山仙顆粒對(duì)荷瘤小鼠免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究

1、山仙顆粒對(duì)荷瘤小鼠免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究    【摘要】  目的觀(guān)察山仙顆粒對(duì)荷瘤小鼠免疫系統(tǒng)的影響。方法純系BALB/c小鼠30只，用U14瘤細(xì)胞荷瘤建立動(dòng)物模型，隨機(jī)平均分為3組：山仙顆粒治療組、環(huán)磷酰胺治療組、生理鹽水對(duì)照組。觀(guān)察山仙顆粒對(duì)荷瘤小鼠NK細(xì)胞活性、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、TNF-等免疫指標(biāo)的影響。結(jié)果山仙顆粒能夠顯著提高治療組小鼠的NK細(xì)胞活性、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率和血清中TNF-，IL-2的含量。結(jié)論山仙顆粒能夠顯著提高荷瘤小鼠免疫系統(tǒng)的活性。論文論文參考網(wǎng) 【關(guān)鍵詞】  山仙顆粒 小鼠腫瘤 免疫Abstract：Object

2、iveTo observe the effect of Shanxian Granule on immune system in tumor-bearing mice.MethodsMMT method was used to estimate cell toxic action of Shanxian Granule.After the animal model of mouse bearing tumors was established, we observed their life spans,NK cell activity, tansformation efficiency of

3、lymhocytic cell and the content of TNF-.ResultsShanxian Granule could significantly increase the NK cell activity and transformation efficiency of lymphocytic cell, elevate the contents of TNF-, IL-2 in tumorbearing mice.ConclusionShanxian Granule can enhance the activity of immune system in tumor-b

4、earing mice.Key words：Shanxian   Granule;  Tumor;  Immunity     正氣虧虛,血行淤滯是腫瘤發(fā)生與轉(zhuǎn)移的基本病機(jī)。癌癥患者常常免疫功能低下，加之放、化療對(duì)全身免疫系統(tǒng)的損傷，患者血中吞噬細(xì)胞的活性與吞噬殺傷作用均有不同程度降低，此即中醫(yī)所說(shuō)的正氣虧虛。由于免疫功能低下，免疫細(xì)胞難以識(shí)別和殺滅存在于血液循環(huán)中的具有轉(zhuǎn)移能力的癌細(xì)胞而使癌細(xì)胞擴(kuò)散，故氣虛血淤是腫瘤發(fā)生與轉(zhuǎn)移的主要病機(jī)，這也是癌癥晚期患者最常見(jiàn)的證型。筆者總結(jié)多年的臨床經(jīng)驗(yàn),潛心研究,研制出補(bǔ)氣活血之山仙

5、顆粒,臨床觀(guān)察有防止腫瘤復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移作用。經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)1，2,山仙顆粒能分別從提高紅細(xì)胞免疫、抑制IV型膠原酶表達(dá)、提高吞噬細(xì)胞功能、抑制腫瘤血管生成等方面對(duì)抗癌細(xì)胞侵襲與轉(zhuǎn)移。為深入探討其抗癌轉(zhuǎn)移機(jī)理,本實(shí)驗(yàn)對(duì)山仙顆粒對(duì)荷瘤小鼠腫瘤免疫系統(tǒng)的影響做了進(jìn)一步研究?，F(xiàn)報(bào)道如下。1  器材與方法1.1  材料1.2  方法取U14瘤株生長(zhǎng)最佳狀態(tài)的傳代細(xì)胞，按細(xì)胞數(shù)1×106/ml，0.2 ml/小鼠腹腔注射，24 h后隨機(jī)分組。山仙顆粒組0.4  ml/d灌胃，1次/d，連續(xù)7 d；生理鹽水（NS）組用無(wú)菌NS，途徑、劑量、方法、次數(shù)同山仙顆粒組

6、；環(huán)磷酰胺（CY）組用環(huán)磷酰胺0.4 mg/ml，途徑、劑量、方法、次數(shù)同山仙顆粒組。于接種瘤株后第12天各組小鼠分別摘除眼球取血，之后再脫頸處死取脾進(jìn)行下一次實(shí)驗(yàn)。1.3  統(tǒng)計(jì)方法兩兩比較，采用方差分析中的SND-q檢驗(yàn)，結(jié)果以±s表示。論文參考網(wǎng)2  結(jié)果2.1  山仙顆粒腹水型荷瘤小鼠，NK細(xì)胞活性及淋巴細(xì)胞增殖率的影響結(jié)果見(jiàn)表1。    結(jié)果表明山仙顆粒組荷瘤小鼠NK細(xì)胞活性及淋巴細(xì)胞增殖率顯著高于NS組及CY組(P<0.01),CY組NK細(xì)胞活性及淋巴細(xì)胞增殖率顯著低于NS組（P<0.05）。2.2&

