鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵

1、鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵(索朗羅布40507014 suollb)一 實驗目的1.學習確定實驗條件方法，掌握鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵的方法及原理。721型分光光度計的正確使用方法，并了解此儀器的主要構造。3.用分光光度法測定試樣中的微量鐵，目前一般采用鄰二氮菲法。二 基本原理1紫外-可見吸光光譜法： 紫外-可見吸光光譜法又稱紫外-可見分光光度法，是以溶液中物質分子對光的選擇性吸收為基礎而建立起來的一類分析方法。 原理：其定量分析的依據(jù)是朗伯-比爾定律（ = bc 其中：A為吸光度；I0和I分別為入射光強度和透射光強度；為摩爾吸光系數(shù)，b為物質吸收層的厚度，c為物質的濃度。）在可見光區(qū)分

2、光光度法測量中。通常是將被測物質于顯色劑反應，使之生成有色物質，然后測其吸光度。進而求得被測物質的含量。因此，顯色反應的完全程度和吸光度的測定條件都會影響到測定結果的準確性。為了使測定有較高的靈敏度和準確度，必須選擇適宜的顯色反應條件和儀器測量條件。通常所研究的顯色反應條件有顯色溫度和時間，顯色劑用量，顯色液酸度，干擾物質的影響及消除等。通常所研究的測量條件主要是測量波長和參比溶液的選擇。條件實驗的一般步驟為改變其中一個因素，暫時固定其他因素，顯色后測量相應溶液的吸光度，通過吸光度-pH曲線確定顯色反應的適宜酸度范圍。其他因素的適宜值，也可按這一方式分別確定。本實驗以鄰二氮菲為顯色劑，選擇測定

3、微量鐵的適宜顯色條件和測量條件，并用于工業(yè)鹽酸中全鐵含量的測定。鄰二氮菲是光度法測定鐵的優(yōu)良試劑，在PH 29范圍內(nèi)（一般56），鄰二氮菲與二價鐵生成穩(wěn)定的紅色配合物，用鹽酸羥胺將三價鐵還原成二價，用鄰二氮菲作顯色劑，可測定試樣中總鐵含量。本實驗選擇性高，相當于鐵含量40倍的Sn（） Al（） Ca （） Mg （） Zn（） Si （） ,20倍的Cr （） V（） P（） ;5倍的Co () Ni() Cu() 不干擾測定。三儀器及試劑721型分光光度計；1cm吸收池；10mL吸量管；2mL吸量管；5 mL吸量管；50mL比色管。×10-3mol·L-1鐵標準溶液，10

4、0ug·mL-1鐵標準溶液，0.15%鄰二氮菲水溶液，10%鹽酸羥胺溶液（新鮮配制），1 mol·L-1乙酸鈉溶液，1 mol·L-1氫氧化鈉溶液，6 mol·L-1鹽酸溶液，工業(yè)鹽酸（試樣）。四實驗步驟（1）吸收曲線的繪制和測量波長的選擇×10-3mol·L-1鐵標準溶液，注入50mL比色管中，加入1.00mL 10%鹽酸羥胺溶液，搖勻，加入2.00 mL 0.15%鄰二氮菲水溶液，5.0 mL乙酸鈉溶液，以水稀釋至刻線。在光度計上用1cm比色皿，采用試劑溶液為參比溶液，在440560nm間，每隔10nm（最大吸收附近490520n

5、m，每隔2nm）測定一次吸光度，以波長為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制吸收曲線，選擇測量的最適宜波長。（2）顯色劑用量選擇×10-3mol·L-1鐵標準溶液和1.00mL 10%鹽酸羥胺溶液，搖勻。分別加入0.10，0.50，1.00，2.00，3.00及4.00mL 0.15%鄰二氮菲水溶液，然后加入5.0 mL乙酸鈉溶液，以水稀釋至刻線，搖勻，在光度計上用1cm比色皿，在選定的波長下，以試劑空白為參比，測定吸光度。以鄰二氮菲體積為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制吸光度-試劑用量曲線，從而確定最佳顯色劑用量。（3）工業(yè)鹽酸中鐵含量的測定a.標準曲線的制作 在六支50mL 比色管

6、中，分別加入0.00，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00 mL 100ug·mL-1鐵標準溶液，再加入1.00 mL 10%鹽酸羥胺溶液，2.00 mL 0.15%鄰二氮菲水溶液和5.0 mL乙酸鈉溶液，以水稀釋至刻線，搖勻，在508nm處，用1cm比色皿，以空白試劑為參比，測定吸光度。b.試樣測定 準確吸取工業(yè)鹽酸三份，分別為1.0，1.5和2.0mL，按標準曲線的操作步驟， 測定其吸光度。五數(shù)據(jù)處理（1）吸收曲線繪制和測量波長選擇的實驗數(shù)據(jù)：波長（nm）440450460470480490492透光率(T)波長（nm）494496498500502504506透光率(T)波長（nm）508510520530540550560透光率(T)(2)顯色劑用量：顯色劑用量（mL）1234吸光度由圖表可觀察到最佳顯色劑用量為2mL,最適宜測量波長為520nm(3)工業(yè)鹽酸中鐵含量的測定：標準曲線的制作：鐵標樣用量（mL）01-1）02吸光度0鹽酸試樣的測定試樣用量（mL）吸光度-1）1700.326620.132根據(jù)標準曲線，得C1= C3= 平均濃度= -1） RSD=2.30% 六思考題（1）用鄰二氮菲法測定鐵時，為什么在測定前需要加入還原劑鹽酸羥胺？答：因為在通常情況下，鐵以三價存在，而只有二價鐵才能和鄰二