微球蛋白均相免疫發(fā)光檢測(cè)試劑盒作品申報(bào)書

1、微球蛋白均相免疫發(fā)光檢測(cè)試劑盒作品申報(bào)書1 丁作品編碼：（此處由參賽校填寫）第三屆“挑戰(zhàn)杯”天 津市大學(xué)生課外學(xué)術(shù)科技作品競(jìng)賽作品申報(bào)書作品名稱：0 2-微 球蛋白均相免疫發(fā)光檢測(cè)試劑盒學(xué)校全稱：天津醫(yī)科大學(xué)申報(bào) 者姓名（集體名稱）：邵晨怡王子晴肖俊 宋緣緣王爽吳飪 類別：自然科學(xué)類學(xué)術(shù)論文口哲學(xué)社會(huì)科學(xué)類社會(huì)調(diào)查報(bào)告 和學(xué)術(shù)論文口科技發(fā)明制作A類口科技發(fā)明制作B類2說 明1. 申報(bào)者應(yīng)在認(rèn)真閱讀此說明各項(xiàng)內(nèi)容后按要求詳細(xì)填寫。2. 申報(bào)者在填寫申報(bào)作品情況時(shí)只需根據(jù)個(gè)人項(xiàng)目或集體項(xiàng) 目填寫A1或A2表，根據(jù)作品類別（自然科學(xué)類學(xué)術(shù)論文.哲學(xué) 社會(huì)科學(xué)類社會(huì)調(diào)查報(bào)告和學(xué)術(shù)論文科技發(fā)明制作）選擇

2、填寫B(tài)1. B2或B3表。所有申報(bào)者可根據(jù)情況填寫C表，推薦者 填寫D表。3. 表內(nèi)項(xiàng)目填寫時(shí)一律用鋼筆.簽字筆或打印，字跡要端正. 清楚，此申報(bào)書可復(fù)制。4. 序號(hào).編碼按照關(guān)于第三屆“挑戰(zhàn)杯”天津市大學(xué)生課外 學(xué)術(shù)科技作品競(jìng)賽申報(bào)作品編碼的說明要求填寫。5. 學(xué)術(shù)論文.社會(huì)調(diào)查報(bào)告及所附的有關(guān)材料必須是中文（若 是外文，請(qǐng)附屮文翻譯），請(qǐng)以4號(hào)楷體打印在A4紙上，與申報(bào)書一同裝訂，學(xué)術(shù)論文及有關(guān)材料在8000字以內(nèi)，社會(huì) 調(diào)查報(bào)告在15000字以內(nèi)。6. 作品申報(bào)書須按要求由各校競(jìng)賽組織機(jī)構(gòu)統(tǒng)一報(bào)送。7. 其他參賽事宜請(qǐng)向本校競(jìng)賽組織機(jī)構(gòu)咨詢。8. 報(bào)送地址：天津師范大學(xué)研修屮心203 （

3、天津市西青區(qū)賓水 西道393號(hào)）聯(lián)系電話：（022） 23766112 3 A2. 申報(bào)者情況（集體項(xiàng)目）說明：1. 必須由申報(bào)者本人按要求填寫；2. 申報(bào)者代表必須是所有作者中學(xué)歷最高者，其余作者填寫 按學(xué)歷由高到低排列；3. 本表屮的學(xué)籍管理部門簽章視為對(duì)申報(bào)者情況的確認(rèn)。姓 名邵晨怡性別女出生年月1994. 11. 1713級(jí)學(xué)歷本科學(xué)制四年入學(xué)時(shí)間XX. 9作品名稱0 2-微球蛋白均相免疫發(fā)光檢測(cè)試劑盒畢業(yè)論 文題目無(wú)郵政編碼300202通訊地址 天津市河西區(qū)廣東路1號(hào) 固定電話60357712郵政編碼300130申報(bào)者代表情況 常住地通訊 地址天津市紅橋區(qū)丁字沽零號(hào)路桃花南里153門

