1.2 基因工程的基本操作程序拔高練習題(個人原創(chuàng)精品2015年)

1、1.2 基因工程的基本操作程序拔高練習題1生命活動中起催化作用的酶都具有一定的專一性，下列四種酶作用的部位分別是()限制酶 解旋酶 腸肽酶 ATP水解酶A氫鍵、磷酸二酯鍵、氨基、高能磷酸鍵B磷酸二酯鍵、堿基、肽鍵、高能磷酸鍵C磷酸二酯鍵、氫鍵、氨基、磷酸鍵 D磷酸二酯鍵、氫鍵、肽鍵、高能磷酸鍵2下列關于基因工程的敘述，錯誤的是()A目的基因和受體細胞均可來自動、植物或微生物B限制酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶C人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素原無生物活性D載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細胞和促進目的基因的表達3下列有關基因工程的敘述，正確的是()A運載體上的標記基因有利于促

2、進目的基因在受體細胞中表達B用逆轉錄法合成胰島素基因時只能從胰島B細胞中提取相關的模板C目的基因導入受體細胞后，引起受體細胞的變異屬于基因突變D限制酶和DNA聚合酶是基因工程中兩類常用的工具酶4某研究所的研究人員將生長激素基因通過質粒介導進入大腸桿菌細胞內，來表達產生生長激素。已知質粒中存在兩個抗性基因：A是抗鏈霉素基因，B是抗氨芐青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大腸桿菌不帶有任何抗性基因。下列敘述正確的是 ( )A導入大腸桿菌的質粒一定為重組質粒BRNA聚合酶是構建該重組質粒必需的工具酶C可用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基檢測大腸桿菌中是否導入了重組質粒D在含氨芐青霉素培養(yǎng)基中不能生長，但在

3、含鏈霉素培養(yǎng)基中能生長的可能是符合生產要求的大腸桿菌5下列有關基因工程中載體的說法,正確的是()。A.在基因工程中,被用作載體的質粒都是天然質粒B.所有的質粒都可以作為基因工程中的載體C.質粒是一種獨立于細菌染色體外的鏈狀DNA分子D.作為載體的質粒DNA分子上應有對重組DNA進行鑒定和選擇的標記基因6科學家將含人的胰蛋白酶基因的DNA片段,注射到羊的受精卵中,該受精卵發(fā)育的羊能分泌含胰蛋白酶的奶。這一過程不涉及()。A.DNA以其一條鏈為模板合成RNAB.DNA按照堿基互補配對原則自我復制C.RNA以自身為模板自我復制D.按照RNA密碼子的排列順序合成蛋白質7以下甲、乙兩圖表示從細菌細胞中獲

4、取目的基因的兩種方法，以下說法中錯誤的是()A甲方法可建立該細菌的基因組文庫 B乙方法可建立該細菌的cDNA文庫C甲方法要以脫氧核苷酸為原料 D乙方法需要逆轉錄酶參與8（雙選）小鼠雜交瘤細胞表達的單克隆抗體用于人體試驗時易引起過敏反應，為了克服這個缺陷，可選擇性擴增抗體的可變區(qū)基因(目的基因)后再重組表達。下列相關敘述正確的是()A設計擴增目的基因的引物時不必考慮表達載體的序列B用PCR方法擴增目的基因時不必知道基因的全部序列CPCR體系中一定要添加從受體細胞中提取的DNA聚合酶D一定要根據目的基因編碼產物的特性選擇合適的受體細胞9天然的玫瑰沒有藍色花，這是由于缺少控制藍色色素合成的基因B，而

5、開藍色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B?，F用基因工程技術培育藍玫瑰。下列操作正確的是()A提取矮牽牛藍色花的mRNA，經逆轉錄獲得互補的DNA，再擴增基因BB.利用限制性核酸內切酶從開藍色花矮牽牛的基因文庫中獲取基因BC利用DNA聚合酶將基因B與質粒連接后導入玫瑰細胞D將基因B直接導入大腸桿菌，然后感染并轉入玫瑰細胞10“十一五”以來,我國國產抗蟲棉的種植面積已占到全國抗蟲棉種植面積的95%。中國農科院生物技術研究所郭三堆研究員領導的研究小組將自主設計的BtGFM CrylA殺蟲基因導入棉花細胞并成功表達,培育出了國產抗蟲棉。有關國產抗蟲棉研制過程的敘述,不正確的是()。A.BtGFM Cry

6、lA殺蟲基因在棉花細胞中的表達需要經過轉錄和翻譯兩個過程B.基因表達載體的構建需要用到限制酶和DNA連接酶C.BtGFM CrylA殺蟲基因具有毒性,可以直接殺死棉鈴蟲D.轉基因棉花是否具有抗蟲特性可通過檢測棉花是否對棉鈴蟲有抗性來確定11201982年，世界上第一例體型比普通小鼠大1.8倍的“超級小鼠”培育成功。下列相關敘述不正確的是()A該“超級小鼠”是采用顯微注射技術獲得成功的B將目的基因導入動物細胞的方法中采用最多，也是最有效的方法是顯微注射技術C將目的基因導入小鼠細胞前要將含有該目的基因的運載體提純D培育該“超級小鼠”所用的受體細胞可以是小鼠的受精卵，也可以是小鼠的體細胞12(易錯題

