在體小腸吸收實驗

1、課程名稱：實驗名稱：一、實驗目的和要求（必填）三.主要儀器設備（必填）專業(yè)：姓名：護滬必叨實驗報告地點：指導老師：_成績：實臉類型：同組學生姓名：二、實驗內容和原理（必填）四. 操作方法和實驗步驟五、實驗數(shù)據記錄和處理七.討論、心得六、實驗結果與分析（必填）一、實驗目的1、掌握大鼠在體腸管泵循環(huán)法研究吸收的試驗方法。2, 掌握藥物腸管吸收的機理和計算吸收速度常數(shù)（ka）和吸收半衰期52的方法。二、實驗原理1、研究藥物消化管吸收試驗方法：體外試驗法、在體試驗法和體內試驗法。2, 消化管吸收藥物主要方式是被動擴散。這種形式的吸收不消耗能量，其透過速度與膜兩側的濃度差成 正比，可用下式表示：-dQ/

2、dt=DKS(C-Ch)/h (1) -dQ/dt二PSC/h二k C (2)dQ/ dt：分子型藥物的透過速度D :藥物在膜內的擴散系數(shù)k :藥物在膜/水溶液中的分散系數(shù)C :消化管內藥物濃度G :血液中的藥物濃度h :膜的厚度式（2）說明藥物透過速度屬于表觀一級速度過程：以消化液中藥物量的變化率dx/dt表示透過速度, 則：-dX/dt=KaX lnX=lnXO-KatlnX對取樣時間t作圖，可得一直線，從直線的斜率可求得吸收速度常數(shù)k“，其吸收半衰期為：tl/2 = Ka小腸在吸收過程中，不僅吸收藥物，也吸收水分，導致供試液體積減少，故不能用直接測定藥物濃度 的方法計算剩余的藥量。酚紅不

3、被小腸吸收，因此向供試液中加入定量的酚紅，在一定間隔時間測定酚紅 的濃度，就可以計算出不同時間供試液的體積，再根據測定的藥物濃度，就可以得出不同時間小腸中剩余 的藥量或被吸收的藥量。三、實驗儀器及試劑儀器：蠕動泵試劑：供試液（SD濃度：20ug/ml.酚紅濃度：20ug/ml）.酚紅液（酚紅濃度：20ug/ml）、20%烏拉坦、 生理鹽水、%NaN02溶液、lmol/L鹽酸、L NaOH, %氨基磺酸鞍（NH$（hNHt ）溶液、蔡乙二胺溶液四、實驗步驟1, 循環(huán)試驗的操作（1）恒溫水浴調節(jié)：將水浴溫度調節(jié)為37乜。（2）供試液的準備：量取75-BOni供試液加入循環(huán)裝置的燒瓶中，置恒溫水浴中

4、預熱至37土乜。（3）生理鹽水的準備：取生理鹽水適量，預熱至37。（2備用。（4）蠕動泵流速的調節(jié)：調節(jié)流速為5ml/min和min。（5）大鼠麻醉：取大鼠一只稱重，按kg體重腹腔注射烏拉坦（濃度為20%）麻醉，并固定于固定臺上。（6）小腸兩端插管；沿大鼠腹部中線打開腹腔（約3cm）,在12指腸上部和回腸下部各切一小口，插入 直徑為的玻璃管，并用線扎緊。（7）腸管洗滌：用注射器將37。（2的生理鹽水緩緩注入腸管，洗去腸管內容物至凈。（8）作成回路：將腸管兩端的玻璃管按圖所示與膠管連接，作成回路，開動蠕動泵，其流速為5ml/mino（9）取樣：以5ml/min流速循環(huán)lOmin后，將流速調節(jié)為m

5、in時，立即自供試液燒瓶中取樣兩份（lml 和各一份），分別作為SD和酚紅零時間樣品，另向燒瓶中補加酚紅液加1,其后每隔15min亦按同法取樣 及補加酚紅液，共取樣9次，停止循環(huán)。2, SD的測定取樣品lml置10ml帶塞試管中 加入1 mol/LHCl 5ml,搖勻，加% NaNO lml,揺勻，放置3min加% NH2S0;（NH. lml,搖勻，放置3min再加蔡乙二胺2nd,揺勻，放置20min。在550nm的波長處測定吸 收度。比色空白液：取酚紅液lml代替樣品，其余操作與樣品處理一致。3, 酚紅的測定取樣品置10ml帶塞試管中，加L NaOH 5ml,揺勻，在555nm的波長處測定

6、吸收度。比色空白液：LNaOH五、實驗數(shù)據記錄和處理1、標曲回歸方程：SD : y=酚紅：y=+ （R2= 2、SD和酚紅樣品濃度計算計算結果如下表:表1大鼠在體小腸吸收量的計算取樣時間（h）SD酚紅abs 濃度 ug/ml abs 濃度 ug/ml供試液體積ml剩余藥量Xug）lnX循環(huán)前2020751500lnXt作圖，得一條直線.作圖如下:7.3007.2807.2607.2407.2207.2007.1807.1607.1407.12011.52取樣時間/h圖1大鼠在體小腸吸收后剩余藥量對時間的曲線求得 Ksr ti/2= h3. 每小時吸收率計算每小時吸收率（%）=（篆時間剩余藥量-

7、lh的剩余藥量）/零時間剩余藥量* 100% =%六、實驗結果及分析實驗結果詳見實驗數(shù)據記錄七、討論心得思考題：1, 在體吸收實驗法的特點是什么在體試驗法不切斷血管和神經，藥物透過上皮細胞后即被血液運走，能避免胃內容物排出及消化管固 有運動等的生理影響，對溶解藥物是一種較好的研究吸收的試驗方法。但本法只限于溶解狀態(tài)藥物，并有 可能將其它因素引起的藥物濃度的變化誤作為吸收.。2, 影響實驗結果的主要因素有哪些主要因素有：大鼠手術是否順利，小腸內容物是否洗凈，所取得藥物量是否準確，蠕動泵的轉速調節(jié) 等。P.3, 供試液中為什么要加入酚紅小腸在吸收過程中，不僅吸收藥物，也吸收水分，導致供試液體積減少，故不能用直接測定