安徽師范大學遺傳學實驗課考題

1、1. 什么是減數(shù)分裂？主要有哪些特征?減數(shù)分裂是一種特殊方式的細胞分裂，僅在配子形成過程中發(fā)生。這一過程的特 點是：連續(xù)進行兩次核分裂，而染色體只復制一次，結果形成四個核，每個核只 含單倍數(shù)的染色體，即染色體數(shù)減少一半，所以稱作減數(shù)分裂。另一個特點是前 期特別長，而且變化復雜，包括同源染色體的配對、交換與分離等。2. 在哪些器官中可以觀察到減數(shù)分裂？其中哪些是理想的實驗材料？在適當?shù)臅r期采集植物的花蕾或動物的精巢。蠶豆花蕾，短腳斑腿蝗精巢。3. 在減數(shù)分裂制片時，選擇合適的時期尤為重要，以蠶豆花蕾為例說明選擇過程。1）取已固定好的花序，按其花蕾大小，排列在小培養(yǎng)皿中 2 ）撥開花蕾，先 取中等

2、大小的花蕾，取出花藥，放在載玻片上 3）加一滴醋酸洋紅在花藥上，用 鑷子夾碎花藥壁，散出花粉母細胞 4 ）加蓋玻片，吸干周圍染色液，用拇指適力 下壓5）鏡檢4. 在植物體的哪些部分可以觀察到有絲分裂？其中哪些是制片比較理想的實驗 材料？高等植物體細胞的有絲分裂，主要發(fā)生在莖尖、根尖、形成層等分生組織。洋蔥 根尖，蠶豆根尖。5. 什么是固定？我們所做的實驗中，最常用的固定劑成分是什么？ 固定是利用化學或物理的方法，使固定劑迅速透入組織和細胞， 將其殺死，使蛋 白質等物質變性， 但在形態(tài)結構上盡量保持原來活著時的完整和真實狀態(tài)， 如細 胞內染色體的分裂形態(tài)。 同時固定更易于染色， 可以較清楚的顯現(xiàn)

3、細胞在生活時 不易看清的結構。卡諾固定液： 3份無水乙醇， 1份冰醋酸（現(xiàn)配現(xiàn)用） 。6. 植物根尖染色體制片中，預處理的方法有哪些？作用是什么？ 冰凍預處理，藥物預處理。對標本進行預處理，固定染色體，使其停留在某一 時期便于觀察。藥劑處理：可以用作染色體預處理的化學藥品，主要有生物堿、甙類、酸類及其 他物質；最常用的 化學藥品有秋水仙素、 8羥基喹啉及對二氯苯。其作用是： 阻止或破壞紡垂體微管的形成， 由于沒有紡垂體的作用， 細胞 有絲分裂過程， 被阻抑在細胞分裂中期階段， 從而累計比較多的處于細胞分裂 中期的染 色體圖象。 促進染色體濃縮變短， 減少染色體之間相互纏繞重疊， 有利染色體的高

4、度分散。 改變胞質粘度， 促進染色體清晰， 促進細胞質清潔。7. 植物根尖的解離主要有哪兩種方法？簡述其主要程序。 酸水解：一般采用鹽酸解離。 用鹽酸解離因材料不用而不同。 洋蔥根尖用 0.1mol/L 鹽酸在60°C下處理8min，蠶豆根尖用上述濃度溫度時間延長15min。之后用70% 酒精清洗幾次，把殘留的酸洗掉以免影響染色體著色。酶處理：將固定的洋蔥根尖用 0.1mol/L 的醋酸鈉洗 2 次，然后放入酶液中（ 2% 果膠酶和1%纖維素酶等量混合），在25 °C恒溫箱中處理，此時根尖較 柔軟，將根尖取出， 用 0.1mol/L 醋酸鈉洗 2 次，再放入 60 