7、)科學家利用生物技術將人的生長激素基因導入小鼠受精卵的細胞核中，經培育獲得一種轉基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中，在醫(yī)學研究及相關疾病治療方面都具有重要意義。下列有關敘述錯誤的是( )A選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞具有全能性B采用DNA分子雜交技術可檢測外源基因在小鼠細胞內是否成功表達C人的生長激素基因能在小鼠細胞內表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用D轉基因小鼠的肝細胞含有人的生長激素基因13下列關于目的基因導入微生物細胞的敘述中，不正確的是()A常用原核生物作為受體細胞，是因為原核生物繁殖快，且多為單細胞，遺傳物質相對較少B受體細胞所處的一種

8、能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)稱為感受態(tài)C感受態(tài)細胞吸收DNA分子需要適宜的溫度和酸堿度D感受態(tài)細胞吸收重組表達載體DNA分子的液體只要調節(jié)為適宜的pH即可，沒必要用緩沖液14在用基因工程技術構建抗除草劑的轉基因煙草過程中，下列操作錯誤的是()A用限制酶切割煙草花葉病毒的核酸B用DNA連接酶連接經切割的抗除草劑基因和載體C將重組DNA分子導入煙草細胞原生質體D用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉基因煙草細胞15科學家將含人的抗胰蛋白酶基因的DNA片段注射到羊的受精卵中，該受精卵發(fā)育成的羊能分泌含抗胰蛋白酶的奶。這一過程涉及()DNA按照堿基互補配對原則自我復制DNA以其中一條鏈為模板合成RNARNA

9、以自身為模板自我復制按照RNA密碼子的排列順序合成蛋白質A B C D16下圖為通過DNA分子雜交鑒定含有某特定DNA的細菌克隆示意圖。下列敘述正確的是()A根據培養(yǎng)皿中菌落數可以準確計算樣品中含有的活菌實際數目B外源DNA必須位于重組質粒的啟動子和終止子之間才能進行復制C重組質粒與探針能進行分子雜交是因為DNA分子脫氧核糖和磷酸交替連接D放射自顯影結果可以顯示原培養(yǎng)皿中含有特定DNA的細菌菌落位置17（雙選）北極比目魚中有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白具有11個氨基酸的重復序列。該序列重復次數越多，抗凍能力越強。下圖是獲取轉基因抗凍番茄植株的過程示意圖，有關敘述正確的是()A過程獲取的目的基因可

10、用于基因工程和比目魚基因組測序B多個抗凍基因編碼依次相連成能表達的新基因，不能得到抗凍性增強的抗凍蛋白C過程構成的重組質粒缺乏標記基因，需要轉入農桿菌才能進行篩選D檢測表達產物蛋白質，可以檢測轉基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其是否完全表達181抗胰蛋白缺乏癥是一種在北美較為常見的單基因遺傳病，患者成年后會出現肺氣腫及其他疾病，嚴重者甚至死亡。對于該致病患者?？刹捎米⑸淙?抗胰蛋白酶來緩解癥狀。據此完成(1)(2)題。(1)圖1表示獲取人1抗胰蛋白酶基因的兩種方法，請回答下列問題：a過程是在_酶的作用下完成的，該酶的作用特點是_。c過程稱為_，該過程需要的原料是_。要確定獲得的基因是否是所需

11、的目的基因，可以從分子水平上利用_技術檢測該基因的堿基序列。 (2)利用轉基因技術將控制該酶合成的基因導入羊的受精卵，最終培育出能在乳腺細胞表達人1抗胰蛋白酶的轉基因羊，從而更易獲得這種酶，簡要過程如圖2所示。獲得目的基因后，常利用_技術在體外將其大量擴增。載體上綠色熒光蛋白(GEP)基因的作用是便于_?；虮磉_載體d，除圖中的標示部分外，還必須含有_。19將動物致病菌的抗原基因導入馬鈴薯制成植物疫苗，飼喂轉基因馬鈴薯可使動物獲得免疫力。以下是與植物疫苗制備過程有關的圖和表。表1引物對序列表引物對AP1AACTGAAATGTAGCTATC P2TTAAGTCCATTACTCTAG引物對BS1G

12、TCCGACTAGTGGCTGTG S2AGCTGGCGTTTAGCCTCG表2幾種限制酶識別序列及切割位點表限制酶AluEcoRPstSma切割位點AGCT TCGAGAATTC CTTAAGCTGCAGGACGTCCCCGGGGGGCCC請根據以上圖表回答下列問題：(1)在采用常規(guī)PCR方法擴增目的基因的過程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內的DNA聚合酶，其最主要的特點是_。(2)PCR過程中退火(復性)溫度必須根據引物的堿基數量和種類來設定。表1為根據模板設計的兩對引物序列，圖2為引物對模板結合示意圖。請判斷哪一對引物可采用較高的退火溫度？_。(3)圖1步驟所用的DNA連接酶對所

