生長抑素Ⅱ型受體在胰腺癌旁組織中表達的研究

1、生長抑素型受體在胰腺癌旁組織中表達的研究    nbsp;nbsp;【摘要】目的了解原發(fā)性胰腺癌組織和癌旁組織中生長抑素型受體（SST2R）的表達情況，探索生長抑素及其類似物治療胰腺腫瘤效果不一致的原因。方法采用免疫組織化學(xué)LSAB法檢測40例原發(fā)性胰腺癌組織和癌旁3nbsp;cm組織中SST2R的表達，并用2檢驗分     方汝亮 劉志梅 顏廷俊 蓋學(xué)銀 王欣 秦仁義   濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報 2005 年 6 月 第 28 卷 第 3 期    【摘要】目的了解原發(fā)性胰腺癌組織

2、和癌旁組織中生長抑素型受體（SST2R）的表達情況，探索生長抑素及其類似物治療胰腺腫瘤效果不一致的原因。方法采用免疫組織化學(xué)LSAB法檢測40例原發(fā)性胰腺癌組織和癌旁3 cm組織中SST2R的表達，并用2檢驗分析了SST2R在原發(fā)性胰腺癌組織與癌旁組織中表達的差異性。結(jié)果胰腺癌組織和癌旁組織同時表達SST2R 5例，表達陽性率為12.5%（5/40）；胰腺癌旁組織SST2R陽性表達率為85%(34/40)，29 例僅胰腺癌旁組織表達；胰腺癌旁組織SST2R陽性表達率明顯高于胰腺癌組織（P<0.05）。結(jié)論SST2R在不同的胰腺癌患者和同一胰腺癌患者的癌組織及癌旁組織中的表達有顯著

3、性差異，這可能是生長抑素及其類似物治療胰腺癌效果不一致的重要原因。        【關(guān)鍵詞】胰腺癌旁組織；生長抑素型受體；免疫組織化學(xué)        A study on the expression of somatostatin receptor subtype 2 ( SST2R) in non-carcinoma  adjacenttissues of primary pancreatic carcinoma  

4、60;     FANG RuliangLIU ZhimeiYAN Tingjunet al        Department of General Surgery,the Third People's Hospital of Jinan,Jinan250101        【Abstract】ObjectiveThe current study was designed to investigate s

5、omatostatin receptor subtype 2 gene expression in tumor tissues and non-carcinoma adjacent tissues of primary pancreatic carcinoma, and explore the cause of the difference in the treatment against pancreatic neoplasms by exogenous somatostatin and its analogues.  MethodsThe expression of SST2R

6、in tumor tissues and non-carcinoma adjacent tissues of primary pancreatic carcinoma in 40 patients was examined by LSAB method, and we analysed the difference of the SST2R expression in tumor tissues and non-carcinoma adjacent tissues of pancreatic carcinoma by statistical method-2 test.  Resul

7、tsAmong these cases, 5 patients had the SST2R expression in both tumor tissues and non-carcinoma adjacent tissues  ofpancreatic carcinoma, the positive rate was 12.5%(5/40); 29 cases had the SST2R expression only in non-carcinoma adjacent tissues of pancreatic carcinoma, and the positive rate w

8、as 85%(34/40) in non-carcinoma adjacent tissues of pancreatic carcinoma. The positive rate of SST2R in non-carcinoma adjacent tissues of pancreatic carcinoma was significantly higher than that in tumor tissues of pancreatic carcinoma (P<0'05). Conclusion The expression of SST2R had the si

9、gnificant difference in tumor tissues and non-carcinoma adjacent  tissues of pancreatic carcinoma in both diverse and identical patients, it may be the important reason of the variable effect on the treatment against pancreatic carcinoma by exogenous somatostatin and its analogues.  &

10、#160;     【Key words】non-carcinoma adjacent tissues of pancreatic carcinoma, somatostatin receptor subtype 2, lmmunohitochemistry        近年來的研究表明，生長抑素及其類似物通過腫瘤組織中生長抑素受體的介導(dǎo)，對多種實體腫瘤如大腸癌、肝癌等有明顯的生長抑制作用，腫瘤組織中生長抑素受體的表達狀況是影響生長抑素及其類似物治療腫瘤療效的重要因素1，2。近年來的

11、臨床研究報告表明，生長抑素及其類似物治療胰腺癌的效果不一致，其原因至今仍不清楚。本研究采用免疫組織化學(xué)LSAB法檢測了 40 例原發(fā)性胰腺癌組織和癌旁組織中生長抑素型受體（SST2R）的表達，旨在探索生長抑素及其類似物治療胰腺癌效果不一致的根本原因。        1資料與方法        1.1一般資料40 例原發(fā)性胰腺癌標本均取自本院病理科，患者年齡 3371 歲（平均年齡 55.65 歲），其中男性 26 例，女性 14 例；病理診斷均為胰腺導(dǎo)管腺

