第6課時(shí)土壤中尿素細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)

1、第6課時(shí)土壤中分解尿素細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)目標(biāo)導(dǎo)航1.研究培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用。2.進(jìn)行微生物數(shù)量的測(cè)定。一、研究思路 1篩選菌株(1)實(shí)驗(yàn)室中微生物篩選的原理人為提供有利于_生長(zhǎng)的條件(包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等)，同時(shí)_或_其他微生物生長(zhǎng)。(2)選擇培養(yǎng)基在微生物學(xué)中，將允許_種類(lèi)的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)_或_其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱(chēng)做選擇培養(yǎng)基。(3)分離分解尿素的細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基在該培養(yǎng)基配方中，為微生物的生長(zhǎng)提供碳源的是_，提供氮源的是_，瓊脂的作用是凝固劑。該培養(yǎng)基對(duì)微生物具有選擇作用。其選擇機(jī)制是_才能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈凅w內(nèi)能合成_，將尿素分解

2、的反應(yīng)式是_。Taq細(xì)菌能忍受93左右的高溫，是在美國(guó)黃石國(guó)家公園的一個(gè)熱泉中發(fā)現(xiàn)的，這說(shuō)明，在尋找目的菌株時(shí)，要根據(jù)_。2統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法(1)稀釋涂布平板法(也叫活菌計(jì)數(shù)法)原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的_，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的_，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。操作第一，設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。將待測(cè)樣品經(jīng)一系列10倍稀釋?zhuān)缓筮x擇_稀釋度的菌液，分別取0.1 mL接種到已制備好的平板上，然后用無(wú)菌涂布器將菌液涂布整個(gè)平板表面，放在適宜的溫度下培養(yǎng)并計(jì)算菌落數(shù)。為使結(jié)果接近真實(shí)值，可將同一稀釋度涂布到三個(gè)或三個(gè)以上的平板上，培養(yǎng)

3、并計(jì)算出_。第二，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在_的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，若設(shè)置的重復(fù)組中結(jié)果相差太遠(yuǎn)，意味著操作有誤，需重新實(shí)驗(yàn)。計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)×M，其中C代表_，V代表_(mL)，M代表_。(2)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法原理：此法利用特定的_或_，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量，但不能區(qū)分細(xì)菌的死活。計(jì)數(shù)板是一塊特制的載玻片，上面有一個(gè)特定的面積1 mm2和高0.1 mm的計(jì)數(shù)室，在1 mm2的面積里又被劃分成25個(gè)(或16個(gè))中格，每個(gè)中格進(jìn)一步劃分成16個(gè)(或25個(gè))小格，計(jì)數(shù)室由_個(gè)小格組成。操作：將稀釋的樣品滴在計(jì)數(shù)板上，蓋上蓋玻片，然后在顯微鏡下計(jì)數(shù)45個(gè)

4、中格中的細(xì)菌數(shù)，并求出每個(gè)小格所含細(xì)菌的平均數(shù)，再按公式求出每毫升樣品中所含的細(xì)菌數(shù)。計(jì)數(shù)公式：每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)每小格平均細(xì)菌數(shù)×400×10 000×稀釋倍數(shù)。(3)設(shè)置重復(fù)和對(duì)照設(shè)置重復(fù)：培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)設(shè)置重復(fù)組，同一稀釋度下應(yīng)涂布_個(gè)平板，才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。設(shè)置對(duì)照：實(shí)驗(yàn)中應(yīng)設(shè)置對(duì)照，主要目的是_對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。如_對(duì)照組，觀(guān)察培養(yǎng)物中是否有雜菌污染；設(shè)置_培養(yǎng)基，觀(guān)察選擇培養(yǎng)基是否具有_作用。二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟1土壤取樣：從肥沃、濕潤(rùn)的土壤中，用無(wú)菌小鐵鏟鏟去表層土3 cm左右，迅速取土壤并裝入_密封或事先準(zhǔn)備好的_

5、中。2制備培養(yǎng)基：制備_培養(yǎng)基作為對(duì)照組，尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基作為_(kāi)，用來(lái)判斷選擇培養(yǎng)基是否具有_。放寬稀釋范圍，如稀釋倍數(shù)為103107范圍內(nèi)的要分別涂布，而每個(gè)稀釋度下需要_個(gè)選擇培養(yǎng)基、_個(gè)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，因此需要15個(gè)選擇培養(yǎng)基和5個(gè)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。兩種培養(yǎng)基應(yīng)各有一個(gè)作為_(kāi)對(duì)照，此外還需準(zhǔn)備8個(gè)滅菌的試管和1個(gè)滅菌的移液管。3樣品的稀釋與涂布平板：參考下面的實(shí)驗(yàn)流程示意圖，將10 g土樣加入盛有90 mL無(wú)菌生理鹽水的錐形瓶中(錐形瓶體積為250 mL)，充分搖勻，吸取上清液1 mL，轉(zhuǎn)移至盛有_ mL生理鹽水的無(wú)菌大試管依次等比稀釋至107稀釋度，并按照由107103稀釋

