實(shí)驗(yàn)室常用的細(xì)菌作用及其選擇

1、第一篇：JM109，DH5a，BL21這些感受態(tài)有何區(qū)別1：DH5a菌株DH5a是一種常用于質(zhì)粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)化時(shí)，可與載體編碼的半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)互補(bǔ)。可用于藍(lán)白斑篩選鑒別重組菌株。基因型：F-，80dlacZM15，(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3) 菌株該菌株用于高效表達(dá)克隆于含有噬菌體T7啟動(dòng)子的表達(dá)載體（如pET系列）的基因。T7噬菌體RNA聚合酶位于 噬菌體DE3區(qū)，該區(qū)整合于BL2

2、1的染色體上。該菌適合表達(dá)非毒性蛋白?；蛐停篎-，ompT， hsdS（rBB-mB），gal， dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS菌株該菌株含有質(zhì)粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表達(dá)T7溶菌酶的基因，能夠降低目的基因的背景表達(dá)水平，但不干擾目的蛋白的表達(dá)。該菌適合表達(dá)毒性蛋白和非毒性蛋白?；蛐停篎-，ompT hsdS（rBB-mB），gal， dcm（DE3，pLysS ，Camr4：JM109菌株該菌株在使用pUC系列質(zhì)粒載體進(jìn)行DNA轉(zhuǎn)化或用M13 phage載體進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí)，由于載體DNA產(chǎn)生的LacZa多肽和JM09編碼的LacZM15進(jìn)行互補(bǔ)，從

3、而顯示半乳糖苷酶活性，由此很容易鑒別重組體菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi1，hsdR17，supE44，relA1，（lacproAB）/FtraD36，proAB+，lacIq，lacZM155：TOP10菌株該菌株適用于高效的DNA克隆和質(zhì)粒擴(kuò)增，能保證高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定遺傳。基因型：F- ，mcrA(mrr-hsd RMS-mcrBC)， 80 ，lacZM15，lac74， recA1 ，ara139(ara-leu)7697， galU ，galK ，rps， (Strr) endA1， nupG6：HB101菌株該菌株遺傳性能穩(wěn)定，使用方便，適用于各種基因重

4、組實(shí)驗(yàn)基因型：supE44，hsdS20（rB-mB），recA13，ara14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-1第二篇：JM110或 SCS110大多數(shù)大腸桿菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基，后者在CCA/TGC序列的第一個(gè)胞嘧啶 C-5位置上引入甲基。 常用的菌株都會產(chǎn)生dam,dcm，從而受到甲基化的影響.部分限制性內(nèi)切酶對甲基化的DNA不能切割，如FbaI和MboI等，一般生物公司提供的內(nèi)切酶說明中均有說明。大多數(shù)酶切位點(diǎn)的甲基化不影響切割，而有些會影響，如Xba

5、I, BclI等。而且甲基化只發(fā)生在特定序列，以XbaI為例，只有在位點(diǎn)序列旁出現(xiàn)GA或TC，該XbaI位才會被甲基化。而要解除這種限制修飾作用通常有兩種方法：（1）選用上述酶的同功酶，如Sau3AI，DNA識別切割位點(diǎn)與MboI相同；但不受甲基化影響；（2）利用甲基化酶缺失的受體細(xì)胞進(jìn)行DNA的制備，如E.coli JM110和鏈霉菌等，前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出，而后者細(xì)胞內(nèi)本就沒有甲基化酶，從這些細(xì)胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。E.coli JM110要排除dam,dcm甲基化的影響，需要用特定的dam-,dcm-的菌株，如JM110如果由JM110或 SCS110等甲基化缺

6、失的菌株產(chǎn)生的質(zhì)粒，則不會被甲基化.第三篇：各種感受態(tài)細(xì)胞的區(qū)別 用途 特征Xl1-Blue菌株基因型：endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 FTn10 proAB+ lacIq (lacZ)M15 hsdR17(rK- mK+)。特點(diǎn)：具有卡那抗性、四環(huán)素抗性和氯霉素抗性。用途：分子克隆和質(zhì)粒提取。BL21(DE3)菌株基因型：F ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) (DE3 lacI lacUV5-T7 gene 1 ind1 sam7 nin5)。特點(diǎn)：該菌株用于以T7 RNA聚合酶為表達(dá)系統(tǒng)的高效外源