7、#160; 山仙顆粒對(duì)腹水型荷瘤小鼠血清中TNF-，IL-2含量的影響結(jié)果見(jiàn)表2。表1  山仙顆粒腹水型荷瘤小鼠，NK細(xì)胞活性及淋巴細(xì)胞增殖率的影響（略）表2  山仙顆粒腹水型荷瘤小鼠血清中TNF-，IL-2含量的影響（略）結(jié)果表明山仙顆粒組荷瘤小鼠血清中TNF-，IL-2含量顯著高于NS組及CY組，CY組小鼠血清中TNF-，IL-2含量顯著低于NS組（P<0.05）。3  討論    腫瘤是嚴(yán)重危害人類(lèi)生命的疾病之一，其死亡率居高不下，為了與腫瘤作斗爭(zhēng)，各國(guó)科學(xué)家進(jìn)行了長(zhǎng)期不懈的努力。近年來(lái)，中藥抗腫瘤的研究日益得到人們的重視

8、，并取得了一定的成果。山仙顆粒作為有效的抗癌制劑，已被廣泛應(yīng)用于臨床，本實(shí)驗(yàn)探討其對(duì)荷瘤小鼠免疫系統(tǒng)的影響。3.1  實(shí)驗(yàn)表明山仙顆粒對(duì)荷瘤小鼠NK細(xì)胞活性有明顯的增強(qiáng)作用。NK細(xì)胞在機(jī)體防御及腫瘤監(jiān)視中起重要作用。NK細(xì)胞對(duì)敏感的靶細(xì)胞的殺傷效應(yīng)不受靶細(xì)胞是否表達(dá)MHC的影響。當(dāng)予以生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑全身或局部治療或在機(jī)體受病毒感染期間，實(shí)體組織中NK細(xì)胞明顯增加，對(duì)監(jiān)視體內(nèi)微環(huán)境及干涉腫瘤的發(fā)展起到重要作用，故可以認(rèn)為山仙顆粒抗腫瘤作用與激活NK細(xì)胞有密切關(guān)系。許多因子如IFN-，IL-2等均可激活NK細(xì)胞，殺傷腫瘤靶細(xì)胞，活化的NK細(xì)胞可釋放細(xì)胞因子TNF-，IL-2，IFN-等，

9、呈正向調(diào)節(jié)作用，調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的功能，擴(kuò)大了抗腫瘤作用。3.2  實(shí)驗(yàn)表明山仙顆粒能夠促進(jìn)荷瘤小鼠脾淋巴細(xì)胞對(duì)COnA的增殖反應(yīng)，說(shuō)明山仙顆粒能增強(qiáng)細(xì)胞免疫，而環(huán)磷酰胺抑制脾細(xì)胞對(duì)ConA反應(yīng)，山仙顆粒能夠拮抗免疫抑制藥所致的免疫抑制。3.3  TNF-是由細(xì)菌脂多糖活化的單核巨噬細(xì)胞釋放的細(xì)胞因子，與腫瘤細(xì)胞膜上的TNF-受體結(jié)合，特異性地殺傷腫瘤細(xì)胞，對(duì)機(jī)體的正常細(xì)胞無(wú)害，可致腫瘤細(xì)胞壞死。此外，TNF-還在體外與IFN-協(xié)同作用，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。本實(shí)驗(yàn)表明山仙顆粒實(shí)驗(yàn)小鼠血清中TNF-的含量顯著高于NS組及CY組，說(shuō)明山仙顆粒能夠促進(jìn)荷瘤小鼠單核巨噬細(xì)胞分泌TNF-，

10、從而提高荷瘤小鼠特異性免疫功能，達(dá)到抗腫瘤作用。3.4   IL-2是機(jī)體CD4+和CD8+細(xì)胞分泌的一種小分子物質(zhì)，它在機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫監(jiān)控中起著很重要的作用。首先，它可以誘導(dǎo)CTL，NK和LAK等多種殺傷性細(xì)胞的分化和效應(yīng)功能，并能誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞產(chǎn)生IFN-C，TNF-A等細(xì)胞因子；其次IL-2能促進(jìn)細(xì)胞增殖、分化和抗體分泌。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，活化的B細(xì)胞有IL2-R,IL-2對(duì)B細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用，除通過(guò)刺激T細(xì)胞分泌B細(xì)胞增殖和分化因子外，還可能有直接調(diào)控作用，從而調(diào)節(jié)體液免疫；第三，IL-2可促進(jìn)吞噬細(xì)胞通過(guò)ADCC機(jī)制殺傷腫瘤。此外，IL-2在體外可誘導(dǎo)腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞成為L(zhǎng)AK-C。目前，LAK/IL-2對(duì)腎母細(xì)胞癌、黑色素瘤、非何杰金氏淋巴瘤、結(jié)腸直腸癌有一定療效3。本實(shí)驗(yàn)表明山仙顆粒組小鼠血清中IL-2的含量顯著高于NS組及CY組，說(shuō)明山仙顆粒能夠提高荷瘤小鼠血清中IL-2的含量，從而提高荷瘤小鼠免疫功能，達(dá)到抗腫瘤作用。    綜上所述，本實(shí)驗(yàn)說(shuō)明山仙顆粒能夠提高荷瘤小鼠的NK細(xì)胞活性，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率，血清中TNF-和IL-2的含量，以加強(qiáng)機(jī)體的免疫系統(tǒng)的功能，提高機(jī)體的抗腫瘤能力?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】  1 王希勝，陳光偉，李仁廷，等.山仙顆?？鼓[瘤的臨床與實(shí)