《免疫學(xué)檢驗(yàn)》教學(xué)大綱.

1、免疫學(xué)檢驗(yàn)教學(xué)大綱課程編碼：10272042課程名稱：免疫學(xué)檢驗(yàn)英文名稱：Immunological detection technique開課學(xué)期：7學(xué)時(shí)學(xué)分：40/2.5課程類型：專業(yè)課 開課專業(yè)：預(yù)防醫(yī)學(xué)專業(yè) 選用教材：免疫學(xué)檢驗(yàn) 人民衛(wèi)生出版社2006年8月第一版 主要參考書：1.免疫學(xué)檢驗(yàn) 呂世靜主編 人民衛(wèi)生出版社2003年2月第2版2.臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn) 王蘭蘭主編2004年1月第3版3.簡明免疫學(xué)技術(shù) 朱正美主編 科學(xué)出版社2002年7月第1版4.免疫學(xué)常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)柳忠輝主編 科學(xué)出版社 執(zhí)筆人：黎明蘭、課程性質(zhì)、目的與任務(wù) 免疫學(xué)檢驗(yàn)是研究免疫學(xué)技術(shù)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中應(yīng)用的一門學(xué)

2、科， 是預(yù)防醫(yī)學(xué)專 業(yè)（衛(wèi)生檢驗(yàn)方向）一門重要的專業(yè)課。免疫學(xué)檢測技術(shù)因其特異性強(qiáng)、敏 感性高、穩(wěn)定、簡便和快速的優(yōu)勢，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、預(yù) 防醫(yī)學(xué)及其他有關(guān)領(lǐng)域。通過對該課程的學(xué)習(xí)，掌握各類免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)的原理、類型、技術(shù)要點(diǎn)、 實(shí)際應(yīng)用及方法學(xué)評價(jià)，更好的為防病治病服務(wù)。、教學(xué)基本要求1.掌握免疫學(xué)檢驗(yàn)常用技術(shù)的原理、技術(shù)要點(diǎn)、應(yīng)用及方法學(xué)評價(jià)。2.掌握免疫學(xué)檢驗(yàn)常用技術(shù)的測定方法。3.掌握免疫學(xué)技術(shù)在免疫預(yù)防計(jì)劃免疫、 動(dòng)植物檢疫、 健康相關(guān)產(chǎn)品免疫 功能評價(jià)中的應(yīng)用。4.了解免疫學(xué)技術(shù)的最新進(jìn)展及與其他學(xué)科的關(guān)系。 、各章節(jié)內(nèi)容及學(xué)時(shí)分配第一章 抗原抗體的純化（2學(xué)時(shí)）

3、教學(xué)目的與要求掌握抗原和抗體純化方法的基本原理、 方法評價(jià)和應(yīng)用。 了解抗原抗體各種 純化方法的程序及分離物的選擇。教學(xué)內(nèi)容第一節(jié) 鹽析法一、原理二、常用中性鹽三、操作步驟四、影響因素五、方法評價(jià)與應(yīng)用第二節(jié) 凝膠層析法一、原理二、常用凝膠的種類和性質(zhì)三、操作步驟四、方法評價(jià)與應(yīng)用第三節(jié) 離子交換層析一、原理二、常用離子交換劑的種類和性質(zhì)三、離子交換層析的程序四、方法評價(jià)與應(yīng)用第四節(jié) 親和層析法一、原理二、親和層析載體與配基的選擇三、層析條件的選擇四、方法評價(jià)與應(yīng)用 考核要求：了解 蛋白質(zhì)提純方法的程序及條件掌握 蛋白質(zhì)提純方法的原理第二章 免疫原與特異性抗體的制備（2學(xué)時(shí)） 教學(xué)目的及要求：

4、掌握人工免疫原的制備方法，免疫血清的制備方法，雜交瘤技術(shù)的原理及技 術(shù)要點(diǎn)。了解可溶性抗原的制備方法及單克隆抗體制備流程及應(yīng)用。 教學(xué)內(nèi)容：第一節(jié) 免疫原的制備一、顆粒性抗原的制備二、可溶性抗原的制備三、人工免疫原的制備及佐劑第二節(jié) 免疫血清的制備一、免疫動(dòng)物的選擇二、確定免疫方案三、動(dòng)物采血法四、免疫血清的分離與保存第三節(jié) 單克隆抗體的制備一、雜交瘤技術(shù)的基本原理二、單克隆抗體的制備要求三、單克隆抗體的應(yīng)用考核要求：了解：1.顆粒性抗原、可溶性抗原的制備方法2.單克隆抗體的制備流程掌握：1.人工免疫原的制備2.免疫血清的制備方法第三章 沉淀反應(yīng)與凝集反應(yīng)（2學(xué)時(shí)） 教學(xué)目的及要求：掌握常用沉

