百日咳疫苗細胞因子碩士論文

1、重組粘著素用于百日咳疫苗開發(fā)的評價研究摘要 4-5 Abstract 5 插圖和附表清單 8-10 第一章 前言 10-20 1.1 百日咳病原學(xué)和致病機制 10 1.2 百日咳的流行病學(xué) 10-11 1.3 百日咳疫苗的發(fā)展史 11-12 1.4 無細胞百日咳疫苗包含的的保護性抗原組分 12-15 1.4.1 百日咳毒素(Pertussis toxin,PT) 12-13 1.4.2 絲狀血凝素(Filamentous hemagglutinin,FHA) 13 1.4.3 百日咳粘著素(pertactin,PRN) 13-14 1.4.4 菌毛(Fimbriae,FIM) 14-15 1.

2、4.5 其它生物活性物質(zhì) 15 1.5 百日咳桿菌保護性抗原的基因多態(tài)性分析 15-17 1.6 無細胞百日咳疫苗的保護力 17-18 1.6.1 一組分或兩組分無細胞百日咳疫苗 17-18 1.6.2 三組分或多組分無細胞百日咳疫苗 18 1.7 無細胞百日咳疫苗誘導(dǎo)的免疫反應(yīng) 18-19 1.8 無細胞百日咳疫苗的質(zhì)量控制 19 1.9 結(jié)束語 19-20 第二章 天然PRN和重組PRN保護力的比較 20-27 2.1 材料和方法 20-24 2.2 結(jié)果 24-26 2.3 討論 26-27 第三章 天然PRN和重組PRN免疫原性及抗原性的比較 27-34 3.1 材料和方法 27-30

3、 3.1.1 材料 27 3.1.2 方法 27-30 3.2 結(jié)果 30-33 3.2.1 檢測方法的建立 30-31 3.2.2 重組PRN和天然PRN免疫原性和抗原性的比較 31-33 3.3 討論 33-34 第四章 天然PRN和重組PRN刺激機體免疫應(yīng)答的研究 34-49 4.1 材料和方法 34-40 4.1.1 材料 35-36 4.1.2 方法 36-40 4.2 結(jié)果 40-48 4.2.1 檢測方法的建立 40-42 4.2.2 細胞因子的檢測 42-43 4.2.3 抗體滴度的測定 43-48 4.3 討論 48-49 第五章 天然PRN和重組PRN誘導(dǎo)機體IgG亞類的比

4、較 49-62 5.1 材料和方法 49-51 5.1.1 材料 49 5.1.2 方法 49-51 5.2 結(jié)果 51-60 5.2.1 IgG1和IgG2a含量的測定 51-60 5.3 討論 60-62 第六章 總結(jié) 62-64 致謝【學(xué)科專業(yè)名稱】 生物化工 【學(xué)位年度】 2009 【論文級別】 碩士 【關(guān)鍵詞】 百日咳; 重組粘著素; 天然粘著素; 細胞因子; 【英文關(guān)鍵詞】 Pertussis; Recombinant PRN; Natural PRN; Cytokines; 【中文摘要】 PRN(百日咳粘著素,Pertactin,PRN)是無細胞百日咳組分疫苗的重要組成部分。天然

5、PRN純化工藝復(fù)雜,制備成本高,用重組PRN代替天然PRN是開發(fā)新型百日咳疫苗的發(fā)展趨勢。本論文對重組PRN的免疫原性、抗原性和保護力進行評價,并研究其激發(fā)機體免疫應(yīng)答的類型。 重組PRN和天然PRN交叉檢測重組PRN組和天然PRN組兩次免疫的PRN抗體,兩組的抗體滴度無顯著性差異(p>0.05)。此結(jié)果表明重組PRN具有較好的免疫原性和抗原性。百日咳的攻擊實驗表明,重組PRN免疫小鼠后可以產(chǎn)生一定的保護力,抵抗百日咳攻擊菌18323的感染。在三個免疫劑量中,中劑量的保護率最高。將重組PRN和天然PRN分別與百日咳疫苗原液、FIM2和FIM3組合模擬無細胞百日咳組分疫苗,進行百日咳攻擊實

6、驗。結(jié)果表明,重組PRN+原液+FIM2+FIM3組高劑量的存活率和天然PRN+原液+FIM2+FIM3組高劑量的相同,均為最高值93.75%,而中劑量和低劑量的存活率高于天然PRN+原液+FIM2+FIM3組的。 細胞因子的檢測結(jié)果表明,重組PRN組分泌較高水平的Th2型細胞因子IL-4和IL-12,而Th1型細胞因子IL. 【英文摘要】 Pertactin is an important component of acellular pertussis vaccine. Natural PRN has disadvantages in purification process. Because of low cost and easy purification, recombinant PRN was considered as a good substitute in acellular pertussis vaccine. In this pAPVer, we evaluated the immunogenicity, antigenicity and protection of recombinant PRN. The PRN antibody was detected after two immunizations of