7、基因的蛋白表達(dá)宿主。T7噬菌體RNA聚合酶基因的表達(dá)受控于噬菌體DE3區(qū)的lacUV5啟動(dòng)子，該區(qū)整合于BL21的染色體上。該菌適合于非毒性蛋白的表達(dá)。用途：蛋白質(zhì)表達(dá)。BL21(DE3)ply菌株基因型：F- ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) (DE3) pLysS(cmR)。特點(diǎn)：該菌株帶有pLysS，具有氯霉素抗性。此質(zhì)粒還有表達(dá)T7溶菌酶的基因，T7溶菌酶能夠降低目的基因的背景表達(dá)水平，但不干擾IPTG誘導(dǎo)的表達(dá)。 適合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表達(dá)。用途：蛋白質(zhì)表達(dá)DH5菌株基因型：F- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyr

8、A96 deoR nupG 80dlacZM15 (lacZYA-argF)U169, hsdR17(rK-, 特點(diǎn)：一種常用于質(zhì)粒克隆的菌株。其80dlacZM15基因的表達(dá)產(chǎn)物與pUC載體編碼的-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)互補(bǔ)，可用于藍(lán)白斑篩選。recA1和 endA1的突變有利于克隆DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。用途：分子克隆、質(zhì)粒提取和蛋白質(zhì)表達(dá)。JM109菌株基因型：endA1 glnV44 thi-1 relA1 gyrA96 recA1 mcrB+ (lac-proA e14- F traD36 proAB+ lacIq lacZM15hsdR17(rK-mK+)。特點(diǎn)：部分抗

9、性缺陷，適合重復(fù)基因表達(dá), 可用于M13克隆序列測定和藍(lán)白斑篩選。用途：分子克隆、質(zhì)粒提取和蛋白質(zhì)表達(dá)。第四篇：E.coli Electro-Cells E.coli Electro-Cell JM109 制品名 TaKaRa Code 包裝量 價(jià)格(人民幣元) E.coli Electro-Cell JM109 D9022 1 Set (50 l×10支) 300 Genotype E.coli JM109 recA1, endA1, gyrA96, thi-1, hsdR17, supE44, relA1, (lac-proA/F'traD36, proAB+, lac

10、Iq, lacZ M15 細(xì)胞濃度 12×1010 Bacteria/ml 保存 -80 制品說明 用高電壓脈沖電流瞬間擊穿大腸桿菌，從而導(dǎo)致DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌內(nèi)的轉(zhuǎn)化方法稱為電穿孔法。電穿孔法是各種轉(zhuǎn)化方法中效率最佳的方法之一，比Ca2+處理的感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率高，在轉(zhuǎn)化少量DNA時(shí)，特別能發(fā)揮其特有的威力。 TaKaRa使用獨(dú)自開發(fā)的菌體培養(yǎng)法，制作出了效果極佳的E.coli Electro-Cell JM109。 細(xì)胞種類 -互補(bǔ)性選擇宿主E.coli JM109 E.coli JM109在使用pUC系列質(zhì)粒載體進(jìn)行DNA轉(zhuǎn)化或用M13 phage載體進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí), 由于載體D

11、NA產(chǎn)生的LacZ多肽和JM109 F'編碼的lacZM15的結(jié)合，顯示-半乳糖苷酶活性 (-互補(bǔ)性)。利用這一特性，可以很容易鑒別重組體菌株。因?yàn)榫哂蠪'質(zhì)粒，除可用于制作基因庫、進(jìn)行亞克隆等之外，也可作為M13載體DNA的宿主，調(diào)制單鏈DNA。 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 使用10 pg的質(zhì)粒DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)化時(shí)： 50 l E.coli JM109 Electro-Cell/10 pg pUC19 plasmid轉(zhuǎn)化時(shí)產(chǎn)生的菌落數(shù) >1×109 transformants/1 g pUC19 plasmid F'質(zhì)粒的穩(wěn)定性檢測 對E.coli JM109使用pUC19