5、6;C0. 1 mol/L 鹽酸溶液中水解2min。最后用45%醋酸鈉清洗根尖8. 植物根尖壓片過程要注意哪些方面？取一染色的根尖置于載玻片中央，用吸水紙洗去多余的溶液，加1滴新鮮的染液，蓋上蓋玻片后，在蓋玻片上蓋上一些吸水紙，應以左手的拇指和中指固定蓋片的 位置，用鉛筆或橡皮輕輕敲打，使細胞核染色體均勻分散。9. 植物根尖的解離有何目的？酸解離有何優(yōu)點？目的是使分生組織細胞之間的果膠質層水解掉，并使細胞壁軟化，便于壓片.酸解離優(yōu)點是較酶水解速度快，強度大，但用酸處理后，必須要用70%酒精清洗，把殘留的酸洗掉，以免影響染色體著色。10. 低滲處理的作用是什么？試說明這種處理的關鍵步驟。使紅細胞

6、解體，白細胞膨脹，染色體分散。取5ML 37 °C低溫的0.075M KCI溶液加入離心管中，用滴管輕輕沖打成細胞懸液，放入37 °C溫箱中靜置20min。11. 果蠅唾腺染色體有哪些形態(tài)特征？果蠅唾腺染色體比果蠅的其他體細胞染色體要長100-200倍，體積大上千倍，故有稱巨大染色體。所有染色體的著絲點聚集在一起形成染色中心，因此唾腺染 色體不但能進行配對，且所有染色體的著絲點聚集在一起形成染色中心， 因此唾 腺細胞染色體形態(tài)不是8條個別染色體，而是由染色中心向空間伸展的 5條長 臂和1條短臂構成。還表現(xiàn)出有明顯的橫紋，數(shù)目和空間排列是恒定的，代表著 一些基因的位置，具有種

7、的特異性。12. 果蠅雜交試驗中，親本為何要用處女蠅？如何收集？只有親本是處女蠅才能保證雌蠅的生殖器里無精子，若非處女蠅則可能使果蠅后 代不是所用雄蠅交配得來的。一般來說，剛羽化出來的果蠅在12小時之內是不進行交配的，所以這段時間內 選出的雌蠅即為處女蠅。為保險起見，可在羽化后10h內挑選。13. 秋水仙素處理為何可以誘發(fā)多倍體的形成？秋水仙素的誘導作用在于阻止有絲分裂細胞紡錘絲的形成，但對染色體的結構和復制無顯著影響。若濃度適合，藥劑在細胞中擴散后，不致發(fā)生嚴重的毒害，這 樣縱裂為二的染色體不能向兩極分開， 因而便產(chǎn)生了染色體加倍的核。當藥劑作 用消除后，由于多倍體細胞繼續(xù)分裂，便得到多倍體

8、組織，以后則產(chǎn)生新的多倍 體植株。14. 扼要敘述空氣干燥法制片的步驟。滴片后，不加熱或任何處理，使載片在室溫下自然干燥的方法。 收集細胞一細胞 經(jīng)秋水仙素處理一低滲處理一離心一充分固定一滴片。 （用吸管吸取細胞懸液自 1m高處滴在冰凍的載玻片上，一片1-3滴，晾干，收存）15. 可用于常規(guī)核型分析的中期分裂相要具備哪些因素?染色體清晰，數(shù)目為46條，大小合適，分散度合適，背景干凈16. 人體外周血淋巴細胞培養(yǎng)中，植物血球凝集素（PHA ）、秋水仙素、肝素鈉和 雙抗分別有何作用？外周血淋巴細胞是不能增殖的分化細胞群， 在體外無菌培養(yǎng)條件下，若于培養(yǎng)基 中植物凝集素（PHA）則可刺激處G。期的淋

9、巴細胞轉化為淋巴母細胞，重新有絲 分裂的能力，經(jīng)一段時間的培養(yǎng)即可獲得大量分裂期細胞以供染色體分析。秋水仙素（或秋水酰胺）可通過干擾微管組裝而抑制紡錘絲形成，使細胞分裂順利 進入后期而停滯于中期，從而可在短期內積累大量最適于進行染色體分裂中期分 裂相。此外，秋水仙素還能使染色單體縮短、分開，使染色體呈現(xiàn)明顯形而利于 辨認。肝素，主要起抗凝血作用雙抗，為防止培養(yǎng)時期細菌的污染17 果蠅雌雄（成蟲期）鑒別最主要或最準確的方法是什么？最準確的是看性梳，性梳是雄果蠅的第二性征，雄果蠅的第一對前足的第一個跗 節(jié)上，因形狀與梳頭的梳子非常相似，又與性別有關而得名。雌果蠅沒有這個結 構。但是性梳這一性狀需要