6、度的順序分別吸取_mL進(jìn)行平板涂布操作。按照濃度從低到高的順序涂布平板，不必更換移液管。說(shuō)明：圖中的1、2、3平板是_，4為_(kāi)作對(duì)照，判斷選擇培養(yǎng)基是否具篩選作用，還有兩個(gè)空白對(duì)照，即不涂布稀釋后菌液的選擇培養(yǎng)基和牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，驗(yàn)證培養(yǎng)基中是否_。4將涂布好的培養(yǎng)皿放在30溫度下培養(yǎng)，及時(shí)觀(guān)察和記錄。5挑選選擇培養(yǎng)基上不同形態(tài)的菌落接入含_培養(yǎng)基的斜面中，觀(guān)察能否產(chǎn)生顏色反應(yīng)。6細(xì)菌的計(jì)數(shù)當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，選取菌落數(shù)在_的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。在同一稀釋度下，至少對(duì)3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，然后求出_，并根據(jù)平板所對(duì)應(yīng)的稀釋度計(jì)算出樣品中細(xì)菌的數(shù)目。同時(shí)仔細(xì)觀(guān)察所分離到的菌落，并記錄菌落特征。7統(tǒng)計(jì)

7、表格表一平板上的菌落數(shù)記錄表稀釋倍數(shù)10310410510610712341234123412341234123表二菌落特征記錄表 菌落種類(lèi)形狀大小隆起程度顏色123注：一般來(lái)說(shuō)，在一定的培養(yǎng)條件下(相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時(shí)間)，_表現(xiàn)出_的菌落特征。三、操作提示1取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的信封在使用前都要_。2應(yīng)在_旁稱(chēng)取土壤。在火焰附近將稱(chēng)好的土樣倒入_中，塞好棉塞。3在稀釋土壤溶液的過(guò)程中，每一步都要在_旁操作。4實(shí)驗(yàn)時(shí)要對(duì)_做好標(biāo)記。注明_等。5為了提高效率，在操作時(shí)更加有條不紊，應(yīng)當(dāng)_。四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)內(nèi)容結(jié)論分析有無(wú)雜菌污染的判斷對(duì)照的培養(yǎng)皿中_菌落生長(zhǎng)未被雜菌污染培養(yǎng)物中菌落

8、數(shù)_被雜菌污染菌落形態(tài)多樣，菌落數(shù)偏高培養(yǎng)物中混入_選擇培養(yǎng)基的篩選作用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菌落數(shù)目_選擇培養(yǎng)基的數(shù)目選擇培養(yǎng)基具篩選作用，已篩選出一些菌落樣品的稀釋操作得到2個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)目在_的平板操作成功，能進(jìn)行菌落的計(jì)數(shù)重復(fù)組的結(jié)果若選取同一種土樣，統(tǒng)計(jì)結(jié)果應(yīng)_；如果結(jié)果相差太遠(yuǎn)，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中出現(xiàn)操作失誤，需要找出產(chǎn)生差異的原因五、課題延伸在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的_將尿素分解成了_。氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，_升高。因此，我們可以通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)基_來(lái)判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_指示劑，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果pH升高，指示劑將_，這樣，我們

9、就可以準(zhǔn)確地鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。知識(shí)點(diǎn)一研究思路1下表為本課題使用的培養(yǎng)基，分析培養(yǎng)基配方，回答下面的問(wèn)題。KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO4·7H2O0.2 g葡萄糖10.0 g尿素1.0 g瓊脂15.0 g用蒸餾水定容到1 000 mL(1)在該培養(yǎng)基的配方中，為微生物的生長(zhǎng)提供碳源和氮源的分別是_。(2)按物理性質(zhì)劃分該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基，理由是培養(yǎng)基中含有_；該類(lèi)培養(yǎng)基常用于微生物的_等。(3)由于_，所以該培養(yǎng)基只能用于能夠合成_的微生物的培養(yǎng)。用此培養(yǎng)基培養(yǎng)土壤浸出液能夠從土壤中篩選出_的細(xì)菌。(4)在微生物學(xué)中，將_的培養(yǎng)基，稱(chēng)作選擇培養(yǎng)基。

