凝血四項(xiàng)檢查

1、凝血四項(xiàng)檢查APTT【檢驗(yàn)原理】37下，在待檢血漿中加入APTT試劑，即以腦磷脂作為血小板的替代物加入貧血小板血漿中，在Ca2+的參與下，使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白凝塊，測(cè)定凝固所需要的時(shí)間，即為待測(cè)血漿的APTT。【樣本制備】1.采血與抗凝：采血后立即與抗凝劑充分混合，血液與抗凝劑（0.109mmol/L枸櫞酸鈉）比例為9：1。2.離心：抗凝血以2500xg離心10分鐘，用微量移液器吸出待測(cè)血漿。3.保存：血漿樣本應(yīng)立即測(cè)試。2224條件下保存，應(yīng)2小時(shí)內(nèi)測(cè)定，24條件下保存，應(yīng)3小時(shí)內(nèi)測(cè)定?！緳z驗(yàn)方法】1.儀器預(yù)熱：開(kāi)機(jī)，按照儀器使用說(shuō)明書(shū)預(yù)熱，達(dá)到要求穩(wěn)定溫度，進(jìn)入正常工作狀態(tài)。2.試劑

2、配制：嚴(yán)格按照標(biāo)示量加入蒸餾水復(fù)溶試劑，將試劑瓶直立在1825中靜置30分鐘，使用前輕輕旋轉(zhuǎn)試劑瓶至完全溶解，勿劇烈振搖。氯化鈣用前應(yīng)放入儀器37預(yù)溫槽。3.正常質(zhì)控血漿制備：按照質(zhì)控血漿試劑盒使用說(shuō)明書(shū)。4.測(cè)定：以半自動(dòng)高性能血凝儀為例：將測(cè)試杯置于預(yù)溫槽中，用加珠器在每個(gè)測(cè)試杯中放一粒鋼珠。試劑放相應(yīng)位置，37預(yù)溫，需混勻放攪拌子。將待測(cè)血漿100ml（患畜或者質(zhì)控血漿）加入測(cè)試杯，再將APTT試劑100ml加入測(cè)試杯，混勻，啟動(dòng)預(yù)溫時(shí)間計(jì)時(shí)，37，5分鐘，將測(cè)試杯從預(yù)溫槽移至測(cè)試槽。使用聯(lián)動(dòng)加樣器加入氯化鈣100ml，儀器自動(dòng)啟動(dòng)計(jì)時(shí)器開(kāi)始計(jì)時(shí)并自動(dòng)打印結(jié)果?！菊Ｖ祬⒖挤秶咳?0

3、.018.0秒，建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的正常值參考范圍?！緳z驗(yàn)結(jié)果解釋】APTT延長(zhǎng)見(jiàn)于、血漿水平減低。APTT縮短見(jiàn)于高凝狀態(tài)、血栓性疾病?？诜茉兴帟?huì)影響檢測(cè)結(jié)果。PT【檢驗(yàn)原理】在待檢血漿中加入過(guò)量的組織凝血活酶和鈣離子，使凝血酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟?，凝血酶使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白凝塊，測(cè)定凝固所需要的時(shí)間，即為待測(cè)血漿的凝血酶原時(shí)間（PT）。PT與血漿中的外源性凝血因子含量呈負(fù)相關(guān)?！緲颖局苽洹?.采血與抗凝：采血后立即與抗凝劑充分混合，血液與抗凝劑（0.109mmol/L枸櫞酸鈉）比例為9：1。草酸鈉、EDTA、肝素不適于作抗凝劑。2.離心：抗凝血以2500xg離心10分鐘。3.保存：血漿

4、樣本應(yīng)立即測(cè)試。2224條件下保存，應(yīng)2小時(shí)內(nèi)測(cè)定，24條件下保存，應(yīng)3小時(shí)內(nèi)測(cè)定。如不能立即測(cè)試，應(yīng)采樣后60分鐘內(nèi)分離血漿?！緳z驗(yàn)方法】1.儀器預(yù)熱：開(kāi)機(jī)，按照儀器使用說(shuō)明書(shū)預(yù)熱，進(jìn)入正常工作狀態(tài)。2.試劑配制：嚴(yán)格按照標(biāo)示量加入蒸餾水復(fù)溶試劑，將試劑瓶直立在室溫中靜置30分鐘，使用前輕輕旋轉(zhuǎn)試劑瓶至完全溶解，勿劇烈振搖。3.正常質(zhì)控血漿制備：按照質(zhì)控血漿試劑盒使用說(shuō)明書(shū)。4.測(cè)定：以半自動(dòng)高性能血凝儀為例：將測(cè)試杯置于預(yù)溫槽中，用加珠器在每個(gè)測(cè)試杯中放一粒鋼珠。試劑放相應(yīng)位置，37C預(yù)溫，混勻需放攪拌子。將待測(cè)血漿100ml（患畜或者質(zhì)控血漿）加入測(cè)試杯。啟動(dòng)預(yù)溫時(shí)間計(jì)時(shí)，37，3分鐘，