12、 DNA進(jìn)行電穿孔法轉(zhuǎn)化后，在含有100 g/ml的Ampicillin、0.2 mM的IPTG, 40 g/ml的X-Gal的L-瓊脂平板培養(yǎng)基上，產(chǎn)生的白色菌落在1%以下。 50 l的E.coli JM109 Electro-Cell在含有100 g/ml的Ampicillin L-瓊脂平板培養(yǎng)基上不產(chǎn)生菌落。 - BL21（DE3）pLysS細(xì)菌菌株 BL21（DE3）pLysS細(xì)菌菌株可以表達(dá)T7控制并核糖體結(jié)合位點(diǎn)的高效蛋白表達(dá)。BL21（DE3）pLysS對DE3（1）是溶源性的。DE3含有T7噬菌體基因I，編碼的T7 RNA聚合酶受lac UV5啟動(dòng)子的控制。BL21（DE3）p

13、LysS含有pLysS質(zhì)粒，他攜帶編碼T7溶菌酶基因。在T7啟動(dòng)子控制下，T7溶菌酶降低靶基因的背景表達(dá)但并不干擾由IPTG誘導(dǎo)的表達(dá)水平。 包裝： P9811 500l 第五篇：JM109，DH5a，BL21感受態(tài)有何區(qū)別 1：DH5a菌株DH5a是一種常用于質(zhì)?？寺〉木?。E.coli DH5a在使用pUC系列質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)化時(shí)，可與載體編碼的半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)互補(bǔ)?？捎糜谒{(lán)白斑篩選鑒別重組菌株?；蛐停篎-，80dlacZM15，(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，-，thi-1，gyrA96，rel

14、A12：BL21(DE3) 菌株該菌株用于高效表達(dá)克隆于含有噬菌體T7啟動(dòng)子的表達(dá)載體（如pET系列）的基因。T7噬菌體RNA聚合酶位于 噬菌體DE3區(qū)，該區(qū)整合于BL21的染色體上。該菌適合表達(dá)非毒性蛋白?；蛐停篎-，ompT， hsdS（rBB-mB），gal， dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS菌株該菌株含有質(zhì)粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表達(dá)T7溶菌酶的基因，能夠降低目的基因的背景表達(dá)水平，但不干擾目的蛋白的表達(dá)。該菌適合表達(dá)毒性蛋白和非毒性蛋白?；蛐停篎-，ompT hsdS（rBB-mB），gal， dcm（DE3，pLysS ，Camr4：J

15、M109菌株該菌株在使用pUC系列質(zhì)粒載體進(jìn)行DNA轉(zhuǎn)化或用M13 phage載體進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí)，由于載體DNA產(chǎn)生的LacZa多肽和JM09編碼的LacZM15進(jìn)行互補(bǔ)，從而顯示半乳糖苷酶活性，由此很容易鑒別重組體菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi1，hsdR17，supE44，relA1，（lacproAB）/FtraD36，proAB+，lacIq，lacZM15 5：TOP10菌株該菌株適用于高效的DNA克隆和質(zhì)粒擴(kuò)增，能保證高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定遺傳?；蛐停篎- ，mcrA(mrr-hsd RMS-mcrBC)， 80 ，lacZM15，lac74， recA1 ，ar

16、a139(ara-leu)7697， galU ，galK ，rps， (Strr) endA1， nupG6：HB101菌株該菌株遺傳性能穩(wěn)定，使用方便，適用于各種基因重組實(shí)驗(yàn)基因型：supE44，hsdS20（rB-mB），recA13，ara14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-1M110或 SCS110大多數(shù)大腸桿菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基，后者在CCA/TGC序列的第一個(gè)胞嘧啶 C-5位置上引入甲基。 常用的菌株都會產(chǎn)生dam,dcm，從而受到甲基化的影響.