4、102手機(jī) 姓名性別年齡學(xué)歷所在單位王子晴女21本科 天津醫(yī)科大學(xué)肖俊男19本科天津醫(yī)科大學(xué)宋緣緣女19本科 天津醫(yī)科大學(xué)王爽女本科天津醫(yī)科大學(xué)其他作者情況吳飪男 本科 天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)校學(xué)籍管理部門意見以上作者是否為xx年9月1日前正式注冊(cè)在校的全日制非成人教育.非在職的各類高等 學(xué)校中國(guó)籍?？粕究粕T士研究生或博士研究生。是否（部門蓋章）年 月 日資格認(rèn)定院系負(fù)責(zé)人或?qū)熞庖姳咀髌肥?否為課外學(xué)術(shù)科技或社會(huì)實(shí)踐活動(dòng)成果是否負(fù)責(zé)人簽名：年 月 FI V >/ 4 B3. 申報(bào)作品情況（科技發(fā)明制作）說明：1. 必須由申報(bào)者本人填寫；2. 本部分中的科研管理部門簽章視為對(duì)申報(bào)者所填內(nèi)容的

5、確 認(rèn)；3.4. 作品分類請(qǐng)按照作品發(fā)明點(diǎn)或創(chuàng)新點(diǎn)所在類別填報(bào)。作品 全稱B 2-微球蛋白均相免疫發(fā)光檢測(cè)試劑盒作品分類從下列項(xiàng)中 選擇（D ） A.B.C.D.E.（LOCI）檢測(cè)血清屮B 2-微球蛋白 的檢測(cè)方法，獲得建立標(biāo)準(zhǔn)曲線的最佳標(biāo)準(zhǔn)品濃度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲 線并建立數(shù)學(xué)模型，評(píng)估試劑盒的靈敏度和精確度，為臨床提供 一個(gè)高效的檢測(cè)方法。基本思路以抗人0 2-微球蛋白抗體包被的 受體球和生物素化抗人B 2-微球蛋白抗體組成檢測(cè)體系，將待檢 標(biāo)本加入體系溫育，待檢抗原于液相屮分別與兩種抗體結(jié)合，于 受體微球表面形成捕獲抗體-待檢抗原-生物素標(biāo)記抗體復(fù)合物； 再加入鏈霉親和素包被供體微球（通用試

6、劑）并溫育，鏈霉親和 素與生物素結(jié)合，促進(jìn)供體微球和受體微球相互靠攏；當(dāng)用激發(fā) 光照射，誘導(dǎo)單線態(tài)氧的產(chǎn)生和傳遞，產(chǎn)生熒光信號(hào)，熒光信號(hào) 的強(qiáng)度與待檢抗原含量呈正向函數(shù)關(guān)系。標(biāo)準(zhǔn)品建立計(jì)量-反應(yīng)曲 線并建立數(shù)學(xué)模型，未知標(biāo)本抗原含量通過數(shù)序模型計(jì)算后獲 得。計(jì)量-反應(yīng)曲線及數(shù)學(xué)模型的建立：配制不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品并檢 測(cè)，所得結(jié)果繪制計(jì)量-反應(yīng)曲線圖，分析數(shù)據(jù)，考慮鉤狀效應(yīng)的 影響，擴(kuò)大或縮小蛋白質(zhì)標(biāo)5準(zhǔn)品濃度范圍并加一支范圍內(nèi)質(zhì)控 品，建立并校正標(biāo)準(zhǔn)曲線，獲得建立標(biāo)準(zhǔn)曲線的最佳標(biāo)準(zhǔn)品濃 度。創(chuàng)新點(diǎn)本實(shí)驗(yàn)采用LOCI技術(shù)定量測(cè)定血清0 2“免洗”，省去了洗滌誤差，提高了分析的精密度。背景低：錯(cuò) 螯合

