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1、地奧心血康對腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用研究(一) 作者:王學(xué)廷 孟麗娟 王淑英 田敏 李正斌 李艷 王建剛【摘要】 目的觀察地奧心血康(DAXXK)對腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。方法采用結(jié)扎大鼠雙側(cè)頸總動脈造成急性腦缺血模型,隨后再灌注。將大鼠隨機(jī)分為3組,即正常對照組、模型組(缺血再灌注組)、DAXXK組。以DAXXK 0.5%、0.2 ml/10 g連續(xù)灌胃7 d,第8天除正常對照組外,其余各組復(fù)制大鼠腦缺血再灌注模型,測定腦勻漿超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量和腦組織含水量。結(jié)果DAXXK組與模型組比較,腦勻漿SOD活性顯著增高
2、(P0.01),MDA含量顯著降低(P0.01),腦組織含水量治療組顯著降低(P0.01)。結(jié)論DAXXK對腦缺血再灌注損傷有保護(hù)作用。 【關(guān)鍵詞】 地奧心血康 腦缺血再灌注 超氧化物歧化酶 丙二醛 腦指數(shù)Abstract:ObjectiveTo study the protective effect of DAXXK on cerebral ischemia-reperfusion injury. MethodsThe animals (rats) were divided into three groups randomly: normal contrast group, cerebral
3、 ischemia-reperfusion injury group, DAXXK treatment group. The rats of DAXXK group were given DAXXK (0.5%,0.2 ml/10 g) by oral gavage once a day.SOD, MDA in brain and cerebral homogenate water content were determined. ResultsCompared with ceremal ischemia reperfusion group DAXXK could increase the a
4、ctivity of SOD and decrease the level of MDA in brain tissue and brain water content(p0.01).ConclusionDAXXK might have a protective effect against the damage of cerebral ischemia-reperfusion injury.Key words:DAXXK; Cerebral; Ischemia-reperfusion injury; SOD; MDA缺血性腦病是臨床常見病,致殘率高,因此,研究和開發(fā)高效低毒的治療缺血性腦病的
5、藥物具有重要的臨床意義。地奧心血康(DAXXK)是由中科院成都生物研究所從野生草本植物薯蕷科的黃山藥之根莖中提取的甾體總皂苷精制而成的純中藥制劑,主要含有8種甾體皂苷,其主要成分為原薯蕷皂苷,占藥物成分量的30%,研究表明其具有活血化淤、行氣止痛、宣痹通陽、補(bǔ)益氣血等功能,主要用于治療心絞痛、冠心病等心肌缺血疾病,臨床應(yīng)用廣泛。近年來臨床觀察到DAXXK對缺血性腦血管疾病有一定療效,對腦梗塞和椎基底動脈供血不足具有良好的改善椎基底動脈供血不足癥狀、促進(jìn)腦血液循環(huán)作用,有效率高達(dá)90%和100%1,但報(bào)道病例少且缺乏基礎(chǔ)研究。本實(shí)驗(yàn)通過DAXXK對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用的研究,為DAXX
6、K在腦血管疾病的臨床用藥提供理論依據(jù)。1 材料1.1 藥品與試劑DAXXK由成都地奧制藥集團(tuán)有限公司生產(chǎn),批號 2304057,在實(shí)驗(yàn)前用生理鹽水配制成0.5%的溶液備用。丙二醛(MDA)試劑盒(批號2004.0107)、超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒(批號2004.0506)、谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)試劑盒(批號2004.0311), 均由南京建成生物研究所提供。1.2 動物Wistar大鼠30只,體重200250 g,雌雄兼用。由河南省實(shí)驗(yàn)動物中心提供。合格證號0000831。2 方法2.1 動物分組及處理取大鼠隨機(jī)分為正常對照組、模型組、DAXXK組。DAXXK治療組用DAXXK