17、部分限制性內(nèi)切酶對甲基化的DNA不能切割，如FbaI和MboI等，一般生物公司提供的內(nèi)切酶說明中均有說明。大多數(shù)酶切位點(diǎn)的甲基化不影響切割，而有些會影響，如XbaI, BclI等。而且甲基化只發(fā)生在特定序列，以XbaI為例，只有在位點(diǎn)序列旁出現(xiàn)GA或TC，該XbaI位才會被甲基化。而要解除這種限制修飾作用通常有兩種方法：（1）選用上述酶的同功酶，如Sau3AI，DNA識別切割位點(diǎn)與MboI相同；但不受甲基化影響；（2）利用甲基化酶缺失的受體細(xì)胞進(jìn)行DNA的制備，如E.coli JM110和鏈霉菌等，前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出，而后者細(xì)胞內(nèi)本就沒有甲基化酶，從這些細(xì)胞中抽提的 DNA就能被

18、上述酶切割。E.coli JM110要排除dam,dcm甲基化的影響，需要用特定的dam-,dcm-的菌株，如JM110如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株產(chǎn)生的質(zhì)粒，則不會被甲基化=實(shí)驗(yàn)室的一般大腸桿菌擁有4288條基因，每條基因的長度約為950bp,基因間的平均間隔為118bp（基因）。E.coli基因組中還包含有許多插入序列，如-噬菌體片段和一些其他特殊組份的片段，這些插入的片段都是由基因的水平轉(zhuǎn)移和基因重組而形成的，由此表明了基因組具有它的可塑造性。利用大腸桿菌基因組的這種特性對其進(jìn)行改造，使其中的某些基因發(fā)生突變或缺失，從而給大腸桿菌帶來可以觀察到的變化，這種能觀察到的

19、特征叫做大腸桿菌的表現(xiàn)型 （Phenotype），把引起這種變化的基因構(gòu)成叫做大腸桿菌的基因型（Genotype）。具有不同基因型的菌株表現(xiàn)出不同的特性。分子克隆中常用的大腸桿菌及其遺傳標(biāo)記按Demerec等1966年提出的命名原則，采用的菌株所有的基因都假定處于野生型狀態(tài)，除非在基因型上另外注明。大腸桿菌基因型的表示方法（Demerec, et, al. 1966）：一、一般規(guī)則：1、根據(jù)基因產(chǎn)物或其作用產(chǎn)物的英文名稱的第一個(gè)字母縮寫成 3個(gè)小寫斜體字母來表示。例如：DNA Adenine Methylasedam。2、不同的基因座，其中任何一個(gè)突變所產(chǎn)生的表型變化可能相同，其表示方法是在

20、3個(gè)小寫斜體字母后加上一個(gè)斜體大寫字母來表示區(qū)別。例如：RecombinationrecA、recB、recC。3、突變位點(diǎn)應(yīng)通過在突變基因符號后加不同數(shù)字表示。如 supE44（sup基因座E的44位突變）。如果不知道幾個(gè)等位基因中哪一 /幾個(gè)發(fā)生了功能性突變，則用連字符“ -”代替大寫字母，如 trp-31。4、細(xì)菌的基因型中應(yīng)該包含關(guān)于其攜帶的質(zhì)粒或附加體的的信息。這些符號包括菌株攜帶的質(zhì)粒或附加體、質(zhì)?；蚋郊芋w上的突變基因座和突變位點(diǎn)。其基因符號應(yīng)與基因座的表示符號明顯區(qū)別，符號的第一個(gè)字母大寫、不斜體并位于括號內(nèi)；質(zhì)?；蚋郊芋w上的突變基因座和突變位點(diǎn)的基因符號的表示方法與染色體上突變

21、基因座、突變位點(diǎn)的符號相同。5、對于攜帶附加體的菌株的完整基因型描述應(yīng)包括附加體的狀態(tài)（游離或整合）。以 F因子為例，F(xiàn)-:F因子缺失； F+:自主性 F因子，不攜帶任何遺傳可識別染色體片段； F':攜帶有遺傳可識別細(xì)菌染色體片段的自主性 F因子；Hfr:整合到染色體上的 F因子（ high frequency of recombination）。當(dāng)這些質(zhì)?；蚴删w片段變異或缺失時(shí)，用（）“或 ”/“等以區(qū)別。例如：/F' traD36、proAB、lac I q、lacZ. M156、某個(gè)基因或某個(gè)領(lǐng)域缺失時(shí)，在其基因型前面加上“ ”表示。例如： lac-proAB基因缺失時(shí)