7、物產(chǎn)生長(zhǎng)壽命熒光信號(hào)（持續(xù)1S），自然界非特異熒光壽命 較短（持續(xù)100 nS）,利用時(shí)間分辨容易測(cè)量到特異性光信號(hào)。 其次，680 nm的激發(fā)光不能激活天然熒光素，幾乎不產(chǎn)生非特異 性熒光。6再次，因微球濃度較低，供體-受體距離遠(yuǎn)超過200 nm,無(wú)生物分子作用，單線態(tài)氧不能傳遞。較低背景信號(hào)，賦予 較高分析敏感度。檢測(cè)速度快：LOCI分析系統(tǒng)賦予抗原抗體間相 互碰撞及作用的幾率，從而縮短平衡所達(dá)到的時(shí)間，縮短了測(cè)定 時(shí)間，相比傳統(tǒng)檢測(cè)的免疫比濁法（兩天完成測(cè)定），本實(shí)驗(yàn)只 需半小時(shí)。多級(jí)放大效應(yīng)：其整個(gè)發(fā)光過程是三個(gè)相互偶聯(lián)的光 激發(fā)過程，各級(jí)均有放大效應(yīng)且其背景信號(hào)低，幾乎不產(chǎn)生特異 性

8、熒光，所以其有較高的分析敏感度，檢測(cè)的線性范圍可達(dá)到3、5 個(gè)數(shù)量級(jí)，而酶標(biāo)只能達(dá)到2、3個(gè)數(shù)量級(jí)。技術(shù)關(guān)鍵以抗人0 2- 微球蛋白抗體包被的受體球和生物素化抗人0 2-微球蛋白抗體組 成的檢測(cè)體系檢測(cè)血清屮B 2-微球蛋白含量的診斷試劑研制主要 涉及：1. 受體球包被抗人B 2-微球蛋白抗體。2. 生物素化抗人0 2-微球蛋白抗體。3. 配制B 2-微球蛋白不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，倍比稀釋成多組不 同濃度。4. 均相免疫發(fā)光法(雙抗體夾心法)測(cè)B 2-微球蛋白標(biāo)準(zhǔn) 品，反復(fù)細(xì)分濃度，尋找最適標(biāo)準(zhǔn)品濃度。5. 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并校正。6. LOCI技術(shù)定量測(cè)定血清 3 2-微球蛋白含量，抗體標(biāo)記受體微球

9、和生物素標(biāo)記抗體與待測(cè) 樣本形成抗體-抗原-生物素標(biāo)記抗體體系，通過不斷細(xì)分標(biāo)準(zhǔn)品 濃度，建立計(jì)量-反應(yīng)曲線并建立數(shù)學(xué)模型，y二(A1. 17056, C=0. 02096, D=441. 46787, r2=0. 99983)檢測(cè)待測(cè)樣 品得到所測(cè)吸光度即可求出待測(cè)樣品濃度。7作品的科學(xué)性先進(jìn) 性(必須說明與現(xiàn)有技術(shù)相比.該作品是否具有突出的實(shí)質(zhì)性技術(shù) 特點(diǎn)和顯著進(jìn)步。請(qǐng)?zhí)峁┘夹g(shù)性分析說明和參考文獻(xiàn)資料)0 2微 球蛋白因其在免疫應(yīng)答屮扮演著重要的角色，使其在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)及 臨床診斷上的應(yīng)用成為近年來的研究熱點(diǎn)，針對(duì)其檢測(cè)方法的研 究與改進(jìn)尚有很大的發(fā)展空間。傳統(tǒng)檢測(cè)B2微球蛋白的方法主 要有免

10、疫比濁法.放射免疫法等，免疫比濁法具有耗時(shí)長(zhǎng).反應(yīng)不 靈敏.檢測(cè)誤差大等缺點(diǎn)，放射免疫法對(duì)實(shí)驗(yàn)室.放射處理及防護(hù) 條件要求高，成本高，其他的檢測(cè)方法又各有其弊端。B2-微球 蛋白均相免疫發(fā)光檢測(cè)試劑盒利用單線態(tài)氧傳遞均相發(fā)光免疫分 析法(LOCI)檢測(cè)B 2-微球蛋白的含量，該反應(yīng)無(wú)需洗滌，形成 了一個(gè)均相系統(tǒng)，采用三級(jí)放大發(fā)光系統(tǒng)，檢測(cè)結(jié)果誤差小且靈 敏度高，檢測(cè)反應(yīng)時(shí)間短，能夠精確檢測(cè)岀所測(cè)樣本0 2-微球蛋 白的含量，是檢測(cè)B 2-微球蛋白含量理想的非放射性免疫分析技 術(shù)方法。同時(shí)該試劑盒標(biāo)準(zhǔn)化了實(shí)驗(yàn)操作，使實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)更加簡(jiǎn) 便快捷，提高實(shí)驗(yàn)室人員的工作效率。在檢測(cè)技術(shù)和手段不斷創(chuàng) 新發(fā)

