醫(yī)用臭氧對大鼠骨骼肌病理學(xué)的影響英文摘要

1、醫(yī)用臭氧對大鼠骨骼肌病理學(xué)的影響英文摘要：Impact of Different Concertrations of Ozone Injection on Pathological Changes of Rat SkeletaMuscleAbstract Objective To evaluated the pathological changes of skeletalmuscle in normalrabbit by different concentrations of ozone injection. Methods30 wistar rars were randomlydivided

2、 into 5 groups (n=6). group Iozone10,group Uozone30, group 山ozone50, group IVozone80,group control. In group I, n, 山 and V, 1ml of ozone 10 卩 g/ml、30 卩 g/ml、50 卩 g/ml、80 卩 g/ml was injected into right ectogluteus respectively, and in group V, punctura at the same pointwithout any injection. Biopsy w

3、as performed after 10min, 30min and 3 weeks with thelightmicroscope , selecting the injection area. Results Compared to the control, light microscope of group n , 山 and V showed myocyte swelling, myocyte ' s bouncary became unclear, transverse striation became disorder, myocyte necrosis, dissolv

4、e and vacuolus degeneration partly after 10min both in two groups. Inflammation cells infiltrated in muscle interspace and blood vesselbased on myocyte necrosis and dissolve in the injection area after 30min. Myocyte atrophy obviously, fibrous tissue accrementition ponderosus, hyalinization partly c

5、ould be seen after 3 weeks. There were no abnormal pathological changes in group I and V. Conclusions Myocyte damageoccurs after injection of ozone with concentration of 30 卩 g/ml、 50 卩 g/mland 80 卩 g/ml , fibrous tissue repairs the damage after 3 weeks. Ozone with concentration of 10卩 g/mldo little

6、 harm to skeletal musle.Key words Medical Ozone; Skeletal Muscle; Pathology；中文摘要：【摘要】 目的通過觀察醫(yī)用臭氧注射后，不同時間段大鼠臀大肌結(jié)構(gòu)的變化，來評價不同濃度醫(yī)用臭氧在骨骼肌注射中的安全性。方法30只大鼠隨機分5組(n=6),醫(yī)用臭氧組：臭氧10、臭氧30、臭氧50、臭氧80組分別注射濃度為10 g g/ml、30 g g/ml、50 g g/ml、80 g g/ml的醫(yī)用臭氧1ml,對照組僅行穿 刺不注射；穿刺注射部位在右側(cè)臀大肌，注射的氣體均為1ml o注射后10min、30min及3周后分別對醫(yī)用臭氧

7、注射點取活檢在光鏡下行病理學(xué)檢查。結(jié)果與對照組比較，光鏡下顯示臭氧30、臭氧50及臭氧80三組注射醫(yī)用臭氧后10min注射點見肌細(xì)胞腫脹，肌細(xì)胞邊界不清，部分肌細(xì)胞壞死溶解，空泡變性；30min后在肌細(xì)胞壞死溶解的基礎(chǔ)上出現(xiàn)了肌細(xì)胞間隙和血管內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤；3周后切片顯示肌細(xì)胞明顯萎縮，較多纖維組織增生，部分伴有玻璃樣變，而臭氧10組與對照組間比較沒有明顯差異。結(jié)論濃度為30 g g/ml、50 g g/ml、80 g g/ml的醫(yī)用臭氧肌肉注射后會產(chǎn)生程度相當(dāng)?shù)募〖?xì)胞損害，3周后纖維組織損傷修復(fù)，濃度為10g g/ml的醫(yī)用臭氧及純氧對肌肉組織沒有明顯損害作用?！娟P(guān)鍵詞】 醫(yī)用臭氧；骨骼肌；

8、病理學(xué)中文全文：臭氧(ozone , O3)治療具有其獨特的優(yōu)越性，在臨床上的應(yīng)用不斷推廣，臭氧療法已成為慢性疼痛微 創(chuàng)治療的新方法。臭氧治療椎間盤突出癥的效果顯著，在歐洲得到了廣泛的應(yīng)用，在國內(nèi)近年來也逐漸開 展該項目1;此外，臭氧對肌肉、肌腱及關(guān)節(jié)軟組織慢性疼痛的治療也有明顯的效果2,3。但臭氧局部注射后對組織影響如何尚未明了。本實驗用不同濃度醫(yī)用臭氧對大鼠骨骼肌及跟腱注射后，觀察臭氧對大 鼠骨骼肌及肌腱病理學(xué)的影響，評估臭氧肌肉及腱鞘內(nèi)注射的氧化程度和影響范圍，為臨床安全應(yīng)用臭氧 治療提供相關(guān)的依據(jù)。材料與方法動物分組：30只wistar大鼠隨機分為5組(n=6),醫(yī)用臭氧組：臭氧10、

