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文檔簡介
1、群體中的基因型頻率群體中的基因型頻率與基因頻率的分析與基因頻率的分析實實 驗驗 目目 的的l掌握掌握ABO血型的鑒定方法,分析其決定基血型的鑒定方法,分析其決定基因在人群中的分布。因在人群中的分布。l通過對人群中通過對人群中PTC嘗味能力的檢測及相關基嘗味能力的檢測及相關基因頻率的分析,了解基因在群體水平上傳遞因頻率的分析,了解基因在群體水平上傳遞的規(guī)律。的規(guī)律。l掌握遺傳平衡定律,了解改變平衡的因素及掌握遺傳平衡定律,了解改變平衡的因素及作用。作用。l人群中人群中ABO血型分布的分析血型分布的分析l人群中人群中PTC味盲基因頻率分析味盲基因頻率分析實實 驗驗 內(nèi)內(nèi) 容容(一)(一)ABO血型
2、遺傳原理血型遺傳原理l1900年年Karl Landsteiner博士報道人類博士報道人類ABO血型系血型系統(tǒng)。統(tǒng)。ABO血型的劃分基礎為紅血球細胞膜上抗原存血型的劃分基礎為紅血球細胞膜上抗原存在的性質(zhì)。在的性質(zhì)。l從遺傳上來看,紅血球抗原類型的差別在其糖基上。從遺傳上來看,紅血球抗原類型的差別在其糖基上。這是由相應的基因決定的,即位于人類第九染色體這是由相應的基因決定的,即位于人類第九染色體上的上的3個復等位基因個復等位基因IA、IB 和和 i 決定的。決定的。 IA、IB基因基因間為并顯性,而間為并顯性,而i對對IA、IB為隱性。為隱性。 一、人群中一、人群中ABO血型分布的分析血型分布的
3、分析 ABO血型抗原、抗體特性血型抗原、抗體特性血型血型基因型基因型細胞抗原細胞抗原血清抗體血清抗體AIAIA、IAiA抗抗BBIBIB 、IBiB抗抗AABIAIBA B_Oii_抗抗A 抗抗B(二)實驗材料(二)實驗材料l 凹面載玻片凹面載玻片l 一次性刺血針一次性刺血針l 紅血球吸管紅血球吸管l 酒精棉球酒精棉球l 生理鹽水生理鹽水l 標準血清標準血清l 牙簽牙簽(三)實驗步驟(三)實驗步驟1. 用酒精棉球消毒采血手指、采血針、血球吸管。用酒精棉球消毒采血手指、采血針、血球吸管。2. 用刺血針刺破手指,然后用紅血球吸管吸取用刺血針刺破手指,然后用紅血球吸管吸取0.02ml血液,移入血液,
4、移入指管后,取指管后,取0.5ml生理鹽水注入小指管并混勻。生理鹽水注入小指管并混勻。3. 分置于分置于2個凹面載玻片的凹面內(nèi)。個凹面載玻片的凹面內(nèi)。 注意:請立即清洗紅血球吸管和小指管,以防血凝結堵塞。注意:請立即清洗紅血球吸管和小指管,以防血凝結堵塞。4. 在載玻片的左、右上角標好在載玻片的左、右上角標好“A”、“B”字樣,分別滴入抗字樣,分別滴入抗A()、抗抗B()標準血清標準血清1滴,用牙簽攪拌,靜置,觀察。滴,用牙簽攪拌,靜置,觀察。5. 觀察判定:如果紅細胞聚集成團,雖經(jīng)振蕩或輕輕攪動亦不散開,觀察判定:如果紅細胞聚集成團,雖經(jīng)振蕩或輕輕攪動亦不散開,為為“凝集凝集”現(xiàn)象;紅細胞散
5、在均勻分布或雖似成團,一經(jīng)振蕩即現(xiàn)象;紅細胞散在均勻分布或雖似成團,一經(jīng)振蕩即散開,則為未凝集或散開,則為未凝集或“假凝集假凝集”。判定標準判定標準 A B AB O抗抗A血清血清() + - + -抗抗B血清血清() - + + -+ 反應;反應;- 不反應不反應 (四)實(四)實 驗驗 結結 果果 統(tǒng)計全組各血型統(tǒng)計全組各血型人數(shù)所占比例,人數(shù)所占比例,和其他組數(shù)據(jù)相和其他組數(shù)據(jù)相加,計算加,計算 IA、IB 和和i的基因頻率的基因頻率人數(shù)人數(shù)A AB BABABO O1 1組組2 2組組3 3組組4 4組組5 5組組6 6組組7 7組組總數(shù)總數(shù)(一)(一)PTC味盲實驗原理味盲實驗原理
