川芎嗪聯(lián)合尼莫地平對(duì)腦缺血再灌注皮質(zhì)神經(jīng)元膜性結(jié)構(gòu)的保護(hù)作用

1、川芎嗪聯(lián)合尼莫地平對(duì)腦缺血再灌注皮質(zhì)神經(jīng)元膜性結(jié)構(gòu)的保護(hù)作用         作者：張輝 董建峰 李衛(wèi)東 趙秋振 祝生源 【摘要】 目的探討川芎嗪聯(lián)合尼莫地平治療腦缺血再灌注損傷的機(jī)制。方法采用Bannister's方法復(fù)制大鼠腦缺血再灌注動(dòng)物模型，利用川芎嗪或川芎嗪聯(lián)合尼莫地平治療；在透射電鏡下觀察皮質(zhì)神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果模型組神經(jīng)元水              

2、                作者：張輝 董建峰 李衛(wèi)東 趙秋振 祝生源 【摘要】  目的探討川芎嗪聯(lián)合尼莫地平治療腦缺血再灌注損傷的機(jī)制。方法采用Bannister's方法復(fù)制大鼠腦缺血再灌注動(dòng)物模型，利用川芎嗪或川芎嗪聯(lián)合尼莫地平治療；在透射電鏡下觀察皮質(zhì)神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果模型組神經(jīng)元水腫，質(zhì)膜、線粒體膜破裂；溶酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體破壞。治療組神經(jīng)元質(zhì)膜、核膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及線粒體損傷減輕，川芎嗪

3、聯(lián)合尼莫地平治療效果更佳。結(jié)論川芎嗪及川芎嗪聯(lián)合尼莫地平對(duì)腦缺血再灌注神經(jīng)元有明顯的保護(hù)作用。 【關(guān)鍵詞】  腦缺血再灌注 川芎嗪 尼莫地平 神經(jīng)元 膜性結(jié)構(gòu)Abstract:ObjectiveTo indentify the treatment mechanism of ligustrazine with nimodipine on cerebral ischemia reperfusion (CIR).  MethodsThe rats were reconstructed model of CIR, used ligustrazine unite nimodipine

4、 treatment. The change of neuron ulstructrure were observed by transmission electron microscope.ResultsIn model group, neurons were dropsying. The membrane of cell and mitochondria were destroyed , the lysosome and endoplasmic reticulum and golgi complex were broken. The injury of plasma membrane an

5、d nuclear membrane and endoplasmic reticulam and mitochondria were lightened in ligustrazin treat group. The effect of treatment were the best that ligustrazine with nimodipine were used.ConclusionThe protective effects of ligustrazine with nimodipine are sigificant on membrane structure in CIR.Key

6、words:Cerebral;  Ischemia reperfusion (CIR);  Ligustrazine;  Nimodipine;  Neuron;  Membrane structure腦缺血再灌注(Cerebral Ischemia reperfusion , CIR) 損傷是臨床常見(jiàn)的腦病之一，其發(fā)病率、致殘率和死亡率均較高，因此研究其病理機(jī)制和治療措施，也是當(dāng)前醫(yī)學(xué)界關(guān)心的重要課題1,2。本實(shí)驗(yàn)采用Bannister's3頸動(dòng)脈血引流技術(shù)復(fù)制腦缺血再灌注動(dòng)物模型，然后經(jīng)川芎嗪聯(lián)合尼莫地平進(jìn)行治療，在電鏡下重點(diǎn)觀察皮

7、質(zhì)神經(jīng)元膜性結(jié)構(gòu)的變化，以探討中西藥結(jié)合治療CIR的效果和機(jī)制。1  材料與方法1.1  動(dòng)物分組及給藥劑量利用清潔級(jí)成年Wistar大鼠40只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、治療1組（川芎嗪腹腔注射100 mg/kg）、治療2組（川芎嗪腹腔注射100 mg/kg+尼莫地平1 ml/k g靜滴）。川芎嗪注射液：北京永康藥業(yè)生產(chǎn)，40 mg/2ml；尼莫地平：保定三九濟(jì)山藥業(yè)生產(chǎn)，1 mg/ ml。1.2  復(fù)制動(dòng)物模型參考Bannister's方法將大鼠戊巴比妥鈉麻醉（50 mg/100 g），仰臥位固定大鼠、常規(guī)消毒、頸正中切開(kāi)皮膚、暴露和分離左右頸總

8、動(dòng)脈，自右總動(dòng)脈遠(yuǎn)端逆行插管（并結(jié)扎近心端），將插管近心端插入右頸外靜脈，然后用動(dòng)脈夾夾閉左頸總動(dòng)脈，使椎動(dòng)脈進(jìn)入腦中血液經(jīng)引流管進(jìn)入右頸外靜脈中，從而造成腦缺血。自腦缺血開(kāi)始腹腔注射川芎嗪或川芎嗪+尼莫地平（靜滴）。90 min之后夾閉動(dòng)、靜脈之間的引流管，開(kāi)放左頸總動(dòng)脈夾，導(dǎo)致腦缺血再灌注。再灌注24 h分別麻醉和處死動(dòng)物，取腦。1.3  切片與染色漏斗前后緣將腦組織冠狀切開(kāi)，在額頂葉取大腦皮質(zhì)數(shù)塊（1 mm×1 mm×1 mm），用2.5%戊二醛固定。常規(guī)梯度丙酮脫水，Epon812浸透和包埋。LKB4型超薄切片機(jī)切片，厚度4050 nm，撈至銅網(wǎng)上。常規(guī)醋

9、酸雙氧鈾-枸櫞酸鉛染色。JEM100CXII型透射電鏡下觀察。2  結(jié)果正常對(duì)照組皮質(zhì)神經(jīng)元，胞質(zhì)中有豐富的核糖體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)；形狀不一的管狀或泡狀滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)；線粒體形狀與大小不一，其嵴長(zhǎng)短不等；高爾基氏體扁囊與小泡清晰可見(jiàn)。質(zhì)膜與核膜完整清晰。核周隙寬窄均勻，核孔豐富，核內(nèi)常染色質(zhì)呈絮狀；異染色質(zhì)較少，呈高電子密度斑塊狀。模型組神經(jīng)元，核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體和高爾基體明顯減少，甚至消失；質(zhì)膜斷裂，細(xì)胞器外溢。輕者線粒體水腫，嵴減少或消失。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫顆粒，高爾基氏體扁囊擴(kuò)張，生成面與成熟面無(wú)法區(qū)分。溶酶體減少，核膜結(jié)構(gòu)模糊，核周隙寬窄不均或消失。核內(nèi)異染色質(zhì)增多。川芎嗪治療組神經(jīng)元水腫減輕，細(xì)胞器相對(duì)增多，但仍有線粒體水腫，局部線粒體膜雙層結(jié)構(gòu)消失，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)仍較少，附著核糖體較少。高爾基氏體生成泡與成熟泡不易見(jiàn)到。胞質(zhì)中微管消失，核膜仍有斷裂現(xiàn)象，核孔較少，核內(nèi)常染色質(zhì)較少。川芎嗪加尼莫地平治療組神經(jīng)元損傷較輕，胞質(zhì)水腫液較少，胞膜大部分完整，偶有小的斷裂處。線粒體不僅數(shù)目較模型組明顯增多，而且線粒體水腫者較少見(jiàn)，膜斷裂者不易見(jiàn)到；線粒體嵴出現(xiàn)。溶酶體