9、臭氧30、臭氧50、臭氧80 組分別注射濃度為10 g g/ml、30 g g/ml、50 g g/ml、80 g g/ml的醫(yī)用臭氧，對照組僅行穿刺不注射。不同濃度醫(yī)用臭氧的獲?。河孟鹉z管將瓶裝醫(yī)用純氧與臭氧發(fā)生器的氧氣入口相連；接通電源，打開 開關(guān)，調(diào)校好氧氣輸出量及臭氧濃度，以獲取所需臭氧濃度。用注射器按壓臭氧發(fā)生器取氣口即可獲得臭 氧，在取氣時須利用氣體壓力將注射器活塞向上推以獲取臭氧，避免主動抽取混入空氣。給藥：以3%戊巴比妥鈉30mg/kg麻醉大鼠，大鼠俯臥位，右臀部備皮，碘酒、酒精消毒，臭氧10、臭氧30、臭氧50、臭氧80組分別在右側(cè)臀大肌處各注射濃度為 10卩g/ml、30卩

10、g/ml、50卩g/ml、80卩g/ml 的醫(yī)用臭氧1ml，對照組僅行穿刺不注射。取材：常規(guī)碘酒、酒精消毒大鼠臀部皮膚后，在右臀部作一長約1.5cm的斜行切口，一次切開皮膚及皮下組織，暴露右側(cè)臀大肌，在注射處取大小約0.5cm3的肌肉組織，以10%的甲醛溶液固定。光學(xué)顯微鏡下檢查：制成切片，行HE染色，在光學(xué)顯微鏡下分別觀察不同時間點、不同濃度臭氧注射后肌肉組織的病理學(xué)變化。結(jié)果與對照比較，臭氧30組、臭氧50組及臭氧80組大鼠注射臭氧后10min，大體標(biāo)本肉眼觀見注射部位肌肉 稍腫脹、蒼白；光鏡下見肌細(xì)胞腫脹，間隙變窄或不清。30min后肌細(xì)胞邊界不清，橫紋紊亂，部分肌細(xì)胞壞死，空泡變性，并

11、有部分肌細(xì)胞間隙和血管壁炎細(xì)胞浸潤。3周后切片顯示肌細(xì)胞明顯萎縮，大量纖維組織增生，部分伴有玻璃樣變。臭氧10組與對照組比較無明顯差異(見圖13)。圖1.5組大鼠骨骼肌注射臭氧10min后注射部位活檢病理改變(HEX 100)I:臭氧10組，肌細(xì)胞輕度腫脹，細(xì)胞膜光滑完整，細(xì)胞未見明顯變性壞死，肌間隔有少量紅細(xì)胞， 無炎癥細(xì)胞浸潤；臭氧 30組，肌細(xì)胞輕度腫脹，部分細(xì)胞邊界不清，少量細(xì)胞變性，肌間隔有少量紅 細(xì)胞，未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤；山：臭氧50組，肌細(xì)胞輕度腫脹，細(xì)胞邊界不清，部分變性，肌間隙有少量紅細(xì)胞；W:臭氧80組，肌細(xì)胞腫脹，細(xì)胞邊界模糊不清，肌細(xì)胞間有較多紅細(xì)胞；V:對照組組，肌

12、細(xì)胞無明顯腫脹，細(xì)胞膜光滑完整，肌間隔有少量紅細(xì)胞，無炎癥細(xì)胞浸潤圖2.5組大鼠骨骼肌注射臭氧30min后注射部位活檢病理改變（HEX 100）I:臭氧10組，肌細(xì)胞輕度腫脹，細(xì)胞膜光滑完整，細(xì)胞未見明顯變性壞死，肌間隔有少量紅細(xì)胞及 炎癥細(xì)胞浸潤；H、山、W :臭氧 30、50、80組，肌細(xì)胞腫脹，肌細(xì)胞邊界不清，橫紋紊亂，部分肌細(xì)胞 壞死溶解，空泡變性，肌間隔、血管壁炎癥細(xì)胞浸潤；V:對照組，肌細(xì)胞無明顯腫脹，細(xì)胞膜光滑完整， 肌間隔有少量紅細(xì)胞，無炎癥細(xì)胞浸潤。圖3兩組大鼠骨骼肌注射臭氧 2周后注射點、旁開1 cm活檢部位病理改變(HEX 200)I:臭氧10組，肌細(xì)胞輕度萎縮，細(xì)胞膜光

