的目的。因干熱滅菌在殺滅微生物方面的效果較差，故需要更高的溫度和更長(zhǎng)的時(shí)間。具體的溫度和時(shí)間需根據(jù)產(chǎn)品的裝量大小和類型、容器及其熱分布特性來確定。一般來說，進(jìn)行滅菌處理的個(gè)體單位應(yīng)盡量小，裝載滅菌設(shè)備時(shí)熱空氣應(yīng)能在設(shè)備容器室內(nèi)自由循環(huán)。干熱滅菌的溫度通常是160170 ，時(shí)間2 h。更高的溫度可縮短時(shí)間，反之，較低的溫度則需要更長(zhǎng)的時(shí)間。干熱滅菌通常用于濕熱滅菌無效的物質(zhì)，包括不揮發(fā)油、甘油及各種熱穩(wěn)定的粉末等。干熱滅菌也是玻璃器皿和手術(shù)器具滅菌的有效方法。實(shí) 驗(yàn) 部 分 過濾系統(tǒng)氣泡點(diǎn)及PH值變化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1.儀器與試劑：1.1儀器：（1）微孔

35、濾膜： 孔徑0.22m 級(jí)別: 除菌級(jí) 直徑：150mm 濾膜面積: 225平方厘米 廠家：杭州西斗門設(shè)備廠（2）平板濾器：直徑：150mm 級(jí)別: 除菌級(jí) 廠家：上海先維過濾設(shè)備廠完整性檢測(cè)儀： 型號(hào)：FILGUARD-212 廠家：上海先維過濾設(shè)備廠 （3）蠕動(dòng)泵，三角瓶 ，脈動(dòng)滅菌柜，10L立瓶，5L三角瓶，管路等。1.2實(shí)驗(yàn)試劑：（1）甘露醇:山東潔晶醫(yī)藥科技有限公司 批號(hào)： 配制40L 5%的甘露醇滅菌溶液。（2）微生物指示劑: 缺陷假單孢菌( ATCC19146直徑0.3m 0. 4m m) , 北京鑫四環(huán)消毒技術(shù)開發(fā)中心。( 3) 菌液濃度: 每平方厘米應(yīng)達(dá)到10個(gè)菌的挑戰(zhàn)水平。

36、( 4) 培養(yǎng)基: 硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基: 北京三藥科技開發(fā)公司, 批號(hào): ; 營(yíng)養(yǎng)瓊脂: 廣東環(huán)凱微生物科技有限公司, 批號(hào): ; 營(yíng)養(yǎng)肉湯: 廣東環(huán)凱微生物科技有限公司, 批號(hào):2實(shí)驗(yàn)方法：2.1 原理：2.1.1氣泡點(diǎn)檢測(cè)簡(jiǎn)介氣泡點(diǎn)檢測(cè)原理：截留效率是微孔膜最重要的性能指標(biāo)，它受控于膜的最大孔徑和膜的孔徑分布。用來測(cè)量膜最大孔徑的最普通最經(jīng)典的方法是泡點(diǎn)壓力法，其原理是基于假定微孔膜是由很多圓形毛細(xì)管狀的孔道組成。測(cè)泡點(diǎn)壓力時(shí)，是先將微孔膜完全濕潤(rùn) (親水性的膜一般用純水濕潤(rùn)，疏水性的膜可用甲醇、異丙醇等溶劑濕潤(rùn))，然后在裝置中對(duì)膜一側(cè)施加氣體壓力，在膜另一側(cè)看氣泡的最低壓力值時(shí)稱這個(gè)壓

37、力點(diǎn)為泡點(diǎn)，膜孔徑與泡點(diǎn)壓力之間的關(guān)系是【8】P=4cos/D其中：P壓差 表面壓力 浸潤(rùn)液與濾材的接觸角 D孔徑（厘米） 氣泡點(diǎn)檢測(cè)是證明過濾系統(tǒng)是針對(duì)濾膜完整性的一種重要手段2.1.2: 經(jīng)培養(yǎng)所得菌簇形成單位的英文縮寫。 細(xì)菌（可見）和真菌的測(cè)量單位。，將稀釋后的一定量的菌液通過澆注或涂布的方法，讓其內(nèi)的微生物單細(xì)胞一一分散在瓊脂平板上，待培養(yǎng)后，每一活細(xì)胞就形成一個(gè)菌落。與常規(guī)利用顯微鏡對(duì)微生物數(shù)量進(jìn)行測(cè)量不同，主要是對(duì)可見（即多數(shù)情況下形成菌落）的細(xì)菌數(shù)量進(jìn)行測(cè)量的單位。2.2實(shí)驗(yàn)過程2.2.1 過濾系統(tǒng)滅菌: 將試驗(yàn)所需的不銹鋼桶、硅膠管、過濾器及濾芯等置于脈動(dòng)真空滅菌器中于121