10、2廣東省是我國(guó)甘蔗生產(chǎn)區(qū)之一。甘蔗是一種高光效的C4植物，單位面積產(chǎn)量很高，種植面積日益擴(kuò)大，目前已成為南方地區(qū)燃料酒精生產(chǎn)的重要原料。利用甘蔗生產(chǎn)燃料酒精的一般工藝流程為：甘蔗榨汁(蔗糖)酵母發(fā)酵蒸餾成品(燃料酒精)。(1)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精發(fā)酵菌種，對(duì)野生酵母菌進(jìn)行誘變后通過(guò)篩選可以得到具有這些特性的突變菌，誘變及篩選過(guò)程如下：步驟1：野生菌液體培養(yǎng)一段時(shí)間后接受紫外線(xiàn)照射誘變處理。步驟2：制備選擇培養(yǎng)基。在基本培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，注意_和_，加瓊脂后滅菌，制成固體平板。步驟3：將紫外線(xiàn)照射后的菌液稀釋涂布平板。步驟4：根據(jù)_，篩選出突變菌。(2)上述步驟2、3和4的依據(jù)

11、分別是_。知識(shí)點(diǎn)二實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)3用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，正確的是()A涂布了1個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230B涂布了2個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是215和260，取平均值238C涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、212和256，取平均值163D涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210、240和250，取平均值2334在本實(shí)驗(yàn)操作中對(duì)使用的平板和試管要進(jìn)行標(biāo)記，以下說(shuō)法正確的是()A對(duì)培養(yǎng)皿僅需注明培養(yǎng)基的種類(lèi)即可B一般在使用之后進(jìn)行標(biāo)記C由于試管用的較多，只需對(duì)試管進(jìn)行標(biāo)記即可D標(biāo)記的目的主要是為了防止實(shí)驗(yàn)中平板、試管等的混

12、淆一、選擇題1在缺乏氮源的培養(yǎng)基上，大部分微生物無(wú)法生長(zhǎng)；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細(xì)菌和放線(xiàn)菌的生長(zhǎng)；在培養(yǎng)基中加入10%的酚可以抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)。利用上述選擇培養(yǎng)基依次能從混雜的微生物群體中分離出()A乳酸菌、金黃色葡萄球菌、放線(xiàn)菌B固氮細(xì)菌、大腸桿菌、放線(xiàn)菌C固氮細(xì)菌、霉菌、放線(xiàn)菌D固氮細(xì)菌、金黃色葡萄球菌、放線(xiàn)菌2請(qǐng)選出下列正確的操作步驟()土壤取樣稱(chēng)取10 g土壤，取出加入盛有90 mL無(wú)菌水的錐形瓶中吸取0.1 mL土壤溶液進(jìn)行平板涂布依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107稀釋度ABCD3在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑的目的是()A篩選出

13、能分解尿素的細(xì)菌B對(duì)分離的菌種作進(jìn)一步鑒定C作細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)成分D如指示劑變藍(lán)就能準(zhǔn)確地認(rèn)定該菌能分解尿素4下面對(duì)“從土壤中分離分解尿素的細(xì)菌過(guò)程中滅菌”的理解，不正確的是()A防止雜菌污染B消滅全部微生物C稀釋土壤溶液的過(guò)程中必須在火焰旁操作D滅菌必須在接種前進(jìn)行5下列不屬于菌種記數(shù)方法的是()A平板劃線(xiàn)法 B稀釋涂布平板法C顯微鏡檢法 D濾膜法6下列有關(guān)配制培養(yǎng)基的敘述中，正確的是()A制作固體培養(yǎng)基必須加入瓊脂B加入青霉素可得到乳酸菌C培養(yǎng)自生固氮菌不需要氮源D發(fā)酵工程一般用固體培養(yǎng)基7用稀釋涂布平板法來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。在某稀釋濃度下某同學(xué)做了若干個(gè)平板并統(tǒng)計(jì)每個(gè)平板的菌落數(shù)，最接近樣