13、連接的DNA兩端堿基序列是否有專一性要求？_。(4)為將外源基因轉入馬鈴薯，圖1步驟轉基因所用的細菌B通常為_。(5)對符合設計要求的重組質粒T進行酶切。假設所用的酶均可將識別位點完全切開，請根據圖1中標示的酶切點和表2所列的識別序列，對以下酶切結果作出判斷。采用EcoR和Pst酶切，得到_種DNA片段。采用EcoR和Sma酶切，得到_種DNA片段。1.2 基因工程的基本操作程序拔高練習題答案1、解析：本題考查與基因工程有關的酶所具有的功能。限制酶作用于磷酸二酯鍵，將DNA分子的兩條鏈分開；解旋酶作用于雙鏈DNA分子間的氫鍵，使扭在一起的兩條長鏈解開；腸肽酶作用于肽鍵，使多肽獨立為氨基酸；AT

14、P水解酶作用于ATP的高能磷酸鍵使其放出能量。答案：D2、解析：載體上的抗性基因主要起著標記基因的作用，有利于篩選含重組DNA的細胞，并不能促進目的基因的表達。答案：D3、解析：標記基因有利于目的基因的篩選，而不是表達；基因工程的原理是基因重組而不是基因突變，因為并沒有產生新的基因；基因工程中常用的兩種工具酶是限制酶和DNA連接酶。答案：B4、選D5、答案:D6、答案:C7、解析：首先要知道甲圖描述的為該細菌的基因組文庫，只要利用DNA限制酶將其原有的DNA切斷即可，不需要以脫氧核苷酸為原料。乙圖描述的為細菌部分基因文庫。乙方法需要逆轉錄酶參與，并需要以脫氧核苷酸為原料。答案：C8、解析：設計

15、引物時應當與表達載體兩端的序列進行互補配對；PCR法擴增目的基因只需要知道基因兩端的序列設計合適的引物即可，而不必知道其全部序列；PCR中應用耐高溫的DNA聚合酶；根據目的基因的編碼產物選擇合適的受體細胞，以有利于基因的表達。答案：BD9、答案A解析:可以利用mRNA經逆轉錄合成目的基因后再進一步擴增,A項正確。因為開藍色花的矮牽?；駼的序列是已知的,所以該目的基因宜采用化學方法合成或用多聚酶鏈式反應(PCR)擴增,而不是從開藍色花矮牽牛的基因文庫中獲取,B項錯誤。目的基因必須與載體結合后才能導入受體細胞,且需要DNA連接酶縫合,C、D項錯誤。10、解析:BtGFM CrylA殺蟲基因可控制

16、Bt殺蟲晶體蛋白合成,Bt殺蟲晶體蛋白對棉鈴蟲具有毒性,只有經過轉錄和翻譯才能合成Bt殺蟲晶體蛋白,因此A選項正確,C選項錯誤;基因表達載體的構建方法是先用同種限制酶切割載體和含目的基因的DNA分子,再用DNA連接酶進行連接;可通過個體生物學水平來鑒定轉基因棉花是否具有抗蟲特性,方法是用棉鈴蟲侵染普通棉花和轉基因棉花,對比轉基因棉花是否對棉鈴蟲具有抗性來確定。答案:C11、答案:D12、【解析】選B。采用DNA分子雜交技術可以檢測外源基因是否進入受體細胞以及外源基因在小鼠細胞內是否轉錄，但表達必須合成相應的蛋白質。轉基因小鼠的所有細胞均由受精卵經有絲分裂而來，但生長激素基因僅在其膀胱上皮細胞中

17、選擇性表達。13、解析：感受態(tài)細胞吸收重組表達載體DNA分子需要適宜的pH，所以應該將其放入緩沖液中，防止吸收過程中某些因素影響到pH的變化。答案：D14、解析：限制酶用于提取目的基因和切割載體，煙草花葉病毒遺傳物質是RNA，不能用限制酶切割；DNA 連接酶可以連接具有相同黏性末端的目的基因和載體；受體細胞可以是受精卵和體細胞，也可以是去除細胞壁的原生質體；目的基因為抗除草劑基因，所以成功導入目的基因的細胞具有抗除草劑的能力，篩選時應該用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉基因細胞。答案：A15、解析：考查目的基因進入受體細胞后的復制及表達。目的基因進入羊的受精卵中，隨受精卵的細胞分裂而進行復制和平均分配，復制時嚴格按照堿基互補配對原則。由這樣的受精卵發(fā)育成的羊的乳腺細胞中同樣含有目的基因，通過轉錄和翻譯產生的目的基因的產物抗胰蛋白酶。答案：A16、解析：根據菌落數只能大約推測出活菌數；外源DNA作為一個完整的基因，自身含有啟動子和終止子；DNA雜交是利用堿基互補配對原則進行的；因為放射性標記的DN