10、借助顯微鏡觀察。除了性梳之外，還有一些其它性狀都可以用肉眼直接觀察。具體如下： 雄蠅，個體較小，腹部條紋3 （腹片4片），腹部末端圓鈍，顏色深。雌蠅，個體較大，腹部條紋5 （腹片6片），腹部末端尖，顏色淺。18. 本學期我們做了哪些遺傳學實驗？通過這些實驗你了解和掌握了哪些生物學基本實驗技能?本學期一共做了六次遺傳學實驗分別是：1. 植物細胞有絲分裂及染色體行為觀察： 通過本次試驗掌握制作植物根尖有絲分裂裝片的技術。2. 減數(shù)分裂制片及染色體行為觀察：掌握減數(shù)分裂制片方法。3. 果蠅生活史及性狀觀察：掌握試驗果蠅的飼養(yǎng)管理技術。4. 果蠅的唾液腺染色體制片及觀察：掌握解剖果蠅幼蟲、分離唾腺的方

11、法，掌握 唾腺染色體的制片技術。5. 植物多倍體激發(fā)、制片及觀察：掌握了植物多倍體人工誘發(fā)技術及多倍體鑒定 方法。6. 人體外周血淋巴細胞培養(yǎng)及制片：掌握了人體外周血淋巴細胞的懸浮培養(yǎng)法與人體細胞染色體標本的制備和核型分析的方法，學會了人體細胞遺傳學實驗的基 本操作技術。19. 植物染色體制片時，我們使用的是什么染色液？人類染色體染色時我們使用的是何種染色液，如何配制？植物染色體制片時使用的是改良苯酚品紅染色液人類染色體染色時我們使用的是吉姆薩染液（Giemsa），配置：稱Giemsa粉劑 1g置研缽中，加少量甘油研磨至無顆粒為止，再加入甘油共 50ml，放在56C 60 C的溫箱或水浴內12

12、h，促使溶化。冷卻后加入甲醇 50ml，室溫放置23d 后，過濾使用。同時將 Giemsa原液1份加片pH7.4的磷酸緩沖液9份稀釋，或在10ml磷酸緩沖液（pH7.4 ）中加入1015滴Giemsa原液，應隨用隨配20. 核型分析有何作用?是細胞遺傳學分析的基本方法：研究染色體形態(tài)、結構、功能的相互關系，可根據(jù)染色體數(shù)目變異判斷病因。核型分析對于人類醫(yī)學遺傳研究及臨床應用都有重大意義。如腫瘤細胞的核型分 析已被應用于腫瘤的臨床診斷、愈后極藥物療效的觀察；通過培養(yǎng)后的淋巴細胞 或皮膚成纖維細胞的核型分析，可以對人的染色體疾病進行診斷，而對培養(yǎng)后的 羊水中胎兒脫屑細胞或胎盤絨毛膜細胞的核型分析則

13、可用于胎兒性別及是否患 有染色體病的產(chǎn)前診斷。21. 微核檢測有何作用？微核試驗在對外來化合物（如藥品、食品添加劑、農(nóng)藥、化妝品、環(huán)境污染物等 ） 遺傳毒性和職業(yè)暴露人群遺傳損害監(jiān)測和現(xiàn)場生態(tài)環(huán)境檢測方面，在診斷和預防肝癌、食管癌、肺癌等惡性腫瘤方面得到了大量的應用。微核試驗最大的優(yōu)點是 經(jīng)濟、簡單、快速，而國內外大量的對試驗研究，比較一致的看法是該方法在敏 感性、特異性和準確性方面，與經(jīng)典的染色體畸變分析方法基本相當川。因而， 特別適合作為大量化合物和現(xiàn)場人群初篩的實驗方法。22. 當你進行果蠅性別鑒定時，果蠅蘇醒了，你如何處理？應迅速將果蠅放入麻醉瓶中繼續(xù)麻醉23. 如何獲得果蠅唾腺？過程中應注意哪些細節(jié)? 把載玻片放在雙筒解剖鏡下，其上滴上一滴生理鹽水。取幼蟲置于生理鹽水中， 兩手各握一枚解剖針，以左手的針壓在幼蟲末端 1/3 處，固定幼蟲，右手的針尖 壓住幼蟲頭部，用適當?shù)牧ο蚯?/p>