維生素B1片劑的含量測定

1、維生素B1片劑的含量測定一、實驗目的與要求1. 掌握差示分光光度法消除可能存在干擾的原理；2. 熟悉差示分光光度法的基本測定方法；3. 了解維生素B1的結構與性質；4. 熟悉維生素B1的檢測原理及操作方法。二、實驗原理1. 結構與性質維生素B1由嘧啶環(huán)和噻唑環(huán)通過亞甲基結合而成的一種B族維生素，為白色結晶或結晶性粉末；溶于水，微溶于乙醇、氯仿，有微弱的特臭，味苦，有引濕性，露置在空氣中，易吸收水分。在堿性溶液中容易分解變質。它的生理功能是能增進食欲，維持神經正?；顒拥龋鄙偎鼤媚_氣病、神經性皮炎等。成人每天需攝入2 mg。它廣泛存在于米糠、蛋黃、牛奶、番茄等食物中，已能由人工合成。2. 測定

2、原理差示分光光度法（簡稱A法），即在測定時，取兩份相等的供試溶液，經不同的處理（如：調節(jié)不同的pH值或加入不同的反應試劑）后，一份置樣品池中，另一份置參比池中，于適當?shù)牟ㄩL處，測其吸光度的差值（A值），根據(jù)標準曲線或值計算出組分的含量。該法既保留了通常的分光光度法簡易快速、直接讀數(shù)的優(yōu)點，又無需事先對樣品進行分離提純，并能消除干擾。本實驗根據(jù)維生素B1的紫外吸收峰隨溶液pH值的變化而變化，pH=2（0.1 mol/LHCl）時，最大吸收波長在246 nm處，吸收系數(shù)為421；pH=7（磷酸鹽緩沖溶液）時，有兩個吸收峰，在232233 nm處，吸收系數(shù)為345；在266 nm處吸收系數(shù)為255。

3、在兩種不同的pH介質中，維生素B1的紫外吸收不受其它共存物的影響，即光譜行為不發(fā)生變化，從而消除了共存物的干擾。因此采用差示分光光度法測定其含量，可消除背景和輔料的干擾。三、實驗材料、試劑與儀器原料名稱規(guī) 格用 量維生素B1AR100 mg鹽酸溶液pH = 適量磷酸鹽緩沖液pH = 適量維生素B1片普通市售20片移液管，容量瓶100 mL（15個），50 mL（1個），紫外光譜儀，研缽。四、實驗方法與步驟1. 標準貯備液的配制精密稱取維生素B1約100 mg，置100 mL量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液（1 mg/ mL）。2. 測定波長的選擇精密量取維生素B1貯備液2.0 m

4、L二份，分別置于兩個100 mL容量瓶中，一份用磷酸鹽緩沖液（）稀釋至刻度，搖勻，得溶液；另一份用鹽酸液（pH=）稀釋至刻度（濃度為），搖勻，得溶液 。分別以相應溶劑為空白，在220 nm 280 nm范圍內測定各自的紫外吸收光譜。再將溶液放于參比池，溶液放于樣品池，在同樣光譜范圍內測定差示吸收光譜（見圖1）。在差示光譜圖上尋找有最大差示吸收值（A）的波長，即為測定波長（247 nm）。3. 標準曲線的繪制精密量取維生素B1貯備液、3.0 mL各二份，分別置100 mL量瓶中。一份用磷酸鹽緩沖液（）稀釋至刻度；另一份用鹽酸液（pH=）稀釋至刻度，搖勻，得五組濃度相同、pH不同的溶液。在上述五組

5、不同濃度下，以緩沖液配制的溶液為參比，在測定波長（247 nm）處分別測定對應的鹽酸液的差示吸收值（A）。以濃度C為橫坐標，以差示吸收值A為縱坐標，繪制標準曲線。4. 維生素B1片的測定取維生素B1 20片，精密稱定，研細。精密稱取適量粉末（約相當于維生素B1 50 mg），置50 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，過濾，棄去初濾液。精密量取續(xù)濾液2.0 mL二份，分別置100 mL量瓶中，分別用磷酸鹽緩沖液和鹽酸液稀釋至刻度，搖勻。將前者置參比池中，后者置樣品池中。在247 nm波長處測定差示吸收值。由標準曲線求得維生素B1濃度，計算維生素B1片含量（標示量的百分數(shù)）。五、注意事項1. 緩沖液（pH= ）：取磷酸二氫鉀 g，加氫氧化鈉（ mol/L） mL，用水稀釋至100 mL，即得。2. 鹽酸液（pH =）：取鹽酸9 mL，加水稀釋成100 mL。取10mL，加水稀釋成1000mL，即得。3. 所給測定波長僅供參考，可照“測定波長的選擇”項下自行測定。4. 本實驗線性范圍為1030 g/ mL，其回歸方程：A，r ?！舅伎碱}】1