11、展且檢測(cè)要求日益提高的大時(shí)代背景Z下，該試劑盒具有良 好的應(yīng)用和推廣前景。參考文獻(xiàn):1梁毅珊.32微球蛋白在 腎臟疾病診治中的臨床應(yīng)用價(jià)值J.求醫(yī)問藥(下半月),xx, (10) :565-566. 2趙利霞，李振甲，魏彥林，等.化學(xué)發(fā) 光免疫分析J.世界科技研究與發(fā)展,2004, (4):24-33. 3李 玉芹血清肌鈣蛋白- I均相化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)體系的初步建立 D.天津醫(yī)科大學(xué)，xx. 4 Kappel A, Stephan S, Christ G, et al.Coagulation Assays Based on the Luminescent Oxygen Channeling I

12、mmunoassay TechnologyJ. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine : Cclm / Fescc,xx, 49(5) :60-855.8作品所處階段(A ) A實(shí)驗(yàn)室階段B中試階段C生產(chǎn)階段D(自填)技術(shù)轉(zhuǎn)讓方式實(shí)驗(yàn)室自主創(chuàng)新的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，專利歸實(shí)驗(yàn) 室所有。作品可展示的形式實(shí)物.產(chǎn)品模型圖紙磁盤 現(xiàn)場(chǎng)演示圖片錄像樣品使用說明及該作品的技術(shù)特點(diǎn) 和優(yōu)勢(shì)，提供該作品的適應(yīng)范圍及推廣前景的技術(shù)性說明及市場(chǎng) 分析和經(jīng)濟(jì)效益預(yù)測(cè)使用說明：預(yù)期用途：用于人體血清.尿液內(nèi) 的B 2-微球蛋白體外定量測(cè)定；試劑組成：試劑A:抗人B2-微 球蛋白

13、抗體包被的受體球試劑B:生物素化抗人0 2-微球蛋白抗 體試劑D:鏈酶親和素標(biāo)記的供體球。檢驗(yàn)方法：加入試劑A.試 劑B液.樣本各25U1,充分混勻，機(jī)器37°C震蕩溫育15mino避 光加入125 U1試劑D液，充分混勻，機(jī)器37°C震蕩混勻 lOmino直接機(jī)器讀數(shù)。結(jié)果解釋：利用標(biāo)準(zhǔn)曲線和所測(cè)吸光度值 計(jì)算樣本濃度，并將其與臨床癥狀相聯(lián)系。備注：詳細(xì)操作過程 請(qǐng)見附B 2-微球蛋白(B2-MG)免疫均相發(fā)光檢測(cè)試劑盒說明 書。技術(shù)特點(diǎn)及優(yōu)勢(shì)：0 2-微球蛋白均相免疫發(fā)光檢測(cè)試劑盒 利用單線態(tài)氧傳遞均相發(fā)光免疫分析法(LOCI)檢測(cè)3 2-微球蛋 白的含量，該反應(yīng)無(wú)需洗滌，形成了均相反應(yīng)環(huán)境，采用三級(jí)放 大發(fā)光系統(tǒng)。檢測(cè)結(jié)果誤差小且靈敏度高，反應(yīng)時(shí)間V V 9短， 能夠精確檢測(cè)出所測(cè)樣本0 2-微球蛋白含量，是檢測(cè)B2-微球 蛋白含量理想的非放射性免疫分析技術(shù)方法。適用范圍及推廣前 景：適用于人體血清或尿液內(nèi)的B 2B2微球蛋白在基礎(chǔ) 醫(yī)學(xué)及臨床診斷上的應(yīng)用己成為研究熱點(diǎn)。其在血清或尿液屮的 含量變化，是某些疾病發(fā)生.發(fā)展和預(yù)后的重要指標(biāo)。特別是作為一項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物在臨床檢測(cè)屮占有重要地位。本作品介紹的3 2- 微球蛋白均相免疫發(fā)光檢測(cè)試劑盒相對(duì)于臨床檢