多功能轉(zhuǎn)錄因子――陰陽因子―1研究進展

1、 維普資訊 國外 醫(yī) 學 遺 傳 學分 冊 19 年 98 第2 1卷 第 1期 S F 占有 優(yōu) 勢 , S F結(jié)合 并激 活轉(zhuǎn) 錄 .在體 R 則 R 件下被掩蔽 , 同一 于 這 一 觀 點 , YY1的反 式 激 內(nèi)可能 許多 轉(zhuǎn) 錄 因子 成 功 地競 爭并 替代 了 活 區(qū) 域 用 一個 異 源反 式 激 活結(jié) 構(gòu) 域 代 替 , YY1 YY1因子 .正負調(diào) 控 因子 的競 爭 由這些 因子 的 仍 表現(xiàn) 為一個 阻遏 因子 .E A 同 YY1P 0 1 / 30發(fā) 相對 濃 度 而 導致 凈 阻 遏 或 凈激 活 活性 , 種競 生 作 用后 , 得 YY1產(chǎn)生 構(gòu)象 變 化

2、 , 反 式 激 這 使 其 爭方 式提供 了 基因表 達更加 嚴謹 的調(diào)控 0 . 動 蛋 白 基 因 表 達 受 到 YY1和 S F 的雙 重 調(diào) R 節(jié) 在 血 清 淀 粉 樣 蛋 白 A1啟 動 子 上 , Y1 1 Y 活 區(qū) 域暴 露 出來 , YY1即 由阻 遏 因子 而 轉(zhuǎn)換 為 NB 3蛋 白 . c結(jié) 合 于 Y 2 cmy Y1后 , 象 也 E1 一樣 , YYl 能發(fā)生 轉(zhuǎn)換 . A 使 功 結(jié) 語 類 似 于 cfs啟動子 的情 形 , o 骨骼肌 骨 一 肌 激 活 因子 0 . 同 NF B競爭 ; e珠 蛋 白基因啟 動子上 , YI X 在 一 Y 與 G

3、A A 1 爭 ; T 一 競 在 酪蛋 白上 , Y1 Y 同乳 自從 19 發(fā) 現(xiàn) 轉(zhuǎn) 錄 因子 YY1以來 , 9 1年 對 腺 因子 ( mmaygadfco , ma r ln atrMGF 競 爭 . 它 進行 了大 量的研 究 , 對其 結(jié)構(gòu) , 功能 以及兩 者 Y Y1參 與 發(fā) 育 調(diào) 控 的 另 一 個 原 因 是 基 因 關(guān) 系有 了更 加深入 的 了解 .但對 某些結(jié) 果 的解 的 甲基化 狀 態(tài) , 然 Y 雖 YI因子在 分 化及未 分化 的細 胞 中都表 達 , 但對 于其 結(jié) 合 基序 上 G 被 甲 釋 是 矛盾 的 和 推 1 性 的 , 蜊 相信 隨著

4、更 加 精細 研 究的進行 , 終會從 分子 水 平闡 明其作 用機 制 , 最 必將對 整個真 核 基因表 達調(diào) 控規(guī) 律的全 面理 解 基化 的反 應 元 件 , YY1親 和 力 顯著 下 降 , 著 隨 不同, YY1 合基 序 上 含 有 G 殘 基 , 殘 基越 結(jié) G 發(fā) 育 階段 胛 不同 , YI因子發(fā) 揮 作 用 的潛 能也 ' 有裨 益 . Y 大 參 考 文 獻 1 Shi e 1 Ce l 19 1; 7: 7 Y ta . l, 9 6 3 7 多, 甲基 化 程 度越 低 , 有 利于 YYl因子 的 結(jié) 越 合 , 之 , 會影 響到 YY1與其 結(jié) 合

5、 基 序 聞 的 反 則 相 互作 用口 . 可 以看 出 , 種機 制 包括 結(jié)合 位點 甲基化 , 各 Y Y1因子 對 D NA結(jié) 合 基 序的 親 和 力變 化 , 額 2 GuoB ta. e 1PNAS. 9 9 1 5 6 19 5; 2: 0 2 5 S ta a y m rhy K ta . CdlBi , 9 3I 5 6 2 t e tM o l 9 1 : 61 4 Ri, g sKJe tM o (elBil 1 9 ; 1I 7 5 ta. t :l o , 9 1 1 1 6 5 r ,At hio I PNAS 鯽 l; 8. 8 4 kK c snM l 8

6、9 0 外 因子 的加 入 , 可能 調(diào)節(jié) 了 Y YI因子 在 分化 和 發(fā)育上 的功 能多樣性 . 4 蛋 白 問相 互 作 用 及 YYl功 能 逆 轉(zhuǎn) . 6 Ha i a a e l N AS, 9 1; 8: 7 rh r a N ta P 1 5 8 9 95 7 Flna a 】 tatM CelBi19 2; 2: 8 a g n R e . l o t 9 1 3 8 Gua b r o A t a . o e t e 1 M lCt Bi I 19 2; 2: 2 9 兒 0 . 9 1 4 0 YY1同其 他反 式 作 用 因子 間競 爭 對 D NA 的 結(jié) 合是 其

