血漿hs-CRP、vWF及其裂解酶含量與急性冠脈綜合征

1、血漿hs-CRP、vWF及其裂解酶含量與急性冠脈綜合征    關(guān)鍵詞：冠狀動脈疾病 心絞痛 冠心病 心肌梗死 心房顫動    【摘要】目的：檢測不穩(wěn)定型心絞痛（UAP）、急性心肌梗死（AMI）等急性冠脈綜合征（ACS）患者血漿中高敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）和血管性血友病因子（vWF）及其裂解酶（vWF-cp）水平，探討它們在ACS發(fā)病機(jī)制中的作用和相互聯(lián)系。方法：研究對象分UAP組和AMI組（入院即刻采血），穩(wěn)定型心絞痛（SAP）組和正常對照組（于入院次日空腹采血），各組均17例;應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA

2、）測定血漿vWF濃度和hs-CRP含量，以殘余膠原結(jié)合力試驗(yàn)測定血漿vWF-cp活性水平。所有入選對象均行冠狀動脈造影證實(shí)。結(jié)果：UAP組和AMI組血漿hs-CRP與vWF水平均高于SAP組和正常對照組P    研究表明，冠狀動脈內(nèi)易損粥樣硬化斑塊破裂以及繼發(fā)的血栓形成是急性冠脈綜合征（ACS）的主要發(fā)病機(jī)制，高敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）、血管性血友病因子（vWF）、血管性血友病因子裂解酶（vWF-cp）在冠狀動脈血栓形成中起重要作用，本研究擬通過檢測ACS病人血液中hs-CRP、vWF、 vWF-cp水平，探討它們在ACS發(fā)病機(jī)制中的作用和相互聯(lián)系。

3、    1 資料與方法    1.1 一般資料    根據(jù)2001年中華醫(yī)學(xué)會心血管分會診斷標(biāo)準(zhǔn)隨機(jī)入選2004年7月至2005年2月住院冠心病病人51例，其中不穩(wěn)定型心絞痛（UAP）和急性心肌梗死（AMI）患者各17例，分別構(gòu)成UAP組和AMI組，穩(wěn)定型心絞痛（SAP）17例為SAP組，另有正常對照組17例，所有冠心病患者及對照組均行冠狀動脈造影檢。排除：慢性肝、腎、免疫、血液系統(tǒng)疾病，感染性疾病以及誘發(fā)血栓形成的其他疾?。ㄐ姆款潉印L(fēng)濕性心瓣膜病、惡性腫瘤等）；既往有經(jīng)皮

4、腔內(nèi)冠脈成形術(shù)、支架置入及冠脈旁路移植術(shù)病史；入院前服用過抗血小板，抗凝藥物及止血藥物；入院前AMI已行溶栓治療；糖尿病。    1.2 方法    對照組和SAP組于入院次日空腹取外周肘靜脈血，UAP組和AMI組入院后即刻取外周肘靜脈血4.5ml，注入含有110體積的枸櫞酸鈉抗凝離心管，1 h內(nèi)以3 000 r/min離心10 min，提取血漿裝于低溫冷凍管中，置于-70冰箱內(nèi)保存。應(yīng)用蘇州大學(xué)血栓室建立的抗vWF雙抗體夾心ELISA法測定血漿vWF濃度。血漿vWF-cp活性測定：按照Rick等所建立的膠原結(jié)合試

5、驗(yàn)并略作改進(jìn)1，2測定之。以酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）定量測定血漿hs-CRP濃度。    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理    應(yīng)用SPSS 10.0版統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，兩組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，多組（兩組以上）均數(shù)間比較采用方差分析，多組均數(shù)兩兩比較采用q檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析，以雙側(cè)=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。    2 結(jié)果    2.1 各研究組之間基本特征比較&#

6、160;   2.2 血漿hs-CRP、vWF和vWF-cp水平與ACS的關(guān)系    2.3 hs-CRP與vWF、vWF-cp的相關(guān)性及其與血脂的相關(guān)性    直線相關(guān)分析表明hs-CRP含量與vWF濃度呈正相關(guān)（r=0.67,P    3 討論    冠狀動脈易損粥樣斑塊破裂,表面破損或裂隙,隨后繼發(fā)血小板聚集和血栓形成,引起冠狀動脈急性完全或不完全堵塞是引發(fā)ACS的主要病理機(jī)制3，4。在導(dǎo)致斑塊破裂的

