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1、核酸催化核酸催化張志超張志超精細(xì)化工國(guó)家重精細(xì)化工國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室Ribozyme具有催化功能的具有催化功能的RNA 一、ribozyme的發(fā)現(xiàn) 80年代初期,美國(guó)科羅拉多大學(xué)博爾德分校的Thomas Cech和美國(guó)耶魯大學(xué)的Sidnery Altan各自獨(dú)立地發(fā)現(xiàn)RNA具有生物催化功能.從而改動(dòng)了生物催比劑的傳統(tǒng)概念。 為此,T.Cech和S.Altman共同獲得了1989年度諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。The M1 RNA in ribonuclease P is catalyticThe intron inthe pre-rRNA ofTetrahemena is self-spliced核酶的
2、分類 剪接型剪接型 剪切型剪切型 Can operate on itself (single turnover, not a true catalyst), or ona separate molecule (multiple turnover, true catalyst) two phospho-transesterifications鳥苷的3-OH攻擊內(nèi)含子的5剪接點(diǎn),并與Intron的5-端磷酸基構(gòu)成共價(jià)鍵銜接,同時(shí)5外顯子零落下來,但3外顯子此時(shí)仍與Intron相連。5-端外顯子的3-OH進(jìn)攻內(nèi)含子的3剪接點(diǎn)并使413nt的內(nèi)含子零落,同時(shí)5外顯子與3外顯子銜接成成熟rRNA。核酶的
3、剪接機(jī)制核酶的剪接機(jī)制Secondary and possible tertiary structure of the self-splicing rRNA intron from Tetrahymena. Intron and exon sequences are shaded yellow and green, respectively. Combination of structural and biochemical studies suggests amechanism mediated by several bound magnesium cations四膜蟲核酶的四膜蟲核酶的X-
4、ray構(gòu)造構(gòu)造Ribozyme的運(yùn)用 Ribozyme的發(fā)現(xiàn)使我們認(rèn)識(shí)到酶不一定都是蛋白質(zhì),這的發(fā)現(xiàn)使我們認(rèn)識(shí)到酶不一定都是蛋白質(zhì),這些些Ri-bozyme主要用在主要用在RNA分子的切割與降解上。由于分子的切割與降解上。由于真核生物的突變體很難獲得,假設(shè)用特制的真核生物的突變體很難獲得,假設(shè)用特制的Ribozyme破破壞切割特定的壞切割特定的RNA分子,使這種分子,使這種RNA不能表達(dá)出相應(yīng)的不能表達(dá)出相應(yīng)的蛋白質(zhì),我們?cè)龠M(jìn)一步察看其表型變化,從而了解這個(gè)基蛋白質(zhì),我們?cè)龠M(jìn)一步察看其表型變化,從而了解這個(gè)基因的功能。因的功能。 另外在醫(yī)學(xué)方面,可以用特別的另外在醫(yī)學(xué)方面,可以用特別的Ribozyme切割一些對(duì)人切割一些對(duì)人體有害的體有害的RNA,到達(dá)解除有害基因功能的目的,這也是基,到達(dá)解除有害基因功能的目的,這也是基因治療的又一條路子。因治療的又一條路子。 在動(dòng)植物育種方面,可以將具有破壞病毒在動(dòng)植物育
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