7、 抑 制轉(zhuǎn) 錄 的 一個 機制 .研 究 發(fā)現(xiàn) , Y 在 與 DNA 直接 或 間接 結(jié)合 時均能 發(fā)揮 阻 Y1 遏轉(zhuǎn) 錄 作 用 , 能 源 于 與 其他 蛋 白發(fā) 生相 互作 可 用 .事實上 , YY1同其 他蛋 白發(fā) 生相 互作 用 是 9 Bu h e e s m y rS.JB . e ,1 9 2 0: 2 il Ch m 9 3, 7 30 15 i Ri g 0 g s KL t · o l Bi l 19 3, 4 e at M lC c · 93 1 7 87 e L 1 s rv s a a A .Ca a Nu l i 5 Re 1 h ia

8、t v l me K. c dc Ac d s,1 4I 2 99 2 5 5 1I 1 S ng rM F ta Ge e 1 3; 3 1 3 2 i e e l n t 99 1 5 8 1 Ch 3 ur S,Pe r g r y RP. c ec Acd st19 3 2 3 1 Nu ti is Re 9 ; 1 3 0 調(diào)節(jié) 其功能 的重 要機制 . 在腺病 毒 E A 不存 在 I 時, YY1抑制 轉(zhuǎn)錄 , 在 El 而 A存在 條件 下 , YY1 激 活 轉(zhuǎn)錄 , 來 YY1是 一 個轉(zhuǎn) 換 蛋 白 , 不 同 看 在 1 M a t nW R ta. ilCh m ,

9、9 4I 6 1 7 4 4 eel L a e 1J Bn e 1 8 9: 6 5 2 1 Pees B e 1JBltCh m , 9 3 2 8: 4 0 5 tr ta. o e 1 9 ; 6 3 3 1 M e盯 V S, O i Mo , 6 j Gt B t B ICd【Bi 【 1 4; 4: 2 o , 99 j 1 8 1 I SY ta . o 7 e 】 M lCd【B o【 1 9 1 6 5 i , 9 4I 4l 2 3 I Hy e De y h rRP e . u l i i s Re , 99 3 8 d Ru e 【 N c ec Acd s 1 5I

10、 2 4 57 4 1 I u R 札 a . c ec Ac 9 j 1 Nu l i MsRe , 9 2 2 5 s 15 4; 2: 4 3 條 件 下 , 有 不 同 的功 能 口 具 .現(xiàn) 已 知 , A 與 E1 YY1 生作用 必須通 過一 個 中聞蛋 白 P 0 , 發(fā) 3 0 即 先由 P 0 30與 YY1 成 一個 復 合物 , 由 E A 形 再 1 與 P 0 發(fā) 生聯(lián) 系來間 接影 響 YY1活性 口 .在 30 缺乏 E1 A條 件下 , Y1 為一個 轉(zhuǎn)錄抑 制 因子 Y 作 而結(jié) 合 在轉(zhuǎn) 錄起 始 點上 游 .盡 管 Y YI的 N 端 包含 有 一 個轉(zhuǎn)

11、 錄 激 活結(jié) 構(gòu)域 , 可 能 在抑 制 條 但 2 Ba A ta. 0 0 1JBi】Ch m , 9 3; 6 4 8 e 1 9 2 8:1 8 2 S t e t Na u 1 c o E ta . t , 9 l l; 5 4 3 4 21 2 Us e a A. e k T el l 9 7 l 5 2 h v Sh n C I, 9 4; 6: l 2 Sh in t v e t s i e 19 3I 6 1 8 3 r v s a a A ta . ce c , 9 2 2: 8 9 2 L eJ n tN u li 4 e S a . cecAcd s 1 9 2 9

12、5 isRe , 9 5| 3: 2 ·l · 5 I 帥 2 Le S 骯 a . 5 el 1PNAS.9 Ot 1 5 1 93 9 6 荔 , 唆 f , 阮力 19 年 98 第2 卷 1 維普資訊 國外壓學遺傳學分冊 簟1 期 28 G u co nL e 1 M d U Bi| 99 12 4 1 m i ta. o .1 2I 9 9 2 Ya S e l cecAc ,Re , 9 5 3 3 3 6 m R t|_ Nu li i d s 1 9 | 3 4 5 2 Na e i n M 五 G蚰 e v 1 9 7I 4 7 t s n StG l m