7、因素中,炎癥是ACS的基礎(chǔ),炎癥因子促進(jìn)ACS的發(fā)生和發(fā)展5。血漿hs-CRP具有高敏感性和精確性,在炎癥因子中具有代表性,且hs-CRP的濃度沒有晝夜變異。近年來美國食品與藥物管理局（FDA）將hs-CRP測定作為預(yù)測ACS的方法之一6。本研究發(fā)現(xiàn)ACS組患者的hs-CRP水平明顯高于SAP組和正常對照組，而SAP組和正常對照組之間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這表明hs-CRP水平只在心臟有急性炎癥反應(yīng)和損傷的ACS時才明顯升高，在組織損傷程度較輕的SAP患者中升高并不明顯，表明hs-CRP水平的增高與冠狀動脈炎癥反應(yīng)程度和組織損傷程度密切相關(guān)，與文獻(xiàn)研究結(jié)果一致7。Sano等8運(yùn)用血管內(nèi)超聲證明

8、在AMI患者中，hs-CRP含量與粥樣斑塊破裂密切相關(guān)，hs-CRP升高程度可反映破裂斑塊的炎癥活動性，提示臨床上可將hs-CRP作為評價粥樣斑塊易損性的非侵入性指標(biāo)。    除炎癥外，還有其他重要因素導(dǎo)致動脈硬化斑塊的破裂，如易形成血栓的血液易損血液。vWF是人體內(nèi)止血與血栓形成中的主要糖蛋白之一,血漿vWF主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞合成,儲存在內(nèi)皮細(xì)胞的Weibel-pallade小體內(nèi),血漿中的vWF水平可反映血管內(nèi)皮細(xì)胞受損程度和高凝狀態(tài)并可作為治療、判斷預(yù)后的評價指標(biāo)之一9,當(dāng)斑塊破裂,內(nèi)皮細(xì)胞受到破壞后釋放入血.介導(dǎo)血小板粘附于受損血管壁,啟動血栓形

9、成。本研究發(fā)現(xiàn)，ACS患者血漿vWF水平與SAP患者和對照組比較顯著增高(P    vWF介導(dǎo)血小板與內(nèi)皮下組織粘附并進(jìn)而形成血栓的能力與其多聚體的大小密切相關(guān),其中大分子的多聚體作用更強(qiáng)13,vWF-cp是新近發(fā)現(xiàn)的一種血漿金屬蛋白酶，它主要水解大分子量的vWF多聚體成小分子的肽段14，因此vWF-cp可以通過對vWF多聚體大小的調(diào)控來調(diào)節(jié)vWF多聚體與內(nèi)皮下膠原和血小板的粘附能力,從而影響血栓的形成。vWF-cp的降低可能會促使血管內(nèi)形成富血小板血栓15。本研究結(jié)果表明，ACS患者血漿vWF-cp活性顯著低于SAP患者和對照組（P0.05），SAP患

10、者與正常對照組比較輕度下降，但并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），提示vWF-cp在ACS血栓形成中可能起著重要作用。ACS患者血漿vWF-cp活性顯著降低可能與以下幾方面的原因有關(guān)：炎癥反應(yīng)，斑塊破裂損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，使貯存于內(nèi)皮細(xì)胞Weibel-Palade小體中的大分子量的vWF多聚體釋放出來，過多的大分子量的vWF可能消耗性地使血循環(huán)中的vWF-cp減少，導(dǎo)致vWF-cp活性下降15；此外，vWF-cp的活性受vWF水平的調(diào)節(jié),vWF水平增高，vWF-cp的活性降低，可能與vWF對該酶本身或相關(guān)的調(diào)節(jié)因子、輔助因子進(jìn)行調(diào)控，致使酶活性降低有關(guān)16。但本研究未發(fā)現(xiàn)vWF-cp與vWF之

11、間在ACS急性期有明顯相關(guān)關(guān)系r=-0.042，P=0.815。同時發(fā)現(xiàn)hs-CRP與vWF-cp之間在ACS急性期亦無明顯相關(guān)關(guān)系r=-0.236，P=0.179。今后有待擴(kuò)大樣本進(jìn)一步研究。    綜上所述，hs-CRP、vWF、vWF-cp在ACS發(fā)生發(fā)展中起重要作用，深入研究它們在ACS中的機(jī)制，對研制治療ACS的安全有效的抗炎藥物可提供理論依據(jù)，國外已經(jīng)獲得了重組的人vWF-cp17，利用重組人vWF-cp的治療，可能有助于減少ACS患者血栓的發(fā)生。    致謝：本研究得到蘇州大學(xué)血液研究所阮長耿院士及南

12、華大學(xué)嚴(yán)鵬科博士無私的幫助和指導(dǎo)，在此衷心感謝。    【參考文獻(xiàn)】    1Rick M,Moll S,Taylor M,et al.Clinical use of a rapid collagen binding assay for von Willebrand factor cleaving protease in patients with thrombotic thrombocytopenic purpuraJ.Thromb Haemost,2002,88:598-604.  

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