14、品中菌體數(shù)真實(shí)值的是()A菌落數(shù)最多的平板B菌落數(shù)量最少的平板C菌落數(shù)量適中的平板D取若干個(gè)平板菌落數(shù)量的平均值8土壤中分解尿素的微生物所需氮源為()A硝酸 B氨 C尿素 D蛋白胨二、簡(jiǎn)答題9在現(xiàn)代農(nóng)業(yè)中，常在飼料中加入一定量的尿素去飼養(yǎng)牛等牲畜。因其有特殊的器官瘤胃，在瘤胃中生活著多種微生物，其中許多微生物以尿素作唯一氮源。某一同學(xué)設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)，對(duì)能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)。.取樣：到屠宰場(chǎng)，在剛宰殺的牛的瘤胃中取樣，將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的信封中密封。.制備培養(yǎng)基：制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基。將菌液稀釋相同的倍數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目。

15、由于初次實(shí)驗(yàn)，選擇了一個(gè)較寬的稀釋范圍，并且每個(gè)稀釋度下需要3個(gè)選擇培養(yǎng)基，1個(gè)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。.微生物的培養(yǎng)與觀(guān)察：按稀釋度的順序分別吸取0.1 mL進(jìn)行平板涂布操作。將涂布好的培養(yǎng)皿放在30下培養(yǎng)，并且需要無(wú)氧條件。比較兩種培養(yǎng)基中菌落的數(shù)量、形態(tài)等，并做好記錄。挑選選擇培養(yǎng)基中不同形態(tài)的菌落接入含酚紅指示劑的培養(yǎng)基中，觀(guān)察是否產(chǎn)生顏色反應(yīng)。.細(xì)菌的計(jì)數(shù)：當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，選取平板計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的目的是什么？_。(2)為什么每個(gè)稀釋度下需要3個(gè)選擇培養(yǎng)基？_。(3)上述培養(yǎng)時(shí)，為什么需要無(wú)氧條件？_。(4)應(yīng)用含酚紅指示劑的培養(yǎng)基的目的是什么？結(jié)果會(huì)

16、呈現(xiàn)出什么樣的顏色反應(yīng)？原理是什么？_。(5)計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)選什么樣的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)？怎樣計(jì)算出樣品中的細(xì)菌數(shù)目？_。10有人送來(lái)一支芽孢桿菌菌種，其中一部分芽孢桿菌有抗青霉素的能力，另一部分沒(méi)有抗性。請(qǐng)你把對(duì)青霉素有抗性的芽孢桿菌分離出來(lái)。(1)現(xiàn)有條件：無(wú)菌牛肉膏培養(yǎng)基兩個(gè)、無(wú)菌接種臺(tái)、接種工具齊備、醫(yī)用青霉素兩支。(2)實(shí)驗(yàn)過(guò)程取兩個(gè)培養(yǎng)基，分別標(biāo)號(hào)為A、B，向A、B兩個(gè)培養(yǎng)基中分別加入_，加入過(guò)程一定要進(jìn)行_操作。向A培養(yǎng)基中接種_。接種后，將A培養(yǎng)基放入恒溫箱培養(yǎng)兩天。從_中挑取生長(zhǎng)良好的芽孢桿菌，接種到B培養(yǎng)基中。接種后，將B培養(yǎng)基放入恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)兩天，即可獲得較多抗青霉素芽孢桿菌。第兩個(gè)

17、步驟的目的是_。第6課時(shí)土壤中分解尿素細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)知識(shí)清單一、1.(1)目的菌株抑制阻止(2)特定抑制阻止(3)葡萄糖尿素只有能夠以尿素作為氮源的微生物脲酶CO(NH2)2H2OCO22NH3它對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找2(1)一個(gè)活菌菌落數(shù)三個(gè)菌落平均數(shù)30300某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積稀釋倍數(shù)(2)細(xì)菌計(jì)數(shù)板血細(xì)胞計(jì)數(shù)板400(3)至少3排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素空白完全篩選二、1.(1)無(wú)菌信封燒杯(2)牛肉膏蛋白胨實(shí)驗(yàn)組選擇作用31空白(3)90.1選擇培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基含有雜菌(5)酚紅指示劑(6)30300平均值(7)同種微生

18、物穩(wěn)定三、1.滅菌2.火焰錐形瓶3.火焰4.培養(yǎng)皿培養(yǎng)基類(lèi)型、培養(yǎng)時(shí)間、稀釋度、培養(yǎng)物5.事先規(guī)劃時(shí)間四、無(wú)偏高其他氮源大于30300接近五、脲酶氨pHpH的變化酚紅變紅對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練1(1)葡萄糖和尿素(2)固體瓊脂純化、分離、計(jì)數(shù)(3)培養(yǎng)基中只有尿素一種氮源脲酶分解尿素(4)允許特定種類(lèi)的微生物生長(zhǎng)，并能抑制或阻止其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)解析根據(jù)培養(yǎng)基的成分，可以推斷培養(yǎng)基的類(lèi)型以及適于培養(yǎng)的微生物的代謝類(lèi)型。含有瓊脂、明膠等凝固劑的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基；不含凝固劑的為液體培養(yǎng)基。不含碳源的培養(yǎng)基適于自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)，不含氮源的培養(yǎng)基適于固氮微生物的培養(yǎng)等。固體培養(yǎng)基常用于菌種的純化、分離、記數(shù)等；液