12、癌，其中胰頭癌 23 例，胰體、尾癌 17 例。按UICC TNM 臨床分期：期14例，IV期26例。所有標本的胰腺癌組織和癌旁 3 cm組織均經(jīng) 10% 的福爾馬林固定、脫水，常規(guī)石蠟包埋，制備4 m厚連續(xù)切片。        1.2主要試劑SST2R 羊多克隆抗體購自美國Santa Cruz 公司；二抗生物素化免抗山羊IgG(ZB-2050)為美國ZYMED公司產(chǎn)品；過氧化酶標記的Streptavidin購自丹麥DAKO公司。        1.3免疫

13、組化染色主要步驟切片經(jīng)常規(guī)脫蠟至水，加 0.01 M 枸椽酸鹽緩沖液（pH 6.0），用微波爐煮 10 min，加一抗，4過夜；加 1300 倍稀釋的生物素標記的免抗山羊IgG，37 1h。加 1400 倍稀釋過氧化酶標記的Streptavidin，37 30min ; DAB顯色，顯微鏡下控制染色終點，蘇木素復(fù)染，透明，封片。以 10×10的目鏡測微尺于 40 HP物鏡下觀察計數(shù)。以磷酸鹽緩沖液（PBS）代替一抗作為陰性對照。        1.4結(jié)果判斷細胞膜/漿中出現(xiàn)棕黃色染色為陽性判斷標準。40×

14、10 視野下用 10×10 的目鏡測微尺計數(shù) 1 000 個細胞，陽性細胞數(shù)比例<10%計“”，1020%計“”，2050%計“”，75%計“”。        1.5統(tǒng)計學(xué)處理計數(shù)資料采用配對四格表資料2檢驗。        2結(jié)果        40 例原發(fā)性胰腺癌組織中，胰腺癌組織和癌旁 3 cm組織同時表達 SST2R 5 例，陽性率為 12.5%（5/4

15、0）；胰腺癌旁 3 cm組織 SST2R 陽性率為 85%(34/40)，29 例僅胰腺癌旁組織表達SST2R。胰腺癌旁組織SST2R 陽性率明顯高于胰腺癌組織（P<0.05，表1）。表1SST2R 在人胰腺癌組織和癌旁3cm組織中的表達癌旁組織SST2R癌組織SST2R+-+529-0 6注：校正2=27. 03，P0. 01。        3討論        生長抑素及其類似物對良惡性腫瘤的抑制作用已為大家所公認，其抑制作用與腫瘤組織

16、是否表達 SST2R 直接相關(guān)2，作用機制主要是通過與腫瘤組織中 SST2R 結(jié)合，直接抑制腫瘤細胞的分裂增殖或通過抑制體內(nèi)各種生長因子如血管內(nèi)皮細胞生長因子、胰島素樣生長因子等而抑制腫瘤的生長?？赏ㄟ^直接和間接的通路抗組織增生和抗腫瘤的發(fā)生3；并可通過上調(diào)P27致胰腺癌細胞周期停止于G0S1期而誘導(dǎo)其凋亡。已有研究表明，原發(fā)性胰腺癌組織中 SST2R 表達較少或缺失6，但關(guān)于癌旁組織中SST2R的表達狀況未見報道。本研究結(jié)果顯示，在 40 例原發(fā)性胰腺癌組織中僅 5 例 SST2R 表達為陽性，陽性率為 12.5%，說明大多數(shù)胰腺癌組織中缺乏 SST2R 亞型的表達，這可能是大多數(shù)胰腺癌對生

17、長抑素及其類似物治療效果不明顯的主要原因。有趣的是大多數(shù)胰腺癌旁組織中 SST2R 表達較高，其機制和作用有待進一步探討。本研究結(jié)果提示，若胰腺腫瘤組織和腫瘤旁組織 SST2R 均減少，生長抑素及其類似物對胰腺腫瘤的治療效果可能無效，但當胰腺腫瘤組織或和腫瘤旁組織 SST2R 明顯表達時，生長抑素及其類似物對胰腺腫瘤可能有一定的治療作用。因此，胰腺腫瘤組織或和腫瘤旁組織 SST2R 的表達不同，必然導(dǎo)致不同的治療效果，這可能是生長抑素及其類似物治療胰腺腫瘤效果報告不一致的主要原因7。我們認為，生長抑素及其類似物用于胰腺腫瘤的治療前，明確SST2R在胰腺腫瘤組織和腫瘤旁組織中的表達情況極為重要，

18、這也有助于最終明確生長抑素及其類似物治療胰腺腫瘤的確切效果。        參考文獻        1. Kouroumalis E, Skordilis P, Thermos K, et al. Treatment of hepatocellular carcinoma with octreotide: a randomized controlled study J. Gut, 1998,42 (3): 442   

19、0;    2. Delesque N, Buscail L, Esteve JP,et al. SST2R somatostatin receptor expression reverses the tumorigenicity of human pancreatic cancer cells. Cancer Res, 1997, 57: 956        3. Buscail L, Esteve JP. Inhibition of cell proliferation by the so

20、matostatin analogue RC-160 is mediated by somatostatin receptor subtypes SST2R and SST5R through different mechanisms. Proc Natl Sci USA, 1995, 92: 1580        4. Knuhtsen S, Esteve JP, Bernadet B, et al. Molecular characterization of the solubilized receptor of somatostatin from rat pancreatic acinar membranes. Biochem J, 1988, 254: 641        5. Q