幾種常用溶液的配制方法

1、   幾種常用溶液的配制方法 1、PBS:取ZLI-9061 PBS溶于1000ml的蒸餾水中，混勻，測pH值應(yīng)在7.27.4之間，若偏離此范圍，請用0.1N的HCl或NaOH調(diào)整。2、TBS：2.1 Tris緩沖液配方：（0.5 M pH7.6）Tris（三羥甲基氨基甲烷）60.57g1N HCl約420ml雙蒸水加至1000mlTris緩沖液配制方法：先以少量雙蒸水（300500ml）溶解Tris，加入HCl后，用HCl（1N）或NaOH（1N）將pH調(diào)至7.6， 最后雙蒸水加至1000ml。此液為儲備液，4冰箱中保存。2.2 TBS配方：Tris-

2、HCI緩沖液（0.5M pH7.6）100mlNaCI8.59g (0.15mol/L)雙蒸水加至1000mlTBS配制方法：先以少量雙蒸水溶解NaCl，再加入Tris-HCl緩沖液，最后加雙蒸水至1000ml，充分搖勻。3、枸櫞酸鹽緩沖液（Citrate buffer）：3.1 儲存液：A. 0.1M枸櫞酸溶液：稱取21.01g枸櫞酸（C6H8O7·H20）溶于1000ml蒸餾水中。B. 0.1M枸櫞酸鈉溶液：稱取29.41g枸櫞酸鈉（C6H5Na3O7·2H20）溶于1000ml蒸餾水中。3.2 工作液：取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸餾水中，溶液pH值應(yīng)

3、為6.0±0.14、胰酶（Trypsin）： 4.1 ZLI-9011胰蛋白酶消化液： 常用濃度為0.125%，即使用前將一滴試劑1胰酶溶液和三滴試劑2胰酶稀釋液均勻混合（1:3稀釋），則可直接滴加使用。胰酶的最終濃度可以根據(jù)使用者的要求進行調(diào)整，濃度范圍可以從0.05%（1:10稀釋）至0.25%（1:1稀釋）。4.2 ZLI-9010胰蛋白酶：取0.05g或0.1g胰蛋白酶加入到100ml 0.05%或0.1% pH7.8的無水氯化鈣水溶液中，溶解即可。5、胃酶（Pepsin）：4%胃蛋白酶，用0.1mol/L HCL配制。（我公司備有ZLI-9013胃蛋白酶消化工作液，不需稀釋

4、直接滴加使用，歡迎選購）6、DAB：6.1 ZLI-9032/9033 DAB Kit：使用前只需將試劑盒提供的A、B、C三種試劑各一滴加至1ml雙蒸水中，即可獲得1ml DAB工作液，簡單易用。6.1 ZLI-9030 DAB：6mgDAB溶于10mlTBS（0.05M pH7.6），再加入0.1ml濃度為3的H2O2，過濾掉沉淀物，即可。7、AEC：4mg AEC溶于1ml二甲基甲酰胺中，加入14ml濃度為0.1M的醋酸緩沖液（pH5.2），然后加入0.15ml 3%H2O2，過濾掉沉淀物。8、RIPA：1×PBS，1%NP 40，0.5 sodium deoxycholate，

5、0.1% SDS（此液體可長期保存）以下抑制劑以儲存液方式保存，臨用前加入RIPA中。8.1 10mg/ml PMSF異丙醇溶液（用量為10ml/ml）8.2 Aprotinin（Sigma產(chǎn)品，用量為30ml/ml）8.3 1000mM sodium orthovanadate冷凍液（用量為10ml/ml）9、Blotto A：常規(guī)使用1×PBS，5% milk，0.05% Tween 20。10、Blotto B：與Phosphotyrosine抗體共用，1×PBS，1% milk，0.05% Tween 20。部分實驗中milk可完全去除，但可能引起背景增高。 版權(quán)所有©廈門太陽馬生