6、l苯硫脲(苯硫脲(PTC),又稱苯基硫代碳酰二胺,是一種白色結晶狀有機化,又稱苯基硫代碳酰二胺,是一種白色結晶狀有機化合物。因具有硫胺基團合物。因具有硫胺基團 N-C=S 而具有苦味,不同的人對其溶液苦而具有苦味,不同的人對其溶液苦味有不同的嘗味能力。該嘗味能力是由一對等位基(味有不同的嘗味能力。該嘗味能力是由一對等位基(Tt)所決定,)所決定,其中其中T對對t為不完全顯性。此性狀按照孟德爾方式遺傳。為不完全顯性。此性狀按照孟德爾方式遺傳。l正常嘗味者的基因型為正常嘗味者的基因型為TT,能嘗出,能嘗出 1/7500001/6000000的的 PTC 溶液的苦味;具有溶液的苦味;具有Tt基因型的
7、人嘗味能力較低,只能嘗出基因型的人嘗味能力較低,只能嘗出1/480000 1/380000 的的PTC溶液的苦味;而基因型為溶液的苦味;而基因型為 tt 的人的人只能嘗出只能嘗出 1/24000 以上以上PTC濃度的苦味。有些個體甚至濃度的苦味。有些個體甚至 PTC 結結晶也嘗不出苦味,這一類個體在遺傳學上稱為晶也嘗不出苦味,這一類個體在遺傳學上稱為PTC味盲味盲。二、人群中二、人群中 PTC味盲基因頻率分析味盲基因頻率分析 編號編號濃濃 度度基因型基因型1號號1 / 750tt2號號1 /1500tt3號號1 / 3000tt4號號1 / 6000tt5號號1 / 12000tt6號號1 /
8、 24000tt7號號1 / 48000Tt8號號1 / 96000Tt 編號編號濃濃 度度基因型基因型9號號1 / 192 000Tt10號號1 / 380 000Tt11號號1 / 750 000TT12號號1 / 1 500 000TT13號號1 / 3 000 000TT14號號1 / 6 000 000TT15號號蒸餾水蒸餾水 (二)實驗步驟(二)實驗步驟 1、受試者坐于椅子上,仰頭張口。測試者用滴管滴、受試者坐于椅子上,仰頭張口。測試者用滴管滴23滴滴14號液號液于受試者舌根部,令其徐徐咽下品味,然后再用蒸餾水做同樣的于受試者舌根部,令其徐徐咽下品味,然后再用蒸餾水做同樣的實驗。實
9、驗。 注意:為避免心理因素的干擾,測試時受試者需背對試劑架,測注意:為避免心理因素的干擾,測試時受試者需背對試劑架,測試者必須將試劑瓶標簽掩蓋與手掌中。試者必須將試劑瓶標簽掩蓋與手掌中。2、詢問受試者能否鑒別此兩種溶液的味道。若不能鑒別或鑒別不、詢問受試者能否鑒別此兩種溶液的味道。若不能鑒別或鑒別不準,則依次用準,則依次用13號、號、12號溶液重復實驗,直至能鑒別出號溶液重復實驗,直至能鑒別出PTC的的苦味為止??辔稙橹埂?、當受試者鑒別出某號溶液時,應當用此號溶液與蒸餾水交替測、當受試者鑒別出某號溶液時,應當用此號溶液與蒸餾水交替測試,重復三次,三次結果相同時,才可采信。試,重復三次,三次結果相同時,才可采信。 (三)實驗結果(三)實驗結果 根據(jù)受試者最初覺根據(jù)受試者最初覺察苦味溶液的編號,察苦味溶液的編號,而查出相應的基因型。而查出相應的基因型。詳細記錄試驗結果,詳細記錄試驗結果,填入表中。各組數(shù)據(jù)填入表中。各組數(shù)據(jù)相加計算各基因型頻相加計算各基因型頻率與基因的頻率。率與基因的頻率。人數(shù)人數(shù)TTTttt1組組2組組3組組4組組5組組6組組7組組總數(shù)總數(shù) 實驗作業(yè)實驗作業(yè)1、統(tǒng)計全年級的、統(tǒng)計全年級的ABO血型頻率,求出血型頻率,求出IA、IB 和和 i 的基的基因頻率,并判定該群體的因頻率,并判定該群體的ABO血型血型各基因型頻率是否各基因型頻率是否符合符合
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