7、 0.5%、0.2 ml/10 g,連續(xù)7 d灌胃。2.2 手術(shù)方法各組大鼠以25%烏拉坦1.0 g·kg-1腹腔注射麻醉,頸部分離雙側(cè)頸總動脈和迷走神經(jīng),絲線結(jié)扎阻斷血流100 min,然后松結(jié),恢復(fù)血流灌注50 min,造成大鼠急性腦缺血再灌注模型2。斷頭處死動物迅速取半腦稱重(濕重),并置100烤箱烘干稱重,按下式計(jì)算大腦半球含水量:含水量(%)=(濕重-干重)/濕重×100%。取另半球至生理鹽水于冰浴中制備勻漿,采用羥胺氧化法測定SOD活性;硫代巴比妥酸法測定丙二醛(MDA)含量。2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SAS軟件包分析,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以±s表示,組間比較用t檢
8、驗(yàn)。3 結(jié)果地奧心血康對大鼠腦缺血再灌注損傷時(shí)腦含水量、腦勻漿SOD、MDA的影響見表1。表1 各組腦含水量、腦勻漿SOD、MDA數(shù)的比較4 討論缺血再灌注損傷是指機(jī)體器官缺血一定時(shí)間后再恢復(fù)血流灌注,組織損傷反而進(jìn)行性加重。腦組織缺血性損傷在臨床上比較常見,如急慢性腦血管意外等,可導(dǎo)致腦細(xì)胞水腫壞死。其作用機(jī)制與氧自由基大量產(chǎn)生、鈣超載及中性粒細(xì)胞聚集等有關(guān)3。腦缺血再灌注時(shí)因循環(huán)障礙及能量代謝紊亂等原因產(chǎn)生大量氧自由基,引起細(xì)胞功能紊亂,膜結(jié)構(gòu)和功能喪失,線粒體破壞,神經(jīng)元壞死;內(nèi)源性抗氧化系統(tǒng)即SOD活力下降,腦組織細(xì)胞生成大量的MDA4,使腦細(xì)胞水腫壞死。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,腦缺血再灌注損
9、傷時(shí)腦組織中SOD活性較正常組顯著降低,而MDA含量顯著升高;用地奧心血康(DAXXK)預(yù)處理后腦組織中SOD活性較正常組顯著升高,而MDA含量顯著降低,說明DAXXK可通過提高缺血時(shí)腦組織中SOD等抗氧化酶的活性,清除氧自由基,抑制腦組織局部脂質(zhì)過氧化反應(yīng),減輕氧自由基對腦組織的損害,從而對腦缺血損傷有保護(hù)作用5,6。在腦缺血早期,局部神經(jīng)元蛋白合成停止,神經(jīng)元發(fā)生去極化,Ca2+內(nèi)流增加,從而引起腦細(xì)胞內(nèi)鈣超載,并使Na+-K+-ATP酶的活性降低,導(dǎo)致氧自由基顯著增多。而缺血再灌注后加劇大量Ca2+內(nèi)流,細(xì)胞外Ca2+濃度降低,腦血管阻力增加,進(jìn)一步加重腦水腫及繼發(fā)的腦血管損傷。實(shí)驗(yàn)結(jié)果
10、表明,DAXXK可顯著降低腦含水量,說明DAXXK可明顯減輕腦水腫,可能是通過抑制細(xì)胞內(nèi)鈣超載,抑制Ca2+在腦組織內(nèi)聚集,改善腦的循環(huán)功能及能量代謝過程,提高Na+-K+-ATP酶的活性,保證腦內(nèi)離子穩(wěn)定,防止腦缺血引起的損傷,具有鈣離子拮抗作用7。綜上所述,DAXXK在腦缺血再灌注損傷過程中,通過清除氧自由基、抗氧化、減少脂質(zhì)過氧化、阻斷Ca2+內(nèi)流等作用,來減輕腦細(xì)胞的損傷,對腦組織細(xì)胞起保護(hù)作用。這為地奧心血康在缺血性腦病的臨床用藥提供了理論依據(jù)?!緟⒖嘉墨I(xiàn)】1 楊雪潔,楊迎暴,羅景慧,等. 地奧心血康的藥理與臨床J.山東醫(yī)藥工業(yè),2003,22(2):30.2 孔曉龍,蔣偉哲. 龍眼丹參對腦缺血再灌注所致?lián)p傷的保護(hù)作用J.廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2004,21(3):356.3 趙 明,王洪新. 腦缺血再灌注損傷機(jī)理及藥物保護(hù)的研究進(jìn)展J. 錦州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2002,23(5):72.4 梁 卉. 丹參抗腦缺氧缺血/再灌注損傷機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展J. 遼寧藥物與臨床,2004,7(2):103.5 任 宏,程建萍,
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