19、體培養(yǎng)基常用于菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)和工業(yè)生產(chǎn)。規(guī)律鏈接(1)培養(yǎng)基主要給培養(yǎng)物提供主要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，另外還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及氧氣等的要求，所以根據(jù)培養(yǎng)基成分可以推斷培養(yǎng)基的類(lèi)型以及適于培養(yǎng)的微生物代謝類(lèi)型。(2)選擇培養(yǎng)基是指允許特定微生物生長(zhǎng)并抑制其他雜菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，所以配制選擇培養(yǎng)基時(shí)要明確要篩選的微生物的營(yíng)養(yǎng)特點(diǎn)和代謝特點(diǎn)。2(1)添加高濃度蔗糖(葡萄糖)調(diào)低pH是否能在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)(2)提供高糖和酸性的篩選環(huán)境；獲得單菌落；能生長(zhǎng)的菌落具有耐高糖和耐酸的特性解析(1)要篩選耐高糖和耐酸的菌種，培養(yǎng)基中必須加入高濃度蔗糖和調(diào)低pH，能在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的即為所需菌種。

20、(2)步驟2是給其提供高糖或酸性的篩選環(huán)境；步驟3是為了獲得單菌落；步驟4是根據(jù)能生長(zhǎng)的菌株具有耐高糖和耐酸的特性篩選出突變菌。3D在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要涂布至少3個(gè)平板，作為重復(fù)組，才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性，所以A、B兩項(xiàng)不正確。C項(xiàng)雖涂布了3個(gè)平板，但是，其中1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另兩個(gè)相差太遠(yuǎn)，說(shuō)明在操作過(guò)程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤，因此，不能簡(jiǎn)單地用3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值求平均值。規(guī)律鏈接設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)要遵守單一變量原則和對(duì)照原則，同時(shí)為避免結(jié)果的偶然性，使結(jié)論更有說(shuō)服力和準(zhǔn)確性，要設(shè)置重復(fù)組，重復(fù)組之間結(jié)果相差不大時(shí)直接求其平均值；若相差太大，說(shuō)明操作有誤，不能簡(jiǎn)單求平均值。4D為避免混淆，最好在使用前

21、就做好標(biāo)記，對(duì)培養(yǎng)皿標(biāo)記時(shí)應(yīng)注明培養(yǎng)基種類(lèi)、培養(yǎng)日期以及平板上培養(yǎng)樣品的稀釋度等，故A、B錯(cuò)。C項(xiàng)試管不僅需進(jìn)行標(biāo)記，在梯度稀釋時(shí)，還應(yīng)按一定順序依次放在試管架上。達(dá)標(biāo)測(cè)試1C固氮細(xì)菌可以在無(wú)氮培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；青霉素可以抑制細(xì)菌和放線(xiàn)菌的生長(zhǎng)，但不會(huì)抑制霉菌的生長(zhǎng)；加入10%的酚的培養(yǎng)基可以抑制細(xì)菌和青霉菌的生長(zhǎng)，但不會(huì)抑制放線(xiàn)菌的生長(zhǎng)。2C3B篩選出能分解尿素的細(xì)菌用選擇性培養(yǎng)基即可，不需要加指示劑。加入指示劑的培養(yǎng)基，目的都是對(duì)要分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定。4B5A平板劃線(xiàn)法可以用于菌種的純化和分離，不能用于菌種記數(shù)。6C制作固體培養(yǎng)基也可以用明膠、海藻酸鈉等；青霉素抑制細(xì)菌和放線(xiàn)菌的繁殖，乳酸菌屬于細(xì)菌；發(fā)酵工程一般用液體培養(yǎng)基；自生固氮菌能夠利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈础?D用稀釋涂布平板法對(duì)樣品中活菌數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，只是一種估測(cè)，根據(jù)此方法的實(shí)驗(yàn)過(guò)程可知，在某一稀釋度下涂布的平板菌體數(shù)具有一定的偶然性，并不是絕對(duì)均勻，所以取若干個(gè)平板菌落數(shù)量的平均值比較接近樣品中菌體數(shù)的真實(shí)值。8C只有能合成