38、度 滅菌40 min。2.2.2. 無菌甘露醇溶液的制備：配制20L 5%的甘露醇溶液，置于脈動(dòng)真空滅菌器中于121度 滅菌40 min。2.2.3 完整性測(cè)試：（1）系統(tǒng)密閉性檢查：按下圖所示，連接整個(gè)過濾系統(tǒng)，安裝濾器。封閉出料口，將上口與壓縮空氣管道相連。緩慢開啟壓縮空氣閥門，壓力表顯示0.6mpa時(shí)，打開完整性檢測(cè)儀，打開功能5，按開始鍵，儀器開始手動(dòng)檢測(cè)，在按加壓鍵，升到0.2Mpa時(shí)松開生壓鍵，穩(wěn)定1-2分鐘，如顯示器壓力值不下則氣密性完好。(2)濾膜氣泡點(diǎn)測(cè)試：系統(tǒng)檢測(cè)合格后，打開完整性檢測(cè)儀，設(shè)置好時(shí)間，打開功能3系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)行氣泡點(diǎn)，檢測(cè)完畢后，顯示器顯示氣泡點(diǎn)壓力。按打印鍵，

39、打印出結(jié)果。2.2.4 微生物截留試驗(yàn)： （1） 截留試驗(yàn): 將缺陷假單胞菌液360 mL 加入0.5% 甘露醇溶液中攪拌均勻, 取1mL 按中國(guó)藥典2005 年版2 部附錄0.5%微生物限度檢查法進(jìn)行檢查, 計(jì)數(shù)過濾前液體的微生物數(shù)量。然后將菌液全部用過濾器濾過, 取1000mL按過濾前藥液微生物數(shù)量檢查法同法操作, 計(jì)數(shù)過濾后的液體的微生物數(shù)量。計(jì)算被過濾液體過濾前的微生物數(shù)量( N0 ) 與過濾后的微生物數(shù)量(N) 比的常用對(duì)數(shù)值,即: LRV = 1gN0-1gN= 7.7。2.5微生物截留試驗(yàn)：除菌濾器再次進(jìn)行起泡點(diǎn)測(cè)試, 確認(rèn)試驗(yàn)過程中濾膜的完整性。記錄見表一系統(tǒng)完整性確認(rèn)記錄3.

40、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：表一：完整性確認(rèn)檢驗(yàn)結(jié)果測(cè)量值標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定是否符合是/否×實(shí)驗(yàn)前0.3245MPa實(shí)驗(yàn)后0.3241MPa0.30MPa完整性確認(rèn)檢驗(yàn)結(jié)果：實(shí)驗(yàn)前后都0.30Mpa，所以完整性確認(rèn)檢驗(yàn)結(jié)果合格。表2微生物截留試驗(yàn)結(jié)果過濾前微生物數(shù)量( N)過濾后微生物數(shù)量(N)1gN1gNLRV標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定7.0×10 CFU1.2×10 CFU9.82.17.7LRV 7微生物截留實(shí)驗(yàn)4.討論濾膜的氣泡點(diǎn)國(guó)內(nèi)沒有嚴(yán)格規(guī)定，廠家給的標(biāo)準(zhǔn)為0.30Mpa，所以此次驗(yàn)證以此為準(zhǔn)，實(shí)驗(yàn)前后濾膜的氣泡點(diǎn)0.30Mpa，符合廠家標(biāo)準(zhǔn)，完整性確認(rèn)檢驗(yàn)結(jié)果系統(tǒng)。實(shí)際生產(chǎn)中，氣泡點(diǎn)是過濾系統(tǒng)檢測(cè)的主要手段。通常也有不合格的情況，如遇到此情況，需認(rèn)真分析原因，：常見的不合格原因有以下幾種濾芯潤(rùn)濕時(shí)間；不夠?yàn)V芯為安裝好；過濾系統(tǒng)漏氣完整性檢測(cè)儀漏氣；壓源壓力不足6Mpa；濾芯未沖洗干凈；濾芯已壞需要更換等等。如果過濾前未確定不合格，應(yīng)更換濾芯，如過濾后確定不合格，