22、它的基因型表示為 （lac-proAB）。7、由于某種基因的變異導(dǎo)致大腸桿菌可以明顯觀察到特征變化，有時(shí)也用其表現(xiàn)型代替基因型進(jìn)行表示。例如：某些抗藥性的獲得或喪失，用如下方式表示： Streptomycin抗性Str +或 Str r，Ampicillin敏感性 Amp-。（第一個(gè)字母要大寫 ，“+”或“r”表示有抗性 ，“-”表示無抗性或敏感）。8、根據(jù)某些特異性蛋白的變異及其導(dǎo)致的結(jié)果變化進(jìn)行表示。例如：TH2菌株上有一種基因型表示如下：hsdS20 （rB-、mB-），其中 S20代表特異性識別蛋白發(fā)生變異，（）中的 rB-、mB-表示由于 S20的變異而導(dǎo)致 B株來源的 hsdR和

23、hsdM的功能缺失。9、蛋白質(zhì)的名稱與對應(yīng)的基因或等位基因相同，但不用斜體，且首字母大寫，如， UvrA、 UvrB。三、主要的基因型說明1、基因重組相關(guān)的基因型recA （Recombination）功能：recA基因表達(dá) ATP依賴型 DNA重組酶，它在-噬菌體與基因組 DNA的溶原重組時(shí)起作用，同時(shí)具有對 DNA放射性損傷的修復(fù)功能。由 recA基因的變異所產(chǎn)生的基因型使同源或異源 DNA的重組不能進(jìn)行，保持插入 DNA的穩(wěn)定性，對 DNA的轉(zhuǎn)化有利。一個(gè)菌株的基因型如果是 recA,則說明此菌株的表現(xiàn)型是重組缺陷的。recB （Recombination）功能：recB基因表達(dá) ATP

24、依賴型 DNase和核酸外切酶V的一個(gè)亞基，對recA的DNA重組酶起輔助和促進(jìn)作用。DNase催化雙鏈DNA的解旋和解鏈，核酸外切酶V催化單鏈DNA的裂解，在DNA的重組和損傷修復(fù)中發(fā)揮重要作用。recB基因的變異導(dǎo)致其DNA重組和修復(fù)功能喪失，保證了外源DNA的穩(wěn)定，有利于DNA轉(zhuǎn)化。recC （Recombination）功能：recC基因表達(dá)四種酶，即核酸外切酶V,ATP依賴型的核酸內(nèi)切酶，解旋酶及ATP酶，它們和recA, recB所表達(dá)的酶相互協(xié)調(diào)作用，在DNA的重組及放射性損傷的修復(fù)中發(fā)揮作用。recC基因的變異導(dǎo)致DNA重組功能缺失，保證外源DNA的穩(wěn)定性。2、甲基化相關(guān)的基因

25、型dam （DNA adenine methylase）功能：dam基因表達(dá)DNA腺嘌呤甲基化酶，它能催化特異序列GATC中A的甲基化，保證DNA免受限制性核酸內(nèi)切酶Mbo I的切斷，同時(shí)在 DNA復(fù)制時(shí)也起一定的輔助作用。dam基因的變異導(dǎo)致腺嘌呤（A）甲基化酶活性的缺失，使腺嘌呤（A）不被甲基化，易于獲得非甲基化質(zhì)粒。dcm （DNA cytosine methylase）功能：dcm基因表達(dá)DNA胞嘧啶甲基化酶，它能特異性識別DNA雙鏈上的CCWGG序列，并使第二個(gè)C甲基化，即CmCWGG,避免 DNA受到相關(guān)限制酶的切斷。dcm基因的導(dǎo)致胞嘧啶甲基化酶活性缺失，使外源DNA上的C不被甲