5、淀反應(yīng)和凝集反應(yīng)的原理及應(yīng)用。 了解其他凝集技術(shù)類型、 原理 和應(yīng)用。教學(xué)內(nèi)容：第一節(jié) 沉淀反應(yīng)一、免疫濃度測定二、雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)三、免疫電泳技術(shù)第二節(jié) 凝集反應(yīng)一、直接凝集反應(yīng)二、間接凝集反應(yīng)三、其他凝集技術(shù) 考核要求： 了解：免疫濃度測定，其他凝集技術(shù)的原理及應(yīng)用。 掌握：雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、雙 免疫電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、間接血凝試驗(yàn) 的原理及應(yīng)用。第四章 溶血反應(yīng)和補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) 教學(xué)目的與要求：掌握溶血反應(yīng)體系及檢測方法。 了解補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)的原理、 類型、方法和評 價(jià)。教學(xué)內(nèi)容：第一節(jié) 溶血反應(yīng)一、溶血反應(yīng)的檢測試驗(yàn)二、血清總補(bǔ)體溶血（CH50）測定。第二節(jié) 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)一、類型與原

6、理二、試驗(yàn)方法及影響因素三、方法的評價(jià)和應(yīng)用考核要求：了解： 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)的類型、原理、方法評價(jià)及應(yīng)用 掌握：血清總補(bǔ)體溶血（CH50）測定。第五章 酶免疫技術(shù)（2學(xué)時(shí)） 教學(xué)目的及要求：掌握固相酶免疫測定的方法類型及原理， 技術(shù)及應(yīng)用。教學(xué)內(nèi)容：第一節(jié) 酶免疫技術(shù)的分類第二節(jié) 固相酶免疫測定一、基本原理二、方法類型和操作步驟第三節(jié)ELISA技術(shù)要點(diǎn)一、試劑準(zhǔn)備二、酶標(biāo)記方法三、酶標(biāo)記物的純化與鑒定四、最適工作濃度的選擇第四節(jié) 其他酶免疫技術(shù)一、斑點(diǎn)-酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)二、斑點(diǎn)酶免疫滲濾試驗(yàn)三、免疫印記法 考核要求： 了解：其他酶免疫技術(shù)的原理及應(yīng)用 掌握：1.雙抗體夾心法和間接法的原理2.EL

7、ISA法的技術(shù)要點(diǎn)第六章 熒光免疫技術(shù)（1學(xué)時(shí)）教學(xué)目的及要求： 掌握熒光抗體技術(shù)的原理、 技術(shù)方法及應(yīng)用。 了解熒光抗體的制備方法及熒光免疫顯微技術(shù)。教學(xué)內(nèi)容：第一節(jié) 熒光現(xiàn)象第二節(jié) 熒光抗體技術(shù)一、基本原理ELISA技術(shù)要點(diǎn)，了解其他酶免疫二、熒光抗體技術(shù)方法三、熒光抗體的制備四、熒光免疫顯微技術(shù)五、應(yīng)用 考核要求：了解：熒光抗體的制備及熒光免疫顯微技術(shù) 掌握：熒光抗體技術(shù)的基本原理及技術(shù)方法。第七章 放射免疫技術(shù)（1學(xué)時(shí)） 教學(xué)目的與要求：掌握放射免疫測定的原理、方法、評價(jià)及應(yīng)用。了解免疫放射測定試驗(yàn)。 教學(xué)內(nèi)容：第一節(jié) 放射免疫測定一、原理二、測定方法三、方法評價(jià)四、應(yīng)用第二節(jié)一、原理

8、二、技術(shù)類型三、技術(shù)要點(diǎn) 考核要點(diǎn)：了解：免疫放射測定的原理、技術(shù)類型及技術(shù)要點(diǎn) 掌握：放射免疫測定的原理、測定方法及應(yīng)用。第八章 金免疫技術(shù)（2學(xué)時(shí)） 教學(xué)目的及要求：掌握金免疫測定技術(shù)的原理、 技術(shù)類型及應(yīng)用。 了解膠體金和免疫金的特性 與制備。了解金免疫組化技術(shù)的方法。教學(xué)內(nèi)容：第一節(jié) 膠體金與免疫金的制備一、膠體金的特性及其制備二、免疫金的特性及其制備第二節(jié) 金免疫測定技術(shù)一、斑點(diǎn)金免疫滲濾試驗(yàn)二、斑點(diǎn)金免疫層析試驗(yàn)第三節(jié) 金免疫組織化學(xué)技術(shù)一、免疫金光鏡染色技術(shù)二、免疫金電鏡染色技術(shù) 考核要求：了解：1.膠體金、免疫金的特性及制備方法。2.免疫金（銀）光鏡染色技術(shù)的原理及方法。掌握：