13、滑完整，細(xì)胞未見明顯變性壞死，肌間隔無明顯纖維組織 增生；H、山、W :臭氧 30、50、80組，肌細(xì)胞萎縮，較多纖維組織增生，部分伴有玻璃樣變；V:對照 組，肌細(xì)胞無明顯腫脹，細(xì)胞膜光滑完整，無纖維組織增生。討論臭氧(03)是氧氣的同素異形體，由氧分子攜帶一個氧原子組成，相對分子質(zhì)量48,性質(zhì)不穩(wěn)定，極易分解，在攜帶的氧原子除氧化后，組合為氧氣(02)進入穩(wěn)定狀態(tài)。臭氧具有不穩(wěn)定性和很強的氧化能力，常溫常態(tài)下半衰期約為2030 min1，所以在臨床應(yīng)用時應(yīng)即造即用，以免其化學(xué)性狀發(fā)生改變。Bocci等2的研究發(fā)現(xiàn)，臭氧濃度為1卩g/ml80卩g/ml時，對血液中紅細(xì)胞無明顯破壞作用，當(dāng)臭氧濃

14、度超過這個范圍時，則可發(fā)生組織損傷。這是因為體內(nèi)具有多種抗氧化酶和谷胱甘肽等物質(zhì)，可以抵 消或部分抵抗臭氧的氧化損傷作用，當(dāng)臭氧的劑量超岀體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)的抗氧化能力時，則可造成組織器 官的損傷作用。所以國內(nèi)外采用臭氧治療時濃度均在80 11 g/ml以下，通常為30卩g/ml50卩g/ml。本實驗選用的臭氧濃度分別為101 g/ml、30 i g/ml、50 1 g/m和80 i g/ml，以觀察各種濃度的醫(yī)用臭氧對大鼠骨 骼肌和跟腱的影響。臭氧是已知可利用的最強氧化劑之一，其氧化能力僅次于氟，它能與極性有機化合物反應(yīng)，導(dǎo)致不飽 和有機分子破裂，而臭氧分子結(jié)合在有機分子的雙鍵上，生成過氧化物。

15、臭氧在進入機體時，即可與細(xì)胞 膜脂質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，生成脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，后者參與一系列的生物調(diào)節(jié)活動，是臭氧發(fā)揮治療作用的因素之 一；臭氧也可與細(xì)胞壁脂類雙鍵反應(yīng)，穿入細(xì)胞內(nèi)部，作用于脂蛋白和脂多糖，改變細(xì)胞的通透性，從而 導(dǎo)致細(xì)胞溶解和死亡。本研究結(jié)果顯示濃度為50卩g/m和80卩g/ml的臭氧肌肉注射后肌肉整個病理改變過程與上述臭氧導(dǎo)致細(xì)胞溶解、壞死的機制非常吻合。文獻報道，臭氧能嚴(yán)重?fù)p害髓核內(nèi)結(jié)構(gòu)及終板，而對 神經(jīng)根、脊髓和腰大肌損傷影響較??；病理學(xué)檢查結(jié)果顯示損傷邊緣出現(xiàn)新鮮的血細(xì)胞，大部分伴隨有淋 巴細(xì)胞炎性組織增生。亦有報道直接將臭氧注入腰大肌內(nèi)治療腰肌勞損，至今沒有造成明顯的損害。本實

16、 驗發(fā)現(xiàn)臭氧肌肉注射后2h病理切片發(fā)現(xiàn)有炎癥細(xì)胞浸潤，與報道相似。臭氧的治療具有雙面性，臭氧的氧化程度與臭氧的濃度呈正比，濃度過低療效欠佳，濃度過高則對周 圍組織產(chǎn)生強刺激，甚至導(dǎo)致組織器官的損傷3。本研究結(jié)果顯示，濃度為30、50、80卩g/ml的臭氧均可對正常肌細(xì)胞造成輕度損傷，而10卩g/ml的臭氧及對照組均沒有見到類似的損傷表現(xiàn)?？紤]到樣本含量和抽樣誤差，并不能得出細(xì)胞損傷程度與注射的臭氧濃度沒有關(guān)聯(lián)的結(jié)論。本研究結(jié)果，提示在臨床應(yīng)用 中，10卩g/ml的臭氧濃度對肌肉組織無明顯損傷，而30卩g/ml80卩g/ml可對肌肉造成輕度損傷，3周后纖維組織修復(fù)損傷。結(jié)論本研究初步提示濃度范圍為10卩g/ml的臭氧對肌肉組織無明顯損傷，30卩g/ml80卩g/ml的臭氧可對 肌肉造成輕度損傷，該損傷3周后纖維組織修復(fù)損傷。以上濃度的臭氧肌肉注射基本安全。參考文獻1. Bocci V. Autohaemotherapy after treatment of blood with ozon