26、基化，易于獲得非甲基化質(zhì)粒。mcrA （Modified cytosine restriction protein a）功能：mcrA基因表達(dá)大腸桿菌防御體系中起重要作用的mcrA酶，這種酶能特異性地作用于外來DNA上的被甲基化的胞嘧啶序列，即 C5mCGG特異序列，使之分解，對大腸桿菌本身起保護(hù)作用。mcrA基因的變異，導(dǎo)致上述功能缺失，對外來DNA中被甲基化的胞嘧啶特異序（C5mCGG）失去作用，有利于限制酶及甲基化酶的克隆體的穩(wěn)定。mcrB, C （Methyl cytosine-specific restriction）功能：mcrB, C基因表達(dá)兩種特異性蛋白，即mcrB蛋白和 mc

27、rC蛋白，它們在大腸桿菌的防御系統(tǒng)中起重要作用。一般情況下，只有這兩種蛋白同時(shí)存在時(shí)才表現(xiàn)出活性， mcrC具有識別和調(diào)節(jié)功能，它能特異性的結(jié)合到外源 DNA上被甲基化的胞嘧啶（C）的特異序列 G5mC上，然后由 mcrB蛋白切斷（mcrB蛋白是特異性切斷外來 DNA中 G5mC序列的限制性核酸內(nèi)切酶），防御外來 DNA的侵入。mcrB, C基因的變異，使上述的對外來 DNA的防御作用缺失，對質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化有利。mrr （Methylation requiring restriction）功能：mrr基因是大腸桿菌細(xì)胞防御系統(tǒng)中重要的基因之一，它能嚴(yán)格限制被甲基化的外源DNA的介入。另外，它對限制

28、酶Acc，CviR ，Hinf I（Hha ），Nla ，Pst 以及 N6-腺嘌呤甲基化酶和C5-胞嘧啶甲基化酶活性有明顯的抑制作用。mrr欠損株（基因型）可用于含有N6-mA和C5-mC的DNA的轉(zhuǎn)化。另外，含有此基因型的菌株也可用于限制酶和甲基化酶的克隆體。hsdM （Host specificitive defective）Map position: 99 min功能：hsdM基因所表達(dá)的DNA甲基化酶是 I型限制酶復(fù)合體（具有對 DNA切斷和修補(bǔ)的雙重功能）的一部分，它能使DNA雙鏈上的AA （雙腺嘌呤） 甲基化，保護(hù)宿主DNA不被分解。hsdM的變異使細(xì)胞內(nèi)的DNA不被甲基化，易于

29、獲得非甲基化質(zhì)粒。3、點(diǎn)突變相關(guān)的基因型mutS （Mutator）功能：mutS基因表達(dá)的蛋白具有識別DNA上錯(cuò)配序列的功能，并能修復(fù)其錯(cuò)配序列（GCAT），防止基因突變。mutS基因的變異導(dǎo)致DNA的錯(cuò)配序列不能得到修復(fù)，容易發(fā)生基因突變，這對于利用點(diǎn)突變進(jìn)行基因改造是有利的。mutT（Mutator）功能：野生大腸桿菌在進(jìn)行DNA復(fù)制時(shí)，細(xì)胞中的8-OXO-dGTP插入模板DNA中的DA位點(diǎn)的效率幾乎與插入DC位點(diǎn)的效率相同，導(dǎo)致 A-T轉(zhuǎn)換成 G-C,使DNA產(chǎn)生變異。而mutT蛋白就是特異性地降解8-OXO-dGTP成為單磷酸鹽（8-OXO-dGMP），這種單磷酸鹽狀態(tài)的G（鳥嘌呤） 不能作為底物進(jìn)行 DNA合成，從而防止了上述的基因突變。 mutT基因的變異使細(xì)胞中8-OXO-dGTP濃度增高，AC的突變幾率增大，有利于利用點(diǎn)突變進(jìn)行基因改造。dut （dUTPase）功能：dut基因表達(dá)脫氧尿嘧啶三磷酸核苷酸水解酶（dUTPase），它能水解dUTP成為dUMP,使細(xì)胞體內(nèi)dUTP的濃度維持在較低的水平，尿嘧啶（U）就不易摻入到DNA中，避免了基因發(fā)生 AU的突變。dut基因發(fā)生突變使dUTPase活性缺失，導(dǎo)致dUTP濃度升高，堿基U（尿嘧啶）極易摻入到DNA中，使其發(fā)生AU的基因突變，有利于利用點(diǎn)突變進(jìn)行基因改造。ung （Uracil