9、斑點(diǎn)金免疫滲濾試驗(yàn)與斑點(diǎn)金免疫層析試驗(yàn)的原理、技術(shù)類型及方法。第九章免疫細(xì)胞檢測技術(shù)（3學(xué)時(shí)） 教學(xué)目的與要求： 掌握免疫細(xì)胞分離純化技術(shù)及評價(jià)免疫功能的相關(guān)試驗(yàn)原理、方法、結(jié)果判定 教學(xué)內(nèi)容：第一節(jié) 免疫細(xì)胞的分離與純化一、血液標(biāo)本的采集二、外周血液中白細(xì)胞的分離三、外周血液中單個(gè)核細(xì)胞的分離四、淋巴細(xì)胞及其亞群的分離純化五、吞噬細(xì)胞的分離六、淋巴細(xì)胞的保存及活力測定。第二節(jié)T淋巴細(xì)胞的檢測一、T淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志的檢測二、T淋巴細(xì)胞受體的檢測三、T淋巴細(xì)胞功能的檢測第三節(jié)B淋巴細(xì)胞的檢測一、B淋巴細(xì)胞表面抗原的檢測二、B淋巴細(xì)胞表面受體的檢測免疫放射測定三、B淋巴細(xì)胞功能的體外檢測 第四節(jié)

10、自然殺傷細(xì)胞的檢測一、 概述二、NK細(xì)胞活性檢測三、測定NK細(xì)胞活性的衛(wèi)生學(xué)意義 第五節(jié) 吞噬細(xì)胞功能的檢測一、 巨噬細(xì)胞吞噬功能的檢測二、 巨噬細(xì)胞吞噬功能檢測的衛(wèi)生學(xué)意義考核要求：了解：1.了解T淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志的檢測方法及衛(wèi)生學(xué)意義的評價(jià)。2了解T淋巴細(xì)胞E受體和IL-2受體的檢測方法。3.了解B淋巴細(xì)胞Sm2g受體及Fc受體的檢測方法。掌握：1.外周血液中單個(gè)核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及亞群分離純化方法，淋巴細(xì)胞保存及活力測定方法。2.T淋巴細(xì)胞功能檢測方法。3.B淋巴細(xì)胞功能檢測的體外實(shí)驗(yàn) 。4. NK細(xì)胞活性檢測方法及衛(wèi)生學(xué)意義。5.噬細(xì)胞功能的檢測方法及衛(wèi)生學(xué)意義。第十章免疫球蛋白測定（1

11、學(xué)時(shí)） 教學(xué)目的及要求： 掌握免疫球蛋白定量測定的方法參考值及應(yīng)用評價(jià)。 了解免疫球蛋白定量的醫(yī)學(xué) 意義。教學(xué)內(nèi)容：第一節(jié) 免疫球蛋白定量的檢測方法 一、常用檢測方法。二、參考值第二節(jié) 免疫球蛋白定量檢測方法學(xué)評價(jià)及應(yīng)用 第三節(jié) 免疫球蛋白定量臨床意義 一、血清Ig定量臨床意義。 二、尿微量Ig定量臨床意義。三、腦脊液Ig定量臨床意義?？己艘螅毫私猓貉錓g、尿微量lg、腦脊液Ig定量檢測的臨床意義。掌握：免疫球蛋白定量檢測方法及參考值，方法評價(jià)及應(yīng)用第十一章 動(dòng)植物病原體的免疫學(xué)檢驗(yàn)（2學(xué)時(shí)） 教學(xué)目的與要求： 掌握常見動(dòng)植物疫病的免疫學(xué)檢測方法。了解進(jìn)出口商品檢疫的新進(jìn)展。 教學(xué)內(nèi)容：第