5、將測(cè)試杯從預(yù)溫槽中移至測(cè)試槽中。使用聯(lián)動(dòng)加樣器加入試劑100ml，儀器自動(dòng)啟動(dòng)計(jì)時(shí)器開(kāi)始計(jì)時(shí)進(jìn)行測(cè)試。記錄結(jié)果。【正常值參考范圍】犬：5.015.0秒，建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的正常值參考范圍。質(zhì)量控制程序：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立質(zhì)量控制程序，使用質(zhì)控血漿測(cè)定。FIB【檢驗(yàn)原理】在待檢稀釋血漿中加入高濃度的凝血酶，使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白凝塊，測(cè)定凝固所需要的時(shí)間，在以參比血漿制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得待測(cè)血漿的纖維蛋白原濃度，即為待測(cè)血漿的纖維蛋白原（FIB）含量。【樣本制備】1.采血與抗凝：采血后立即與抗凝劑充分混合，血液與抗凝劑（0.109mmol/L枸櫞酸鈉）比例為9：1。2.離心：抗凝血以2500xg

6、離心10分鐘。3.稀釋：用咪唑緩沖液按照1：5比例稀釋血漿。4.保存：血漿樣本應(yīng)立即測(cè)試。2224條件下保存，應(yīng)2小時(shí)內(nèi)測(cè)定，24條件下保存，應(yīng)3小時(shí)內(nèi)測(cè)定。【檢驗(yàn)方法】1.儀器預(yù)熱：開(kāi)機(jī)，按照儀器使用說(shuō)明書(shū)預(yù)熱，進(jìn)入正常工作狀態(tài)。2.試劑配制：嚴(yán)格按照標(biāo)示量加入蒸餾水復(fù)溶試劑，并放室溫靜置30分鐘，使用前輕輕旋轉(zhuǎn)試劑瓶至完全溶解，勿劇烈振搖。3.定標(biāo)血漿制備：以蒸餾水復(fù)溶血漿，加入量標(biāo)識(shí)在試劑瓶上。正常質(zhì)控血漿制備：按照質(zhì)控血漿試劑盒使用說(shuō)明書(shū)。4.FIB標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：以半自動(dòng)血凝儀為例：按下表稀釋標(biāo)準(zhǔn)血漿（假設(shè)FIB標(biāo)定液濃度2.57g/L）：比例標(biāo)準(zhǔn)血漿（ml）咪唑緩沖液（ml）總體積（

7、ml）FIB濃度（g/L）1:51004005005.141:10504505002.571721:20305706001.281:40207808000.64每份稀釋血漿宜重復(fù)測(cè)試4次（至少測(cè)定2次），求秒數(shù)均值。進(jìn)入FIB標(biāo)定菜單，選錄入，將不同稀釋度血漿凝固時(shí)間均值和FIB濃度輸入儀器。選計(jì)算，按2次確認(rèn)，標(biāo)準(zhǔn)曲線輸入完成并打印。則檢測(cè)樣本時(shí)，同時(shí)報(bào)告秒數(shù)和g/L。更換試劑批號(hào)時(shí)應(yīng)重做標(biāo)準(zhǔn)曲線。5.測(cè)定：以半自動(dòng)高性能血凝儀為例：將測(cè)試杯置于預(yù)溫槽中，用加珠器在測(cè)試杯中放一粒鋼珠。將5倍稀釋血漿100ml（患畜或者質(zhì)控血漿）加入測(cè)試杯，37C預(yù)溫3分鐘，將測(cè)試杯

8、移至測(cè)試槽。用聯(lián)動(dòng)加樣器加入已預(yù)溫的凝血酶試劑100ml，啟動(dòng)計(jì)時(shí)器，儀器記錄時(shí)間并自動(dòng)打印結(jié)果?！菊Ｖ祬⒖挤秶咳?.014.0秒。建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的正常值參考范圍。TT【檢驗(yàn)原理】在待檢血漿中加入標(biāo)定的凝血酶，使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白凝塊，測(cè)定凝固所需要的時(shí)間，即為待測(cè)血漿的凝血酶時(shí)間（TT）。【樣本制備】1.采血與抗凝：采血后立即與抗凝劑充分混合，血液與抗凝劑（0.109mmol/L枸櫞酸鈉）比例為9：1。2.離心：抗凝血以2500xg離心10分鐘。3.保存：血漿樣本應(yīng)立即測(cè)試。2224條件下保存，應(yīng)2小時(shí)內(nèi)測(cè)定，24條件下保存，應(yīng)3小時(shí)內(nèi)測(cè)定?！緳z驗(yàn)方法】1.儀器預(yù)熱：開(kāi)機(jī)，按照儀器使用說(shuō)明書(shū)預(yù)熱，達(dá)到要求穩(wěn)定溫度，進(jìn)入正常工作狀態(tài)。2.試劑配制：嚴(yán)格按照標(biāo)示量加入蒸餾水復(fù)溶試劑，將試劑瓶直立在室溫中靜置30分鐘，使用前輕輕旋轉(zhuǎn)試劑瓶至完全溶解，勿劇烈振搖。3.正常質(zhì)控血漿制備：按照質(zhì)控血漿試劑盒使用說(shuō)明書(shū)。4.測(cè)定：以半自動(dòng)高性能血凝儀為例：將測(cè)試杯置于預(yù)溫槽中，用加珠器在每個(gè)測(cè)試杯中放一粒鋼珠。將待測(cè)血漿100ml（患畜或者質(zhì)控血漿）加入測(cè)試杯，啟動(dòng)預(yù)溫時(shí)間計(jì)