13、a B De , 9 3- 2 97 3 I tJ la. n sD , 9 5 9 1 8 9 上 Se IGe e : 1 9 I 1 8 f 卜一 胚胎 干 細胞 培 養(yǎng)特 性及 其分 化 能力 的研 究進 展 第二 軍 醫(yī)大 學生物 學教研 室 ( 海 2 0 3 上 o 4 3 提要 I 2 綜述 傅 繼 梁審校 轉(zhuǎn)基因動枷在現(xiàn)代 生命科 學研 覽的各個領(lǐng)域都有 著廣闊的應 用前 景 . 而通過胚胎 干如胞 基因打靶 逢徑 制鼻轉(zhuǎn)基 因小 鼠又是 目前社 普遍采用的方法之一 . 奉文 目的在 于對小鼠胚 胎干知胞 的培葬特性 , 向分化潛 能 多 及 體 外 誘 導 分化 方 面 的

14、 研 究現(xiàn) 狀 作一 蝣 速 . 胚 胎干 細胞 (e ro ise cl E mby nc tm e1.S 是 從者 床 前胚 胎 ( 3 5天 內(nèi)細 胞 群 (n e 孕 的 inr cl masI M 離得 到 的 , 在 體外 培養(yǎng) 的 el s,C 分 能 一 1 9品 系 , 要 原 因在 于 1 9品 系是 畸 胎 瘤 高 2 主 2 發(fā)小鼠, 自發(fā)率高 達 3 , 株較 為容 易 . 0 建 直接 從 早 期胚 胎 建 立 E S細胞 系的 方 法 有多 種 , E v n 和 Ka f n 采 用的方 法 是 : 小 鼠受 as uma 口所 在 種高度未分化的細胞.最早在

15、18 年 , 9 1 英國 劍 橋 大 學 的 E as和 Kaf nl 延 緩 著 床 vn uma _用 的胚 泡 , 國加 州大學 舊金 山分 校 的 Mat 美 ri 2 n 精 25 后切 除卵巢 并結(jié)合 激素誘 發(fā) 延緩胚 泡 .天 著 . 和體 外培養(yǎng) 這種 胚泡 , 果滋 養(yǎng)外胚 收集 結(jié) 層細胞 貼壁生 長 , I 細胞 發(fā)育 成 卵柱狀 結(jié) 而 CM 構(gòu) . 顯微鏡直 視下挑 出這 種柱狀 結(jié)構(gòu) . 在 胰酶 消 用條件培養(yǎng)基分別成功地分離 , 體外培養(yǎng) 了小 鼠的胚胎干 細胞 除 小 鼠外 . 還有 金黃地 鼠, 豬 和牛 等動物 的胚胎 干 細胞 系的建 立取得成 功

16、的 報道 . 5 T o o 口等從 恒 河猴 的囊 胚 中 19 年 h msn 9 分離 , 建立 了 E S細胞 株 . 這是 第一 個 建株 的靈 長類動物 的胚 胎干 細胞 . S細 胞系 的建立在 培 E 化 后繼續(xù)培養(yǎng), 傳代 . 小 鼠胚胎干 細胞 具有細 胞 的特征 : 大 , 核 胞 漿 少 , 外培 養(yǎng) 時 , 胞 排列 緊 密 . 體 細 呈集 落 形生 長, 在集 落邊緣 有 時可見有 少量 的 已分 化細 胞 , 形 態(tài) 為扁 平上 皮 細胞 樣 或 棱形 成纖 維 細 胞 樣 . E S細胞 體 外培 養(yǎng) 工作 要 求在 嚴 格 的 無菌 條 件 養(yǎng) 的細 胞與

17、個 體 發(fā)育 之 間 架起 了橋 梁 . 體 細 在 胞與 生殖 細胞之 間架起 了橋 梁 . 目前 , 已在個 它 體 發(fā)育 研 究 , 目的功 能 研 究 以及 制 備轉(zhuǎn) 基 因 基 動物等 許多 醫(yī)學研 究領(lǐng) 域 中發(fā) 揮著重 要作 用 . 一 下進行 , 所使用的器皿 , 試劑都必須是無菌且徹 底清 除去 垢劑 的.常 規(guī)培養(yǎng) 液為含 有 白血病細 胞抑 制 園子 ( I , 牛 血 清 , 一 氨酸 , 必 I F胎 L各 非 需 氨 基酸 ( AA丙 酮 酸 鹽 , NE , 琉 基 乙醇 , 各 氨 酰胺 以及 高濃度 葡 萄糖 的 D M1.其 中 . ME . 值得 注意 的是胎 牛血 清的濃 度及其 質(zhì)量 是影響 E S細 胞生 長狀況 的重 要 因素 , 高 濃度 的胎牛 過 血 清并 不利 于 E S細 胞 的生 長 , 同時 , 同批號 不 的胎 牛血 清對 促進 E S細 胞的 生長 繁殖 具 有 不 , 胚 胎干 細胞 的特性 研究 E S細 胞 顯著 區(qū)別 于其 它 細 胞系 的兩大 特 性在 于 : 先 . 直接 從 小鼠早期 胚胎 分離建 首 它是 系 的 , 以它 像胚 胎細 胞 那 樣具 有 發(fā)育 的全 能 所 性 , 常二 倍染色 體 , 廣泛 參與宿 主胚胎 各 含正 能 組 織器 官 的生 長 , 發(fā)