12、一節(jié) 動(dòng)物病原體的免疫學(xué)檢驗(yàn)一、炭疽的免疫學(xué)檢驗(yàn)二、鼻疽的免疫學(xué)檢驗(yàn)三、口蹄疫的免疫學(xué)檢驗(yàn)四、布魯氏病的免疫學(xué)檢驗(yàn)五、狂犬病的免疫學(xué)檢驗(yàn)六、瘋牛病的免疫學(xué)檢驗(yàn)七、禽流感的免疫學(xué)檢驗(yàn) 第三節(jié) 植物病原體的免疫學(xué)檢驗(yàn) 一、植物細(xì)菌的免疫學(xué)檢驗(yàn) 二、植物真菌的免疫學(xué)檢驗(yàn)三、植物病毒的免疫學(xué)檢驗(yàn)考核要求：了解：植物病原體的免疫學(xué)檢驗(yàn)方法。 掌握：動(dòng)物病原體的免疫學(xué)檢驗(yàn)方法。第十二章 健康相關(guān)產(chǎn)品的免疫學(xué)檢驗(yàn)（2學(xué)時(shí)） 教學(xué)目的與要求： 掌握保健食品免疫學(xué)檢驗(yàn)方法和評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)及化妝品的免疫學(xué)檢驗(yàn)方法。 了解健康 相關(guān)產(chǎn)品中有毒有害物質(zhì)免疫學(xué)檢驗(yàn)方法及新進(jìn)展。教學(xué)內(nèi)容：第一節(jié)有毒有害物質(zhì)的免疫學(xué)檢驗(yàn) 一、

13、有毒有害物質(zhì)免疫學(xué)檢驗(yàn)的技術(shù)要點(diǎn)。 二、有毒有害物質(zhì)免疫學(xué)檢測方法。 三、 有毒有害物質(zhì)免疫學(xué)檢測方法的應(yīng)用。第二節(jié)第三節(jié)化妝品的免疫學(xué)檢驗(yàn) 保健食品免疫學(xué)檢驗(yàn)和評價(jià)、免疫學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目二、免疫學(xué)檢驗(yàn)方法三、增強(qiáng)免疫功能結(jié)果判定與評價(jià)。考核要求：了解：有毒有害物質(zhì)的免疫學(xué)檢驗(yàn)的技術(shù)要點(diǎn)、方法和應(yīng)用。 掌握：保健食品免疫學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目、檢驗(yàn)方法、結(jié)果判定及標(biāo)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 免疫學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)大綱一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c任務(wù)免疫學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)課的教學(xué)目的是使學(xué)生掌握諸項(xiàng)試驗(yàn)的原理、基本要求、操作步驟，正確分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果、了解各種影響因素以及在衛(wèi)生檢驗(yàn) 工作中的應(yīng)用。通過實(shí)驗(yàn)課教學(xué)，培養(yǎng)學(xué)生認(rèn)真、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度和實(shí) 際動(dòng)手操作能

14、力，以適應(yīng)檢驗(yàn)工作的需要。二、實(shí)驗(yàn)教學(xué)基本要求1.掌握免疫學(xué)檢驗(yàn)諸項(xiàng)試驗(yàn)的原理2.掌握諸試驗(yàn)各種液體的配制方法3.掌握必做實(shí)驗(yàn)的操作步驟、結(jié)果判定及影響因素。4.了解諸項(xiàng)試驗(yàn)所需的儀器設(shè)備。三、實(shí)驗(yàn)教材或指導(dǎo)書免疫學(xué)檢驗(yàn)實(shí)習(xí)指導(dǎo)人民衛(wèi)生出版社2006年8月第一版五、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目一覽表序 號實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目內(nèi)容提要實(shí)驗(yàn)類型學(xué)時(shí)分配主要儀器設(shè)備實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)備注1免疫球蛋白的 分離純化鹽析法血清中的免 疫球蛋白粗 提綜合性10一組（每學(xué) 期選取 3 個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目）2免疫球蛋白的 分離純化凝膠過濾層 析法（分離不 同分子量大 小的抗原）層析柱3雙向瓊脂擴(kuò)散鑒定抗原和 抗體純度的 定性分析4聚丙烯酰胺凝 膠電泳分離、鑒定血 清中各類蛋 白質(zhì)電泳儀、圓盤 電泳槽5酶聯(lián)免疫吸附 實(shí)驗(yàn)雙抗體夾心 法檢驗(yàn)未知 抗原酶標(biāo)儀、微量加樣器、酶標(biāo)測定板6免疫金（銀）染色實(shí)驗(yàn)免疫金標(biāo)記 抗體及檢測 抗原超速離心機(jī)、 顯微鏡、溫 箱、分光光度 計(jì)7保健食品免疫 功能評價(jià)，包 括：血清補(bǔ)體 總活性測定（CH50 法）Co